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检验医学与临床 2012年第5期9卷 602-603页

作者：李先莉四川省达州市中心医院检验科 635000

目的通过时间分辨免疫荧光技术(TRFIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)对乙型肝炎(简称乙肝)病毒标志物(HBV-M)测定结果的比较,探讨TRFIA在HBV-M测定中的应用。方法采用TRFIA和ELISA及其配套试剂盒对2 350例临床标本同时测定HBV-M,并对结果... 详细信息

目的通过时间分辨免疫荧光技术(TRFIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)对乙型肝炎(简称乙肝)病毒标志物(HBV-M)测定结果的比较,探讨TRFIA在HBV-M测定中的应用。方法采用TRFIA和ELISA及其配套试剂盒对2 350例临床标本同时测定HBV-M,并对结果进行比较分析。结果与ELISA相比,TRFIA在乙肝病毒表面抗原(HBsAg)与乙肝病毒e抗原(HBeAg)的测定上差异均无统计学意义(P>0.05),而在乙肝病毒表面抗体(抗-HBs)、乙肝病毒e抗体(抗-HBe)及乙肝病毒核心抗体(抗-HBc)的测定上差异均有统计学意义(P<0.01)。在HBV-M模式的检测方面,TRFIA与ELISA相比灵敏度明显提高,特别是对抗-HBs、抗-HBe、抗-HBc模式的检出率显著增高(P<0.05)。结论 TRFIA较ELISA特异性强、灵敏度高,是一种比较理想的定量检测方法,并能为疫苗接种提供可靠依据。选择恰当的方法才能降低实验室的不确定度,为室内质量控制建立良好的基础,更好地服务于临床。

关键词：时间分辨免疫荧光技术酶联免疫吸附试验乙型肝炎病毒标志物

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时间分辨免疫荧光技术在检验医学中的发展现状

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江西医学检验 2003年第3期21卷 191-193页

作者：乐爱平江西医学院第一附属医院检验科南昌330006

标记免疫分析法创立于60年代初期,是将多种标记示踪技术的高度敏感性和医学免疫学抗原抗体反应的高度特异性相结合的产物,包括放射免疫(RIA),酶联免疫分析法(EIA)、化学发光免疫分析法(CLIA)、电化学发光免疫分析法(ECLIA)、时间分辨荧... 详细信息

标记免疫分析法创立于60年代初期,是将多种标记示踪技术的高度敏感性和医学免疫学抗原抗体反应的高度特异性相结合的产物,包括放射免疫(RIA),酶联免疫分析法(EIA)、化学发光免疫分析法(CLIA)、电化学发光免疫分析法(ECLIA)、时间分辨荧光免疫分析(TRFIA).TRFIA具有零本底、灵敏度高、重复性好、特异性强、线性范围宽和应用广泛等特点,是继放射免疫分析之后,标记免疫分析法发展的一个新的里程碑,是当代配基分析中最有发展前景的分析手段.本文就时间分辨免疫荧光分析技术作如下综述.

关键词：检验医学时间分辨免疫荧光技术发展现状标记免疫分析法

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基于时间分辨荧光免疫层析快速定量检测降钙素原（PCT）试剂的研究

基于时间分辨荧光免疫层析快速定量检测降钙素原（PCT）试剂的研究

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作者：邵向阳南方医科大学

学位级别：硕士

背景:感染性疾病是临床上的常见病,发病率呈逐渐上升的趋势,严重的感染患者会发生感染性休克。不同类型的感染性疾病的治疗方案也不同,细菌感染需要及时采用抗生素进行治疗,非细菌性感染则应慎用抗生素治疗。脓毒血症是一种死亡率较高... 详细信息

