检索结果-南通市图书馆

作者：李晓燕郑州大学

学位级别：硕士

目的肿瘤是危及人类生命的顽敌，为了攻克这一世界难题，各国每年投入大量的人力、物力，进行着国际间多学科的广泛协作，从事抗癌药物的研究开发。目前，消化系统肿瘤的治疗以手术、放疗、化疗为主，但大部分的患者发现时已是中、晚... 详细信息

目的肿瘤是危及人类生命的顽敌，为了攻克这一世界难题，各国每年投入大量的人力、物力，进行着国际间多学科的广泛协作，从事抗癌药物的研究开发。目前，消化系统肿瘤的治疗以手术、放疗、化疗为主，但大部分的患者发现时已是中、晚期，失去手术最佳时机，用放疗、化疗虽然能取得一定疗效，但仍有一定局限性。祖国医学是一个伟大的宝库，中药治疗肿瘤有一定的疗效，且毒副作用小，临床反应轻，所以肿瘤的药物治疗非常需要中、西医的结合。近年来对中药治疗肿瘤的研究也越来越多，已成为当今的热门话题。抑瘤宁是治疗消化系统肿瘤的一个经验方，为纯中药复方制剂，由Rab、Duc、Sol和Aca组成，用于治疗食管癌、贲门-胃底癌、肝癌、胰腺癌等。该方经临床观察疗效确切，且无明显毒副作用，但迄今尚未进行药效学的实验研究，方剂组成及用药剂量尚待通过抗肿瘤实验进行优选。本实验通过选择人食管癌Eca-109细胞、人胃癌SGC-7901细胞、人胰腺癌Bxpc-3细胞、人肝癌Bel-7402细胞，进行体外抗肿瘤实验，从Rab、Duc、Sol、Aca、Rab+Duc、Rab+Sol、Rab+Aca、Rab+Duc+Sol、Rab+Duc+Aca、Rab+Sol+Aca、Rab+Duc+Sol+Aca等组中，筛选出以Rab为主药的最佳药物组合及各药最佳剂量比例。方法 ***测定各实验组对Eca-109细胞、SGC-7901细胞、Bxpc-3细胞、Bel-7402细胞的生长抑制率。取对数生长期的细胞，接种于96孔板上孵育24小时后，设空白对照

关键词：抑瘤宁 Eca-109细胞 SGC-7901细胞 Bxpc-3细胞 Bel-7402细胞细胞凋亡

抑瘤宁体外对非消化系统癌细胞增殖抑制作用的研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

抑瘤宁体外对非消化系统癌细胞增殖抑制作用的研究

作者：白桦郑州大学

学位级别：硕士

背景和目的恶性肿瘤是严重危害人类生命健康的疾病，且发生率呈逐年上升的趋势。肿瘤的治疗一直是全世界关注的课题，目前手术、放疗和化疗仍为恶性肿瘤治疗的主要手段，但由于其毒副作用、适应证范围的限制等因素存在其治疗的局限性... 详细信息

背景和目的恶性肿瘤是严重危害人类生命健康的疾病，且发生率呈逐年上升的趋势。肿瘤的治疗一直是全世界关注的课题，目前手术、放疗和化疗仍为恶性肿瘤治疗的主要手段，但由于其毒副作用、适应证范围的限制等因素存在其治疗的局限性。中医药在肿瘤治疗领域中有其独特的功效，无论在抑制或杀伤肿瘤细胞方面，还是术后调理，减轻放、化疗不良反应，改善症状和体征，提高生存质量等方面，均发挥了重要的作用。中药以其无明显毒副作用、价格低廉、应用历史悠久等优点在治疗肿瘤方面显示了日益重要的作用地位，越来越受到广大学者、患者的重视和接受。中药治疗肿瘤有一定的疗效，可提高机体免疫功能，对化、放疗起减毒、增效的作用，有预防肿瘤复发转移，阻断癌前病变之功效且毒副作用轻。所以近年来对中药治疗肿瘤的研究也越来越多。抑瘤宁是治疗消化系统肿瘤的一个临床验方，为纯中药复方制剂，由Rab、Aca、Sol、Duc四味中药构成。具有抗癌抑增，清热解毒，消肿散结，补益健脾的功能，临床治疗晚期食管癌、贲门-胃底癌、肝癌及胰腺癌有较好疗效，无明显毒副作用。其方剂中Rab、Duc、Sol皆为清热解毒类药物，Aca有增加机体的免疫和抗癌作用。前期实验研究表明Rab与Duc两药联用和Rab、Aca、Sol、Duc四药联用体外能明显地抑制消化系统肿瘤细胞的生长;四药联用时，能使人食管癌Eca-109细胞阻滞于S期，并诱导细胞凋亡。目前对非消化系统肿瘤细胞作用尚无研究。本课题在前期实验研究基础之上以人乳腺癌MDA-MB-231、人肺癌NCI-H520、人肺癌A549、人宫颈癌Hela四种细胞为观察对象，通过进行细胞形态学观察，生长抑制率测定及流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率进一步探讨抑瘤宁对非消化系统癌细胞的增殖抑制作用，最佳方剂组成及用药剂量，为临床应用抑瘤宁治疗非消化系统实体瘤提供实验依据。方法 1药物的制备按照相关文献提取方法提取各成分的粗提物。实验中用培养液将粗提物稀释成不同浓度。药物浓度=草药重量／培养液体积。 2细胞培养将MDA-MB-231、NCI-H520、A549、Hela细胞分别接种于含体积分数10％灭活胎牛血清的L15、RPMI-1640、F12、高糖DMEM培养液中。在37℃、体积分数5％CO、相对湿度为体积分数95％的细胞培养箱中常规培养。1～2d换液一次，1～2d或2～3d传代。 3细胞生长抑制率的测定取MDA-MB-231、NCI-H520、A549、Hela对数生长期的细胞，分别以1×10／ml、5×10／ml、5×10／ml、5×10／ml细胞浓度接种于96孔板上，每孔200μl，培养24h后，以抑瘤宁不同药物搭配处理细胞为实验组，每组6个平行孔，设调零孔，空白对照孔和本底对照孔，置37℃、5％CO培养箱中培养48h后，采用噻唑蓝(MTT)还原法检测实验组细胞生长抑制率。重复实验3次(n=18)。 4细胞形态学观察倒置显微镜下观察比较实验组与对照组在细胞形态学区别。 5流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率 6统计学分析采用统计软件SPSS10.0，采用单因素方差分析及x检验对数据进行分析，以α=0.05为检验水准。结果 1抑瘤宁对四种非消化系统癌细胞的生长抑制作用 1．1对MDA-MB-231细胞的生长抑制作用以“Rab(2mg／ml)+Duc(0.4mg／ml)+Sol(0.4mg／ml)+Aca(0.4mg／ml)”四药联用时细胞生长抑制率最高，用药剂量最少，抑制率可达99.74％。 1．2对NCI-H520细胞的生长抑制作用以“Rab(2mg／ml)+Duc(1mg／ml)+Sol(1mg／ml)+Aca(1mg／ml)”四药联用时细胞生长抑制率最高，用药剂量最少，抑制率可达96.41％。 1．3对A549细胞的生长抑制作用以“Rab(3mg／ml)+Duc(0.8mg／ml)+Sol(0.8mg／ml)+Aca(0.8mg／ml)”四药联用时细胞生长抑制率最高，用药剂量最少，抑制率可达80.62％。 1．4对Hela细胞的生长抑制作用以“Rab(2mg／ml)+Duc(1mg／ml)+Sol(1mg／ml)+Aca(1mg／ml)”四药联用时细胞生长抑制率最高，用药剂量最少，抑制率可达97.98％。 2对照组：MDA-MB-231细胞呈梭形，贴壁生长，细胞透亮，生长状态良好。四药联用组：细胞相互分离，贴壁大量减少，细胞皱缩，体积缩小，可见大量细胞崩解碎片，死亡。 3抑瘤宁作用于体外培养的MDA-MB-231细胞后，四药联用组S期细胞百分率明显升高;G／G期细胞百分比明显下降;细胞被阻滞于S期;细胞凋亡率升高。与空白对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05)。结论 1 Rab、Duc、Sol、Aca四药联用能明显地抑制MDA-MB-231、NCI-H520、

