检索结果-南通市图书馆

真菌学报 1992年第3期11卷 195-197页

作者：侯成林刘世骐安徽农学院合肥230036

本文报道了松树上散斑壳属(Lophodermium Chev.)的1个新种,即新疆五针松散斑壳(Lophodermium pini-sibiricum Hou et *** ***.)。文中对该新种的形态特征作了汉文和拉丁文的描述。

关键词：松树散斑壳属新种

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国散斑壳属补遗I.

菌物学报 2004年第1期23卷 14-17页

作者：林英任许早时叶光斌王士娟安徽农业大学合肥230036

报道散斑壳属的2个新种:寄生于云南松Pinus yunnanensis Franch. 针叶的灰散斑壳Lophodermium griseum和生于油茶Camellia oleifera 叶片上的江南散斑壳L. jiangnanense。模式标本保藏于安徽农业大学森林保护教研室(AAUFP)。

关键词：散斑壳属灰散斑壳江南散斑壳新种

辽东地区油松散斑壳属生态学及生物学特性的研究

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

辽东地区油松散斑壳属生态学及生物学特性的研究

作者：石凤莲沈阳农业大学

学位级别：硕士

油松是辽宁省东部地区的主要树种之一，既有大面积的天然林，也有范围广泛的人工林。近年来，油松落针病在辽东山区普遍发生，部分地区危害严重。作者对省内东部山区主要油松林区的油松落针病病情进行了调查，发现导致松针感病脱落的病... 详细信息

油松是辽宁省东部地区的主要树种之一，既有大面积的天然林，也有范围广泛的人工林。近年来，油松落针病在辽东山区普遍发生，部分地区危害严重。作者对省内东部山区主要油松林区的油松落针病病情进行了调查，发现导致松针感病脱落的病原菌主要为散斑壳属真菌。散斑壳属是菌物系统中的一个重要组成部分，隶属于盘菌纲(Discomycetes)斑痣盘菌目(Rhytismatales)斑痣盘菌科(Rhytismataceae)。本文采用现代菌物学和林木病理学研究技术，对辽东山区油松落针病病原中的散斑壳属(Lophodermium spp．)部分种的生态学特性及生物学特性进行了较系统的研究。主要内容包括：辽东地区油松落针病危害程度的调查及症状的描述、生态因子对病害发生的影响的研究、散斑壳菌培养特性观察及分析。以Minter(1981)的分类标准为主要依据，对采自辽宁省东部地区(沈阳、抚顺、本溪和丹东4个地区)的12个地方的40余号病原菌标本进行整理编号、种的形态及解剖学鉴定及分离培养。共查明散斑壳属真菌5种，分别是：针叶树散斑壳(Lophodermiumconigenum)、松针散斑壳(Lophodermi pinastri)、A、新2B、光亮散斑壳(Lophodermiumnnitens Darker)。这5种散斑壳菌可在树上挂叶、二年生、三年生或正在腐败的落地针叶上产生子实体。本研究选用其中的4个种进行了研究。辽东山区油松落针病发生与生态因子存在一定的关系：油松落针病的发生与坡向关系不明显，坡位、树种的组成、林分密度和郁闭度与油松落针病的发生有明显的关系。坡的下腹发病较重，上坡明显发病较轻。人工纯林病害的发生程度最重，人工混交林和天然混交林的发病程度较低。林分密度越大发病越重;同样，郁闭度越大发生越重，反之则轻。病害的发生和土壤类型也有一定的关系。石质棕色森林土壤类型的发病率和发病指数均高于暗棕色森林土壤类型。土壤中速效氮、速效磷含量和钙、镁元素含量均随着病重而呈现减少趋势，速效氮表现最明显。随着土壤pH值逐渐降低，酸性增加，油松落针病的发病程度逐渐加重。本研究采用子囊果组织分离法，对部分成熟材料进行分离培养，并对其培养性状进行了观察记录，研究了不同营养、pH值、温度、光照条件对4个菌种菌落特征及生长量的影响，结果表明：绝大多数菌种在PDA培养基上菌丝生长较快;菌种在CA，OA上形成分生孢子器的时间早些，在PDA，PSA，PA，PAS上形成的稍晚些，但是在PDA，PSA上形成的分生孢子器直径大于在CA，OA，PA，PAS上形成的分生孢子器直径。所有菌种在培养60天后，仍未见形成子囊;生长最适pH值为5.5或6.0，在pH值4.0-10.0时大部分菌种均可生长;光照条件对菌落生长量影响的差异不显著;生长的温度范围为2℃-35℃，生长最适温度为25℃，超过35℃时菌丝几乎停止生长。本文在参考前人研究资料的基础上，综述和评论了松落针病病原的生活史及其造成的危害性、生态学以及生物学特性，同时对当前国内外防治落针病的方法进行了总结归纳。希望本研究能为在林业生产中防治落针病提供一定的理论基础。

