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电子束辐照对鲈鱼小清蛋白生化性质及抗原性的影响

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核农学报 2023年第11期37卷 2196-2205页

作者：洪天畅朱恒杏邵孟茹潘家荣中国计量大学生命科学学院浙江省特色农产品品质与危害物控制技术重点实验室浙江杭州310018

为研究辐照对鲈鱼过敏原生化性质、抗原性及二级结构的影响,本试验采用0、3、5、7、9 kGy剂量电子束辐照鲈鱼小清蛋白溶液及冻干粉,测定其浓度、浊度、疏水性、分子量和抗原性的变化,以及二级结构的含量。结果表明,随着辐照剂量增大,小... 详细信息

为研究辐照对鲈鱼过敏原生化性质、抗原性及二级结构的影响,本试验采用0、3、5、7、9 kGy剂量电子束辐照鲈鱼小清蛋白溶液及冻干粉,测定其浓度、浊度、疏水性、分子量和抗原性的变化,以及二级结构的含量。结果表明,随着辐照剂量增大,小清蛋白冻干粉及溶液的浓度降低,疏水性提高,浊度增加,过敏条带变浅,免疫印迹条带变浅,小清蛋白与抗体的结合能力减弱,抗原性降低;α-螺旋及无规则卷曲比例升高,β-折叠及β-转角变化不明显,二级结构被破坏。综上,电子束辐照使小清蛋白生化性质及结构发生了变化,有效降低了小清蛋白的抗原性,同时发现液态小清蛋白较固态对辐照更敏感。本研究结果为鲈鱼及其制品辐照消敏研究提供了理论依据。

关键词：鲈鱼小清蛋白辐照生化性质抗原性

非洲猪瘟病毒全长与截短p72蛋白的抗原性比较

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畜牧兽医学报 2022年第4期53卷 1182-1191页

作者：张文燕王亚文冯亚文滕召剑李潭清董炜刘涛宋勤叶任玉红河北农业大学动物医学院&河北省兽医生物技术创新中心保定071000 河北省兽药监察所石家庄050051 顺平县动物疫病预防与控制中心保定072250 瑞普生物药业有限公司保定071000

比较非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)全长p72与截短p72蛋白(p72s)的抗原性,为ASFV特异性抗体检测技术研究提供试验依据。应用大肠杆菌表达系统表达p72和p72s蛋白,应用Western blot和液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)技术鉴定... 详细信息

比较非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)全长p72与截短p72蛋白(p72s)的抗原性,为ASFV特异性抗体检测技术研究提供试验依据。应用大肠杆菌表达系统表达p72和p72s蛋白,应用Western blot和液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)技术鉴定表达的蛋白,分析蛋白的抗原表位;用纯化的重组全长和截短p72蛋白分别免疫小鼠,比较其免疫原性;通过ELISA和Western blot,评价重组p72和p72s蛋白与ASFV阳性血清的免疫反应性。结果:重组p72和p72s蛋白均以包涵体形式表达,相对分子质量分别约为76和42 ku,与预期大小相符;表达蛋白的酶解肽段对p72和p72s蛋白推测氨基酸序列的覆盖度分别为89.3%和88.39%,两者分别包含27和17个抗原表位;用p72与p72s蛋白免疫小鼠3次后,血清特异性抗体效价分别为1∶200~1∶25600和1∶12800~1∶409600;基于重组p72与p72s蛋白的ELISA从108份猪血清中分别检出78份(72.2%)和85份(78.7%)阳性血清,两者的检测结果具有很好的一致性(kappa=0.826,P=0.016);经Western blot检测的10份ASFV抗体阳性血清中有7份与p72蛋白反应,全部与p72s蛋白反应。截短p72蛋白比全长p72蛋白的抗原性好,更适合用于ASFV抗体检测。

关键词：非洲猪瘟病毒 p72蛋白截短p72蛋白原核表达抗原性

挤压膨化温度对大豆分离蛋白抗原性及结构的影响

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中国油脂 2023年

作者：常永锋陈屹轩布冠好高雪丽赵青青罗琼许昌学院食品与药学院河南工业大学粮油食品学院

为了探究挤压膨化温度对大豆分离蛋白（SPI）抗原性及结构的影响，本文利用间接竞争酶联免疫吸附法评估挤压膨化后大豆蛋白的抗原性，SDS-PAGE分析抗原蛋白的分子量变化，采用氨基酸分析测定蛋白的营养特性，通过测定不同浸提液中蛋白... 详细信息

