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显齿蛇葡萄叶细胞悬浮培养体系的建立及其产多酚类物质研究

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食品科学技术学报 2023年第2期41卷 104-120,163页

作者：凌丽娟钟伊嘉潘晓洋梁琦陈雨琴唐道邦陈继光尹忠平江西农业大学食品科学与工程学院/江西省天然产物与功能食品重点实验室江西南昌330045 广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所/农业农村部功能食品重点实验室/广东省农产品加工重点实验室广东广州510610

显齿蛇葡萄叶富含多酚类化合物,是一种具有很高开发利用价值的新资源食品原料。以显齿蛇葡萄幼叶为外植体诱导出了2种典型的愈伤组织,通过激素优化和连续筛选获得了性状优良的愈伤组织,在此基础上建立并优化了显齿蛇葡萄叶细胞悬浮培养... 详细信息

显齿蛇葡萄叶富含多酚类化合物,是一种具有很高开发利用价值的新资源食品原料。以显齿蛇葡萄幼叶为外植体诱导出了2种典型的愈伤组织,通过激素优化和连续筛选获得了性状优良的愈伤组织,在此基础上建立并优化了显齿蛇葡萄叶细胞悬浮培养体系,对悬浮培养细胞中的主要多酚类物质进行了鉴定,并评价了多酚的抗氧化活性。采用超高压液相色谱飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF MS/MS)和高效液相色谱(HLPC)检测技术,分别从愈伤组织和悬浮培养细胞中鉴定出了7种和10种多酚类化合物,其中原花青素B1、(+)-儿茶素、表儿茶素没食子酸酯为愈伤组织和悬浮培养细胞中共有的物质,且含量较高,其中以表儿茶素没食子酸酯含量最高,在愈伤组织和悬浮培养细胞中分别达到了5 020.965μg/g和1 044.725μg/g。抗氧化活性评价结果显示,悬浮培养细胞多酚提取物具有很强的抗氧化活性,对2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS+)和2,2-联苯基-1-苦基肼基(DPPH)自由基清除的IC50分别为30.681μg/mL和3.685μg/mL,相同质量浓度下对DPPH自由基的清除和总还原能力均强于维生素C,其抗氧化能力主要源于表儿茶素没食子酸酯和(+)-儿茶素。希望研究可为显齿蛇葡萄细胞培养及其多酚类次生代谢产物的合成调控提供参考。

关键词：显齿蛇葡萄叶藤茶愈伤组织悬浮培养细胞多酚

显齿蛇葡萄叶总黄酮对原发性高血压大鼠的降血压研究

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食品工业科技 2016年第6期37卷 351-355页

作者：赵喜兰漯河医学高等专科学校河南漯河462002

为了探讨显齿蛇葡萄叶总黄酮对原发性高血压大鼠的影响,采用超声波辅助提取,D-101大孔树脂纯化制备显齿蛇葡萄叶总黄酮,将SHR大鼠40只随机分成正常组、模型组、显齿蛇葡萄叶黄酮组(100、200和400 mg/kg)和依那普利组(5 mg/kg),显齿蛇葡... 详细信息

为了探讨显齿蛇葡萄叶总黄酮对原发性高血压大鼠的影响,采用超声波辅助提取,D-101大孔树脂纯化制备显齿蛇葡萄叶总黄酮,将SHR大鼠40只随机分成正常组、模型组、显齿蛇葡萄叶黄酮组(100、200和400 mg/kg)和依那普利组(5 mg/kg),显齿蛇葡萄叶黄酮组和依那普利组按照体重分别给予对应药物灌胃10周,分别在10周和12周测定血压及血清中各项指标。同时利用显齿蛇葡萄叶黄酮不同剂量喂养正常大鼠6个月,测定血压及血清各项指标。结果显示,显齿蛇葡萄叶黄酮治疗原发性高血压大鼠10周后能明显降低血压,另外也降低血清中血浆肾素、血管紧张素Ⅱ、内皮缩血管肽和丙二醛的含量和提高一氧化氮、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽的含量,对正常Wistar大鼠喂养后发现对血压基本没有影响。提示显齿蛇葡萄叶黄酮对原发性高血压大鼠具有明显的降血压效果,潜在的机理可能与肾素-血管紧张素的-醛固酮系统(RAAS)调制和抗氧化系统有关,另外显齿蛇葡萄叶黄酮对正常大鼠的血压没有影响,表明显齿蛇葡萄叶黄酮可用来作为天然药物或功能食品来预防高血压。