关键词：油松落针病散斑壳属生态学特性生物学特性

斑痣盘菌科的分类和针叶树生散斑壳属等随机扩增多态性DNA分析

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

斑痣盘菌科的分类和针叶树生散斑壳属等随机扩增多态性DNA分析

作者：李占东安徽农业大学

学位级别：硕士

斑痣盘菌科(Rhytismataceae)是世界菌物资源中的一个重要组成部分。本文采用现代菌物学研究技术,从形态解剖学、个体发育学、生态与地理分布、培养性状等方面对斑痣盘菌科部分种进行了较为系统的分类研究。同时采用RAPD技术对26个针叶... 详细信息

斑痣盘菌科(Rhytismataceae)是世界菌物资源中的一个重要组成部分。本文采用现代菌物学研究技术,从形态解剖学、个体发育学、生态与地理分布、培养性状等方面对斑痣盘菌科部分种进行了较为系统的分类研究。同时采用RAPD技术对26个针叶树生散斑壳属(Lophodermium Chevall.)和2个相关属(Ploioderma destruens,Soleellachinensis)菌株部分种内及近似种间的遗传多样性进行了分析研究,进一步弄清了各分类群之间的系统发育关系。以Darker(1967)的分类系统为基础,同时参考Korf(1973)、Cannon & Minter(1986)、Kirk et al.(2001)等人的若干补充和修订,对源于皖南山区和大别山区的斑痣盘菌科菌物进行分类研究。共查明4属8种,其中包括栎皮下盘菌(Hypodermaquerci)、栲散斑壳(Lophodermium castanopsis)、短孢齿裂菌(Coccomyces brevisporus)3个新种;对5个已知种进行了补充研究,使其形态结构、个体发育等特征得以完善,同时追记了它们的寄主新记录和地理新分布。对各种均提供了形态解剖学特征的描述与图解、寄主及生境的记载,并对其相近类群、寄生性与致病性等加以讨论。编制了各属的二叉式分种检索表。利用组织分离法对采自安徽的菌物活材料进行分离纯化,获得针叶树生散斑壳属(Lophodermium)及其近似属10个分离株。通过定期观察、记载各菌株的培养性状和拍摄纯培养物彩色照片,发现各菌株在MA平板培养基上的生长速度、菌落形状、颜色和结构以及子实体形成与否及成熟期等方面存在一定的差异,少数菌株产生分生孢子器和线(环)纹,所有菌株均不产生子囊果,仅个别菌株分泌水溶性色素而使培养基变色。利用氯化苄法对26个针叶树生散斑壳属(Lophodermium)和2个舟皮盘菌属及小鞋孢盘菌属菌株进行DNA提取。通过对模板用量、随机引物用量、Mg离子用量、dNTP用量、Taq酶用量和反应退火温度及时间、延伸温度及时间、循环次数等参数进行优化,建立了该类菌物RAPD-PCR反应的最佳体系,即在25μl反应体积中,DNA模板(100ng/μl)1.0gμl,随机引物(12.5μM)1.0μl,MgCl(25mM)2.0μl,dNTPs(10mM)2.0μl,Taq酶(5U/μl)0.2μl,10×PCR buffer 2.5μl,ddHO 16.3μl。扩增程序为:先95℃预变性5min,循环50次,每个循环包括94℃变性1min,36℃退火100s,72℃延伸140s,最后一次循环后在72℃延伸10min。采用上述优化的扩增体系对26个针叶树生散斑壳属及其相关属菌株进行RAPD分析。利用9个随机引物共扩增出111个位点,其中多态性位点数104个,占总数的94%,扩增片段长度大多数集中在250-2000bp之间。采用UPGMA方法构建RAPD聚类树状图。分析结果表明:针叶树上的散斑壳属(Lophodermium)各分离株和近似菌株之间遗传距离变异范围在1.98-5.35之间。在遗传距离4.91处,将针叶树上26个分离株分成A、B、C、D、E、F 6个类群。同种或近似种的菌株基本上能很好地聚在一起,不同种之间也能较好地区分;这与表型性状分类的结果基本一致。由此可见,RAPD技术在种内和近似种间系统学研究中具有较好的适用性。通过将表型性状与RAPD分析结果进行比较,进一步验证了子囊果大小、线纹的有无及特征、寄主种类等在针叶树生散斑壳属部分种内及近似种间区分方面的重要性。同时从另外一个侧面也证明了子囊孢子的类型这一特征在针叶树生散斑壳属与相关属区分方面是十分重要的。

