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拮抗犬小孢子菌芽胞杆菌的筛选和鉴定

中国兽医杂志 2024年第3期60卷 35-39页

作者：孙雪盼赵婷婷郑紫萱徐子淇李静马红霞高云航么乃全徐凤宇赵传芳吉林农业大学动物医学院吉林长春130118 江丰(辽宁)生物科技有限公司辽宁铁岭112600 动物生产及产品质量安全教育部重点实验室吉林长春130118 中国农业科学院特产研究所吉林长春130112

为了寻找能够拮抗犬小孢子菌的细菌,本试验从健康犬、猫和貉粪便中筛选了抗犬小孢子菌的芽胞杆菌,经培养、染色特性和16S rDNA序列分析对其中抑菌谱最广的芽胞杆菌进行鉴定,采用平板对峙法测定所筛选芽胞杆菌对犬小孢子菌的抑制效果,用... 详细信息

为了寻找能够拮抗犬小孢子菌的细菌,本试验从健康犬、猫和貉粪便中筛选了抗犬小孢子菌的芽胞杆菌,经培养、染色特性和16S rDNA序列分析对其中抑菌谱最广的芽胞杆菌进行鉴定,采用平板对峙法测定所筛选芽胞杆菌对犬小孢子菌的抑制效果,用碘化丙啶对芽胞杆菌发酵上清处理的犬小孢子菌菌丝进行染色以初步分析抑菌机理。结果显示,共筛选到12株拮抗犬小孢子菌的芽胞杆菌,其中F-15株对犬小孢子菌的抑制率为64.28%,也可抑制金黄色葡萄球菌和沙门菌;F-15株的16S rDNA序列与HSB1株贝莱斯芽胞杆菌的16S rDNA序列相似度为100%;F-15株发酵上清处理的犬小孢子菌菌丝染色后,在荧光显微镜下可见红色荧光,表明其损伤了犬小孢子菌菌丝的细胞膜。本试验为贝莱斯芽胞杆菌及其代谢产物在防控犬小孢子菌等真菌危害中的应用提供了参考。

关键词：贝莱斯芽胞杆菌犬小孢子菌拮抗

橡胶炭疽病拮抗海洋放线菌的筛选鉴定及其生防机制

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分子植物育种 2024年

作者：冼世莹方婧佳王阳锋苑文新李悦徐小雄冯慧敏海南热带海洋学院三亚市热带植物分子育种实验室海南热带海洋学院海南省院士团队创新中心海南省海洋食品工程技术研究中心海洋食品精深加工关键技术省部共建协同创新中心

本研究以分离的79株海洋放线菌为供试菌株，以橡胶炭疽病菌RC178为靶标，采用平板对峙法进行初筛，并进一步利用单菌平板对峙法、菌丝生长速率法和牛津杯法对初筛抑制率大于20%的菌株进行复筛；通过生理生化特征测定、16S rDNA基因序列... 详细信息

本研究以分离的79株海洋放线菌为供试菌株，以橡胶炭疽病菌RC178为靶标，采用平板对峙法进行初筛，并进一步利用单菌平板对峙法、菌丝生长速率法和牛津杯法对初筛抑制率大于20%的菌株进行复筛；通过生理生化特征测定、16S rDNA基因序列对拮抗菌株进行鉴定，明确其分类地位；通过显微镜观察拮抗菌株对靶标病原菌菌丝形态的影响，并测定拮抗菌株产真菌细胞壁水解酶能力，从而探究其生防机制。研究结果表明，经平板对峙法初筛得到16株对橡胶炭疽病具有抑菌效果的菌株，但仅菌株A5-1抑制效果最明显，大于20%。复筛结果显示，单菌平板对峙时，菌株A5-1对橡胶炭疽病的抑菌率达72.90%，但其无菌发酵液对橡胶炭疽病无明显效果。结合菌落形态、生理生化及16S rDNA系统发育进化树分析结果，鉴定菌株A5-1为清澜链霉菌( Streptomyces qinglanensis )。拮抗菌株A5-1能使病原菌菌丝扭曲、消解，造成不可逆的伤害，并能分泌蛋白酶和β-1，3葡聚糖酶，水解病原真菌细胞壁，并产生嗜铁素，抑制孢子萌发，达到生防目的。海洋来源放线菌株A5-1具有开发成为橡胶炭疽病生防菌的潜力。