关键词：显齿蛇葡萄叶总黄酮原发性高血压大鼠降血压

显齿蛇葡萄叶多酚的α-葡萄糖苷酶抑制及抗氧化活性研究

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显齿蛇葡萄叶多酚的α-葡萄糖苷酶抑制及抗氧化活性研究

作者：耿升河南科技学院

学位级别：硕士

显齿蛇葡萄叶(Ampelopsis grossedentata Leaves,AGL)是我国特有的一种富含多酚的功能性食品植物原料。长期以来,AGL的多酚研究主要集中在其以二氢杨梅素(Dihydromyricetin,DMY)为代表的小分子酚类物质上,而对其单宁组分(Tannin fractio... 详细信息

显齿蛇葡萄叶(Ampelopsis grossedentata Leaves,AGL)是我国特有的一种富含多酚的功能性食品植物原料。长期以来,AGL的多酚研究主要集中在其以二氢杨梅素(Dihydromyricetin,DMY)为代表的小分子酚类物质上,而对其单宁组分(Tannin fraction,TF)的研究却鲜见报道。有鉴于此,本文采用响应面法优化了超声-微波协同提取AGL多酚的工艺,分离纯化了其单宁类组分,并运用波谱分析手段鉴定了其结构。在此基础上,系统研究了TF和DMY的α-葡萄糖苷酶抑制和抗氧化活性。以水为溶剂,超声-微波协同提取AGL多酚的最适条件为:超声功率50 w,提取时间10 min,液固比50:1(v/w),微波功率350 w,微波时间100 s。在该条件下多酚得率为19.35%(以DMY计)。经喷雾干燥后,产物中的DMY含量为43.08%。采用柱色谱法分离了AGL水提取物中的TF,并采用紫外、红外、核磁等波谱分析手段对其结构进行了鉴定,结果表明该TF成分为没食子酸和糖结合而成的缀合物,属于水解单宁类物质。在α-葡萄糖苷酶抑制试验中,AGL水提物、TF、DMY展示了抑制活性,其IC50值分别为23.10,1.94和72.21μg/mL,TF的活性远高于DMY,表明TF是AGL中抑制α-葡萄糖苷酶的重要成分,可能与AGL的降血糖活性有重要关联。抑制动力学试验发现三者对α-葡萄糖苷酶的抑制类型均为竞争性与非竞争性的混合型抑制。通过荧光光谱扫描试验发现三者与α-葡萄糖苷酶结合后,会使α-葡萄糖苷酶发生荧光猝灭现象。在DPPH自由基清除试验、ABTS自由基清除试验、还原力测试等三种化学抗氧化模型中,AGL水提物、TF、DMY均表现了很强的抗氧化能力。AGL水提物、TF和DMY清除DPPH自由基的IC50值分别为15.78,10.17和7.66μg/m L。三者对清除ABTS自由基的IC50值分别为>60,39.02和29.51μg/mL。还原力测试中三者的活性与浓度线性相关(r2>0.996)。在上述抗氧化活性测试中,DMY展现了最高活性,TF和水提物则次之。在HepG2细胞模型中,AGL水提物、TF、DMY均表现了很强的细胞抗氧化能力。在“无PBS清洗”处理方案中,AGL水提物、TF和DMY抑制细胞中过氧化自由基生成的EC50值分别为80.10,13.13和12.56μg/m L。而在“PBS清洗”处理方案中,三者的EC50值分别为163.16,30.62和78.94μg/m L,TF的活性显著高于DMY。本课题建立了AGL多酚的超声-微波协同提取方法,分析鉴定了AGL的TF组分,发现TF对AGL的抗氧化和降血糖活性有重要贡献,该发现为理解显AGL的生物活性提供了参考。

