检索结果-南通市图书馆

酸性丝氨酸蛋白酶ASP_(NJ)对K562白血病细胞的抑制与损伤作用研究

中国生化药物杂志 2012年第6期33卷 736-739页

作者：薄其青葛鑫崔佳乐姜雪刘剑凯洪敏吉林大学白求恩医学院生物化学教研室吉林长春130021

目的研究酸性丝氨酸蛋白酶ASPNJ单独用药及与多柔比星联合用药对体外培养的人慢性髓系白血病细胞株K562的抑制作用,并初步探讨其作用机制。方法应用MTT比色法、台盼蓝拒染法检测细胞增殖和细胞活力,倒置显微镜下观察细胞的动态变化,瑞氏... 详细信息

目的研究酸性丝氨酸蛋白酶ASPNJ单独用药及与多柔比星联合用药对体外培养的人慢性髓系白血病细胞株K562的抑制作用,并初步探讨其作用机制。方法应用MTT比色法、台盼蓝拒染法检测细胞增殖和细胞活力,倒置显微镜下观察细胞的动态变化,瑞氏-吉姆萨染色法观察细胞的形态改变,流式细胞术检测细胞凋亡。结果沙蚕丝氨酸蛋白酶ASPNJ有效抑制K562细胞的增殖和活力并呈浓度和时间依赖性,联合用药显示ASPNJ显著增加多柔比星的杀伤作用;K562细胞出现凋亡所具有的形态学变化,ASPNJ明显诱导K562细胞的凋亡。结论沙蚕丝氨酸蛋白酶ASPNJ对体外培养的K562细胞具有明显的抑制作用并能增强多柔比星的效应,其作用机制可能与直接的细胞毒性作用及诱导凋亡有关。

关键词：丝氨酸蛋白酶多柔比星 K562细胞凋亡慢性髓性粒细胞白血病

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

酸性丝氨酸蛋白酶对人慢性髓性粒细胞株K562细胞作用的初步研究

酸性丝氨酸蛋白酶对人慢性髓性粒细胞株K562细胞作用的初步研究

引用

作者：薄其青吉林大学

学位级别：硕士

酸性丝氨酸蛋白酶对人慢性髓性粒细胞株K562细胞作用的初步研究目的：酸性丝氨酸蛋白酶（Acidic Serine Protease from Neanthes japonica,ASPNJ）是本实验室从我国北方沿海海洋生物沙蚕体内提纯得到的一种蛋白酶，因其对纤维蛋白及纤... 详细信息

酸性丝氨酸蛋白酶对人慢性髓性粒细胞株K562细胞作用的初步研究目的：酸性丝氨酸蛋白酶（Acidic Serine Protease from Neanthes japonica,ASPNJ）是本实验室从我国北方沿海海洋生物沙蚕体内提纯得到的一种蛋白酶，因其对纤维蛋白及纤维蛋白原有很强的溶解作用，故曾命名为沙蚕纤溶酶，其本质是酸性丝氨酸蛋白酶。具有纤溶活性的一类蛋白酶如蚓激酶对多种肿瘤细胞有显著的杀伤作用，受到基础和临床研究的重视。然而，ASPNJ对肿瘤细胞的作用及作用机制至今没有被研究。本论文报告ASPNJ对慢性髓性粒细胞白血病K562的体外抗肿瘤作用，并做了初步的机制研究，探讨临床应用的可能性，可能为抗白血病研究与治疗提供一个新的思路。方法： 1、以体外培养的慢性髓性粒细胞白血病K562细胞株为本实验模型;2、MTT比色法检测ASPNJ对K562细胞的增殖抑制作用;3、倒置显微镜、瑞氏-吉姆萨染色法及激光共聚焦显微镜联合流式细胞术观察ASPNJ作用K562细胞后其形态学的改变及凋亡情况;4、PCR检测Bax mRNA的表达，以β-actin为内参，观察ASPNJ作用于K562细胞后，与凋亡有关的部分基因表达状况;5、观察ASPNJ与多柔比星联合作用于K562细胞的增效作用;6、观察ASPNJ对人正常红细胞溶血、凝聚作用及MTT比色法检测对粒细胞的作用;结果： 1、ASPNJ对K562细胞有明显的增殖抑制作用，呈现出时效-量效关系;2、倒置显微镜、瑞氏-吉姆萨染色法观察形态学变化，可见ASPNJ作用K562细胞后，部分细胞出现明显的凋亡改变，包括核固缩、核碎裂等，部分细胞呈现显著的坏死现象，或同时有凋亡改变也有坏死改变;3、激光共聚焦显微镜下，可见典型的细胞膜绿色，胞核红色的形态变化;激光共聚焦及流式细胞术可明显检测到ASPNJ对K562细胞产生的凋亡作用与坏死作用;4、PCR结果显示：随着ASPNJ作用剂量及时间的增加，Bax基因表达逐渐增高;5、ASPNJ与盐酸多柔比星联合用药，有显著的肿瘤抑制增效作用;6、ASPNJ对人体正常红细胞无溶血作用，也无凝聚作用;7、ASPNJ对人正常粒细胞没有显著的增殖抑制作用。结论： 1、ASPNJ能抑制K562细胞增殖，其作用呈现一定的时效和量效关系，ASPNJ促使K562细胞凋亡和坏死;2、ASPNJ可能通过上调Bax mRNA的表达来诱导K562细胞凋亡，可能通过破坏K562细胞膜完整性引起细胞坏死;3、与盐酸多柔比星共同作用，有显著的增效作用;4、ASPNJ对正常人白细胞作用远远低于K562细胞，在6小时内不引起溶血和凝聚

关键词： ASPNJ K562 慢性髓性粒细胞白血病凋亡坏死 Bax mRNA

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

酸性丝氨酸蛋白酶ASPNJ抗白血病细胞作用早期膜蛋白质组学研究

酸性丝氨酸蛋白酶ASPNJ抗白血病细胞作用早期膜蛋白质组学研究

引用

第五届泛环渤海生物化学与分子生物学会学术交流会

作者：王馨平黎志国唐延斐李春花张建一王亮刘剑凯吉林大学基础医学院

目的研究酸性丝氨酸蛋白酶ASP

关键词：丝氨酸蛋白酶蛋白质组双向电泳 K562细胞慢性髓性粒细胞白血病

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：