新型抗肿瘤转移多肽-三聚β肽(β3)在大肠杆菌中的表达及其抗粘附作用

作     者：王松梅 朱珺 李岩 潘銮凤 查锡良 刘银坤 WANG Song-mei;ZHU Jun;LI Yan;PAN Luan-Feng;ZHA Xi-Liang;LIU Yin-kun

作者机构：复旦大学上海医学院分子生物学实验室上海200032 上海市第六人民医院药剂科上海200032 复旦大学中山医院肝癌研究所上海200032 复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系上海200032 

出 版 物：《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期：2005年第21卷第4期

页      面：558-562页

核心收录：

学科分类：08[工学] 09[农学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家高技术研究发展计划(863)项目(No.2001AA215411 No.2004AA215201) 上海市重点科技项目(No.024319212) 

主　　题：基因工程 抗粘附 多肽 表达 肝癌 

摘      要：自行设计了抗肿瘤转移多肽-三聚β肽(β3),人工合成了β3的基因片段,构建了β3的表达质粒pET_His_β3,在大肠杆菌BL21(DE3)plysS中表达。在用IPTG诱导1·5h后可见明显的His_β3融合蛋白的表达,表达产物约占细胞总蛋白的4%,占细胞总不溶性蛋白的10%。每升pET_His_β3/BL21(DE3)plysS细菌培养液用金属螯合琼脂糖凝胶6BFF分离后可回收纯度为92·2%的β3产物约20mg。所表达出的β3肽对人肝癌细胞株SMMC_7721细胞及人肝癌高转移细胞株HCCLM6细胞与纤连蛋白(fibronectin,FN)粘附具有特异的抑制作用,呈现剂量效应相关关系和时间效应相关关系,抑制作用强于β肽(β1)、3倍浓度的β1(3×β1)和GRGDS。研究结果表明:pET_His_β3/BL21(DE3)plysS是β3适合的表达系统;表达的β3肽具有特异的抗肿瘤细胞粘附作用。