关键词：橡胶炭疽病海洋放线菌拮抗生防机制

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拮抗灰葡萄孢菌乳酸菌的筛选与鉴定

工业微生物 2024年第2期54卷 158-160页

作者：刘昂周芊芊董柏余姚秋萍冯瑶朱德全贵州民族大学民族医药院贵州贵阳550025 贵州民族大学贵州省少数民族医药资源开发与利用国家民委重点实验室贵州贵阳550025

灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)是导致果蔬腐败的主要病原菌之一。乳酸菌因为安全、无毒且具有一定的抗菌作用,在抑制果蔬腐败病原菌方面具有一定的潜在价值。鉴于此,文章期望从发酵食品和常见水果表面分离并筛选出抑制灰葡萄孢菌活性的... 详细信息

灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)是导致果蔬腐败的主要病原菌之一。乳酸菌因为安全、无毒且具有一定的抗菌作用,在抑制果蔬腐败病原菌方面具有一定的潜在价值。鉴于此,文章期望从发酵食品和常见水果表面分离并筛选出抑制灰葡萄孢菌活性的乳酸菌,结果发现有10株乳酸菌对灰葡萄孢具有抑菌活性。经鉴定,3株(JZ a1、MJ a2、PS b1)为Limosilac tobacillus fe rme ntum,2株(ZLJ、MDF b)为Lactobac illus pentosus,MHT b为Lactobacillus ac idophilus,4株(SCb1、MJ a、MDF a、MHT a1)还有待进一步鉴定。文章为开发果蔬生物保鲜剂提供了实践基础与理论支撑。

关键词：果蔬腐败菌乳酸菌灰葡萄孢菌拮抗

生防细菌HX0037对栝楼炭疽病的防病能力及其机制

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生物技术通报 2024年第4期40卷 228-241页

作者：徐伟芳李贺宇张慧何仔昂高文恒谢紫洋王传文尹登科安徽中医药大学药学院中药研究与开发安徽省重点实验室合肥230012 安徽中医药大学安徽中药材种植联合研究中心合肥230012 潜山市传文瓜子有限公司安庆246300

【目的】研究潜在生防细菌HX0037对栝楼炭疽病的防病能力,并探究其生防机制。【方法】采用平板对峙法测定HX0037对栝楼炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)、枣炭疽菌(Collettrichum coccodes)、梨炭疽菌(Colletotrichum fructicola)和苹果炭疽菌(Cryptosporiopsis malicorticis)的拮抗活性;离体接种法评价其对栝楼叶片炭疽病和果实炭疽病的防治效果;结合形态学、生理生化特征和全基因组的序列分析结果,确定生防细菌的分类地位,并预测其次级代谢产物;采用酸沉淀法提取脂肽类化合物,并对其进行高效液相色谱串联质谱分析(LC-MS);最后通过观察生防细菌所产脂肽对栝楼炭疽病菌菌株生长和菌丝形态的影响,以及检测该菌株产酶和铁载体能力,探究可能的生防机制。【结果】HX0037菌株对4种瓜果炭疽病菌均有不同程度的抑菌活性,其中对栝楼炭疽病菌的抑菌效果最好,其能明显改变病菌细胞膜的通透性;与单独接种病菌的栝楼组相比,接种HX0037菌株能显著减小栝楼叶片炭疽病和栝楼果实炭疽病的病斑面积,其防病效果分别为61.50%和52.51%;HX0037菌株被进一步鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),其基因组中包含12个次级代谢产物基因簇,它还具备产生纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶和铁载体的能力;从HX0037代谢物中分离获得的脂肽导致栝楼炭疽病菌的菌丝发生扭曲、膨大等畸变现象,经LC-MS鉴定,该脂肽粗提物中含有表面活性素和丰原素。【结论】解淀粉芽孢杆菌HX0037具有良好的抑制炭疽病菌生长的能力,有望被进一步开发为生物农药用于栝楼炭疽病的绿色防控。