关键词：抑瘤宁细胞生长抑制率细胞周期凋亡

抑瘤宁对Ec-9706荷瘤裸鼠的抗癌作用及其对cox-2及ki-67影响的实验研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

抑瘤宁对Ec-9706荷瘤裸鼠的抗癌作用及其对cox-2及ki-67影响的实...

作者：孙明月郑州大学

学位级别：硕士

目的：恶性肿瘤是一类细胞异常活跃的增殖性疾病,人类生命及健康已受到它的严重威胁。目前,主要治疗措施有手术、放射治疗、化学治疗及生物治疗等。由于现实多种原因,虽然某些早期患者可能治愈,但很多患者发现时已属中晚期,往往失去了... 详细信息

目的：恶性肿瘤是一类细胞异常活跃的增殖性疾病,人类生命及健康已受到它的严重威胁。目前,主要治疗措施有手术、放射治疗、化学治疗及生物治疗等。由于现实多种原因,虽然某些早期患者可能治愈,但很多患者发现时已属中晚期,往往失去了手术机会。化学治疗是中晚期恶性肿瘤患者的主要治疗手段,虽然疗效肯定,但存在多种问题,如毒副作用较大、价格昂贵,且存在多药耐药等,常导致患者机体状况恶化及生活质量降低,严重时患者因不能耐受而放弃治疗。目前肿瘤的发生发展被公认为是一个渐进的漫长过程,它是一种难治性的慢性病,能获得彻底根治的机会虽不乐观,但希望能最大限度的提高机体的免疫功能,控制和稳定瘤体,减小瘤体对机体的危害,使患者长期保持一定工作能力和较好的生活质量,使长期带瘤生存成为我们渴望达到的现实奋斗目标。因此,人们需要研究一种既能阻止或减缓肿瘤生长增殖,又安全的,可以长期伴随治疗的药物或方法。中药及中国医学是一个伟大的宝库,用以治疗肿瘤具有诸多优势,如其药源广泛、价格低廉、毒副作用小等。近年来,运用中药治疗恶性肿瘤,越来越被广大学者和患者接受,成为恶性肿瘤综合治疗中的重要有效手段之一。抑瘤宁是我室长期临床实践的经验方,为纯中药复方制剂,由冬凌草、刺五加、龙葵和蛇莓组成,临床用其水煎剂治疗消化系统肿瘤,疗效肯定,无明显毒副作用。根据本课题组前期对四味中药提取物体外抗肿瘤实验结果示：四药联用时能明显抑制消化系统肿瘤细胞生长;使Eca-109细胞阻滞于S期,并诱导细胞凋亡;小白鼠急性毒性实验表明,其最大给药剂量相当于临床拟用量的126倍;药效学实验显示对动物移植性肿瘤H-22、S180的抑瘤率大于30%,并可延长白血病L1210荷瘤小鼠的生存天数。本课题观察抑瘤宁对Ec-9706荷瘤裸鼠的抑瘤作用及可能的作用机理,为临床应用提供实验依据。方法：对Ec-9706荷瘤裸鼠的抑瘤作用实验及免疫组化实验建立Ec-9706裸鼠肿瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分成5组,每组7只：空白对照组(经口灌胃等容量无菌生理盐水);阳性对照组(经腹腔注射平阳霉素4mg/kg 3次/w);抑瘤宁低、中、高剂量组(经口灌胃提取物分别为6.64g生药/kg,13.28g生药/kg,19.92g生药/kg,1次／d)。所有实验组均连续给药4w,从第7d起观察各组裸鼠的瘤重变化及生命体征。第29d处死动物,取出瘤体称重,计算抑瘤率,同时做组织蜡块病理切片,用免疫组化法检测各组中cox-2和ki-67的表达情况;并取出肝、心、胰、脾、肾主要脏器,采用HE染色,于光镜下观察脏器细胞病理,了解药物对脏器的有无毒性。结果：阳性对照组及抑瘤宁低、中、高剂量组的抑瘤率分别为43.40%、31.53%、35.09%及35.59%,与空白对照组比较均有统计学意义(P抑瘤宁三个剂量组间差异无明显量效关系;实验结束时,阳性对照组及抑瘤宁各剂量组动物体重均高于空白对照组。病理形态学结果表明,抑瘤宁各剂量组对裸鼠各脏器未发现毒副作用。抑瘤宁组及阳性对照组裸鼠肿瘤组织中cox-2及ki-67的表达均低于空白对照组;与之相比均有显著性差异：抑瘤宁低剂量组(P抑瘤宁中、高剂量组(P抑瘤宁能明显改善Ec-9706荷瘤裸鼠的体重及一般情况。2.抑瘤宁对Ec-9706荷瘤裸鼠有抑瘤作用,能促进肿瘤细胞坏死,凋亡。3.抑瘤宁抗肿瘤机制可能是通过改变肿瘤细胞内cox-2及ki-67的表达,使肿瘤细胞停止分裂,从而抑制肿瘤生长。

关键词：抑瘤宁裸鼠 EC-9706 抑瘤率 cox-2 ki-67

抑瘤宁对消化系统肿瘤细胞体外增殖抑制作用的研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

抑瘤宁对消化系统肿瘤细胞体外增殖抑制作用的研究

作者：张松郑州大学

学位级别：硕士

目的：恶性肿瘤是严重威胁人类健康及生命的常见病，也是世界医学的一大难题。目前，主要采用手术、放疗、化疗及生物治疗等综合措施。对于中晚期恶性肿瘤患者，作为其主要治疗手段的化疗，虽然疗效肯定，但是由于其毒副作用大、价格... 详细信息

