检索结果-南通市图书馆

作者：王鑫集美大学

学位级别：硕士

软体动物性腺分化与发育的分子机制一直以来都是繁殖生物学和水产养殖学的研究重点。尽管软体动物体内存在类似于脊椎动物的雌激素和雄激素,但由于缺乏对其生物合成途径或来源的了解,以及有关激素受体的直接证据,脊椎动物类型的类固醇... 详细信息

软体动物性腺分化与发育的分子机制一直以来都是繁殖生物学和水产养殖学的研究重点。尽管软体动物体内存在类似于脊椎动物的雌激素和雄激素,但由于缺乏对其生物合成途径或来源的了解,以及有关激素受体的直接证据,脊椎动物类型的类固醇激素在软体动物性腺分化中的作用尚无定论。近年来,备受关注的腹足类性畸变分子机制的研究表明,维甲酸X受体(retinoid X receptor,RXR)在腹足类性畸变的过程起着重要的作用。有关性畸变分子机制的研究表明RXR对于腹足类性腺分化与发育的作用机制至关重要。本论文采用荧光实时定量PCR技术和RNA干扰技术研究了杂色鲍RXR基因和细胞凋亡相关基因在杂色鲍性腺分化与发育中的作用机制。主要结果如下:1、每月采集雌雄样品,采用常规组织切片和HE染色技术跟踪观察了杂色鲍性腺发育的周年变化。根据杂色鲍性腺的颜色、体积、生殖细胞的形态结构及占主体的生殖细胞的类型等将杂色鲍的性腺发育分为5个时期:休止期、增殖期、生长期、成熟期和排放期。观察结果显示:厦门本地的杂色鲍一年只有一个生殖周期,并且雌性个体和雄性个体的发育是不同步的:雌性杂色鲍性腺发育的休止期是1到3月;增殖期是4到5月;生长期是6到7月;成熟期是8到12月,雄性杂色鲍性腺发育的休止期是2到3月;增殖期是4到5月;生长期是6到10月;成熟期是11月到次年1月。另外,杂色鲍性腺发育的个体差异较大,性腺发育成熟时期会观察到处于生长期或者更早期的个体,因此不同发育时期样品的选择要根据组织学观察的结果而不是取样的时间。2、采用geNorm、Normfinder和Bestkeeper等内参分析软件对10个候选内参基因包括β-action(β-ACT)、18S ribosomal(18S)、28S ribosomal(28S)、elongation factor 1-alpha(ELFA)、ribosomal protein L8(RPL8)、translation initiation factor 5A(EIF5A)、Y-box protein(YB1)、ornithine decarboxylase antizyme 1(OAZ1)、60S ribosomal protein L3(RPL3)、ribosomal protein S9(RPS9)进行分析并筛选了杂色鲍性腺发育过程中不同组织的最适内参基因:杂色鲍性腺发育过程中卵巢内表达最稳定的内参基因是OAZ1;杂色鲍性腺发育过程中雌性杂色鲍头部组织内表达最稳定的内参基因是EIF5A;杂色鲍性腺发育过程中雌性杂色鲍肝胰腺组织内表达最稳定的内参基因是28S;杂色鲍性腺发育过程中雄性杂色鲍头部组织内表达最稳定的内参基因是RPS9;杂色鲍性腺发育过程中雄性杂色鲍肝胰腺组织内表达最稳定的内参基因是EIF5A。3、分析了维甲酸X受体(retinoid X receptor,RXR)在杂色鲍性腺发育过程中不同组织的表达情况:在卵巢、雌性个体头部、雌性个体肝胰腺和雄性个体头部组织中,RXR在性腺发育的增殖期时表达量显著上调(P性腺发育的增殖期时的表达量显著下调(P性腺发育增殖期时的不同组织的表达量与其他发育时期相比均存在显著性差异,这表明增殖期是RXR在杂色鲍性腺分化与发育发挥作用的窗口期。4、本论文还通过实时荧光定量PCR技术研究了细胞凋亡相关基因在杂色鲍性腺分化与发育中的作用:在卵巢中,半胱天冬氨酸酶3(Caspase3,Casp3)和细胞凋亡因子(defender against cell death 1,DAD1)在性腺发育休止期时表达量显著上调(P性腺发育增殖期时表达量显著上调(P分化与发育过程。5、雌性杂色鲍肝胰腺组织注射RXR基因双链RNA 48h后,雌性杂色鲍头部组织的RXR表达量与空白对照组和绿色荧光对照组相比没有显著性差异;雌性杂色鲍卵巢组织的RXR表达量空白对照组和绿色荧光对照组相比显著性下调。这些结果证明了对杂色鲍进行活体注射双链RNA可以让体内的目的基因产生基因沉默现象。