关键词：解淀粉芽孢杆菌生物防治栝楼炭疽病拮抗全基因组菌种鉴定脂肽

枯草芽孢杆菌LJ的分离鉴定及其对凡纳滨对虾幼体弧菌病防治效果

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广东海洋大学学报 2024年第3期44卷 34-41页

作者：刘岭萍谭玉冰薛明王优阳陈丽莹梁喜华郡梁华芳温崇庆广东海洋大学水产学院广东湛江524088

【目的】从对虾肠道分离鉴定拮抗病原弧菌的益生菌,对其生物安全性及对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)幼体弧菌病的控制效果进行评价,以促进益生菌对对虾弧菌病的防治效果。【方法】利用平板划线法从虾肠分离细菌,根据拮抗病原弧菌... 详细信息

【目的】从对虾肠道分离鉴定拮抗病原弧菌的益生菌,对其生物安全性及对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)幼体弧菌病的控制效果进行评价,以促进益生菌对对虾弧菌病的防治效果。【方法】利用平板划线法从虾肠分离细菌,根据拮抗病原弧菌活性筛选潜在益生菌株,结合表型特征、16S rRNA和rpoB基因序列对目标菌株进行鉴定,利用纸片扩散法测试其对17种抗菌药物敏感性。通过水体添加目标菌评价其对凡纳滨对虾幼体感染副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)的生物防治效果。【结果】从对虾肠道分离筛选得到一株对副溶血弧菌、哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)和坎氏弧菌(Vibrio campbellii)均有明显拮抗作用的菌株LJ;LJ不溶血且无多重耐药性,被鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。水体添加1×10^(5)和1×10^(6)cfu/mL LJ均可显著提高感染副溶血弧菌的对虾幼体存活率和变态率(P拮抗病原弧菌和提高感染副溶血弧菌凡纳滨对虾幼体的存活率。

关键词：枯草芽孢杆菌LJ 益生菌弧菌拮抗生物防控凡纳滨对虾药敏

毛乌素沙地黑沙蒿与赖草凋落物混合分解对增温的短期响应

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生态学报 2024年

作者：罗凯高圣杰郝少荣梁琨查天山贾昕北京林业大学水土保持学院宁夏盐池毛乌素沙地生态系统国家定位观测研究站北京林业大学林木资源高效生产全国重点实验室

植物凋落物分解过程受环境和生物因素共同调控，而气候变暖如何改变凋落物分解的物种混合效应仍存较大不确定性。采用开顶式增温箱和分解袋相结合的方法，研究增温对毛乌素沙地黑沙蒿、赖草以及两者的混合凋落物分解前150d质量损失和养... 详细信息

植物凋落物分解过程受环境和生物因素共同调控，而气候变暖如何改变凋落物分解的物种混合效应仍存较大不确定性。采用开顶式增温箱和分解袋相结合的方法，研究增温对毛乌素沙地黑沙蒿、赖草以及两者的混合凋落物分解前150d质量损失和养分释放的影响。结果表明：增温导致赖草凋落物质量、C、N、P、纤维素和木质素残留率分别下降7%,7.6%、12%、8.8%、20%和10%，黑沙蒿凋落物质量、P和木质素残留率分别上升2.2%、2.2%和0.8%,C、N和纤维素残留率分别下降1.1%、2%和2.5%。与单独分解相比，混合凋落物质量、C、P、纤维素和木质素残留率分别上升7.7%、8.2%、4.1%、3.9%和5.9%,N元素残留率下降4.1%，增温导致混合凋落物质量、C、N、P、纤维素和木质素残留率分别上升16.9%、18.8%、11.4%、18.5%、21.5%和21.1%。黑沙蒿和赖草凋落物混合在前期分解过程中产生了拮抗效应，即相比于单种凋落物分解具有更低的质量损失；此外，增温处理下拮抗效应更强。本研究表明，在气候变化和植被恢复背景下，预测毛乌素沙地灌丛生态系统的生物地球化学循环时，应该考虑气候变暖和物种混合的交互因子对凋落物分解的影响。