目的：恶性肿瘤是严重威胁人类健康及生命的常见病，也是世界医学的一大难题。目前，主要采用手术、放疗、化疗及生物治疗等综合措施。对于中晚期恶性肿瘤患者，作为其主要治疗手段的化疗，虽然疗效肯定，但是由于其毒副作用大、价格昂贵，且存在多药耐药等问题，常导致病人机体状况的恶化及生命质量的降低，严重时致患者因不能耐受而放弃治疗。而中药尤其是中药复方治疗肿瘤从整体考虑，具有药源广泛、价格低廉、毒副作用小等优点。中药化学通过对单味中药或复方中药进行提取、分离、纯化、结构鉴定，寻找药物活性成分，是获得新的抗癌药物的重要途径，也正在成为抗肿瘤药物研究的热点。抑瘤宁为纯中药复方制剂，由Rab、Aca、Sol、Duc组成，临床用于治疗消化系统肿瘤，疗效肯定，无明显毒副作用。根据本课题组前期对四味中药粗提物实验结果，Rab与Due两药联用和Rab、Aca、Sol、Duc四药联用体外能明显地抑制消化系统肿瘤细胞的生长;四药联用时，能使Eca-109细胞阻滞于S期，并诱导细胞凋亡。迄今尚未对其有效抗肿瘤成分进行药效学实验研究，方剂组成及用药剂量尚待通过实验进行优选。本实验以人食管癌Eca-109、人胃癌BGC-823、人肝癌Bel-7402、人结肠癌Ls-174t细胞为实验对象进行体外抗肿瘤实验，通过文献查阅，从Rab中选取成分A—Oridonin，Aca中选取成分B—ASS(Acanthopanax Senticosus)，Sol中选取成分C—Solanine，Duc中选取成分D—Ducheside，以A为主要成分，与B、C、D进行两联、三联、四联等组合，根据细胞毒性最大、药物剂量最小的原则从中筛选出最佳的药物组合。方法： ***法测定各实验组对Eca-109、BGC-823、Bel-7402、Ls-174t细胞的生长抑制率。取对数生长期的细胞，接种于96孔板上培养24h后，设空白对照组和实验组，每个浓度设6个平行孔重复三次，分别作用于Eca-109、BGC-823、Bel-7402、LS-174t细胞48h，测定细胞生长抑制率。 2．用倒置显微镜观察药物作用于Eca-109细胞48h后的形态学变化。 3．用流式细胞仪检测Eca-109细胞周期分布和凋亡率。 4．统计学分析采用统计软件SPSS10.0，采用单因素方差分析及χ检验对数据进行分析，以α=0.05为检验水准。结果： 1．对Eca-109、BGC-823、Bel-7402、Ls-174t细胞的生长抑制作用。 1．1对Eca-109细胞的生长抑制作用。以两药联用“A(10μg／mL)+B(1mg／mL)”，三药联用“A(15μg／mL)+B(1mg／mL)+C(0.4mg／mL)”、“A(10μg／mL)+B(1mg／mL)+D(3.2mg／mL)”，四药联用“A(10μg／mL)+B(0.5mg／mL)+c(0.4mg／mL)+D(1.6mg／mL)”时细胞生长抑制率最高，可达100％。 1．2对BGC-823细胞的生长抑制作用。以两药联用“A(20μg／mL)+B(1mg／mL)”，三药联用“A(20μg／mL)+B(1mg／mL)+C(0.8mg／mL)”、“A(30μg／mL)+B(1mg／mL)+D(3.2mg／mL)”，四药联用“A(15μg／mL)+B(0.75mg／mL)+C(0.4mg／mL)+D(3.2mg／mL)”时细胞生长抑制率最高，可达100％。 1．3对Bel-7402细胞的生长抑制作用。两药联用以“A(15μg／mL)+B(2mg／mL)”抑制率最高，为90.80％;三药联用以“A(30μg／mL)+B(1mg／mL)+C(1.6mg／mL)”抑制率最高，为76.31％;四药联用以“A(20μg／mL)+B(1mg／mL)+C(0.4mg／mL)+D(3.2mg／mL)”时细胞生长抑制率最高，可达94.23％。 1．4对Ls-174t细胞的生长抑制作用。两药联用以“A(30μg／mL)+B(1mg／mL)”抑制率最高，为31.46％;三药联用以“A(20μg／mL)+B(1mg／mL)+C(0.8mg／mL)”抑制率最高，为28.76％;四药联用以“A(20μg／mL)+B(1mg／mL)+C(0.8mg／mL)+D(1.6mg／mL)”时细胞生长抑制率最高，可达36.54％。 2．用流式细胞仪检测Eca-109细胞周期分布和凋亡率。各实验组作用于细胞48h后，S期细胞百分率明显升高，G／G期细胞百分率明显下降。呈现凋亡所特有的亚G峰，凋亡率升高，与空白对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05)。结论： 1．A与B两药联用或A、B、C与D四药联用都能明显的抑制Eca-109、BGC-823、Bel-7402、Ls-174t细胞的生长。 2．A、B两药

关键词：中药复方抑瘤宁生长抑制率细胞周期凋亡

抑瘤宁对不同类别化疗药物增效作用的实验研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

抑瘤宁对不同类别化疗药物增效作用的实验研究

作者：陈雪姣郑州大学

学位级别：硕士

背景资料：早在公元前256年间,我国周代史书籍就有记载关于“疡医”的描述,它同于现代人们所言之癌症,其发病率为逐年增高趋势,同为世界范围内严重危及人类健康的恶性疾病之一。若干年来,随着一代代人对其认识的不断积累和深入,我们了... 详细信息

