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肿瘤干细胞标志EpCAM和cd133在人原发性肝癌中的表达及其对预后的临床意义

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肿瘤 2012年第8期32卷 628-633页

作者：潘群雄苏子剑王聪仁庄建良福建医科大学附属泉州第一医院肿瘤外科福建泉州362000

目的:检测肿瘤干细胞标志上皮细胞黏附分子(epithelial cell adhesion molecule,EpCAM)和cd133在原发性肝癌组织中表达的情况,探讨其与临床病理参数的关系及对肝癌预后的临床意义。方法:应用免疫组织化学方法检测70例人肝癌组织中EpCAM... 详细信息

目的:检测肿瘤干细胞标志上皮细胞黏附分子(epithelial cell adhesion molecule,EpCAM)和cd133在原发性肝癌组织中表达的情况,探讨其与临床病理参数的关系及对肝癌预后的临床意义。方法:应用免疫组织化学方法检测70例人肝癌组织中EpCAM和cd133的表达情况。采用SPSS软件包进行相关分析和生存分析,研究EpCAM、cd133与肝癌临床病理特征及预后的关系。结果:cd133和EpCAM蛋白在肝癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织(Pcd133未见表达。cd133在有血管浸润的肝癌组织中表达水平明显高于未浸润血管组(P400ng/mL、低分化和肿瘤浸润血管的癌组织中EpCAM表达水平明显高于相应对照组(Pcd133蛋白表达呈正相关关系(Pcd133表达强阳性的肝癌患者生存期明显短于cd133表达强度较低组。如果将EpCAM表达强阳性和中等阳性的肝癌患者合为一组,可见EpCAM中-强阳性表达的肝癌患者生存期短于EpCAM低表达者。通过术前AFP水平分层分析可见,术前AFP水平>400ng/mL组中EpCAM中-强阳性表达的患者生存期与低度阳性表达患者相比明显缩短。肿瘤数目、术前AFP水平、有无肿瘤包膜和cd133表达是影响肝癌预后的独立因素。结论:cd133和EpCAM可能参与肝癌发展的恶性进程,其高表达提示肝癌患者预后不良,因此推测EpCAM+AFP+可能是肝癌恶性程度更高的标志。

关键词：肝肿瘤上皮细胞黏附分子抗原,cd133 基因表达预后

化学诱导小鼠肝癌模型中cd133的动态变化

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肿瘤 2012年第8期32卷 585-591页

作者：唐超莉匡志鹏杨帆吴继宁广西医科大学研究生学院南宁530021 广西医科大学附属肿瘤医院实验研究部南宁530021

目的:检测肝癌干细胞标志cd133在化学诱导C57BL/6J小鼠肝癌过程中各时期的动态变化。方法:通过化学法[二乙基亚硝胺(diethylnirtosamine,DEN)/四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)/乙醇]诱发50只C57BL/6J雄性小鼠肝癌,对照组为45只正常... 详细信息

目的:检测肝癌干细胞标志cd133在化学诱导C57BL/6J小鼠肝癌过程中各时期的动态变化。方法:通过化学法[二乙基亚硝胺(diethylnirtosamine,DEN)/四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)/乙醇]诱发50只C57BL/6J雄性小鼠肝癌,对照组为45只正常C57BL/6J雄性小鼠。观察小鼠成瘤情况和生长状态,对每2周定期处死小鼠获得的组织标本分别进行病理学切片观察,并采用实时荧光定量PCR、免疫组织化学法、蛋白质印迹法和FCM法分别检测cd133mRNA和蛋白的表达情况。结果:化学诱导20周后,成功诱发出小鼠肝癌。实时荧光定量PCR和FCM检测结果显示,第8周后诱癌组小鼠肝组织中cd133的表达高于正常对照组,差异有统计学意义(Pcd133的表达量呈上升趋势,第16周时诱癌组cd133的表达明显高于前期诱癌组(Pcd133蛋白从第4周起出现弱表达,随着诱癌时间的递增,cd133蛋白表达量逐渐增多。免疫组织化学检测结果显示,诱癌组第8周cd133出现弱阳性,第16周出现中等阳性,第20周出现强阳性;而正常对照组无表达。结论:肝癌干细胞标志cd133参与了肝癌的发生、发展全过程,随着诱癌进展其表达量逐渐增加。