关键词：斑痣盘菌科分类学散斑壳属随机扩增多态性DNA分析针叶树

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

我国散斑壳属及皮下盘菌属若干种的研究

我国散斑壳属及皮下盘菌属若干种的研究

作者：许早时安徽农业大学

学位级别：硕士

本文采用现代菌物学研究技术，对我国散斑壳属(Lophodermium Chev．)及皮下盘菌属(Hypoderma de Not．)部分种进行较系统的研究。主要内容包括：各菌种形态解剖学、发育学特征的研究;安徽一些种的生态习性、培养性状探讨以及酯酶同工酶... 详细信息

本文采用现代菌物学研究技术，对我国散斑壳属(Lophodermium Chev．)及皮下盘菌属(Hypoderma de Not．)部分种进行较系统的研究。主要内容包括：各菌种形态解剖学、发育学特征的研究;安徽一些种的生态习性、培养性状探讨以及酯酶同工酶测定与分析;散斑壳菌和皮下盘菌的多性状综合分类。赞同Cannon & Minter(1986)提出的分类观点，将散斑壳属和皮下盘菌属置于盘菌纲(Discomycetes)斑痣盘菌目(Rhytismatales)斑痣盘菌科(Rhvtismataceae)下。对来自国内16省的240号标本进行鉴定与分类，共查明2属21种。其中包括6个新种：柃木散斑壳(***)，灰散斑壳(***)，纠丝散斑壳(***)，江南散斑壳(***)，强壮散斑壳(***)和硬皮下盘菌(***);4个中国新记录种：芒果散斑壳(***)，茶生散斑壳(***)，小散斑壳(***)及悬钩子皮下盘菌(***);国内11个仅见报道名称或描述不详的已知种。编制了散斑壳属和皮下盘菌属分种的二叉式检索表，对各种均提供了形态解剖学特征的描述与图解、寄主及产地的记载，并加以讨论。新种的模式标本保藏于安徽农业大学森林保护教研室(AAUFP)。本次研究的21种散斑壳菌及皮下盘菌来自黑龙江、甘肃、西藏、云南、陕西、广西、贵州、北京、湖南、山西、四川、安徽、江苏、福建、广东和海南等16省(市、自治区)，从南方的海南岛至北部的黑龙江均有此类菌物的存在。但这些菌物总体上呈南多北少的地理分布格局，大多数种分布于长江流域及其以南地区，显然得益于该区气候温暖、雨量充沛、植被丰富的优越自然条件。该类菌物寄主范围广泛，除针叶树外，还包括众多的被子植物。它们共涉及寄主植物11科(松科、柏科、杉科、茶科、蔷薇科、杜鹃科、漆树科、壳斗科、豆科、木兰科、五加科)15属。多数种仅知在单寄主属上发生，但也有部分种能在多寄主上产果，如松针散斑壳(***)可危害16种单、双维管束松树。散斑壳菌和皮下盘菌主要在侵染致死或正在腐败的叶、叶柄或枝干等部位产生子实体。以组织分离法对采自安徽皖南山区的斑痣盘菌活菌材料进行分离培养，获得7种散斑壳菌及皮下盘菌的培养性状资料。结果表明大多数种在MA平板上菌落营养生长最好，产生分生抱子器及分生抱子的时间较早、能力较强;OA也是可选择的培养基之一：而P＊A较不适宜于该类菌物的营养生长和分生抱子器产生。所有种在培养60天内均不产生子囊果。采用聚丙烯酚胺凝胶垂直平板电泳技术对斑病盘菌进行酯酶同工酶测定，以 UPGMA法进行聚类分析，在距离系数 3＊水平上将 12个斑痞盘菌菌株归为4类。结果表明，亲缘关系愈近的菌株其酶谱的相似性愈大，属间差异明显大于种间差异，同菌种的酶谱可因寄主、产地不同等而存一定差异。酯酶同工酶测定与分析可作为区分近似种的一种辅助手段。本文在参考前人研究资料的基础上，综述和评论了散斑壳属及皮下盘菌属的分类历史、形态学、生态与地理分布以及生物学性状。

