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新型抗肿瘤转移多肽-三聚β肽(β3)在大肠杆菌中的表达及其抗粘附作用

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生物工程学报 2005年第4期21卷 558-562页

作者：王松梅朱珺李岩潘銮凤查锡良刘银坤复旦大学上海医学院分子生物学实验室上海200032 上海市第六人民医院药剂科上海200032 复旦大学中山医院肝癌研究所上海200032 复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系上海200032

自行设计了抗肿瘤转移多肽-三聚β肽(β3),人工合成了β3的基因片段,构建了β3的表达质粒pET_His_β3,在大肠杆菌BL21(DE3)plysS中表达。在用IPTG诱导1·5h后可见明显的His_β3融合蛋白的表达,表达产物约占细胞总蛋白的4%,占细胞总不溶... 详细信息

自行设计了抗肿瘤转移多肽-三聚β肽(β3),人工合成了β3的基因片段,构建了β3的表达质粒pET_His_β3,在大肠杆菌BL21(DE3)plysS中表达。在用IPTG诱导1·5h后可见明显的His_β3融合蛋白的表达,表达产物约占细胞总蛋白的4%,占细胞总不溶性蛋白的10%。每升pET_His_β3/BL21(DE3)plysS细菌培养液用金属螯合琼脂糖凝胶6BFF分离后可回收纯度为92·2%的β3产物约20mg。所表达出的β3肽对人肝癌细胞株SMMC_7721细胞及人肝癌高转移细胞株HCCLM6细胞与纤连蛋白(fibronectin,FN)粘附具有特异的抑制作用,呈现剂量效应相关关系和时间效应相关关系,抑制作用强于β肽(β1)、3倍浓度的β1(3×β1)和GRGDS。研究结果表明:pET_His_β3/BL21(DE3)plysS是β3适合的表达系统;表达的β3肽具有特异的抗肿瘤细胞粘附作用。

关键词：基因工程抗粘附多肽表达肝癌

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抗粘附超疏水表面的构筑及其研究进展

化工新型材料 2022年第6期50卷 277-280,285页

作者：谢源姚继明张维河北科技大学纺织服装学院石家庄050018 河北省纺织服装技术创新中心石家庄050018

超疏水表面由于独特的润湿性,在防冰、防腐蚀、自清洁和油水分离等方面得到广泛应用。抗粘附表面作为其中的一种,在医疗卫生、食品安全、工业建筑等领域表现出极大应用潜力。为了更好地了解抗粘附超疏水表面,简述了其仿生机理并根据粘... 详细信息

超疏水表面由于独特的润湿性,在防冰、防腐蚀、自清洁和油水分离等方面得到广泛应用。抗粘附表面作为其中的一种,在医疗卫生、食品安全、工业建筑等领域表现出极大应用潜力。为了更好地了解抗粘附超疏水表面,简述了其仿生机理并根据粘附物种类的不同,介绍了其研究现状以及在抗固体、液体、微生物粘附方面的应用,最后对抗粘附超疏水表面未来的研究方向进行了展望。

关键词：超疏水表面抗粘附 Lotus状态抗血液粘附微生物污染

抗粘附核壳微凝胶封装胰岛治疗1型糖尿病的研究

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抗粘附核壳微凝胶封装胰岛治疗1型糖尿病的研究

作者：商玉莲华南理工大学

学位级别：硕士

1型糖尿病作为一种自身免疫性疾病,具有胰岛素依赖性,其患者只有长期不间断接受胰岛素注射治疗才能缓解糖尿病带来的严重并发症。胰岛移植作为细胞替代疗法的典型代表,在糖尿病治疗中具有广泛的应用前景。现阶段的临床胰岛移植是经肝门... 详细信息