背景资料：早在公元前256年间,我国周代史书籍就有记载关于“疡医”的描述,它同于现代人们所言之癌症,其发病率为逐年增高趋势,同为世界范围内严重危及人类健康的恶性疾病之一。若干年来,随着一代代人对其认识的不断积累和深入,我们了解到恶性肿瘤的发生、发展是某些正常细胞出现异常活跃无限制增殖的结果,它与环境污染、基因缺陷等因素有着密切联系;近年来,随着国民生活的不断提高、环境治理及抗肿瘤治疗的不断发展,对其虽有所控制,却仍不容乐观,诸如抗肿瘤用药的毒副作用较大、价格昂贵、多药物耐药等问题的存在,致使患者机体素质下降及背负繁重经济负担等,从而导致因不能耐受毒性反应或因经济穷困而放弃治疗。故,在保证客观疗效的前提下,最大限度的减低化疗药物毒副反应和提高机体自身免疫功能,以实现患者长期“带瘤生存”和良好生活状态,成为了广大医务工作这不断拓新的奋斗目标。因此为了争取统筹兼顾、安全有效的治疗方法,国内外越来越多的业内人士热衷于研究中医药学用于恶性肿瘤的防治。因其毒副反应较小、药源广泛、价格低廉等优势所在,成为恶性肿瘤的综合治疗中较为重要的有效手段之一。本实验中的抑瘤宁制剂为我科长期临床实践的经验药方,由冬凌草、刺五加、龙葵和蛇莓组成,为纯中药复方制剂,主要用于消化系统恶性肿瘤,尤为在喷门癌、肝癌、胃癌、食管癌、胰腺癌等疾患中,经长期临床实践证实疗效肯定,且长期服用尚未发现明显毒副作用。本课题组前期对于抑瘤宁的体外抗肿瘤实验研究已取得了一定成果,它可明显抑制人胃癌SGC-7901细胞、人食管癌Eca-109细胞、人肝癌Bel-7402细胞、人胰腺癌BBxpc-3细胞、人宫颈癌Hela细胞、人乳腺癌MDA-MB-231细胞、人肺癌NCI-H520细胞、人肺癌A549细胞的生长。本实验将在此基础上,于体内实验水平探讨该组方制剂对不同类别化疗药物间的量效关系及疗效对比,为更好的指导临床应用提供实验依据。目的：研究抑瘤宁复方制剂对不同类别化疗药物间的药效比较。方法：本实验分为5个部分,每部分列选1类西药类别化疗药作为阳性代表药物进行增效作用的研究,其各部分均采用S180动物瘤株,加生理盐水制作细胞密度为10×107/ml的细胞悬液,接种于4周龄雄性昆明种普通级小鼠,体重均20克左右,无特定病原体环境下饲养（*** free, SPF）在小鼠右侧腋窝皮下接种上述悬液0.2m1/只,建立移植瘤模型,每部分的实验动物均随机分为8组：空白对照组、抑瘤宁低、中、高剂量组、化疗药物组及化疗药物分别联合抑瘤宁高、中、低剂量组。具体用药剂量详见各阶段实验阐述。实验期间观察小鼠生命体征、一般状况、体重、瘤重变化等,所有实验组均于接种移植瘤后次日连续给药10天,末次给药后24小时以颈椎脱臼法处死小鼠,剥取瘤组织,予以称重,并计算抑瘤率。结果： 1各组小鼠生长状况良好,实验期间无一死亡,于接种4天后可见该部位渐出现大小不等粟粒样结节,约至第7天所被接种小鼠均出现直径约0.5×0.5cm样结节并逐日增大,成瘤率为100%,造模成功。 2各阳性对照组与不同剂量抑瘤宁组均可抑制S180移植瘤在小鼠体内的生长,移植瘤的大小和重量均低于空白对照组。阳性代表药顺铂（DDP）实验：抑瘤宁低、中、高剂量组抑瘤率为：34.36%、35.23%、39.05%：DDP组及DDP+抑低、中、高剂量组抑瘤率分别为：60.48%、60.48%、67.62%、70.95%;烷化剂：环磷酰胺（CTX）实验阶段：抑瘤宁低、中、高剂量组抑瘤率为：34.16%、35.19%、38.85%;CTX组及CTX+抑低、中、高剂量组抑瘤率分别为：57,14%、64.29%、74.29%、79.05%;抗代谢类：卡培他滨片（希罗达）实验阶段：抑瘤宁低、中、高剂量组抑瘤率为：34.09%、35.27%、38.85%;希罗达组及希罗达+抑低、中、高剂量组抑瘤率分别为：42.93%、44.95%、48.99%、50.00%;抗肿瘤抗生素类：平阳霉素（PYM）实验阶段：PYM组、抑瘤宁低、中、高剂量组瘤重抑制率分别为：44.95%、32.19%、35.31%/38.64%;PYM+抑低、PYM+抑中、PYM+抑高剂量组抑瘤率分别为：37.88%、47.98%、51.01%;植物碱类：依托泊苷（VP-16）实验阶段：VP-16组、抑瘤宁低、中、高剂量组瘤重抑制率分别为：48.57%、32.09%、35.74%、38.71%,VP-16+抑低、VP-16+抑中、VP-16+抑高的抑瘤率依次为：47.14%、50.00%、51.43%。（各实验阶段具体数据及统计分析详见文章正文结果部分）结论：各实验阶段阳性对照组与不同剂量抑瘤宁组

关键词：抑瘤宁 S180 昆明小鼠环磷酰胺顺铂依托泊苷平阳霉素卡培他滨抑瘤率增效作用

抑瘤宁有效成分对肿瘤细胞增殖抑制作用的研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

抑瘤宁有效成分对肿瘤细胞增殖抑制作用的研究

作者：朱利楠郑州大学

学位级别：硕士

背景和目的肿瘤是危害人类生命的疾病之一，我国肿瘤引起的死亡率在所有疾病中居第1位。目前主要采用手术、放疗、化疗、生物治疗等综合措施。肿瘤化疗药物为恶性肿瘤的治疗做出了不可替代的重要贡献。但随着研究的不断深入，人们逐渐... 详细信息