关键词：肝肿瘤,实验性抗原,cd133 小鼠,近交C57BL 化学诱癌

肺癌组织中cd133和cd105的表达及其临床意义

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肿瘤 2010年第4期30卷 334-337页

作者：程继荣王淑琴祖木热提邹静新疆医科大学第五附属医院肿瘤中心乌鲁木齐830011

目的:研究肿瘤干细胞标志物cd133和肿瘤血管内皮细胞标志物cd105在肺癌组织中的表达及其临床意义。方法:用免疫组织化学链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(streptavidin-biotin-peroxidase complex,SABC)法检测65例肺癌组织和30例癌... 详细信息

目的:研究肿瘤干细胞标志物cd133和肿瘤血管内皮细胞标志物cd105在肺癌组织中的表达及其临床意义。方法:用免疫组织化学链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(streptavidin-biotin-peroxidase complex,SABC)法检测65例肺癌组织和30例癌旁组织中cd133与cd105的表达情况,分析二者与肿瘤大小、组织学类型、组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移和预后的关系。结果:肺癌组织cd133和cd105的阳性表达率高于癌旁组织,分别为69.2%vs26.7%和67.7%vs10.0%,差异有统计学意义(均Pcd133和cd105阳性表达率高于无淋巴结转移组,分别为82.5%vs48.0%和80.0%vs48.0%,差异有统计学意义(均Pcd133和cd105的表达与淋巴结转移正相关,Pearson列联系数r分别为0.35和0.32(均Pcd133和cd105的表达与肿瘤大小、组织学类型、组织分化程度以及TNM分期无相关性(均P>0.05)。cd133与cd105的表达之间呈正相关,Pearson列联系数r=0.37(Pcd133和cd105表达阳性组的术后中位生存期低于阴性组,分别是37个月vs66个月和35个月vs70个月,差异有统计学意义(均Pcd133和cd105的表达与肺癌患者的淋巴结转移和预后密切相关,其高表达提示预后不良。

关键词：肺肿瘤淋巴转移预后抗原,cd133 抗原,cd105

人结直肠癌细胞株来源的HCT116肿瘤细胞球的转移相关特性

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肿瘤 2011年第11期31卷 982-986页

作者：贾健锋程勇武乃金任林飞徐维刘弈武杨小丁重庆医科大学附属第一医院胃肠外科重庆400016

目的:无血清悬浮培养生成HCT116肿瘤细胞球,检测球中cd133表面标志分子的细胞定位,以及cd133+细胞所占的比例,并探索肿瘤细胞球发生上皮-间质转化与其转移能力之间的可能联系。方法:HCT116细胞在添加了细胞生长因子的无血清培养液(serum... 详细信息

目的:无血清悬浮培养生成HCT116肿瘤细胞球,检测球中cd133表面标志分子的细胞定位,以及cd133+细胞所占的比例,并探索肿瘤细胞球发生上皮-间质转化与其转移能力之间的可能联系。方法:HCT116细胞在添加了细胞生长因子的无血清培养液(serum-freemedium,SFM)中悬浮培养生成细胞球,应用激光共聚焦和流式细胞仪检测cd133表面标志分子的细胞定位及细胞球中cd133+细胞的含量。Transwell小室实验、免疫荧光及反转录PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR)法分别检测细胞球的体外转移能力以及上皮-间质转化关键分子的表达情况。结果:HCT116细胞球中cd133表面标志分子定位于各个球层面的细胞膜,并且cd133+细胞比例显著增多。细胞球高表达间质化分子N-cadherin及Vimentin,而上皮化分子E-cadherin表达水平下降,并具有更强的转移能力。结论:HCT116细胞球中富含cd133+细胞,cd133表面标志分子定位于细胞膜,细胞球可能通过上皮-间质转化而获得更强的转移能力。