关键词：散斑壳属皮下盘菌属多性状综合分类分离培养酯酶同工酶

斑痣盘菌科分类及被子植物生散斑壳属分子生物学研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

斑痣盘菌科分类及被子植物生散斑壳属分子生物学研究

作者：张韬安徽农业大学

学位级别：硕士

本论文采用目前世界上最新颖、先进的分类系统和多性状综合分类方法,根据形态解剖学、个体发育学、生态及生物学等特征,对采自安徽天堂寨国家森林公园和牯牛降自然保护区的斑痣盘菌科3属的若干种进行了分类学研究。同时,采用9个重复性... 详细信息

本论文采用目前世界上最新颖、先进的分类系统和多性状综合分类方法,根据形态解剖学、个体发育学、生态及生物学等特征,对采自安徽天堂寨国家森林公园和牯牛降自然保护区的斑痣盘菌科3属的若干种进行了分类学研究。同时,采用9个重复性好的随机引物对被子植物上的28个散斑壳属(Lophodermium Chevall.)菌株进行RAPD-PCR扩增反应,通过RAPD分析结果结合表型性状的比较和分析,确定了子囊果埋生位置,子座、子囊、子囊孢子、侧丝等形态学特征以及寄主种类差异在该类真菌种水平分类上的重要性,进一步明确了被子植物生散斑壳属若干种内和种间的遗传多样性和亲缘关系。主要研究结果如下:1.以Darker(1967)、Cannon & Minter(1986)、Kirk et al.(2001)等人提出的分类观点为主要依据,对采自安徽天堂寨国家森林公园、牯牛降自然保护区以及保藏于安徽农业大学森保教研室(AAUFP)的近300号标本进行鉴定、分类。研究了齿裂菌属(Coccomyces)的显缘齿裂菌(***),皮下盘菌属(Hypoderma)的野珠兰皮下盘菌(***)以及散斑壳属(Lophodermium)的贝壳衫散斑壳(***)、纠丝散斑壳(***)、小散斑壳(***)、红褐散斑壳(***)、蝙蝠葛散斑壳(***)和石楠散斑壳(***)8个种,其中野珠兰皮下盘菌、蝙蝠葛散斑壳和石楠散斑壳为新种。编制了二叉式分种检索表,各种均附有形态解剖学特征的描述与图解以及寄主、生境的记载,并加以讨论。2.利用组织分离法对采自安徽天堂寨国家森林公园的散斑壳属成员进行了分离培养,获得9个生于被子植物上的散斑壳属菌株。培养期间,定期观察发现不同种之间的培养性状存在显著差别,甚至同种的不同生境及寄主的分离株在菌落生长速度、大小、颜色以及色素产生方面也存差异;各菌株均附培养性状描述。3.利用随机扩增多态性DNA技术(RAPD)对源于安徽黄山风景区以及天堂寨国家森林公园的28个被子植物生散斑壳属菌株进行了基因组DNA多态性分析。采用筛选出的9个10—寡聚核苷酸随机引物,通过RAPD-PCR扩增反应,共获得扩增条带105条,其中特异性条带100条,占95.24%;用UPGMA方法构建聚类图,在遗传距离4.10处将28个供试菌株分为7类,其聚类结果与表型性状分类极其相近。通过RAPD分析结果结合表型性状的比较和分析,确定了子囊果埋生位置,子座、子囊、子囊孢子、侧丝等形态学特征以及寄主种类差异等表型性状在该类菌物分类上的重要性。