1型糖尿病作为一种自身免疫性疾病,具有胰岛素依赖性,其患者只有长期不间断接受胰岛素注射治疗才能缓解糖尿病带来的严重并发症。胰岛移植作为细胞替代疗法的典型代表,在糖尿病治疗中具有广泛的应用前景。现阶段的临床胰岛移植是经肝门静脉注射胰岛细胞实现的,其面临的严重免疫排斥反应导致胰岛细胞快速失活,胰岛移植后终身免疫抑制的服用引起器官损伤,并且捐赠供体来源短缺,这些问题阻碍了临床胰岛移植的广泛应用。此外,经分离提纯后获得的胰岛缺失微血管网络及细胞外基质,被切断了与胰腺组织的联系,导致胰岛发生失巢凋亡。因此,本文提出了一种核壳结构微凝胶的制备方法,首先利用微流控技术将胰岛封装在类细胞外基质微凝胶中,为胰岛提供一个适宜的生存空间,然后通过在类细胞外基质微凝胶表面构建抗粘附壳层,增强微凝胶的免疫屏障功能,保护胰岛免受免疫系统的攻击,从而延长胰岛移植后的存活和功能。此外,进一步设计了一种用于促进皮下空间血管生长的预血管化支架,从而使皮下空间成为适宜的胰岛移植部位,为胰岛移植保留空腔并加快实现胰岛存活和功能所需的血运重建。本文的主要研究内容和结论如下:(1)结合微流控技术和表面聚合方法制备了多种核壳微凝胶。首先,以胰岛封装为出发点,在双层微流控芯片中制备了尺寸均匀、大小适合的Gel MA和HAMA两种类细胞外基质微凝胶。其次,利用微凝胶释放的引发剂在水凝胶前体溶液中的扩散和聚合,制备了多种材料构成不同的核壳微凝胶,说明了该方法在材料设计上的普适性。并且通过多次重复壳层构建实现了微凝胶壳层的叠加,满足复杂多层微环境的设计。最后,通过模拟测试核壳形成过程中的两次蓝光交联对BMSCs细胞活性的影响,说明了核壳微凝胶的构建满足封装胰岛且不损伤胰岛细胞活性的目的。(2)基于核壳微凝胶的制备方法,设计了一种能够抗粘附的核壳微凝胶并用于胰岛封装。以水凝胶表面的荧光蛋白吸附结果,以及含有不同浓度CBMA的PEGDA水凝胶在溶胀率和孔隙率的变化,筛选了HAMA作为核壳微凝胶的内核材料用于胰岛封装,含10%CBMA的PEGDA作为外壳材料赋予微凝胶抗粘附性,验证了核壳微凝胶在抗蛋白吸附和巨噬细胞粘附方面的特性;并以TNF-α和ROS作为炎症标志物,在与巨噬细胞共培养中验证了HAMA@P/C(10)能明显降低胰岛细胞引起的免疫炎症反应。此外,通过在体外对封装胰岛的活性和胰岛素分泌功能的表征,验证了核壳微凝胶能为胰岛提供物理屏障且不影响胰岛活性和功能。(3)将抗粘附核壳微凝胶封装的胰岛移植到糖尿病小鼠的附睾脂肪垫,用于评估胰岛移植后的血糖调节能力。并制备了一种预血管化支架,使皮下空间也能作为适宜的胰岛移植部位。首先,在高血管化部位附睾脂肪垫进行胰岛移植,通过对比裸胰岛、HAMA微凝胶封装胰岛、HAMA@P/C(10)核壳微凝胶封装胰岛的血糖调节效果,表明抗粘附核壳微凝胶在移植的90天内保护了胰岛长期存活和功能,维持了小鼠血糖的稳定性。其次,为了开发更具备临床操作性的皮下空间作为胰岛移植部位,利用Gel MA易于内皮细胞粘附和肝素特异性结合负载VEGF促进细胞迁移的特点,在Gel MA的冷凝和双键交联的双重功能下,制备了一种预血管化支架。并通过体外内皮细胞在水凝胶表面的生长行为和体内血管生成现象,说明了其在皮下空间诱导血管化的能力。最后,在预血管化支架内进行了胰岛移植,展示了长达90天的糖尿病治疗效果,证明了诱导得到的高度血管化皮下空间能支持胰岛的长期存活和功能。

关键词：胰岛移植抗粘附微封装预血管化皮下移植

重组防御素5对铜绿假单胞菌的抑菌及抗粘附作用

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中华传染病杂志 2004年第6期22卷 401-403页

作者：李广阔李旭田伏洲曹永宽陈涛粟永萍成都军区总医院全军普外中心胰胆病区 610083 第三军医大学创伤烧伤复合伤国家重点实验室

肠源性感染与多种疾病的发生、发展和预后密切相关,危害极大.尽管众多学者在黏膜机械屏障、免疫屏障和肠道微生态平衡等方面作了大量研究,但未能建立针对性的防治措施;目前临床上仍采用预防性使用广谱抗生素进行治疗,效果不佳.近年发现... 详细信息

肠源性感染与多种疾病的发生、发展和预后密切相关,危害极大.尽管众多学者在黏膜机械屏障、免疫屏障和肠道微生态平衡等方面作了大量研究,但未能建立针对性的防治措施;目前临床上仍采用预防性使用广谱抗生素进行治疗,效果不佳.近年发现,以防御素为代表的内源性抗菌肽,如小肠隐凹底部Paneth细胞分泌的防御素5(HumanDefensin 5,HD-5),因其广谱、高效抗微生物活性而具潜在临床应用前景,颇受关注[1,2].我们运用基因重组技术,成功地将人小肠黏膜中编码HD-5的基因(DEFA5)克隆入真核表达质粒pcDNA 3.1(+)中,并成功将重组质粒[pcDNA3.1(+)-DEFA5]转染到仓鼠卵巢上皮细胞株(CHO-K1)中,获得了具有抗菌活性的重组防御素5(Recombinant Human Defensin 5,rHD-5)[3,4].现将rHD-5对铜绿假单胞菌的抑菌及抗粘附作用报道如下。

