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条斑紫菜藻红蛋白的脉冲超声辅助提取

农业工程学报 2007年第1期23卷 207-211页

作者：马海乐肖海芳骆琳江苏大学食品与生物工程学院镇江212013 河南科技大学食品与生物工程学院洛阳471039

该文探讨条斑紫菜藻红蛋白的脉冲超声辅助提取方法,优化得到的最佳工艺参数为:超声脉冲的工作时间2 s,间隙时间3 s,超声功率800 W,提取时间60 m in,提取温度20℃,料液比30 m g/mL,料液循环泵转速5 r/s。在最优工艺参数下,藻红蛋白的得率... 详细信息

该文探讨条斑紫菜藻红蛋白的脉冲超声辅助提取方法,优化得到的最佳工艺参数为:超声脉冲的工作时间2 s,间隙时间3 s,超声功率800 W,提取时间60 m in,提取温度20℃,料液比30 m g/mL,料液循环泵转速5 r/s。在最优工艺参数下,藻红蛋白的得率为3.249%、纯度(OD561/OD280)为0.365。与传统提取方法相比,该方法提取时间大大缩短。

关键词：条斑紫菜藻红蛋白脉冲超声辅助提取

条斑紫菜多糖超声提取及其对U937细胞生长抑制影响的研究

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农业工程学报 2005年第8期21卷 165-168页

作者：何荣海马海乐骆新峥江苏大学生物与环境工程学院镇江212013

采用超声辅助提取技术进行条斑紫菜多糖的提取,并进行柱层析纯化。经正交试验确定的条斑紫菜粗多糖提取的最佳工艺条件为15g干紫菜粉加入2L水,提取液循环转速为12r/s,提取液温度为40℃,超声功率为800W,超声处理时间/超声间隙为3s/2s和... 详细信息

采用超声辅助提取技术进行条斑紫菜多糖的提取,并进行柱层析纯化。经正交试验确定的条斑紫菜粗多糖提取的最佳工艺条件为15g干紫菜粉加入2L水,提取液循环转速为12r/s,提取液温度为40℃,超声功率为800W,超声处理时间/超声间隙为3s/2s和超声全程时间为2h,对应的得率为26.29%。粗多糖分别经50%、60%、70%和80%乙醇分步醇沉,沉淀出四种不同级分的半纯品,用DEAE-52纤维素和SephadexG-200将其中两种多糖半纯品纯化,分别得到5个和3个不同分子量的级分,分别考察了这两种紫菜多糖半纯品及各自分级产物对人血癌细胞U937细胞的体外生长抑制的抗肿瘤试验,结果前者及其分级产物对U937细胞生长有一定的抑制作用,后者及其分级产物则有一定的促进作用。

关键词：多糖超声提取条斑紫菜 U937细胞

条斑紫菜ACEI抑制肽的超滤分离与离子交换纯化!

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农业机械学报 2012年第2期43卷 146-150,204页

作者：何荣海马海乐余筱洁江苏大学食品与生物工程学院镇江212013 浙江农林大学农业与食品科学学院临安311300

对条斑紫菜ACEI抑制肽进行了超滤分离和离子交换纯化的试验研究。先后采用截留分子量分别为10 kDa和3 kDa的超滤膜对条斑紫菜ACEI抑制肽超滤,分子量小于3 kDa的组分对ACE活性抑制最高,多肽的IC50值从超滤前的0.844 mg/mL下降到0.523 mg... 详细信息

对条斑紫菜ACEI抑制肽进行了超滤分离和离子交换纯化的试验研究。先后采用截留分子量分别为10 kDa和3 kDa的超滤膜对条斑紫菜ACEI抑制肽超滤,分子量小于3 kDa的组分对ACE活性抑制最高,多肽的IC50值从超滤前的0.844 mg/mL下降到0.523 mg/mL。南开D61阳离子树脂对分子量小于3 kDa的ACEI抑制肽组分吸附率最大,用不同浓度氨水阶梯洗脱,得到第2个洗脱峰的蛋白回收率和活性回收率最高,分别为45.2%和61.5%,其IC50值最低,为0.127 mg/mL,比纯化前下降了75.7%。