背景和目的肿瘤是危害人类生命的疾病之一，我国肿瘤引起的死亡率在所有疾病中居第1位。目前主要采用手术、放疗、化疗、生物治疗等综合措施。肿瘤化疗药物为恶性肿瘤的治疗做出了不可替代的重要贡献。但随着研究的不断深入，人们逐渐发现肿瘤化疗药物面临诸多如毒副作用、抗药性、病症不能彻底根除等问题。而传统中医药治疗注重整体，攻补兼施，副作用小，且疗效稳定持久。临床观察发现有些中药成分不仅有直接抗肿瘤作用，而且有对化、放疗减毒增效、预防肿瘤复发转移的作用。中药发挥作用的物质基础是其有效成分或单体，随着现代科学技术的广泛应用，更多的中药成分被开发成新药，应用于临床，并已成为新药研发的必然趋势。抑瘤宁为中药经验方，由Rab、Aca、Sol、Duc四味中药组成，临床治疗消化系统肿瘤，疗效肯定，无明显毒副作用。本实验前期已对四味中药粗提物体外单独和联合作用于多种消化系统肿瘤细胞进行了初步研究，结果表明抑瘤宁粗提物有较强的体外抗肿瘤作用。提示对抑瘤宁有效成分或单体抗肿瘤活性的研究和作用机制的探讨有着极大的科研价值及应用前景。目前对中药成分的研究多以单一性研究为主，虽然在体外及动物实验中显示出一定的抗肿瘤活性，但在临床应用中往往需较大剂量，疗效欠佳。多种有效单体联合应用有无协同增效作用尚无报道。经文献查阅，从Rab中选取成分Oridonin，Aca中选取ASS(Acanthopanax Senticosus)，Sol中选取Solanine，Oridonin、ASS、Solanine均为纯度较高的粉制剂，而对Duc有效成分的提纯目前仍属空白。本实验从Duc中提取出Ducheside，经鉴定为Duc活性成分之一。分别以A、B、C、D代表Oridonin、ASS、Solanine、Ducheside四种药物，采用四种药物分别单用和以A为主要成分，与B、C、D进行二联、三联、四联组合，作用于人乳腺癌MDA-MB-231细胞、人肺癌A549细胞、人肺癌NCI-H520细胞、人宫颈癌Hela细胞，进行体外抗肿瘤研究，探讨中药成分或单体的作用机理。并根据细胞毒性最大，药物剂量最小的原则从多次实验中筛选出最佳药物组合及最佳配伍剂量，为进一步研究抑瘤宁成分的药理学毒性及开发新药提供实验基础。方法 1．实验分组。本实验分为11组，分别为A、B、C、D、A+B、A+C、A+D、A+B+C、A+B+D、A+C+D、A+B+C+D，同时设空白对照组(未加药组)。 2．采用噻唑蓝(MTT)还原法测定各实验组对MDA-MB-231、A549、NCI-H520、Hela细胞的生长抑制率。取对数生长期细胞，接种于96孔板，培养24h后，将不同浓度的各组药物分别作用于MDA-MB-231、A549、NCI-H520、Hela细胞继续培养48h后，测定各组细胞生长抑制率。每个浓度设6个平行孔，重复三次。 3．倒置显微镜观察各组药物作用于MDA-MB-231细胞48h后的形态学变化。 4．流式细胞仪检测各组药物作用后MDA-MB-231细胞周期分布和凋亡率。 5．统计学分析。采用统计软件SPSS11.0分析，用独立样本的t检验，χ检验对统计数据进行分析，如有差异，多组间参数两两比较采用q检验。以α=0.05为检验水准。结果 1．不同浓度不同药物分组的四种药物作用于体外培养的MDA-MB-231、A549、NCI-H520、Hela细胞48h后，各实验组生长抑制率结果如下： 1．1 MDA-MB-231细胞：A在单药组抑制作用最强(IC=4.78μg／ml)，C次之(IC=1.15mg／ml)，B最弱(IC=2.15mg／ml)。四药联合在联合用药组各成分剂量最小(A 2μg／m+B 0.6 mg／ml+C 0.4 mg／ml+D 0.4 mg／ml)，抑制作用最强。 1．2 A549细胞：A在单药组抑制作用最强(IC=16.26μg／ml)，C次之(IC=0.51mg／ml)，B最弱(IC=1.92mg／ml)。四药联合在联合用药组各成分剂量最小(A 4μg／ml+B 0.2mg／ml+C 0.1mg／ml+D 0.4mg／ml)，抑制作用最强。 1．3 NCI-H520细胞：A在单药组抑制作用最强(IC=31.56μg／ml)，D次之(IC=0.71mg／ml)，B最弱(IC=2.43mg／ml)。四药联合在联合用药组各成分剂量最小(A 10μg／ml+B 0.6mg／ml+C 0.1mg／ml+D 0.2mg／ml)，抑制作用最强。 1．4 Hela细胞：A在单药组抑制作用最强(IC=23.44μg／ml)，C次之(IC=1.73mg／ml)，D最弱(IC=2.26mg／ml)。四药联合在联合用药组各成分剂量最小(A 10μg／ml+B 0.6mg／ml+C 0.4mg／ml+D

关键词：抑瘤宁中药成分增殖抑制作用细胞周期凋亡

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

抑瘤宁对放疗小鼠的增效和减毒作用

抑瘤宁对放疗小鼠的增效和减毒作用

作者：张晶晶郑州大学

学位级别：硕士

背景资料：随着社会经济的发展,恶性肿瘤的发病率呈逐年上升趋势,严重威胁着人类健康。同时人们对肿瘤研究的不断深入,认识到肿瘤是由一些正常细胞无限增殖造成的,而肿瘤的治疗是一个综合治疗的过程,其中放射治疗是主要的治疗措施之一,... 详细信息