关键词：显齿蛇葡萄叶二氢杨梅素单宁抗氧化 α-葡萄糖苷酶抑制

大孔吸附树脂分离纯化显齿蛇葡萄叶中蛇葡萄素的工艺研究

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中药材 2016年第5期39卷 1117-1119页

作者：黄仁杰肖健林晓君陈虎彪福建卫生职业技术学院药学系福建福州350101 香港浸会大学中医药学院

目的:为获得质量分数较高的蛇葡萄素原料,建立大孔吸附树脂分离纯化显齿蛇葡萄叶中蛇葡萄素的方法。方法:比较6种不同型号大孔吸附树脂的静态吸附与解吸附能力,考察动态吸附与洗脱参数,筛选最佳大孔吸附树脂分离纯化蛇葡萄素的工艺条件... 详细信息

目的:为获得质量分数较高的蛇葡萄素原料,建立大孔吸附树脂分离纯化显齿蛇葡萄叶中蛇葡萄素的方法。方法:比较6种不同型号大孔吸附树脂的静态吸附与解吸附能力,考察动态吸附与洗脱参数,筛选最佳大孔吸附树脂分离纯化蛇葡萄素的工艺条件。结果:优选SP700型大孔吸附树脂为最佳型号树脂,并确定径高比为1∶10,上样浓度为5 mg/m L,上样体积为4 BV,上样速度为1 BV/h。以2 BV/h的流速分别用水(7 BV)、10%乙醇(8 BV)、20%乙醇(11 BV)进行动态洗脱,最终获得质量分数达95.5%的蛇葡萄素。结论:大孔吸附树脂法操作简单、可行,可获得高质量分数的蛇葡萄素原料。

关键词：显齿蛇葡萄叶蛇葡萄素大孔吸附树脂分离高效液相色谱法

响应面法优化显齿蛇葡萄叶中总类黄酮的提取工艺

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粮油加工 2010年第8期 149-152页

作者：胡立志刘本国南海娟任政张洪宾季文杰陈永生河南科技学院食品学院

以显齿蛇葡萄叶为原料,以乙醇-水为溶剂,加热回流提取其叶中的总类黄酮,通过响应面试验优化得到了最适提取工艺条件:提取温度70℃,加热时间60min,乙醇浓度58%,液固比为40,提取1次。在此条件下总类黄酮提取率可达到73.93%。

关键词：显齿蛇葡萄叶类黄酮提取响应面法

显齿蛇葡萄叶代用茶总黄酮以二氢杨梅素计的试验验证

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湖南农业科学 2021年第5期 84-90页

作者：张学英湘西自治州食品药品检验所湖南吉首416000

自然界中许多植物都含有天然黄酮类物质,但植物各异,其总黄酮含量及主要黄酮单体成分也各不相同。对显齿蛇葡萄叶代用茶总黄酮是否应以二氢杨梅素计进行了试验验证。结果表明:显齿蛇葡萄叶代用茶(即莓茶或藤茶)中不含或极少含芦丁,其总... 详细信息

自然界中许多植物都含有天然黄酮类物质,但植物各异,其总黄酮含量及主要黄酮单体成分也各不相同。对显齿蛇葡萄叶代用茶总黄酮是否应以二氢杨梅素计进行了试验验证。结果表明:显齿蛇葡萄叶代用茶(即莓茶或藤茶)中不含或极少含芦丁,其总黄酮单体成分主要是二氢杨梅素,从而论证显齿蛇葡萄叶代用茶(即莓茶或藤茶)中总黄酮以二氢杨梅素计。通过分析检测莓茶或藤茶中总黄酮(以二氢杨梅素计)含量高达300-400 g/kg,其中,二氢杨梅素单体含量高达200-300 g/kg,二氢杨梅素含量占总黄酮70%-80%。

关键词：显齿蛇葡萄叶代用茶总黄酮二氢杨梅素

显齿蛇葡萄叶提取物对大鼠肝癌前病变模型抗氧化酶活性的影响

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中医药导报 2009年第8期15卷 1-3页

作者：钟正贤陈学芬李燕婧杨秀芬广西中医药研究院广西南宁530022 广西中医学院药学院广西南宁530002

目的:探讨显齿蛇葡萄叶提取物在大鼠肝脏化学致癌初期对血清及肝脏抗氧化酶活性的影响,从而进一步探索其抗致癌作用的可能机制。方法:按改良的Solt Farber方法建立大鼠肝癌前病变模型,用显齿蛇葡萄叶水提物及总黄酮饲养大鼠6周后,取血... 详细信息