背景:感染性疾病是临床上的常见病,发病率呈逐渐上升的趋势,严重的感染患者会发生感染性休克。不同类型的感染性疾病的治疗方案也不同,细菌感染需要及时采用抗生素进行治疗,非细菌性感染则应慎用抗生素治疗。脓毒血症是一种死亡率较高的疾病,是非心脏内科ICU病人死亡的主要原因,我国估计约300万例/年,死亡率40%-50%。不能接受有效的抗生素治疗,患者的死亡风险逐渐上升,每推迟一小时,死亡率将增加7.6%。因此对这些感染性疾病进行早期的鉴别诊断,选择合适的治疗方案显得非常重要。降钙素原（procalcitonin,PCT）作为脓毒血症、炎症的一个良好血清学标志物,有助于临床感染性疾病的鉴别诊断及其预后评估,指导抗生素使用。目前PCT的检测方法主要有定量法（化学发光法、酶联免疫发光分析法）和半定量法（胶体金法）。化学发光法、酶联免疫发光分析法能准确定量,化学发光法需要大型专用仪器、费用昂贵、使用不便,酶联免疫发光分析法操作繁琐,准确性影响因素较多等缺点,限制了使用范围。胶体金法快速简便,但是不能精确的定量。PCT的动态监测和早期检测在临床上的价值意义重大,因此需要建立一种能快速、简便、准确对PCT定量的方法。目的:建立一种适用于床旁检测（Point of care testing,POCT）又称为“即时检验”的快速定量检测方法以助于PCT的及时检测和动态监测。本研究采用时间分辨结合免疫层析技术,建立一种快速定量检测PCT的方法。方法:1.将购买的两对PCT特异性单克隆行标记和包被抗体配对组合,用时间分辨免疫荧光分析法（TRFIA,Time-resolved fluoroimmunoassay）进行筛选,获取最佳的标记及包被抗体。2.应用双抗体夹心法,建立基于时间分辨荧光免疫层析快速定量检测降钙素原（PCT）试剂的方法。对各项试剂参数进行优化包括:硝酸纤维膜（NC膜）的筛选、检测线（T）和质控线（C）包被抗体量、最佳的划线量、标记抗体最佳用量、最佳反应时间确定。3.对试剂性能指标评估,进行以下实验:标准曲线、分析灵敏度、准确度、精密度、特异性、临床考核实验。结果:1.通过TRFIA法,综合剂量-反应曲线相关系数（r）、信噪比、背景等,筛选最优的标记原料（MJ03）;包被原料（16B5）。2.确立基于免疫层析技术与时间分辨技术反应模式;最佳的硝酸纤维膜HF135膜;检测线（T）16B5最佳包被用量2.0mg/mL;质控线（C）山羊抗兔IgG最佳包被用量1.0mg/mL;最优划线喷速0.08μL/mm;标记抗体MJG03最佳用量为0.1mg/mL;兔IgG最佳用量为0.1mg/mL;最佳反应时间为15min。3.试剂性能指标评估:标准曲线回归方程:log（y）= 1.1143+0.8529log（x）,r=0.9994;分析灵敏度为0.08ng/mL;准确度（回收率）在93%～105%之间;分析、分析间精密度CV在5.4%～13.4%;检测样本时不受人降钙素、CRP、人抗钙素、IL-6干扰物质的影响;234例临床样本考核实验等效性对比研究表明,自制试剂盒和商品化试剂盒（Roche Elecsys BRAHMS PCT Kit）具有很好的一致性（Kappa =0.875）和相关性[r = 0.977,（P＜0.01）]。结论:本研究成功研制了基于时间分辨荧光免疫层析技术快速定量检测PCT的试剂,试剂各项参数、性能指标良好,均符合体外诊断试剂的要求。能很好的满足临床对PCT快速定量检测的需求。

关键词：时间分辨免疫荧光技术即时检验(POCT) 免疫层析技术降钙素原(PCT) 脓毒血症

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深圳市15岁以下儿童HBV感染及抗体水平调查

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职业与健康 2013年第6期29卷 726-728页

作者：孙丽芳马东礼杨方华邓芳梅罗小娟广东省深圳市儿童医院检验科 518026

目的了解深圳市儿童乙型肝炎(以下简称乙肝)流行和乙肝疫苗接种状况,为制定和调整乙肝疫苗接种策略提供依据。方法采用时间分辨免疫荧光技术(TRFIA)对4 446名15岁以下儿童进行乙肝两对半定量检测,并对结果进行分析。结果 15岁以下儿童... 详细信息

目的了解深圳市儿童乙型肝炎(以下简称乙肝)流行和乙肝疫苗接种状况,为制定和调整乙肝疫苗接种策略提供依据。方法采用时间分辨免疫荧光技术(TRFIA)对4 446名15岁以下儿童进行乙肝两对半定量检测,并对结果进行分析。结果 15岁以下儿童乙肝表面抗原(HbsAg)阳性率为1.21%,其中男孩HBsAg阳性率为1.45%,女孩HBsAg阳性率为0.85%,差异没有统计学意义。HBsAg阳性率0～6岁组为0.85%,13～15岁组为4.80%,差异有统计学意义;乙肝表面抗体(HbsAb)阳性率(≥10 U/L)为85.43%,男孩HBsAb阳性率83.94%,女孩HBsAb阳性率88.42%,性别分布差异有统计学意义。HBsAb水平有随着年龄增加而下降的趋势,TRFIA定量分析抗HBsAb结果 100 U/L占52.61%。结论年龄越小HBsAg阳性率越低,说明近年该市的乙肝防治效果非常显著,定量测定HBsAb的浓度对于了解儿童对乙肝病毒(HBV)的免疫能力,评价全面免疫的接种效果,及时补种疫苗有重要意义,有47.39%的儿童HBsAb定量值低于100 U/L,需要补种或加强乙肝疫苗,推行乙肝疫苗加强免疫策略应该是今后乙肝防治工作的重点。