关键词：结直肠肿瘤肿瘤干细胞球形体,细胞抗原,cd133 上皮-间质转化

cd13^+cd133^+和cd13_-cd133_-肝癌细胞的生物学差异及临床意义

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解放军医学杂志 2013年第8期38卷 661-664页

作者：金世龙黄中荣陈华余天雾曹洪龙运全周健李鹤苟毅李远廖娟重庆医科大学附属永川医院肝胆外科重庆402160

目的比较HuH7细胞系cd13+cd133+和cd13-cd133-肝细胞癌(HCC)细胞的生物学差异,并探讨其临床意义。方法通过对cd13+cd133+HCC细胞增殖情况、细胞周期、培养10d分化情况、裸鼠体内成瘤能力,以及对5-FU和吡柔比星等化疗药物的敏感性等生物... 详细信息

目的比较HuH7细胞系cd13+cd133+和cd13-cd133-肝细胞癌(HCC)细胞的生物学差异,并探讨其临床意义。方法通过对cd13+cd133+HCC细胞增殖情况、细胞周期、培养10d分化情况、裸鼠体内成瘤能力,以及对5-FU和吡柔比星等化疗药物的敏感性等生物学特征的研究,分析cd13+cd133+HCC细胞亚群的临床意义。结果 cd13+cd133+HCC细胞增殖速度明显快于cd13-cd133-HCC细胞,78.45%的cd13+cd133+HCC细胞处于G0/G1期,2.19%处于G2/M期,19.36%处于S期;62.18%的cd13-cd133-HCC细胞处于G0/G1期,11.88%处于G2/M期,25.95%处于S期。在裸鼠体内,1×103个cd13+cd133+HCC细胞即可成瘤,而1×105个cd13-cd133-HCC才可成瘤。cd13+cd133+HCC细胞对5-FU和吡柔比星具有抵抗特性,而其他3种亚群较易被杀灭。FACS分选的cd13+cd133+HCC和cd13-cd133-HCC细胞经过10d培养后,cd13+cd133+HCC亚群的cd13、cd133标志表达与HuH7细胞系相近,而cd13-cd133-HCC细胞不具有此能力。结论 cd13+cd133+HCC细胞具有肿瘤干细胞的特征,可能与临床肝癌复发和转移有关,是临床治疗过程中尤其需要杀灭的细胞。

关键词：肝肿瘤肿瘤干细胞抗原,cd13 抗原,cd133

cd44^＋-ESA^＋在结肠癌干细胞分选中的应用

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中华胃肠外科杂志 2011年第11期14卷 896-898页

作者：薛芳沁杨国华黄若磊福建医科大学省立临床学院肿瘤外科福州350001

目的分选结肠癌细胞株SW480细胞中的cd133^＋-cd44^＋-ESA^＋亚群细胞，并观察其致瘤性。方法用流式细胞仪分选SW480细胞中cd133^＋．cd44^＋-ESA^＋,cd133^--cd44^＋-ESA^＋及cd133^--cd44^--ESA亚群细胞。将这3组细胞分别接种于NOD／SCID小鼠，每组5只。观察肿瘤生长情况。结果SW480细胞中cd133^-．cd44^--ESA^-、cd133^--cd44^＋-ESA^＋和cd133^＋．cd44^＋-ESA^＋亚群细胞分别占（86．38~10．23）％、（1．26~0．28）％和（0．38±0．07）％。接种3d后，cd133^＋．cd44^＋．ESA^＋细胞组小鼠可形成瘤结节：cd133^--cd44^＋-ESA^＋细胞组小鼠9d左右可见瘤结节．而cd133^--cd44^--ESA^-细胞组小鼠则要到15d方可见瘤结节。接种后18d，3组小鼠肿瘤大小分别为（13．82±5．04）mm^3、（9．25±4．57）mm^3和（4．76±3．92）mm^3，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论cd44^＋-ESA^＋结肠癌干细胞表面标记之-：cd133^＋．cd44^＋-ESA^＋细胞则是SW480细胞的癌干样细胞．