关键词：凋落物分解混合拮抗增温养分释放

基于发光细菌法的钙镁钾离子的单一及联合毒性效应评价

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中南大学学报(自然科学版) 2024年第6期 2129-2142页

作者：王丹周彦宏李珊珊延卫西安交通大学能源与动力工程学院

采矿、农业和工业排放等人类活动加剧了淡水生态系统的盐碱化，但与盐碱化相关的毒性评价仍处于研究阶段。为了进一步阐明盐碱化相关离子的生物毒性效应，以明亮发光杆菌T3菌为供试菌株，考察了与盐碱化相关的阳离子Ca2+、Mg2+、K+的单... 详细信息

采矿、农业和工业排放等人类活动加剧了淡水生态系统的盐碱化，但与盐碱化相关的毒性评价仍处于研究阶段。为了进一步阐明盐碱化相关离子的生物毒性效应，以明亮发光杆菌T3菌为供试菌株，考察了与盐碱化相关的阳离子Ca2+、Mg2+、K+的单一及二元混合物的毒性效应区间和毒性兴奋刺激效应区间，并基于发光损伤和氧化应激2个方面探究了3种阳离子及其二元混合物的毒性机理。研究结果表明：在单一毒性工况下，Ca2+、Mg2+毒性相近，抑制发光亮度一半时的浓度即半数效应浓度(EC50)分别为335.5 mmol/L,333.3 mmol/L,K+的毒性响应与Mg2+、Ca2+不同，T3菌对K+表现出很高的耐受性；3种单一阳离子及二元混合物实验组均出现了毒性兴奋效应（Hormesis），但刺激响应及相应的浓度区间不同，联合毒性具有组分和浓度比依赖性，二元混合毒性由高到低的顺序为Ca2+-Mg2+、Ca2+-K+、Mg2+-K+,Ca2+的存在会增加混合物的毒性；Ca2+-Mg2+二元混合物诱发氧化应激，产生毒性协同作用，二元混合物中K+的存在减弱了氧化应激，降低了联合毒性，部分表现出拮抗作用。

关键词：毒性兴奋刺激效应拮抗协同独立作用模型氧化损伤

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针药结合效应刍议

中国针灸 2024年第7期 838-844页

作者：陈红秀于波周影李旭李铁长春中医药大学针灸推拿学院中国科学院微电子研究所

总结和探讨针灸与药物在治疗过程中的联合作用结果，将针药结合效应概括为“针增药效、药增针效、针药协同、针药拮抗”4个方面。“针增药效”侧重针灸对药物的影响，包括针灸能够影响药物在体内的吸收和代谢过程，增加血药浓度；增强... 详细信息

总结和探讨针灸与药物在治疗过程中的联合作用结果，将针药结合效应概括为“针增药效、药增针效、针药协同、针药拮抗”4个方面。“针增药效”侧重针灸对药物的影响，包括针灸能够影响药物在体内的吸收和代谢过程，增加血药浓度；增强药物的靶向效应，引药归经；减少药物使用剂量及不良反应；避免首过效应，增加药物生物利用度。“药增针效”不仅体现药物对针灸的增效作用，还有药物本身对针灸器具的预处理以附加针具药物性能，进而提高疗效。“针药协同”和“针药拮抗”从不同侧面探讨了针灸与药物同时作用机体的可能效应，其作用靶点可能相同或不同，作用机制有待进一步深入探索。