关键词：条斑紫菜 ACEI抑制肽超滤离子交换

条斑紫菜锰超氧化物歧化酶基因克隆与序列分析

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高技术通讯 2006年第5期16卷 522-528页

作者：王荣刘涛周晓君庄筠昀茅云翔中国海洋大学海洋生命学院青岛266003

为研究紫菜抗逆抗病的分子机制,以本实验室建立的条斑紫菜表达序列标签（EST）和全长cDNA富集文库,结合PCR技术,克隆了条斑紫菜编码锰超氧化物歧化酶（Mn-SOD）的cDNA及基因组DNA全长序列,并进行了序列特性相关分析.研究结果表明：该基... 详细信息

为研究紫菜抗逆抗病的分子机制,以本实验室建立的条斑紫菜表达序列标签（EST）和全长cDNA富集文库,结合PCR技术,克隆了条斑紫菜编码锰超氧化物歧化酶（Mn-SOD）的cDNA及基因组DNA全长序列,并进行了序列特性相关分析.研究结果表明：该基因cDNA序列全长为958个核苷酸,包含一个完整Mn-SOD基因的ORF,编码224个氨基酸和终止密码子;该基因在基因组中序列长度为1416bp,包含4个外显子和3个内含子,这既不同于高等植物的6个外显子和5个内含子,也不同于人的5个外显子和4个内含子;该基因编码区密码子的平均GC含量为60.9%,第三位密码子的GC含量高达84.9%;序列中包含4个与Mn^2＋的结合位点及一个保守的金属结合结构域,预测分子量为24469.09Da,等电点为5.99;条斑紫菜Mn-SOD与人的相关蛋白具有类似的空间结构,都有6个跨膜α螺旋结构域;由cDNA序列推导的氨基酸序列与莱茵衣藻相似性为57.7%,系统发生分析表明条斑紫菜Mn-SOD与绿藻莱茵衣藻和硅藻海链藻的亲缘关系较近.这是该基因在红藻门中的首次报道.

关键词：条斑紫菜锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)基因序列分析

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条斑紫菜藻红蛋白纯化方法的研究

农业工程学报 2007年第2期23卷 249-253页

作者：马海乐肖海芳骆琳江苏大学食品与生物工程学院镇江212013 河南科技大学食品与生物工程学院洛阳471039

为了解决目前藻红蛋白纯化方法过于复杂,处理量小等问题,采用“盐析→超滤→HA柱层析或DEAE-52柱层析”的工艺路线,建立了一种简化而高效的条斑紫菜藻红蛋白纯化方法。结果显示:1)对藻红蛋白纯度(以OD561/OD280表示)为0.365的条斑紫菜... 详细信息

为了解决目前藻红蛋白纯化方法过于复杂,处理量小等问题,采用“盐析→超滤→HA柱层析或DEAE-52柱层析”的工艺路线,建立了一种简化而高效的条斑紫菜藻红蛋白纯化方法。结果显示:1)对藻红蛋白纯度(以OD561/OD280表示)为0.365的条斑紫菜粗提物采用盐析法沉淀藻红蛋白时,得到藻红蛋白的纯度为0.45,回收率为90.53%;2)采用截留分子量为5万Da的超滤膜对藻红蛋白盐析物进行脱盐和出去小分子杂蛋白处理,得到的藻红蛋白的纯度为0.74,回收率为93.11%;3)进一步分别采用HA柱层析和DEAE-52柱层析纯化超滤液,藻红蛋白最高纯度分别为2.76和1.74,回收率分别为59.3%和56.81%。研究结果表明,采用盐析和超滤相结合的方法,可以较为方便而高效地得到食用级藻红蛋白,进一步通过HA柱层析,即可达到药用级的要求。

关键词：条斑紫菜藻红蛋白纯化盐析超滤柱层析

条斑紫菜中砷的亚细胞分布及其解毒机制的研究

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分析化学 2013年第11期41卷 1647-1652页