关键词：结肠肿瘤肿瘤干细胞抗原,cd133 抗原,cd44 上皮表面抗原

人脐血来源内皮祖细胞的纯化鉴定及定向分化的研究

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中华烧伤杂志 2006年第5期22卷 355-358页

作者：谢松涛陈璧陶克第四军医大学西京医院全军烧伤中心西安710032

目的检测cd133+血管内皮祖细胞(EPC)的细胞表面标志物,鉴定其生物学特性。方法采用免疫磁珠法分离人脐血EPC,用EGM-2MV培养基[含表皮生长因子(EGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(FCF)2等具有诱导分化作用的细胞因子]进... 详细信息

目的检测cd133+血管内皮祖细胞(EPC)的细胞表面标志物,鉴定其生物学特性。方法采用免疫磁珠法分离人脐血EPC,用EGM-2MV培养基[含表皮生长因子(EGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(FCF)2等具有诱导分化作用的细胞因子]进行体外培养。应用流式细胞术、免疫组织化学等方法检测cd133+细胞的比例、原代EPC的生长曲线及生长特性。透射电镜查找Weibel-Palade小体。同时没计EPC裸鼠成瘤实验,观察瘤体生长及血管增生情况,以鉴定EPC的生物学特性。结果cd133+细胞在免疫磁珠分离前后的比例各为0．91％及85．52％。EPC原代培养时细胞形态正常、密度均匀,前3 d为相对抑制期,此后快速增殖,10 d后达80％-90％融合。EPC生长曲线显示,接种后5 d内细胞数量无明显变化,从第7天开始明显增加,第17天达高峰。光学显微镜下可见,原代EPC贴壁后呈梭形,接种后7 d数量明显增加,呈克隆状生长。透射电镜观察到,细胞膜伸出许多伪足丝,基底膜呈多层;细胞质内可见一种短棒状小体,含平行管状的内部结构,即Weibel-Palade小体,确定其为EPC。裸鼠成瘤实验可见EPC组肿瘤瘤体及血管数量大于或多于对照组;抗人血管性假血友病因子(vWF)免疫荧光染色显示,大量EPC参与肿瘤血管生成。结论本实验分离培养的cd133+细胞具有分化为成熟血管内皮细胞的能力,即为EPC。裸鼠成瘤实验初步证明EPC参与血管重建,具有促进血管新生、加速缺血组织血管化的作用。

关键词：胎血抗原,cd133 抗原,cd34 内皮祖细胞免疫磁珠

人结肠癌HCT116细胞系肿瘤干细胞特性研究

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解放军医学杂志 2009年第11期34卷 1292-1296页

作者：陈克力江恒陈建芳裴莉梁后杰重庆第三军医大学西南医院肿瘤科 400038

目的探讨结肠癌HCT116细胞系的肿瘤干细胞相关特性,为结肠癌干细胞功能研究奠定基础。方法取HCT116细胞在无血清条件下培养,观察细胞在无血清培养基中的增殖分化情况,采用限量稀释法计数细胞的克隆球形成率,并观察细胞及克隆球的生长、... 详细信息