背景资料：随着社会经济的发展,恶性肿瘤的发病率呈逐年上升趋势,严重威胁着人类健康。同时人们对肿瘤研究的不断深入,认识到肿瘤是由一些正常细胞无限增殖造成的,而肿瘤的治疗是一个综合治疗的过程,其中放射治疗是主要的治疗措施之一,在实际的临床应用中约有70%的恶性肿瘤患者需要在不同的治疗时机接受放疗。但由于恶性肿瘤内乏氧细胞的存在,既降低了了放射治疗的临床疗效,也在一定程度上导致了肿瘤的复发。为了提高放射治疗的临床疗效,20世纪60年代初在世界范围内开始了对放射治疗增敏药物的探索,其中最具代表性的是各种硝基咪唑类化合物或其衍生物[1,2],它们对乏氧细胞有特定的细胞毒性作用,而对有氧细胞却并未显示出毒性作用,其中有不少药物已进入Ⅲ期临床试验阶段。但是此类药物的临床试验结果并不都令人满意,仅在部分恶性肿瘤患者中取得了较好的临床疗效,而且存在着一定的神经毒性。经大量实验研究表明,中药可作为放射治疗的辅助用药,既可以增强放射治疗的效果,有助于癌症的治疗;又可以对机体具有整体的调节作用,减轻放射治疗所致的毒副反应,故具有重要的研究价值。本实验中所应用的抑瘤宁是纯中药复方制剂为我科长期临床实践的经验方,由冬凌草、刺五加、龙葵和蛇莓组成,主要应用于消化系统的恶性肿瘤,其效果明确,且长期应用暂未发现明显的毒副作用,临床拟用量的126倍未发现急性毒性反应。之前本课题组对抑瘤宁的体内外抗肿瘤作用及对化疗增效的实验研究已取得了一定成绩,证实它可明显抑制人肝癌Bel-7402细胞、人胰腺癌BBxpc-3细胞、人宫颈癌Hela细胞、人肺癌NCI-H520细胞、人肺癌A549细胞的生长,且与不同化学结构的化疗药物联合应该有不同程度的增效作用。本项研究将在此基础上,用体内实验的方法研究抑瘤宁对小鼠放射治疗的增效和减毒作用,为其更好的应用临床提供实验依据。目的：研究抑瘤宁对放疗小鼠的增效和减毒作用。方法：抑瘤宁对放疗小鼠的增效作用研究：实验分A、B两组进行,实验A组小鼠于接种瘤珠后次日开始用药,第5日照射。实验B组小鼠接种瘤珠的24小时内开始照射及用药。每组80只,再随机分为8小组：1、阴性对照组(空白组)2、模型对照组(单纯照射组)3、抑瘤宁低剂量组4、抑瘤宁中剂量组5、抑瘤宁高剂量组6、抑瘤宁低剂量+放疗组7、抑瘤宁中剂量+放疗组8、抑瘤宁高剂量+放疗组。实验过程中将S180肉瘤株用生理盐水配成1×107/ml的细胞悬液,接种于8周龄、体重20克左右的雄性清洁级小鼠的右侧腋窝皮下,0.2ml/只,制备移植瘤模型,在此基础上给其灌注抑瘤宁,抑瘤宁低、中、高剂量组的浓度分别为为7.5g生药/kg、15.0g生药/kg、22.5g生药/kg,给药时间均为10天,1次/日。实验过程中6MV-X直线加速器局部照射一次,照射剂量为5Gy,照射时间为2.5min,期间观察小鼠的一般状况,于给药后24h内颈椎脱臼法处死小鼠,剥取瘤体,用滤纸吸干,电子天平称其重量,后计算抑瘤率。抑瘤宁对放疗小鼠减毒作用的研究：150只小鼠随机分为6组,25只/组,不接种瘤珠,分组情况如下：1、阴性对照组(空白组)2、模型对照组(单纯照射组)3、阳性对照组(利血生组)4、抑瘤宁低剂量+放疗组5、抑瘤宁中剂量+放疗组6、抑瘤宁高剂量+放疗组。用药浓度同增效实验。分组24h内开始给药(阴性对照组、模型对照组除外),给药时间均为31天,1次/日,后于用药的第5天给予6MV-X直线加速器一次性全身照射,照射剂量为3Gy,照射时间为1.5min,分别在照射前第1天、照射后第8天、14天、21天、28天从各组随机取5只小鼠自眼眶静脉丛采血计数白细胞总数及中性粒细胞比例。结果：1.实验期间小鼠基本生活状态良好。增效实验中,各组小鼠于接种后第4天左右在接种部位均出现粟米粒样大小不等的结节,结节逐渐增大,至第8天结节直径约0.5x0.5cm,成瘤率为100%,模型制作成功。2.不同剂量的抑瘤宁对放疗荷瘤小鼠均具有增效作用且增效作用与照射时间无明显关系。实验A组中模型对照组,抑瘤宁低、中、高剂量组,放疗联合抑瘤宁低、中、高剂量组的抑瘤率分别为33.8%、31.4%、35.4%、32.4%、67.2%、71.6%、74%。实验B组中模型对照组,抑瘤宁低、中、高剂量组,放疗联合抑瘤宁低、中、高剂量组的抑瘤率分别为31.2%、33.2%、33.7%、35.6%、67.8%、67.3%、68.3%。照射前用药与照射同时用药的抑瘤效应无明显差异。3.抑瘤宁对放疗小鼠减毒作用实验结果显示：抑瘤宁能减轻放疗所致的小鼠外周血白细胞总数、中性粒细胞比例的下降。照射前一天各组小鼠白细胞总数及中性粒细胞比例均正常,照射后第8天降至最低,后渐恢复,以照射后第14-21天恢复

关键词：抑瘤宁 S180 放疗增效减毒

抑瘤宁对食管癌EC9706荷瘤裸鼠的抗癌作用及其对VEGF和ENS的影响

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

抑瘤宁对食管癌EC9706荷瘤裸鼠的抗癌作用及其对VEGF和ENS的影响

作者：王琳郑州大学

学位级别：硕士

目的：恶性肿瘤已严重威胁了人类的生命和健康,目前肿瘤治疗的主要措施有：手术治疗、放射治疗、化学治疗、免疫治疗及生物治疗等,任何治疗各有其适应症和禁忌症。由于现实一些原因,虽然某些早期肿瘤可能治愈,但许多患者在发现患病... 详细信息

目的：恶性肿瘤已严重威胁了人类的生命和健康,目前肿瘤治疗的主要措施有：手术治疗、放射治疗、化学治疗、免疫治疗及生物治疗等,任何治疗各有其适应症和禁忌症。由于现实一些原因,虽然某些早期肿瘤可能治愈,但许多患者在发现患病时已属于中晚期,失去了最佳的治疗机会。化学治疗作为中晚期恶性肿瘤主要治疗手段之一,虽然疗效肯定,但实际应用中存在一定问题,如毒副作用较大、价格昂贵和可能出现多药耐药等,其常导致患者机体状况恶化和生活质量降低,严重时患者因不能耐受而放弃治疗。目前肿瘤的发生发展被公认为是一个逐渐的慢性过程,属于难治性的疾病。多年来人们希望能将其获得彻底的根治,或者能最大限度的提高机体的免疫功能,控制和稳定肿瘤,减小肿瘤对机体的危害,使患者保有较好的生活质量,使患者长期带瘤生存成为现实奋斗目标。为此,医学工作者为寻求研究某种能阻止或减缓肿瘤生长增殖、安全的、可以长期在治疗中应用的药物或方法不懈努力。中药及中国医学是一个伟大的宝库,在肿瘤治疗中具有较多优势,如其药源广泛、毒副作用小、价格低廉等。近年来,中药治疗恶性肿瘤逐渐被广大学者认可和众多患者接受,国内外很多学者热衷于研究中医药对恶性肿瘤的治疗作用,不论从抗肿瘤中药的单药还是中药复方制剂,都取得了可喜的成果,中医治疗成为恶性肿瘤多学科综合治疗的重要有效手段之一。抑瘤宁是我科长期临床实践的经验方,为纯中药复方制剂,由冬凌草、刺五加、龙葵和蛇莓组成,临床用其水煎剂治疗消化道系统肿瘤,疗效确切,无明显毒副作用。根据本课题组前期已对四味中药提取物进行体外抗肿瘤实验结果示：四药联用时能明显抑制消化道系统肿瘤细胞增殖、生长;能诱导细胞凋亡,使Eca109细胞阻滞于S期;小白鼠急性毒性实验已表明,最大给药剂量相当于临床拟用量的126倍时,未发现急性毒性反应;药效学实验显示,抑瘤宁对动物移植瘤H-22荷瘤小鼠、S180荷瘤小鼠的抑瘤率均大于30%。本课题观察抑瘤宁对人食管癌EC9706荷瘤裸鼠的抑瘤作用及可能的作用机理,进一步为其临床应用提供实验依据。方法：对EC9706荷瘤裸鼠的抑瘤作用实验及免疫组化实验。建立人食管癌EC9706裸鼠移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分为5组,每组8只,分别是：空白对照组（经口灌胃等容量无菌生理盐水）;阳性对照组（经腹腔注射平阳霉素,4mg/kg,隔日一次）;抑瘤宁低、中、高剂量组（经口灌胃抑瘤宁提取物,剂量分别为7.47g生药/kg,14.94g生药／kg,22.41g生药/kg,1次／天）。所有实验动物组均连续给药28天（4周）,从第一天起开始观察各组裸鼠的体重、移植瘤变化及一般情况。于第29天脱臼法处死动物,取瘤体称重,计算抑瘤率,同时做组织蜡块病理切片,用免疫组化SP法检测各组中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）及内皮抑素（endostatin,ENS）的表达情况,探讨抑瘤宁可能的抑瘤机制;并取出心、肝、脾、肺、肾、睾丸主要脏器,进行HE染色,在光镜下观察主要脏器组织形态学变化,了解药物对脏器有无毒性。结果：阳性对照组及抑瘤宁低、中、高剂量组的抑瘤率分别为47.40%、35.81%、36.72%及42.3%,与空白对照组比较均有统计学意义（P＜0.01）;抑瘤宁各剂量组间差异无明显量效关系;实验结束时,空白对照组及抑瘤宁各剂量组动物体重均高于阳性对照组。组织形态学结果表明,抑瘤宁高剂量组对裸鼠主要脏器未发现明显毒副作用。抑瘤宁各剂量组及阳性对照组裸鼠肿瘤组织中的VEGF表达均低于空白对照组,与空白对照组相比差异有统计学意义（P＜0.01）。抑瘤宁各剂量组及阳性对照组裸鼠肿瘤组织中ENS的表达均高于空白对照组,与之相比均有差异有统计学意义（P＜0.05）,抑瘤宁三个剂量组间差异无统计学意义（P＞0.05）。结论： 1.抑瘤宁能增加EC9706荷瘤裸鼠的体重并改善一般情况。 2.抑瘤宁对EC9706荷瘤裸鼠的瘤体生长有明显的抑制作用。 3.抑瘤宁抗肿瘤机制可能是通过调控血管内皮生长因子（VEGF）和内皮抑素（ENS）的表达,抑制肿瘤血管生成从而达到抑瘤的作用。