为了探究挤压膨化温度对大豆分离蛋白（SPI）抗原性及结构的影响，本文利用间接竞争酶联免疫吸附法评估挤压膨化后大豆蛋白的抗原性，SDS-PAGE分析抗原蛋白的分子量变化，采用氨基酸分析测定蛋白的营养特性，通过测定不同浸提液中蛋白的溶解度探究分子间作用力，利用紫外和荧光光谱研究蛋白三级结构以及疏水性的变化。结果表明，随着挤压膨化温度的升高，SPI抗原性呈现先降低再增高的趋势，当温度为145.0℃时，SPI的抗原性下降最为显著。挤压过程中抗原蛋白均发生明显降解，营养特性保持良好，挤压膨化后蛋白溶解度呈现显著性下降，在破坏氢键、二硫键、疏水相互作用后蛋白的溶解度大幅度上升，挤压后蛋白三级结构发生变化，表面疏水性显著下降。本研究为大豆蛋白的脱敏技术提供了理论依据，为开发低敏性大豆蛋白产品提供参考。

关键词：大豆分离蛋白挤压膨化抗原性蛋白结构

甘肃省两例人感染欧亚类禽H1N1猪流感病毒的HA、NA基因特性和抗原性分析

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中华实验和临床病毒学杂志 2022年第2期36卷 166-171页

作者：李红育王平李保娣李梓李希妍杨磊刘佳谭敏菊粱姿萱徐丛杉马明辉王华王淼于德山王大燕甘肃省疾病预防控制中心甘肃省传染病病原学重点实验室兰州730000 庆阳市疾病预防控制中心庆阳745000 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家流感中心卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室北京102206

目的分析甘肃省发现的2例人感染欧亚类禽H1N1猪流感病毒(EAS-H1N1)的抗原性和基因特性,为疾病预防控制提供科学参考。方法对甘肃省2021年2月以来发现的2例人感染EAS-H1N1进行抗原性和基因组对比分析,并使用Mega7.0等软件分析其基因组特... 详细信息

目的分析甘肃省发现的2例人感染欧亚类禽H1N1猪流感病毒(EAS-H1N1)的抗原性和基因特性,为疾病预防控制提供科学参考。方法对甘肃省2021年2月以来发现的2例人感染EAS-H1N1进行抗原性和基因组对比分析,并使用Mega7.0等软件分析其基因组特征。结果2例人感染EAS-H1N1病例,均有相关环境暴露史,获得2株毒株:A/Gansu-Xifeng/1143/2021和A/Gansu-Xifeng/1194/2021。2株毒株的HA、NA基因均来自欧亚类禽H1N1猪流感病毒,与河北、天津的人感染EAS-H1N1病毒和山东的貂体内分离的EAS-H1N1病毒亲缘关系较近;2株毒株的HA受体结合位点均发生E190D、D225E突变,NA蛋白均未发生H274Y和N294S突变。结论甘肃省人感染EAS-H1N1病毒基因组发生了部分重要分子突变,可能导致其毒力增强,并具备潜在的人际间传播能力。加强EAS-H1N1基因特征研究分析有助于从分子水平上监测病毒变异突变并对疫情进行科学防控。

关键词：欧亚类禽H1N1猪流感抗原性神经氨酸酶基因特性

2019—2020年9株H9N2亚型禽流感病毒抗原性分析及候选疫苗株筛选

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畜牧与兽医 2023年第11期55卷 72-78页

作者：蒋文明张琳彭程刘朔尹馨李金平侯广宇刘华雷中国动物卫生与流行病学中心山东青岛266032 农业农村部动物生物安全风险预警及防控重点实验室(南方) 山东青岛266032 乌兰察布职业学院内蒙古乌兰察布012000