作者：尚德荣张继红赵艳芳翟毓秀宁劲松丁海燕盛晓风段元慧中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室国家水产品质量监督检验中心农业部水产品质量安全检测与评价重点实验室

通过对砷的富集形态变化和亚细胞分布研究,揭示条斑紫菜中砷的区隔化效应及其对砷的解毒机理。将活体条斑紫菜分别暴露于0.05,0.1,0.5和1.0 mg/L的亚砷酸根(AsO33-)和砷酸根(AsO3-)溶液中6 d,每天取样一次,运用HPLC-ICP-MS法分析紫菜中... 详细信息

通过对砷的富集形态变化和亚细胞分布研究,揭示条斑紫菜中砷的区隔化效应及其对砷的解毒机理。将活体条斑紫菜分别暴露于0.05,0.1,0.5和1.0 mg/L的亚砷酸根(AsO33-)和砷酸根(AsO3-)溶液中6 d,每天取样一次,运用HPLC-ICP-MS法分析紫菜中砷的形态变化,运用差速离心技术分析砷在亚细胞水平的分布差异。结果表明,随着介质浓度的升高和暴露时间的增加,藻体中的砷含量呈线性增长趋势,统计分析表明条斑紫菜对As(Ⅲ)和As(Ⅴ)的积累与暴露浓度都呈极显著正相关,相关系数RAs(Ⅲ)=0.99960,p条斑紫菜对As(Ⅲ)的富集速率略高于As(Ⅴ),暴露在0.1 mg/L As(Ⅲ)和As(Ⅴ)溶液中6 d后的富集系数分别是4718.7和4111.5。研究表明,条斑紫菜中砷的亚细胞分布与区隔化差异很大,各组分的砷含量分别为:细胞液80%>细胞壁15%>细胞器5%。藻体胞液是砷的主要储存部位,胞液对砷具有非常明显的区隔化作用。通过对其富集过程中砷形态转化规律的研究发现:As(Ⅴ)会迅速被甲基化,然后再转化成砷糖(AsX1);As(Ⅴ)会迅速被富集还原成As(Ⅲ),As(Ⅲ)被逐步甲基化,然后再转化成砷糖(AsX1)。

关键词：高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱条斑紫菜亚砷酸根砷酸根亚细胞分布区隔化作用

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条斑紫菜多糖提取工艺的优化

农业工程学报 2006年第9期22卷 194-197页

作者：周存山马海乐胡文彬江苏大学生物与环境工程学院镇江212013

该文利用二次通用旋转设计对条斑紫菜多糖提取工艺条件中的浸提温度、浸提时间、料液比3因子的最优化组合进行了定量研究,并对建立模型进行了规划求解及试验验证,同时还分析了盐酸脱蛋白的可行性。经试验验证,当料液比为1160∶100(m g/... 详细信息

该文利用二次通用旋转设计对条斑紫菜多糖提取工艺条件中的浸提温度、浸提时间、料液比3因子的最优化组合进行了定量研究,并对建立模型进行了规划求解及试验验证,同时还分析了盐酸脱蛋白的可行性。经试验验证,当料液比为1160∶100(m g/mL)、时间为4.7 h、温度为100℃时多糖得率最高,为(22.22±0.92)%(n=3)与理论计算值(23.34%)基本一致;当料液比为1160∶100(m g/mL)、时间为1.3 h,温度为73.2℃时,多糖纯度最高达(94.60±0.90)%(n=3),稍低于理论计算值(98.60%),回归模型可较好地预测多糖的得率和纯度。三氯乙酸和盐酸在pH 2.5时的脱蛋白率分别为73.73%和69.55%,差异不显著,实际生产中可用盐酸替代三氯乙酸进行脱蛋白处理。

关键词：条斑紫菜多糖提取数学模型

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条斑紫菜ACEI肽结构鉴定与性能试验

江苏大学学报（自然科学版） 2012年第4期33卷 430-434页

作者：何荣海马海乐江苏大学食品与生物工程学院江苏镇江212013 江苏省农产品物理加工重点实验室江苏镇江212013 江苏省农产品生物加工与分离工程技术研究中心江苏镇江212013