关键词：杂色鲍性腺分化与发育 RXR

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性发育异常的基因诊断现状和研究进展

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生殖医学杂志 2024年第8期33卷 1125-1131页

作者：丁蕾蕾田秦杰中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院妇产科学系妇科内分泌与生殖中心国家妇产疾病临床医学研究中心北京100730

性发育异常(DSD)是先天性改变引起的发育异常或变异,表现为性染色体、性腺或性激素性别不典型、不一致。DSD是一类临床表现类似的遗传性疾病,临床误诊率极高。通过基因检测能够明确病因,避免因血清化验、影像检查的局限性导致疾病误诊... 详细信息

性发育异常(DSD)是先天性改变引起的发育异常或变异,表现为性染色体、性腺或性激素性别不典型、不一致。DSD是一类临床表现类似的遗传性疾病,临床误诊率极高。通过基因检测能够明确病因,避免因血清化验、影像检查的局限性导致疾病误诊。本文对性发育的胚胎学和遗传学机制进行了描述,总结了近年来DSD不同疾病中的主要基因组发现,以期为DSD的临床诊断和遗传咨询提供更多参考。

关键词：性发育异常性腺分化与发育基因检测

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半滑舌鳎Shh基因的克隆与表达及甲基化分析

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中国水产科学 2016年第2期23卷 316-317+327+318-326页

作者：齐茜董忠典张宁邵长伟贾晓东温海深陈松林中国海洋大学水产学院中国水产科学研究院黄海水产研究所中国水产科学研究院鲟鱼繁育工程技术研究中心

通过RACE方法获得半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)Hh基因家族的Shh基因,该基因全长1 922 bp,其中5′UTR 266 bp,3′UTR 360 bp,ORF1 296 bp,编码431个氨基酸,经预测该多肽的相对分子质量为47.28 k D,理论等电点6.95,具有Hh基因家族特... 详细信息

通过RACE方法获得半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)Hh基因家族的Shh基因,该基因全长1 922 bp,其中5′UTR 266 bp,3′UTR 360 bp,ORF1 296 bp,编码431个氨基酸,经预测该多肽的相对分子质量为47.28 k D,理论等电点6.95,具有Hh基因家族特有的保守结构域。氨基酸序列分析表明,半滑舌鳎Shh与牙鲆的同源性最高,为82%,与其他鱼类同源性为74%81%,与非洲爪蟾的同源性为61%,与人和鼠的同源性为63%64%。甲基化结果显示,Shh基因在1龄卵巢中的甲基化程度普遍低于雄鱼与伪雄鱼精巢。基因表达分析显示,Shh基因在胚胎期的囊胚期表达显著高于其它时期(P性腺分化的关键期孵化后50 d,雌性性腺中表达量较前期升高,且显著高于同时期雄性性腺中的表达(P性腺分化的关键期8095 d,Shh基因在雄性中的表达水平显著升高(P性腺中表达显著高于雄鱼与伪雄鱼。本研究表明,半滑舌鳎Shh基因在进化中高度保守,与胚胎分化、组织器官形成、雌雄性腺分化及性腺发育密切相关。

关键词：半滑舌鳎 Shh RACE q RT-PCR 性腺分化与发育甲基化

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