目的探讨结肠癌HCT116细胞系的肿瘤干细胞相关特性,为结肠癌干细胞功能研究奠定基础。方法取HCT116细胞在无血清条件下培养,观察细胞在无血清培养基中的增殖分化情况,采用限量稀释法计数细胞的克隆球形成率,并观察细胞及克隆球的生长、增殖、分化情况。取HCT116细胞(5×103、5×104个)接种4周龄雌性NOD-SCID小鼠,观察3～8周,分析其致瘤性和病理学特征。采用流式细胞仪和免疫荧光染色法分别检测HCT116细胞cd133、cd44、ABCG2的表达,RT-PCR和Western blotting检测cd133的mRNA和蛋白表达。采用免疫组化法检测分化过程中HCT116克隆球上CK20的表达。结果41.47%±1.28%的HCT116细胞能在无血清培养基中形成克隆球,第二代克隆球形成率仍保持在较高水平(32.53%±2.32%)。HCT116细胞在无血清条件下培养72h可形成克隆球,且至少可传15代以上。5×103个HCT116细胞接种至小鼠皮下5～6周后即可形成移植瘤。大部分HCT116细胞为cd133+cd44+,并表达ABCG2蛋白。HCT116细胞的克隆球分化至第4天即可检测到CK20表达。结论大部分HCT116细胞具有肿瘤干细胞特性,可作为肿瘤干细胞研究的理想对象。

关键词：肿瘤干细胞测定抗原,cd44 抗原,cd133

靶向肝癌干细胞的紫杉醇纳米粒的制备及其对肝癌Huh-7和HepG2细胞作用的研究

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肿瘤研究与临床 2021年第2期33卷 99-103页

作者：金成王双全白玲西电集团医院普通外科西安710077 西安市人民医院泌尿外科 710100

目的探讨靶向肝癌干细胞的紫杉醇纳米粒的制备及其对肝癌HepG2细胞(cd133阳性亚群占8%)和Huh-7细胞(cd133阳性亚群占65%)的效果。方法应用单乳溶媒挥发法制备聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物装载的紫杉醇纳米粒,采用1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)... 详细信息

目的探讨靶向肝癌干细胞的紫杉醇纳米粒的制备及其对肝癌HepG2细胞(cd133阳性亚群占8%)和Huh-7细胞(cd133阳性亚群占65%)的效果。方法应用单乳溶媒挥发法制备聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物装载的紫杉醇纳米粒,采用1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺/N-羟基琥珀酰亚胺(EDC/NHS)交联法制备由抗cd133抗体修饰的紫杉醇纳米粒,即靶向纳米粒。检测纳米粒的表征及理化特性(包封率和载药率、粒度分布、形态、体外释放)。将肝癌Huh-7和HepG2细胞与紫杉醇纳米粒或靶向纳米粒共培养,应用流式细胞术分析肝癌细胞对纳米粒的摄取和累积,并检测cd133阳性细胞比例,应用平板克隆形成实验分析细胞存活情况。结果扫描电镜检测显示,靶向纳米粒的粒径为(429.26±41.53)nm,Zeta电位为-11.2 mV,具有球形形态和较高的包封率[(87.53±5.90)%]。流式细胞术检测显示,37 ℃时,Huh-7细胞靶向纳米粒组的荧光强度较紫杉醇纳米粒组荧光强度高(13 397±720比6 898±604),差异有统计学意义(P0.05)。Huh-7细胞靶向纳米粒组cd133阳性细胞比例较紫杉醇纳米粒组低[(15.7±2.6)%比(54.9±7.4)%],差异有统计学意义(t=7.31,P=0.008);HepG2细胞两组间差异无统计学意义(P>0.05)。平板克隆形成实验结果显示,靶向纳米粒作用后,各时间点Huh-7细胞存活率低于紫杉醇纳米粒作用后,差异有统计学意义(F=5.56,P=0.009);紫杉醇纳米粒和靶向纳米粒作用后,HepG2细胞存活率差异无统计学意义(F=1.19,P=0.142)。结论制备的靶向肝癌干细胞的纳米粒对肝癌Huh-7细胞有良好抑制作用。

关键词：肝肿瘤肿瘤干细胞紫杉醇纳米粒抗原,cd133 分子靶向治疗