关键词：针药结合增效减毒拮抗理论探讨

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三株酚酸降解菌的筛选与鉴定及其生物活性

微生物学通报 2024年第6期51卷 2193-2214页

作者：廖永琴王楠申云鑫唐加菜施竹凤矣小鹏冯路遥李铭刚何永宏杨佩文云南农业大学植物保护学院云南昆明650000 云南省农业科学院农业环境资源研究所云南昆明650205 云南大学资源植物研究院云南昆明650091

【背景】常见作物连续种植后会导致根系分泌酚酸类自毒物质,该类物质是引起土传病害和连作障碍频发的主要因素。【目的】探讨利用有益微生物降解作物根系分泌物苯甲酸,缓解作物土传病害发生,并储备有益菌种资源。【方法】通过以苯甲酸... 详细信息

【背景】常见作物连续种植后会导致根系分泌酚酸类自毒物质,该类物质是引起土传病害和连作障碍频发的主要因素。【目的】探讨利用有益微生物降解作物根系分泌物苯甲酸,缓解作物土传病害发生,并储备有益菌种资源。【方法】通过以苯甲酸为唯一碳源的无机盐培养基筛选无量山菌株资源,结合高效液相色谱仪测定酚酸降解菌株对苯甲酸的降解率;利用平板对峙试验,并基于缓解苯甲酸抑制番茄种子萌发试验及番茄幼苗促生长和对番茄枯萎病防效试验验证菌株的生物活性;结合形态学、生理生化和16S rRNA基因序列对菌株进行分类学鉴定。【结果】从无量山筛选得到4株放线菌和3株细菌具有酚酸降解能力,酚酸降解菌株在摇瓶培养72 h时对苯甲酸降解率分别为100%、99.83%、99.89%、99.87%、64.91%、56.92%和49.33%;其中2株放线菌YNK-FS0018、YNK-FS0019和一株细菌YNK-FB0022能较好地利用苯甲酸。番茄种子萌发试验结果表明菌株YNK-FS0018、YNK-FS0019和YNK-FB0022均可以缓解苯甲酸对种子萌发的抑制,促进种子萌发,萌发率分别为73%、73%和97%,并促进种子根生长,平均根长为13.31、13.04和14.56 cm;平板对峙试验结果表明菌株YNK-FS0018、YNK-FS0019和YNK-FB0022均对病原菌有广谱抗性;抗生素基因检测结果为菌株YNK-FS0018、YNK-FS0019具有PKSII、NRPS基因,菌株YNK-FB0022具有fenD、bioA、yndJ、ysnE、ituC、sboA和srfAB基因;盆栽试验结果显示菌株YNK-FS0018对番茄株高、地上鲜重、地上干重、根重、根长和茎粗有促生作用,各项分别增加53.40%、67.50%、57.50%、73.50%、77.28%和9.40%;菌株YNK-FS0019处理的株高、地上鲜重、地上干重、根重、根长和茎粗分别增加23%、40.90%、14.00%、57.00%、26.30%和16.80%;菌株YNK-FB0022处理的株高、地上鲜重、地上干重、根重、根长和茎粗分别增加24.50%、44.70%、26.40%、75.10%、98.00%和9.00%;3株菌对番茄枯萎病的防效分别为87.10%、74.18%和80.65%;结合形态学和分子生物学鉴定,菌株YNK-FS0018为稻瘟霉素链霉菌(Streptomyces blastmyceticus,GenBank登录号为OR523286),YNK-FS0019为白黄链霉菌(Streptomyces alboflavus,GenBank登录号为OR523289),YNK-FB0022为耐盐芽孢杆菌(Bacillus halotolerans,GenBank登录号为OR523290);此外,菌株均有解有机磷、溶锌、分泌铁载体、水解淀粉酶和水解蛋白酶的能力。【结论】三株酚酸降解菌具有解有机磷、溶锌、分泌铁载体、水解淀粉酶和水解蛋白酶的能力,对番茄幼苗株高、茎粗、根长、根重、地上部分鲜重和干重等农艺性状具有显著促进作用,对番茄枯萎病防效较好,可为土传病害的生物防治上提供微生物资源。

关键词：苯甲酸酚酸降解菌促生长拮抗番茄枯萎病