关键词：斑痣盘菌科分类学散斑壳属分子生物学被子植物

武夷山广义散斑壳属分类及其多基因系统发育学研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

武夷山广义散斑壳属分类及其多基因系统发育学研究

作者：赵兴艳安徽农业大学

学位级别：硕士

广义散斑壳菌(Lophodermium sensu lato)隶属于子囊菌门(Ascomycota)锤舌菌纲(Leotiomycetes)斑痣盘菌目(Rhytismatales),包括严格意义上的散斑壳属(Lophodermium Chevall.)和特里尔盘菌属(Terriera ***.)。本文采用多性状综合分类方法,对福建武夷山自然保护区的广义散斑壳属真菌进行系统分类研究,同时基于ITS rDNA、nLSU rDNA、mtSSU rDNA序列构建广义散斑壳属系统进化树,对严格意义上的散斑壳属与特里尔盘菌属的亲缘关系和遗传多样性加以讨论与研究。以Darker、Cannon&Minter、Johnston等人提出的分类系统原则为主要依据,对来自武夷山自然保护区的80余号标本进行了鉴定与分类,共查明18种,其中14种为已知种,新种4个,分别为树参特里尔盘菌*** ***.、武夷山散斑壳*** ***.、杜鹃散斑壳*** ***.、膨丝特里尔盘菌*** ***.,提出一个新组合***(*** et al.)***.。各新种均附有形态解剖学特征的中英文描述、外表与显微镜照片、图解及生境记载,并加以讨论。此外,编制了二叉分种检索表。以柔膜菌目为外群,构建广义散斑壳属的单基因与多基因序列联合发育树,对不同属之间、不同种之间以及不同菌株间进化关系进行探讨。结果表明:1.严格意义上的Lophodermium属和Terriera属可能为多起源性属,Terriera属的建立是合理的。2.寄主对广义散斑壳属内种间系统发育关系有一定的影响。3.通过系统发育树并结合形态特征分析,建议将***界定为***(*** et al.)***.新组合。

关键词：散斑壳属特里尔盘菌属形态特征多基因序列联合分析系统发育学

一些阔叶树生斑痣盘菌科的分类和散斑壳属ISSR分子标记

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

一些阔叶树生斑痣盘菌科的分类和散斑壳属ISSR分子标记

作者：刘艳兵安徽农业大学

学位级别：硕士

本论文采用目前世界上较新颖、先进的分类系统和多性状综合分类方法,根据形态解剖学、个体发育学、生态及生物学等特征,对采自安徽天堂寨国家森林公园、黄山风景区和牯牛降自然保护区的斑痣盘菌科(Rhytismataceae)3属的若干种进行了分... 详细信息

本论文采用目前世界上较新颖、先进的分类系统和多性状综合分类方法,根据形态解剖学、个体发育学、生态及生物学等特征,对采自安徽天堂寨国家森林公园、黄山风景区和牯牛降自然保护区的斑痣盘菌科(Rhytismataceae)3属的若干种进行了分类学研究。同时,采用9个重复性好的随机引物对散斑壳属(Lophodermium Chevall.)15个菌株进行ISSR-PCR扩增反应,通过ISSR分析结果结合表型性状的比较和分析,确定了部分形态学特征以及寄主种类差异在该类真菌种水平分类上的重要性,进一步明确了散斑壳属若干种内和种间的遗传多样性和亲缘关系。以Darker(1967)的分类系统为基础,同时参考Korf(1973)、Cannon&Minter(1986)、Kirk et al.(2001)等人的若干补充和修订,对采自安徽天堂寨国家森林公园、黄山风景区、牯牛降自然保护区以及保藏于安徽农业大学森保教研室(AAUFP)的标本进行鉴定、分类。共查明隶属于齿裂菌属(Coccomyces)、散斑壳属(Lophodermium)和斑痣盘菌属(Rhytisma)3属的8个种,其中包括2个新种,即棒囊齿裂菌(Coccomycesclavatus ***.)和尖孢散斑壳(Lophodermiun acutisporum ***.);并且对6个国内已知种进行了补充研究,追加了这些种的新寄主和地理新分布。以组织分离法对采自天堂寨国家森林公园的阔叶树生斑痣盘菌活材料进行分离培养,共获得隶属于齿裂菌属(Coccomyces)、皮下盘菌属(Hypoderma)、散斑壳属(Lophodermium)和斑痣盘菌属(Rhytisma)的8号分离株,接菌于MA培养基上,定期观察、记载各菌株的菌落形状、大小、色泽、结构、气生菌丝和潜生菌丝状况、生长速度、分泌色素与否以及是否产生分生孢子等特征。利用氯化苄法对采自天堂寨国家森林公园的散斑壳属(Lophodermium Chevall.)15个菌株进行DNA提取。通过对模板用量、随机引物用量、Mg离子用量、dNTP用量、Taq酶用量和反应退火温度及时间、延伸温度及时间、循环次数等参数进行优化,建立了该类菌物ISSR-PCR反应的最佳体系,即在15μl反应体积中,DNA模板(45ng/μl)2.0μl,随机引物(10μM)0.6μl,MgCl(25mM)1.5μl,dNTPs(10mM)0.3μl,Taq酶(5U/μl)0.3μl,10×PCR buffer 1.5μl,ddHO 8.8μl。扩增程序为:94℃预变性2min;每个循环94℃变性1min,特定温度下退火60s,72℃延伸2min30s,共35个循环;循环结束后72℃延伸10min。利用筛选出9条重复性好、条带清晰的引物,使用优化的ISSR-PCR反应参数及程序对散斑壳属15个菌株的DNA进行ISSR分子标记。9个引物共扩增出154个位点,其中多态性位点数150个,占总数的97.40%。扩增位点数最多的是引物S45,有21个位点数;扩增位点数最少的是S12,有14个位点数,扩增出的片断长度大多在100-2000bp之间。采用UPGMA方法构建聚类树状图,遗传距离在7.08处,15个菌株被划分为6个类群,其聚类结果与表型性状分类极其相近。通过ISSR分析结果结合表型性状的比较和分析,确定了子囊果埋生位置,子座、子囊、子囊孢子、侧丝等形态学特征以及寄主种类差异等表型性状在该类菌物分类上的重要性。

