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中国组织工程研究 2023年第25期27卷 4006-4012页

作者：郭鹏达刘珂珂段昕刘朝辉张云涛滨州医学院附属医院口腔科山东省滨州市256600 周口市中心医院口腔科河南省周口市466099

背景:有研究发现,松油烯4醇对于种植体周围炎相关致病菌表现出明显的抑菌活性,当应用于钛种植体表面时能有效减少表面生物膜形成,降低种植体周围炎的发生,但是有关其生物安全性的研究不多。目的:分析松油烯4醇对金黄色葡萄球菌、变异链... 详细信息

背景:有研究发现,松油烯4醇对于种植体周围炎相关致病菌表现出明显的抑菌活性,当应用于钛种植体表面时能有效减少表面生物膜形成,降低种植体周围炎的发生,但是有关其生物安全性的研究不多。目的:分析松油烯4醇对金黄色葡萄球菌、变异链球菌的抗菌效果,以及其对MC3T3-E1细胞生长与成骨分化的影响。方法:将松油烯4醇以不同体积分数溶于二甲基亚砜中,检测松油烯4醇溶液对金黄色葡萄球菌和变异链球菌的最低抑菌浓度及最低杀菌浓度,并采用抑菌圈实验检测1/2最低抑菌浓度、最低抑菌浓度及最低杀菌浓度松油烯4醇的抗菌效果。以不同浓度(0%,0.3%,0.2%,0.1%,均为体积分数)松油烯4醇的培养基或钙化诱导液处理MC3T3-E1细胞,采用CCK-8实验检测细胞的增殖活性,罗丹明-鬼笔环肽染色观察细胞骨架,碱性磷酸酶活性实验检测细胞分化能力,茜素红染色观察矿化结节形成,RT-PCR检测Runx2、骨钙素mRNA的表达。结果与结论:①松油烯4醇溶液对变异链球菌的最低抑菌浓度为0.1%、最低杀菌浓度为0.4%,对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度为0.03%、最低杀菌浓度为0.125%;随着浓度的增加,松油烯4醇溶液对两种细菌的抑菌圈直径增加(P松油烯4醇可促进MC3T3-E1细胞的增殖,其中以浓度0.2%组最明显;③罗丹明-鬼笔环肽染色显示,松油烯4醇可促进MC3T3-E1细胞的黏附;④碱性磷酸酶活性与茜素红染色显示,松油烯4醇均可促进MC3T3-E1细胞的早期分化与矿化,其中以浓度0.2%组最明显;⑤RT-PCR检测显示,钙化诱导1 d时,0.3%,0.2%,0.1%组Runx2 mRNA的表达高于0%组(P4 d时,0.2%,0.1%组Runx2、骨钙素mRNA的表达高于0.3%,0%组(P松油烯4醇可以抑制金黄色葡萄球菌及变异链球菌的生长,促进MC3T3-E1细胞的增殖、分化和矿化。

关键词：松油烯4醇金黄色葡萄球菌变异链球菌 MC3T3-E1细胞骨钙素OCN Runx2

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松油烯4醇体内外诱导A549细胞自噬及抑制增殖作用

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第三军医大学学报 2014年第21期36卷 2201-2206页

作者：潘乾广石瑶叶秀峰胡仕林晏家瑛周也涵万丹重庆医科大学基础医学院病理科重庆400016 重庆医科大学基础医学院神经科学研究中心重庆400016 重庆市日用化学工业研究所重庆400065

目的研究松油烯4醇体内外抑制人非小细胞肺癌细胞株A549增殖及诱导自噬的作用。方法不同浓度松油烯4醇作用A549细胞后,应用MTT法检测抑制率及IC50;流式细胞仪检测细胞周期、凋亡、细胞内钙离子浓度变化;透射电镜观察作用前后细胞超微结... 详细信息

目的研究松油烯4醇体内外抑制人非小细胞肺癌细胞株A549增殖及诱导自噬的作用。方法不同浓度松油烯4醇作用A549细胞后,应用MTT法检测抑制率及IC50;流式细胞仪检测细胞周期、凋亡、细胞内钙离子浓度变化;透射电镜观察作用前后细胞超微结构的变化。A549细胞移植瘤裸鼠药物连续腹腔注射10 d后分别测量各组移植瘤的平均体积和质量,观察药物的体内抑制肿瘤生长作用。用实时荧光定量PCR和Western blot法检测自噬相关基因BECN1和LC3的体内外表达情况。结果 MTT结果显示松油烯4醇作用于A549细胞24 h后,随着药物浓度升高抑制率逐渐升高,呈浓度依赖性(P4 h的IC50为0.067%(体积分数)。FCM检测结果显示,实验组细胞周期被阻滞在S期,实验组细胞总凋亡率均高于对照组(P松油烯4醇处理的A549细胞内自噬泡数量明显增加。实验组移植瘤平均瘤体积和平均瘤质量均低于对照组(P46%和53.33%。实时荧光定量PCR及Western blot结果显示BECN1和LC3蛋白及mRNA表达量上调(P松油烯4醇在体内外可诱导人非小细胞肺癌细胞株A549自噬并抑制其增殖。