关键词：防御素铜绿假单胞菌临床应用治疗抑菌 th细胞肠源性感染抗粘附免疫屏障效果不佳

PAMAM-抗体偶联物的制备、体外抗癌及抗粘附研究

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PAMAM-抗体偶联物的制备、体外抗癌及抗粘附研究

作者：赵蓉莉福州大学

学位级别：硕士

目的肿瘤手术后的转移造成的死亡是全球急待解决的重大社会和科技问题。其根源是体内低活性残存的循环肿瘤细胞(CTCs),“抗癌药”对其无效。基于高分子树枝状聚合物良好的生物相容性、可降解性、较好的尺寸效应及多价络合效应,本文选取... 详细信息

目的肿瘤手术后的转移造成的死亡是全球急待解决的重大社会和科技问题。其根源是体内低活性残存的循环肿瘤细胞(CTCs),“抗癌药”对其无效。基于高分子树枝状聚合物良好的生物相容性、可降解性、较好的尺寸效应及多价络合效应,本文选取粒径抗癌活性和抗粘附影响,从而为特异性捕获CTCs并抑制其活性提供理论参考。方法本文首先采用丁二酸酐对G6 PAMAM表面进行修饰,合成完全羧化的G6PAMAM衍生物,后通过调整完全羧化的G6 PAMAM与两种靶向抗体之间的摩尔比例而制备G6 PAMAM-5aEpCAM (G6-5A)、 G6 PAMAM-5aSialyl Lewis X (G6-5S)及G6 PAMAM-5aEpCAM-5aSialyl Lewis X (G6-5A-5S)单/双靶向配体偶联物。运用1NMR、FTIR、UV-Vis及DES等手段对偶联物的结构、粒径及电荷特性等进行表征并探索其在不同温度、pH、振荡速率下的稳定性;采用MTT比色法考察所合成的偶联物对人结肠癌细胞株(LoVo、 SW480)体外增殖抑制情况;应用流式细胞仪检测分析偶联物对细胞周期分布的影响;采用MTI'法和荧光显微镜拍照法考察偶联物对人结肠癌细胞株体外抗粘附能力的影响。结果通过优化条件,可成功制备出尺寸可控、结构精确的G6-5A、G6-5S、 G6-5A-5S偶联物,且这些偶联物(pH 7.4)可在37℃下稳定存在12 h以上,4℃稳定存在两星期以上,几乎不受振荡速率的影响(即使在210 rpm下);与完全羧化的G6 PAMAM相比,这三种偶联物均可抑制结肠癌细胞的生长并呈浓度依赖性,且使细胞被阻滞在G0/G1期;体外粘附实验表明这三种偶联物均具有抑制人结肠癌细胞粘附基质和人脐带内皮细胞的能力。结论所合成的偶联物不仅能抑制人结肠癌细胞的增值,阻滞其周期,还可以抑制结肠癌细胞对基质或脐静脉内皮细胞的粘附。所有这些前期研究可为后期预防癌症转移的离体和在体研究提供重要的理论依据和参考。

关键词：第六代聚酰胺-胺型树枝状高分子靶向抗体稳定性抗癌抗粘附

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用抗粘附表面转换技术来减少光刻图形缺陷

微电子学 1982年第2期 46-51页

作者： Toshiharu Matsuzawa ,江泽流

在对接触式光刻工艺进行了详尽评价之后,我们断定出光致抗蚀剂粘附到掩模版表面上是产生图形缺陷的主要原因,并研究出了一种预防性措施——抗粘附表面转换法(SURCAS),采用此种方法可使缺陷密度减少到常规接触光刻图形缺陷密度的四分之... 详细信息

在对接触式光刻工艺进行了详尽评价之后,我们断定出光致抗蚀剂粘附到掩模版表面上是产生图形缺陷的主要原因,并研究出了一种预防性措施——抗粘附表面转换法(SURCAS),采用此种方法可使缺陷密度减少到常规接触光刻图形缺陷密度的四分之一。这种技术为改进目前大规模集成电路的生产开辟出了新的途径,而且在不久的将来还可用于线宽小至1微米的超微细图形光刻中。

