以生物蛋白胶—松质骨基质为载体的软骨组织工程实验研究

作     者：陈学忠 

作者单位：广西医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：肖增明

授予年度：2005年

学科分类：0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 08[工学] 0836[工学-生物工程] 

主      题：生物蛋白胶 松质骨基质 载体 软骨细胞 组织工程 

摘      要：目的:研究生物蛋白胶、生物蛋白胶/松质骨基质载体负载关节软骨细胞在体外培养时的表现和修复关节软骨全层缺损的效果。方法:(1)取3 周龄的新西兰幼兔的关节软骨细胞种植于生物蛋白胶、生物蛋白胶/松质骨基质载体上作体外培养,通过倒置显微镜、扫描电镜、透射电镜、AB-PAS 染色、Masson’s三色法染色、Ⅱ型胶原免疫组化检查等,了解细胞生长及软骨基质的分泌情况,并观察载体降解情况;(2)将培养出的软骨细胞-生物蛋白胶复合物、软骨细胞-生物蛋白胶-松质骨基质支架复合物分别植入兔股骨滑车关节软骨全层缺损处,对照组植入生物蛋白胶/松质骨基质或不作任何植入。术后1,2,3 个月取标本,从大体观察、组织学、透射电镜等方面了解关节软骨缺损的修复情况,并观察载体降解和吸收情况。结果:(1) 关节软骨细胞在生物蛋白胶、生物蛋白胶/松质骨基质载体中大部分保持卵圆形,小部分在载体表面如贴壁细胞状;(2) 于第9 天以后,两组支架内的细胞数均开始明显增加。软骨细胞活性达95%以上;(3) AB-PAS 染色(+)、Masson’s 三色法染色检查(+)。(4)生物蛋白胶在术后1 个月已降解,而松质骨基质在术后2 个月降解,术后3 个月时实验组关节软骨缺损以软骨组织修复,与周围软骨及软骨下骨愈合良好。AB-PAS 染色、Masson’s 三色法染色染色证实其基质有蛋白多糖和胶原,电镜观察表明修复组织软骨细胞及基质与正常关节软骨一致。生物蛋白胶/松质骨基质植入对照组以部分软骨组织修复,空白对照组以纤维组织修复。结论:关节软骨细胞能在生物蛋白胶、生物蛋白胶/松质骨基质载体中增殖,保持其表型和分泌软骨基质。由两者构建的组织工程软骨模块均能良好地修复关节软骨缺损,而生物蛋白胶/松质骨基质载体能有效地防止修复组织出现塌陷。