为了解近年来H9N2亚型禽流感病毒的分子特征和抗原变异情况,本研究对选自2019—2020年的9株H9N2亚型禽流感病毒的血凝素(HA)基因序列进行分析,进一步利用交叉血凝抑制试验和中和试验对抗原性进行分析,并以此筛选出候选疫苗株,开展免疫... 详细信息

为了解近年来H9N2亚型禽流感病毒的分子特征和抗原变异情况,本研究对选自2019—2020年的9株H9N2亚型禽流感病毒的血凝素(HA)基因序列进行分析,进一步利用交叉血凝抑制试验和中和试验对抗原性进行分析,并以此筛选出候选疫苗株,开展免疫原性和攻毒保护试验研究。9株病毒HA基因核苷酸同源性为91.2%~98.9%,表明这些毒株之间HA基因分化明显。9株病毒HA蛋白裂解位点序列均为RSSR,符合低致病性禽流感病毒分子特征。所有9株病毒HA均含有7个潜在的糖基化位点。9株病毒HA关键受体结合位点的234位氨基酸由谷氨酰胺变为亮氨酸,提示这些毒株具有结合α2,6-Sialidase受体的能力。交叉血凝抑制试验显示各毒株之间出现最大64倍的抗原性差异,交叉中和试验显示各毒株之间出现最大1024倍的抗原性差异。根据中和试验结果,利用AntigenMap制作抗原图谱,可以看出9株病毒可以分为2个主要抗原群。筛选的Y2432毒株制备灭活疫苗免疫鸡群后21 d,针对同源毒株平均血凝抑制(HI)抗体效价达到13.6 log_2,使用同源毒株和异源毒株进行攻毒,保护率均为100%。Y2432免疫SPF鸡,14 d即可产生高水平抗体,最高可达到14.4 log_2,且抗体可维持140 d以上。筛选的候选疫苗株免疫原性和免疫保护效果较好,为预防H9N2亚型禽流感的流行提供了重要技术储备。

关键词：禽流感 H9N2 抗原性疫苗

高强度超声波浴对小麦醇溶蛋白结构及抗原性的影响

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河南工业大学学报（自然科学版） 2023年第2期44卷 64-71,112页

作者：曹佳兴朱海兰王君荣蒙太和张国治河南工业大学粮油食品学院河南郑州450001 郑州科技学院食品科学与工程学院河南郑州450064 中粮面业(武汉)有限公司湖北武汉430000 河南省面制主食工程技术研究中心河南郑州450001

小麦是世界上生产和消费最广泛的粮食作物,同时也是公认的八大过敏性食品之一,而麦醇溶蛋白(Glia)是诱发小麦过敏的主要过敏原之一,为探究小麦蛋白脱敏的新方法,采用高强度水浴超声波(HIWU),设定不同的超声功率(0、240、360、480、600 W... 详细信息

小麦是世界上生产和消费最广泛的粮食作物,同时也是公认的八大过敏性食品之一,而麦醇溶蛋白(Glia)是诱发小麦过敏的主要过敏原之一,为探究小麦蛋白脱敏的新方法,采用高强度水浴超声波(HIWU),设定不同的超声功率(0、240、360、480、600 W)对Glia进行处理。测定了Glia中游离氨基和游离巯基的含量,利用傅里叶变换红外光谱(FTIR)、荧光光谱和拉曼光谱表征Glia的结构,通过免疫印记吸附试验(Western blotting)和间接非竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)测定了Glia与抗体的反应能力。结果表明:高强度超声波浴对Glia的结构和抗原性影响显著;480 W超声处理对Glia的抗原抑制效果最好;超声波浴使Glia的二级和三级结构发生显著变化,其有序结构(α-螺旋、β-折叠)含量减少,无序结构(β-转角、无规则卷曲)含量增加,酪氨酸和色氨酸残基暴露,维持结构稳定的g-g-g型二硫键含量减少。高强度超声波浴改变了Glia的次级结构,其抗原表位被掩藏或破坏,有效地降低了Glia的抗原性。

关键词：高强度超声波浴小麦醇溶蛋白蛋白质结构抗原性

湿热处理对花生球蛋白Ara h 3抗原性的影响

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河南工业大学学报（自然科学版） 2023年第6期44卷 44-50页