关键词：掩模版光致抗蚀剂光刻胶抗腐蚀抗粘附

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受生物启发的抗粘附界面材料

受生物启发的抗粘附界面材料

表面接枝不同分子量聚乙二醇的聚氨酯材料的抗粘附性能研究

中国化学会第十七届全国胶体与界面化学学术会议

作者：孟靖昕王树涛中国科学院理化技术研究所中科院仿生材料与界面科学重点实验室

自然界中,存在着许许多多有趣的抗粘附现象。通过研究生物体独特的抗粘附行为,不但有助于我们深入的理解其抗粘附机理,而且能够指导我们发展新型抗粘附界面材料。近年来,我们研究了几种典型的抗粘附现象,并受此启发设计了多种仿生抗粘... 详细信息

自然界中,存在着许许多多有趣的抗粘附现象。通过研究生物体独特的抗粘附行为,不但有助于我们深入的理解其抗粘附机理,而且能够指导我们发展新型抗粘附界面材料。近年来,我们研究了几种典型的抗粘附现象,并受此启发设计了多种仿生抗粘附界面材料,实现了对细胞、细菌、油污、以及矿物抗粘附。例如,受免疫细胞结构的启发,制备了多种细胞捕获以及培养的界面材料,并通过调控材料表面的浸润性,实现了单细胞或细胞聚集体的释放。2)受荷叶超疏水自清洁特性启发,制备了超疏水弓丝,实现了抗菌、抗镍离子渗出的特性;3)受植物中单宁酸易于粘附特性启发,制备了表面具有超疏油低粘附的涂层,实现了抗油粘附的特性;4)受肾上皮细胞表面抗结石的启发,制备了表面具有超亲水性纳米纤毛状凝胶的涂层结构,实现了对矿物的高效抗粘附特性。

关键词：生物启发抗粘附浸润性

来源： cnki会议评论

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西南民族大学学报（自然科学版） 2016年第6期42卷 646-653页

作者：许德秋关雅元刘畅蒋雨辰张吉亚罗建斌西南民族大学化学与环境保护工程学院四川成都610041

通过利用聚多巴胺与氨基基团的共价反应,将不同分子量的氨基聚乙二醇单甲醚(mPEG-NH_2)固定于聚氨酯(PU)材料表面,并系统地研究了不同分子量聚乙二醇修饰的聚氨酯材料表面的抗粘附性能.实验中采用了三种不同分子量的氨基聚乙二醇单甲醚... 详细信息

通过利用聚多巴胺与氨基基团的共价反应,将不同分子量的氨基聚乙二醇单甲醚(mPEG-NH_2)固定于聚氨酯(PU)材料表面,并系统地研究了不同分子量聚乙二醇修饰的聚氨酯材料表面的抗粘附性能.实验中采用了三种不同分子量的氨基聚乙二醇单甲醚,分别是分子量1 000、2 000和5 000.对修饰后的材料表面进行的X射线光电子能谱测试及静态接触角测试证实了不同分子量的聚乙二醇成功地接枝于聚氨酯材料表面.通过对材料表面在不同时间段抗金黄色葡萄球菌粘附效果的分析,以及抗血小板粘附测试,系统地探讨了聚乙二醇分子量的不同对所修饰材料表面抗粘附效果的影响.并针对由分子量2 000与5 000的聚乙二醇修饰的材料表面进行了抗细菌生物膜测试.

关键词：聚乙二醇抗粘附聚多巴胺聚氨酯

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SARS相关急性肺损伤与抗粘附免疫调节

生命科学 2003年第3期15卷 134-136,188页

作者：孙桂芝李晓周同张冬青邓伟吾陈楠上海第二医科大学瑞金医院上海200025 上海第二医科大学上海市免疫学研究所上海200025

SARS作为急性呼吸道传染病,其肺损伤的早期与急性呼吸窘迫综合征(ARDS)有关,后期表现为肺纤维化。患者体内免疫防御机制可出现什对SARS病毒的过度激活,造成肺部白细胞免疫炎性损伤。粘附分子及其介导的白细胞粘附可能参与了SARS的急性... 详细信息

SARS作为急性呼吸道传染病,其肺损伤的早期与急性呼吸窘迫综合征(ARDS)有关,后期表现为肺纤维化。患者体内免疫防御机制可出现什对SARS病毒的过度激活,造成肺部白细胞免疫炎性损伤。粘附分子及其介导的白细胞粘附可能参与了SARS的急性肺损伤。设想在病毒感染早期,通过抗粘附免疫调节,抑制患者过激的免疫防御机制,阻抑活化白细胞的粘附级联反应,进而减轻肺损伤;以减轻或延缓病变的进一步发展。

关键词： SARS 肺损伤抗粘附免疫调节