关键词：齿裂菌属散斑壳属斑痣盘菌属分类学 ISSR分子标记

四川省散斑壳属若干种的鉴定、培养及遗传多样性分析

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

四川省散斑壳属若干种的鉴定、培养及遗传多样性分析

作者：杨静四川农业大学

学位级别：硕士

松树是四川省林区的主要树种之一，既有大面积的天然林，也有范围广泛的人工林。近年来，松落针病在四川林区普遍发生，部分地区危害严重。作者对省内主要松树林区的松落针病病情进行了调查，发现导致松针感病脱落的病原菌主要为散斑壳... 详细信息

松树是四川省林区的主要树种之一，既有大面积的天然林，也有范围广泛的人工林。近年来，松落针病在四川林区普遍发生，部分地区危害严重。作者对省内主要松树林区的松落针病病情进行了调查，发现导致松针感病脱落的病原菌主要为散斑壳属真菌，并对其作了较为系统的研究，主要内容包括：病原菌种的形态学鉴定、培养特性观察及种间、种内遗传多样性分析。以Minter(1981)的分类标准为主要依据，对采自四川省主要松树林区(雅安名山、甘孜泸定、甘孜康定、眉山丹棱、成都蒲江、内江资中、自贡、宜宾、泸州、南充、达州、西昌冕宁)的40余号病原菌标本进行整理编号、种的形态学鉴定、分离培养。共查明散斑壳属真菌7种，分别是：针叶树散斑壳(Lophodermium conigenum)、松针散斑壳(Lophodermi pinastri)、四川散斑壳(Lophodermium sichuanense)、印度散斑壳(Lophodermium indianum)、南方散斑壳(Lophodermium australe)、二郎山散斑壳(Lophodermium erlangshanense)(新种暂定名)、库曼散斑壳(Lophodermium kumaunicum);其中，二郎山散斑壳为新种，库曼散斑壳为四川新记录种。采用子囊果组织分离法对部分成熟材料进行分离培养，获得24个菌株，并对其培养性状进行了观察记录，为进一步进行RAPD遗传多样性分析奠定了基础。采用改良二次沉淀法获得了24个散斑壳菌株的基因组DNA，并利用RAPD技术进行种间、种内遗传多样性分析。RAPD分析对反应条件非常灵敏，故稳定性和重复性较差，为了保证RAPD结果的可靠性和重复性，本论文探讨了DNA模板、Taq酶、Mg离子、dNTPs、引物等组分浓度对散斑壳属真菌RAPD反应的影响，并获得了最佳反应条件：25μlPCR反应体积，10×Taq酶缓冲液(2.5μl)，1.5UTaq酶，20ng DNA模板，0.4mmol／LdNTPs，4.0mmol／L Mg，0.48μmol／L引物，10.2μlddHO。经过筛选，从160条RAPD引物中得到11条可用于RAPD分析的最佳引物，其扩增图谱具有谱带清晰、带型稳定、多态性好等特点;利用这11个引物对24个散斑壳属菌株进行PCR扩增，共获得217个位点，多态性位点214个，多态率为98.6％。利用NTSYS-PC2.1软件中的UPGMA法构建遗传图谱，结果表明：同种及近似种菌株能够较好地聚在一起，且RAPD聚类结果与形态学特征具有一定的相关性;同一种内各菌株由于地域分隔而产生较大的遗传分化;相同地理来源的同一菌种由于寄主来源不同也能造成种内不同程度的遗传分化。