关键词：抑瘤宁裸鼠 EC9706 抑瘤率血管内皮生长因子内皮抑素

抑瘤宁及其组方各提取液对S-180荷瘤小鼠的抗癌作用和细胞动力学研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

抑瘤宁及其组方各提取液对S-180荷瘤小鼠的抗癌作用和细胞动力学...

作者：张孟伟郑州大学

学位级别：硕士

恶性肿瘤最近几年成为威胁人类健康的最主要因素之一,其发病率呈逐年上升趋势,因此在全世界范围内引起了人们的广泛关注,当今对恶性肿瘤的研究已涉及很多方面,包括其发病原因、耐药性的形成、转移、药物对恶性肿瘤细胞的杀伤作用等,但... 详细信息

恶性肿瘤最近几年成为威胁人类健康的最主要因素之一,其发病率呈逐年上升趋势,因此在全世界范围内引起了人们的广泛关注,当今对恶性肿瘤的研究已涉及很多方面,包括其发病原因、耐药性的形成、转移、药物对恶性肿瘤细胞的杀伤作用等,但由于它的发生是一个非常复杂的过程,迄今我们尚未能明确其发病原因,因而对恶性肿瘤的治疗尚无令人满意的方法,只能达到延长患者的生存期,改善生活质量,减小恶性肿瘤对机体伤害的目的。我们在肿瘤学领域还处在探索阶段,还有很多的难题等待我们去解决。对于早期未发生转移的恶性肿瘤,手术切除仍是其首选的治疗手段,术后根据病理及分期来决定是否行辅助治疗;对于中、晚期的恶性肿瘤患者,综合治疗是其主要治疗方法,包括化疗,同时结合放射治疗;对于适合应用分子靶向药物治疗的患者,可以根据期家庭经济情况选用;另外还有CIK细胞生物治疗也是一种可供选择的方法。但传统的治疗方法有时对人体的影响较大,例如食管癌术后由于解剖位置的改变会对消化道功能产生一定的影响;化疗药物在杀伤肿瘤细胞的同时也杀伤了正常的免疫细胞,削弱了人的免疫力,为肿瘤细胞的生长和转移创造了条件;另外分子靶向治疗药物及CIK细胞生物治疗,由于其费用昂贵,在我国现有的国情下还不能普及。而中医药是一个伟大的宝库。早在我国古代就有中医中药治疗恶性肿瘤的记载,由于其有一定的疗效,毒副作用较小,且价格低廉,因此在恶性肿瘤的综合治疗中有其重要的地位。抑瘤宁是我科经过长期的临床实践总结出的一个有效方剂,该方剂为纯中药制剂,由冬凌草、刺五加、龙葵和蛇莓四味中药组成,临床可以根据辩证和患者的症状进行加减,临床用其水煎剂治疗食管癌、胃癌等消化系统肿瘤,疗效肯定,无明显毒副作用。根据本课题组前期对四味中药提取物体外抗肿瘤实验结果示：四种药物联用时能明显抑制消化系统肿瘤细胞和非消化道肿瘤细胞生长;药物能使Eca-109细胞阻滞于S期,并诱导细胞凋亡;体内试验急性毒性实验证实,其最大给药剂量相当于临床拟用量的126倍,在小鼠体内未发现明显的急性毒性反应;药效学实验显示该药对动物移植性肿瘤H-22、S180的抑瘤率大于30%,并在短期内延长白血病L1210荷瘤小鼠的生存期。本课题主要观察抑瘤宁及其组方各提取液对S-180荷瘤小鼠的抑瘤作用及其可能的细胞动力学机制。方法：对S-180荷瘤小鼠的抑瘤实验及细胞动力学实验。建立纤维肉瘤S-180荷瘤小鼠模型,将小鼠随机分为两大组,第一组分别是模型对照组（羧甲基纤维素钠2ml/10g ig10d）;阳性对照组（浓度为0.2%的环磷酰胺20mg/kg ip10d）;抑瘤宁低剂量组7.47g生药/kg,抑瘤宁中剂量组14.94g生药/kg,抑瘤宁高剂量组22.41g生药/kg;第二组为：模型对照组（羧甲基纤维素钠2ml/10g ig10d）;阳性对照组（浓度为0.2%的环磷酰胺20mg/kgip10d）;以下四味中药均用其水煎剂,冬凌草低、中、高剂量组2.25g生药/kg、4.5g生药/kg、6.75g生药/kg;蛇莓低、中、高剂量组1.5g生药/kg、3g生药/kg、4.5g生药/kg;刺五加低、中、高剂量组2.25g生药/kg、4.5g生药/kg、6.75g生药/kg;龙葵低、中、高剂量组0.75g生药/kg、1.5g生药/kg、2.25g生药/kg。所有实验动物组均连续给药10天,从第一天起开始观察各组小鼠的体重、移植瘤变化及一般情况。于第11天脱臼法处死动物,取瘤体称取瘤重,计算抑瘤率,同时取瘤体组织做成单细胞悬液上流式细胞仪检查各个细胞周期所占比例,探讨抑瘤宁可能的抑瘤机制。结果：抑瘤宁及其组方中各药物的提取液对S-180荷瘤小鼠瘤体的抑制作用：第一组：阳性对照组的抑瘤率为：58.13%,抑瘤宁低、中、高剂量组的抑瘤率分别为：38.61%、41.86%、42.27%;第二组：阳性对照组的抑瘤率为：55.32%;冬凌草低、中、高剂量组的抑瘤率分别为：32.11%、36.59%、38.57%;蛇莓低、中、高剂量组的抑瘤率分别为：31.30%、36.17%、40.24%;刺五加低中高剂量组的抑瘤率分别为：32.92%、34.95%、39.02%;龙葵低、中、高剂量组的抑瘤率分别为：28.05%、30.89%、36.18%,他们与模型对照组比较差异具有统计学意义（P抑瘤宁能将S-180细胞阻滞于S期;冬凌草能将S-180细胞阻滞于G2/M期;蛇莓能将S-180细胞阻滞于G0/G1期;刺五加能将S-180细胞阻滞于G2/M期;龙葵能将S-180细胞阻滞于S期。结论： 1、抑瘤宁及其组方中各中药的提取液能改善小鼠一般状况。 2、抑瘤宁及其组方中各中药的提取液对S-1