作者：吴枭席俊孙富宇杨欢欢水天娇黄芃博高一达河南工业大学粮油食品学院河南郑州450001

为探究湿热处理对花生球蛋白Ara h 3抗原性的影响,采用硫酸铵分级沉淀法从花生脱脂粉中分离纯化出Ara h 3,进行不同温度、时间和质量浓度的湿热处理,通过正交试验确定最优湿热处理条件,采用间接ELISA法检测湿热处理后Ara h 3抗原性变化... 详细信息

为探究湿热处理对花生球蛋白Ara h 3抗原性的影响,采用硫酸铵分级沉淀法从花生脱脂粉中分离纯化出Ara h 3,进行不同温度、时间和质量浓度的湿热处理,通过正交试验确定最优湿热处理条件,采用间接ELISA法检测湿热处理后Ara h 3抗原性变化,测定外源荧光、游离巯基含量以及圆二色光谱,从蛋白结构的变化解释湿热处理对Ara h 3抗原性的影响。研究表明:湿热处理能够降低Ara h 3抗原性,且在质量浓度10 mg/mL、90℃处理30 min时,抗原性降至最低;湿热处理后的Ara h 3荧光强度、表面疏水性增强,三级结构发生变化;游离巯基含量增加、空间结构发生改变;α-螺旋和β-折叠含量降低,无规则卷曲含量增加,二级结构发生变化。湿热处理后Ara h 3空间结构发生改变,部分抗原表位遭到破坏或被包埋,抗原性降低。

关键词：湿热处理 Ara h 3 抗原性蛋白结构酶联免疫吸附法

非洲猪瘟病毒CP312R蛋白T细胞表位的筛选及抗原性分析

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中国兽医科学 2022年第4期52卷 410-416页

作者：周晓丽毛箬青朱紫祥孙德惠朱昱茜王凌云齐萌郑海学塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔843300 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业农村部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046

利用免疫表位数据库(IEDB)预测和筛选非洲猪瘟病毒(ASFV)CP312R蛋白的T细胞表位;通过流式细胞术检测表位肽促进ASFV抗原特异性脾淋巴细胞增殖情况,促进免疫细胞分泌IFN-γ水平及其对T淋巴细胞杀伤作用的影响;通过RT-qPCR技术分析表位肽... 详细信息

利用免疫表位数据库(IEDB)预测和筛选非洲猪瘟病毒(ASFV)CP312R蛋白的T细胞表位;通过流式细胞术检测表位肽促进ASFV抗原特异性脾淋巴细胞增殖情况,促进免疫细胞分泌IFN-γ水平及其对T淋巴细胞杀伤作用的影响;通过RT-qPCR技术分析表位肽对ASFV在骨髓巨噬细胞中复制的影响。结果显示,筛选出2条表位肽PP8和PP9,均可促进ASFV抗原特异性脾淋巴细胞增殖(P0.05),而表位肽PP9能够显著促进CD8^(+)T细胞对靶细胞的杀伤效率(P抗原或表位提供了基础数据。

关键词：非洲猪瘟病毒 T细胞表位筛选蛋白抗原性

大豆蛋白抗原性及其对幼龄动物影响的研究进展

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黑龙江畜牧兽医 2022年第19期 27-30,140页

作者：王博瑶郑晨旭韦雨杭丛玉艳沈阳农业大学动物科学与医学学院沈阳110866

豆粕是常用的幼龄动物日粮原料,但其中含有大量抗原蛋白,易引起幼龄动物肠道发生过敏反应,导致肠道损伤,降低动物生长性能。文章综述了日粮中大豆抗原蛋白的主要组成、致敏机制和几种常见降低抗原性的方法,探讨了日粮中大豆蛋白的抗原... 详细信息

豆粕是常用的幼龄动物日粮原料,但其中含有大量抗原蛋白,易引起幼龄动物肠道发生过敏反应,导致肠道损伤,降低动物生长性能。文章综述了日粮中大豆抗原蛋白的主要组成、致敏机制和几种常见降低抗原性的方法,探讨了日粮中大豆蛋白的抗原性对幼龄动物生长发育的影响,以期为大豆蛋白在幼龄动物生产中的应用提供参考。

关键词：大豆抗原蛋白抗原性致敏豆粕幼龄动物