目的:探讨显齿蛇葡萄叶提取物在大鼠肝脏化学致癌初期对血清及肝脏抗氧化酶活性的影响,从而进一步探索其抗致癌作用的可能机制。方法:按改良的Solt Farber方法建立大鼠肝癌前病变模型,用显齿蛇葡萄叶水提物及总黄酮饲养大鼠6周后,取血及肝脏测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)、谷胱甘肽-S-转移酶(GSH-ST)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)及r-谷氨酰转肽酶(r-GT)。结果:显齿蛇葡萄叶水提物及总黄酮在大鼠肝脏化学致癌初期对血清和肝脏中SOD、GSH-px、GST、CAT的活性有明显回升作用,降低MDA含量,并能抑制癌前病变标志物r-GT活性表达。结论:显齿蛇葡萄叶提取物具有抗氧化和抑制癌前病变标志物的作用,可能是显齿蛇葡萄叶的抗致癌机制之一。

关键词：显齿蛇葡萄叶化学致癌抗氧化酶大鼠

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显齿蛇葡萄基本成分研究

天然产物研究与开发 2001年第5期13卷 46-48页

作者：张友胜杨伟丽熊皓平湖南农业大学食品科技学院长沙410128

对显齿蛇葡萄 (Ampelopsisgrossedentata)幼嫩茎叶中的粗蛋白、水溶性蛋白、氨基酸组分、总灰分、无机营养元素、多酚、水提取物、总黄酮以及其中的二氢杨梅素含量作了测定。结果表明 :显齿蛇葡萄幼嫩茎叶中粗蛋白氨基酸及无机营养元素... 详细信息

对显齿蛇葡萄 (Ampelopsisgrossedentata)幼嫩茎叶中的粗蛋白、水溶性蛋白、氨基酸组分、总灰分、无机营养元素、多酚、水提取物、总黄酮以及其中的二氢杨梅素含量作了测定。结果表明 :显齿蛇葡萄幼嫩茎叶中粗蛋白氨基酸及无机营养元素含量丰富 ;多酚、水提取率、总黄酮和二氢杨梅素含量高。显齿蛇葡萄幼嫩茎叶既可粗加工为具特殊风味的类茶产品 ,又可作集营养、保健。

关键词：显齿蛇葡萄叶氨基酸无机营养元素多酚总黄酮二氢杨梅素氢叶化学成分

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藤茶及牛蒡子配伍对耳足致炎鼠的影响

中国兽医学报 2021年第8期41卷 1589-1592,1597页

作者：李晓青张雷赵雅欣孙睿雷雨广东润良药业有限公司广东珠海519000 北京市密云区卫生健康委员会北京101500 北京联合大学应用文理学院北京100083

旨在研究藤茶及牛蒡子配伍对耳足致炎鼠的影响。将SPF级SD雄性大鼠及BALB/c雄性小鼠随机分组,分别设定空白对照组,低、中、高剂量组,观察大鼠棉球植入试验中肉芽肿净量及其血清中TNF-α、IL-6、C反应蛋白水平(CRP)、足趾肿胀试验中肿胀... 详细信息

旨在研究藤茶及牛蒡子配伍对耳足致炎鼠的影响。将SPF级SD雄性大鼠及BALB/c雄性小鼠随机分组,分别设定空白对照组,低、中、高剂量组,观察大鼠棉球植入试验中肉芽肿净量及其血清中TNF-α、IL-6、C反应蛋白水平(CRP)、足趾肿胀试验中肿胀率水平,以及小鼠耳廓肿胀试验中耳廓肿胀率水平。结果显示,各剂量组均能有效降低大鼠肉芽肿净量及足趾肿胀率,其中中、高剂量组能显著降低致炎率。棉球植入大鼠血清中TNF-α、IL-6及CRP水平与样品呈现负相关性。中、高剂量组可有效降低小鼠耳廓肿胀率。藤茶与牛蒡子配伍可显著改善咽部症状,减轻致炎程度,改善机体TNF-α、IL-6及CRP水平,共同协同达到清咽效果。

关键词：清咽显齿蛇葡萄叶牛蒡子配伍