关键词：抑瘤宁肉瘤S-180 抑瘤率细胞周期

抑瘤宁对荷人结肠癌HCT-8裸鼠的抑癌作用及对血管内皮生长因子及微血管密度的作用

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

抑瘤宁对荷人结肠癌HCT-8裸鼠的抑癌作用及对血管内皮生长因子及...

作者：张小杰郑州大学

学位级别：硕士

背景：恶性肿瘤是严重威害人类健康的一种疾病,由于大多数肿瘤发现时已为晚期,目前对晚期肿瘤的治疗无论是手术、化疗、放疗还是免疫疗法等,都各有其适应症和禁忌症。总的来说,综合治疗,也就是中西医结合、内外兼顾的治疗较为理想。近年... 详细信息

背景：恶性肿瘤是严重威害人类健康的一种疾病,由于大多数肿瘤发现时已为晚期,目前对晚期肿瘤的治疗无论是手术、化疗、放疗还是免疫疗法等,都各有其适应症和禁忌症。总的来说,综合治疗,也就是中西医结合、内外兼顾的治疗较为理想。近年来,国内外越来越多的学者热衷于研究中医药对恶性肿瘤的治疗作用,从抗肿瘤中药的单药到中药复方制剂都取得了可喜的成果。如抗肿瘤单味中药：紫杉醇、喜树碱衍生物,中药复方制剂如：康莱特注射液在非小细胞肺癌等肿瘤的治疗,华蟾素在消化系肿瘤的应用,消癌平在胃癌食管癌等多种肿瘤中的应用。这些足以说明中药抗肿瘤有广阔的前景,本实验中的抑瘤宁由冬凌草、龙葵、刺五加、蛇莓四味中药成分组成,具有清热解毒、消肿散结、扶正固本、补益健脾之功效。前期对抑瘤宁的体外实验研究已取得了一定成果,本实验将继续从体内实验探讨抑瘤宁的作用及其作用机理。第一部分抑瘤宁对荷人结肠癌HCT-8裸鼠的抑癌作用目的：通过建立人结肠癌裸鼠移植瘤模型,给于抑瘤宁治疗,检测抑瘤宁对人结肠癌原位移植瘤生长的影响。方法：购买4周龄BALB/c雄性裸小鼠30只,体重20克左右,于无特定病原体(specified. pathogens free, SPF)环境下饲养,环境温度、湿度适宜,无菌饲料及灭菌纯净水饲养,在37℃含5%C02培养箱中培养人结肠癌细胞株HCT-8,取对数生长期的结肠癌细胞,用生理盐水制作成细胞密度为10×107／ml的细胞悬液。在裸鼠右侧腋窝皮下接种上述细胞悬液0.2ml建立种植瘤模型,定期观察,游标卡尺测量肿瘤的长径(a)、短径(b),按公式V=ab2/2,计算肿瘤近似体积,接种14天后形成稳定的皮下移植瘤。随将30只裸鼠随机分为5组,空白对照组、希罗达组、抑瘤宁低、中、高剂量组。抑瘤宁的三种浓度分别为35%、70%、105%,希罗达浓度为2%,空白对照组给蒸馏水,均按照0.2ml/10g(裸鼠体重)灌胃给药,每天一次,连续用药4周,末次用药24小时后颈椎脱臼处死小鼠,切取种植瘤组织,心肝脾肺肾脏器,置于4%多聚甲醛溶液中固定,观察各组裸鼠的一般状况,各组原位移植瘤的瘤体积,瘤重及用药前后裸鼠体重的变化,绘制肿瘤生长曲线,计算抑瘤率。结果：1、30只裸鼠实验期间无一死亡,成瘤率为100%,成瘤时间为接种后6-10天,于接种后14天肿瘤直径平均达5mm,造模成功。2、空白对照组裸鼠肿瘤迅速生长,生长曲线较陡直;,其余各组肿瘤生长缓慢(P抑瘤宁低、中、高、剂量组与空白组比较差异均有统计学意义：高剂量组(P抑瘤宁低、中剂量组(P瘤重(g)分别为：1.4683±0.16845、0.8567±0.12388、1.2333±0.29132、1.1583±0.17646、1.0150±0.17695。希罗达组、低剂量组、中剂量组和高剂量组与空白组相比差异有显著性：希罗达(P抑瘤率分别为：希罗达组42.18%;低剂量组16.33%;中剂量组21.77%;高剂量组31.29%;和空白组相比差异有统计学意义(P抑瘤宁对荷人结肠癌裸鼠有抑癌作用。第二部分瘤宁抑制荷HCT-8人结肠癌裸鼠移植瘤的机理探讨目的：研究抑瘤宁抑制荷HCT-8人结肠癌裸鼠移植瘤的作用机制。方法：取第一部分各组裸鼠移植瘤和裸鼠脏器的石蜡标本,进行常规HE染色、SP法免疫组化染色,检测移植瘤组织中的MVD,VEGF表达和各组脏器情况。结果：1、各组动物的心肝脾肺肾脏器的HE染色镜下未见明显毒性表现;各组的肿瘤组织的HE染色镜下均可见明显的细胞核异常现象：核大,深染,多核,核碎裂等现象。2、VEGF蛋白表达主要位于细胞胞浆、核膜上,为棕黄色或褐色颗粒;第v111因子显色主要位于细胞胞浆、核膜上,也为棕黄色或褐色颗粒。空白组、希罗达组、低剂量组、中剂量组和高剂量组瘤组织内的VGEF蛋白表达阳性百分率分别为45.1667±2.71416、26.1667±1.16905、36.3333±2.94392、33.5000±0.83666、30

关键词：抑瘤宁裸鼠 HCT-8人结肠癌血管内皮生长因子微血管密度