关键词：散斑壳属形态学鉴定培养性状遗传多样性分析

斑痣盘菌目茎生种的分类及针叶树生散斑壳属分子生物学研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

斑痣盘菌目茎生种的分类及针叶树生散斑壳属分子生物学研究

作者：韩加军安徽农业大学

学位级别：硕士

斑痣盘菌目(Rhytismatales)是世界菌物资源中的一个重要组成部分。本文采用现代菌物学技术,从形态解剖学、个体发育学、生态与地理分布等方面对斑痣盘菌目部分茎生种进行了较深入的分类研究。同时,采用10个重复性好的随机引物对针叶树... 详细信息

斑痣盘菌目(Rhytismatales)是世界菌物资源中的一个重要组成部分。本文采用现代菌物学技术,从形态解剖学、个体发育学、生态与地理分布等方面对斑痣盘菌目部分茎生种进行了较深入的分类研究。同时,采用10个重复性好的随机引物对针叶树生散斑壳属(Lophodermium Chevall.)的22个菌株进行ISSR-PCR扩增反应,通过ISSR分析结果结合表型性状的比较和分析,进一步明确了针叶树生散斑壳属若干种内和种间的亲缘关系。主要研究结果如下: 1.以Darker(1967)、Cannon&Minter(1986)、Kirk et al.(2001)等人提出的分类观点为主要依据,对采自安徽天堂寨国家森林公园、黄山风景区以及保藏于安徽农业大学森保教研室(AAUFP)的标本进行鉴定、分类。研究了异盘菌属(Ascodichaena)的多皱异盘菌(***),散斑壳属(Lophodermium)的葛藤散斑壳(***)、茎生散斑壳(***)、茶生散斑壳(***)、三尖杉散斑壳(***),齿裂菌属(Coccomyces)的小齿裂菌(***)、台湾齿裂菌(C. taiwanensis),以及皮下盘菌属(Hypoderma)的野珠兰皮下盘菌(***)8个种,其中多皱异野盘菌为中国新纪录科、属、种,葛藤散斑壳和茎生散斑壳为新种。编制了二叉式分种检索表,各种均附有形态解剖学特征的描述与图解以及寄主、生境的记载,并加以讨论。 2.利用改良的氯化苄法对22个针叶树生散斑壳属(Lophodermium)菌株进行DNA提取。通过对模板DNA浓度、引物浓度、Mg浓度、dNTPs浓度、Taq DNA聚合酶浓度以及退火温度等条件进行优化,建立了该类菌物ISSR-PCR反应的最佳体系,即在15μ反应体积中,DNA模板(45ng/μl) 2.0μl,随机引物(10μM) 0.6μl,MgCl(25mM)1.51μl,dNTPs(10mM)0.3μl,Taq酶(5U/μl)0.3μl,10×PCR buffer1.5μl,ddHO 8.8μl。利用ISSR分子标记技术对源于安徽黄山风景区以及天堂寨国家森林公园的22个针叶树生散斑壳属菌株进行了基因组亲缘关系的分析。采用筛选出的10个随机引物,通过ISSR-PCR扩增反应,共获得扩增条带167条,其中特异性条带160条,占95.8%;通过欧氏最短距离中的类平均法聚类,得到各菌株之间的遗传距离在5.93-7.41之间。另外,在遗传距离7.12处,将22个供试菌株分为5类。通过ISSR分析结果结合表型性状的比较和分析,同种或近似种的菌株基本上能很好地聚在一起,不同种之间也能较好地区分;这与表型性状分类的结果基本一致。由此可见,ISSR技术在种内和近似种间系统学研究中具有较好的适用性。同时论证了子囊果埋生位置,子座、唇、子囊、子囊孢子等形态学特征以及寄主种类差异等在该类菌物种水平分类上的重要性。

关键词：斑痣盘菌目茎生种散斑壳属 ISSR-PCR反应针叶树