关键词：时间分辨免疫荧光技术乙型肝炎表面抗原乙型肝炎表面抗体儿童疫苗

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人工肝和肝移植术后的乙肝三系统定量观察

人工肝和肝移植术后的乙肝三系统定量观察

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第三届全国重型肝病及人工肝血液净化学术年会

作者：肖萍陈青锋杨彦麟郭振华孙永红赵正斌岳伟陈红兰州大学第一医院传染病研究室兰州大学第一医院传染科

目的:观察人工肝技术和肝移植手术对重症乙肝患者乙肝病毒标志物的影响。方法:乙肝三系统定量采用时间分辨免疫荧光技术,乙肝病毒 DNA 定量采用实时荧光定量 PCR 法。结果:28例实施人工肝技术的重肝患者治疗前后的乙肝三系统定量和 HBVD... 详细信息

目的:观察人工肝技术和肝移植手术对重症乙肝患者乙肝病毒标志物的影响。方法:乙肝三系统定量采用时间分辨免疫荧光技术,乙肝病毒 DNA 定量采用实时荧光定量 PCR 法。结果:28例实施人工肝技术的重肝患者治疗前后的乙肝三系统定量和 HBVDNA 定量结果为:HBsAg171.19±***/ml,HBeAg0.03± 0.029ncu/ml,HBeAb3.97±4.61 ncu/ml,HBcAb5.98±3.3Incu/ml,HBVDNA1.1*10±6.81*10 cop/ml 和 HBsAg 168.14±39.4 HBeAg 0.02±0.023 HBeAb 3.95±4.34 HBcAb 6.41±***1.1*10± 6.23*10cop/ml。P 值均>0.05,无统计学意义。26例施行肝移植手术的患者治疗前后的乙肝三系统定量和 HBVDNA 定量结果分别为 HBsAg 144.65±77.0ng/ml,HBeAg 0.02±0.028 ncu/ml,HBeAb 4.32±6.43 ncu/ml,HBcAb 6.04±4.88 ncu/ml,HBVDNA1.0.10±6.89*10cop/ml 和 HBsAg 6.54±3.32 ng/ml, HBeAg 0.02±0.016 ncu/ml,HBeAb 4.79±6.44 ncu/ml,HBcAb 5.97±4.64 ncu/ml,HBVDNA 1.04*10 ±3.40*10cop/ml。除 HBeAb 和 HBcAb P 值>0.05外,其他项目 P 值均技术延长了重症乙肝患者的生存时间和质量,为肝移植手术创造了合适的条件和机会,赢得了时间。

关键词：时间分辨免疫荧光技术 HBVDNA 乙肝三系统人工肝技术肝移植手术

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孕中期血清指标在先天缺陷胎儿产前筛查中的临床意义

孕中期血清指标在先天缺陷胎儿产前筛查中的临床意义

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中华医学会第七次全国检验医学学术会议

作者：马育华山东省临沂市人民医院

目的检测孕妇血清甲胎蛋白(AFP),游离β-HCG (Freeβ-HCG),进行孕中期(14～20+6周)先天缺陷儿的无创性筛查。方法采用全自动时间分辨免疫分析仪及配套试剂进行血清AFP和Freeβ-HCG的定量检测,专使用专业软件结合孕妇年龄、体重、孕周等... 详细信息

目的检测孕妇血清甲胎蛋白(AFP),游离β-HCG (Freeβ-HCG),进行孕中期(14～20+6周)先天缺陷儿的无创性筛查。方法采用全自动时间分辨免疫分析仪及配套试剂进行血清AFP和Freeβ-HCG的定量检测,专使用专业软件结合孕妇年龄、体重、孕周等多种因素进行分析校正,计算胎儿患病风险率。以1:270为风险切割点。>1:270为高风险,时间越长,引起染色体不分离的风险越大。该病是偶发的,可以在任何人群中发病。加之目前该病没有治疗方法,给家庭和社会带来了巨大的负担。目前AFP和Freeβ-HCG的两联筛查方案对DS的检出率可达65%～75%,假阳性率在5%左右。相对于产前诊断实验,孕妇所承担的风险及医务工作者操作的繁琐,筛查实验的经济和方便更容易被孕妇接受。从而扩大了参与筛查的孕妇人数,有效减少了先天性缺陷儿的出生,对于提高人口素质具有重大意义。

关键词：唐氏综合征 18-三体综合征神经管缺陷产前筛查时间分辨免疫荧光技术

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