人结肠癌HCT116细胞系肿瘤干细胞特性研究

作     者：陈克力 江恒 陈建芳 裴莉 梁后杰 CHEN Ke-li;JIANG Heng;CHEN Jian-fang;PEI Li;LIANG Hou-jie

作者机构：重庆第三军医大学西南医院肿瘤科400038 

出 版 物：《解放军医学杂志》 (Medical Journal of Chinese People's Liberation Army)

年 卷 期：2009年第34卷第11期

页      面：1292-1296页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主　　题：肿瘤干细胞测定 抗原,CD44 抗原,CD133 

摘      要：目的探讨结肠癌HCT116细胞系的肿瘤干细胞相关特性,为结肠癌干细胞功能研究奠定基础。方法取HCT116细胞在无血清条件下培养,观察细胞在无血清培养基中的增殖分化情况,采用限量稀释法计数细胞的克隆球形成率,并观察细胞及克隆球的生长、增殖、分化情况。取HCT116细胞(5×103、5×104个)接种4周龄雌性NOD-SCID小鼠,观察3～8周,分析其致瘤性和病理学特征。采用流式细胞仪和免疫荧光染色法分别检测HCT116细胞CD133、CD44、ABCG2的表达,RT-PCR和Western blotting检测CD133的mRNA和蛋白表达。采用免疫组化法检测分化过程中HCT116克隆球上CK20的表达。结果41.47%±1.28%的HCT116细胞能在无血清培养基中形成克隆球,第二代克隆球形成率仍保持在较高水平(32.53%±2.32%)。HCT116细胞在无血清条件下培养72h可形成克隆球,且至少可传15代以上。5×103个HCT116细胞接种至小鼠皮下5～6周后即可形成移植瘤。大部分HCT116细胞为CD133+CD44+,并表达ABCG2蛋白。HCT116细胞的克隆球分化至第4天即可检测到CK20表达。结论大部分HCT116细胞具有肿瘤干细胞特性,可作为肿瘤干细胞研究的理想对象。