对条斑紫菜蛋白酶解获得的血管紧张素转换酶抑制肽(ACEI)进行纯化和结构鉴定,并研究了条斑紫菜ACEI肽体外贮存稳定性和对原发性高血压大鼠的降血压作用.结果表明:通过2步反相高效液相制备色谱纯化得到2种单一组分ACEI肽,经液质联用质谱... 详细信息

对条斑紫菜蛋白酶解获得的血管紧张素转换酶抑制肽(ACEI)进行纯化和结构鉴定,并研究了条斑紫菜ACEI肽体外贮存稳定性和对原发性高血压大鼠的降血压作用.结果表明:通过2步反相高效液相制备色谱纯化得到2种单一组分ACEI肽,经液质联用质谱分析肽序列分别为Cys-Ser-Asn-Arg和Pro-Cys-His-Trp,二者对血管紧张素转换酶半数抑制浓度分别为24.71和5.38μmol.L-1;条斑紫菜ACEI肽不耐高温,在中性或酸性条件下较稳定;用分子质量小于3 ku条斑紫菜ACEI肽组分对原发性高血压大鼠灌胃后有显著降血压效果,且降血压幅度随灌胃剂量增大而提高.

关键词：条斑紫菜血管紧张素转换酶抑制肽结构鉴定性能蛋白质

条斑紫菜Tubulin和Kinesin基因家族鉴定及失水胁迫表达模式分析

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海洋与湖沼 2021年第3期52卷 673-684页

作者：崔正彩孔凡娜茅云翔孙斌王俊皓董道英中国海洋大学海洋生命学院海洋生物遗传学与育种教育部重点实验室青岛266003 海南热带海洋学院水产与生命学院热带海洋生物资源利用与保护教育部重点实验室三亚572022

微管是细胞骨架的主要成分,其结构及动力学机制对提高生物体耐受性具有重要作用。微管网络如何通过结构的动态变化调控适应环境变化已成为胁迫生物学领域的研究热点之一。条斑紫菜(Pyropia yezoensis)能够适应潮间带复杂多变的环境,是... 详细信息

微管是细胞骨架的主要成分,其结构及动力学机制对提高生物体耐受性具有重要作用。微管网络如何通过结构的动态变化调控适应环境变化已成为胁迫生物学领域的研究热点之一。条斑紫菜(Pyropia yezoensis)能够适应潮间带复杂多变的环境,是研究潮间带大型海藻抗逆机制的良好材料。目前对紫菜微管相关基因家族构成及其生物学功能的研究较少。本研究利用生物信息学方法,在条斑紫菜基因组中共鉴定出4个Tubulin基因(Pyα-tubulin 1、Pyα-tubulin 2、Pyβ-tubulin和Pyγ-tubulin)和11个Kinesin基因(PyKinesin 1—PyKinesin 11),并对其理化性质、基因结构、蛋白特征、染色体定位、系统进化和失水胁迫下的表达模式进行了系统分析。结果显示:条斑紫菜中有3种微管蛋白(Tubulin)亚型;该家族成员散布于1号和2号染色体上,Pyα-tubulin 1和Pyα-tubulin 2为串联重复基因;PyTubulin家族成员在基因结构和蛋白特征方面均较为保守,且在转录水平对失水胁迫不敏感。条斑紫菜中有5种驱动蛋白(Kinesin)亚型,亚家族种类和基因数量均少于高等植物;该家族基因散布于1号、2号和3号染色体上,无串联重复基因;PyKinesin家族成员在基因结构和蛋白特征方面存在一定差异,PyKinesin 1在中高度失水胁迫下表达量显著上调。本研究为进一步理解Tubulin和Kinesin基因家族的进化和功能、解析微管在条斑紫菜响应失水胁迫中的作用奠定了基础。

关键词：条斑紫菜 Tubulin Kinesin 基因家族失水胁迫