关键词：松油烯4醇 A549 凋亡钙离子自噬 LC3,BECN1

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松油烯4醇体内外抑制人非小细胞肺癌增殖及机制研究

松油烯4醇体内外抑制人非小细胞肺癌增殖及机制研究

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作者：潘乾广重庆医科大学

学位级别：硕士

目的：探讨松油烯4醇体内外对人非小细胞肺癌A549增殖抑制作用及其可能作用机制。方法：不同浓度松油烯4醇作用于人肺癌细胞A549后，应用MTT法检测细胞增殖抑制率及IC50;CCK8比色分析法绘制细胞生长曲线观察增殖抑制的时间效应;透射电... 详细信息

目的：探讨松油烯4醇体内外对人非小细胞肺癌A549增殖抑制作用及其可能作用机制。方法：不同浓度松油烯4醇作用于人肺癌细胞A549后，应用MTT法检测细胞增殖抑制率及IC50;CCK8比色分析法绘制细胞生长曲线观察增殖抑制的时间效应;透射电镜观察药物作用前后细胞超微结构的变化;流式细胞技术检测细胞周期、凋亡、细胞内钙离子浓度变化;将A549细胞移植瘤裸鼠分为对照、低剂量、高剂量组药物连续腹腔注射十天后分别测量各组移植瘤的平均体积和重量，观察药物的体内抑制肿瘤生长作用;运用实时荧光定量PCR和Western blot方法检测自噬相关基因BECN1和LC3以及凋亡相关基因BCL-2和Caspase-3的表达变化情况。结果：A549细胞经不同浓度（空白对照、0.02%、0.04%、0.06%、0.08%、0.1%v/v）松油烯4醇作用24h后，IC50为0.067%v/v。CCK-8实验结果表明给药组细胞生长曲线明显较对照组平缓，并与给药剂量呈显著相关性。透射电镜观察可见经松油烯4醇处理的A549细胞内自噬泡数量明显增加。FCM检测结果显示，经松油烯4醇处理的A549细胞周期被阻滞在S期，细胞凋亡率升高,各药物干预组细胞内钙离子荧光强度均明显高于对照组（P＜0.05）。实验组移植瘤平均瘤体积和平均瘤质量均低于对照组，比较差异均有统计学意义(P＜0.05)，计算高、低剂量的松油烯4醇对肺癌裸鼠移植瘤生长抑制率分别为77.46%和53.33%。实时荧光定量PCR及Western blot结果显示体外培养细胞及裸鼠移植瘤组织中的自噬相关基因BECN1和LC3蛋白及mRNA表达量上调，凋亡相关基因中Caspase-3蛋白及mRNA表达量上调BCL-2蛋白及mRNA表达量下调（P＜0.05）。结论：松油烯4醇对人非小细胞肺癌A549细胞具有抑制增殖作用，该作用可能与其诱导自噬和凋亡有关。

关键词：松油烯4醇 A549 凋亡自噬

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松油烯4醇体内外对人肺癌细胞系A-549增殖抑制作用

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局解手术学杂志 2014年第5期23卷 481-485页

作者：潘乾广石瑶叶秀峰胡仕林晏家瑛周也涵万丹重庆医科大学病理科重庆400016 重庆医科大学神经科学研究中心重庆400016 重庆市日用化学工业研究所重庆400065

目的探讨松油烯4醇体内外对人肺癌细胞系A-549增殖抑制作用及其可能机制。方法不同浓度松油烯4醇作用于A-549细胞24 h后,应用MTT法检测抑制率及IC50;CCK-8比色分析法绘制不同浓度下的生长曲线;透射电镜观察药物作用后细胞超微结构的变化... 详细信息

目的探讨松油烯4醇体内外对人肺癌细胞系A-549增殖抑制作用及其可能机制。方法不同浓度松油烯4醇作用于A-549细胞24 h后,应用MTT法检测抑制率及IC50;CCK-8比色分析法绘制不同浓度下的生长曲线;透射电镜观察药物作用后细胞超微结构的变化;流式细胞仪检测细胞周期、凋亡、细胞内Ca2+浓度变化;将A-549细胞移植瘤裸鼠分为对照组、低剂量组、高剂量组药物连续腹腔注射10 d后分别测量各组移植瘤体积和重量,观察药物的体内抗肿瘤作用。结果 A-549细胞24 h的IC50为0.067%v/v;CCK-8实验结果表明给药组生长曲线明显较对照组平缓,并与给药剂量呈显著相关性;电镜观察可见经松油烯4醇处理的A549细胞内自噬泡数量明显增加。FCM检测周期显示S期阻滞;检测显示细胞凋亡率明显增加,凋亡率呈现浓度-效应关系;各药物干预组A-549细胞内Ca2+荧光强度均明显高于对照组(P松油烯4醇治疗后移植瘤生长缓慢,治疗结束时治疗组移植瘤质量及瘤体积明显低于对照组(P松油烯4醇在体外能抑制A-549细胞的增殖。

关键词：松油烯4醇 A-549 裸鼠成瘤 Ca2+ 凋亡自噬

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