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微小RNA-129-5p和高迁移率族蛋白B1在缺血性脑卒中患者中的表达水平及临床意义

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心脑血管病防治 2024年第1期24卷 26-30页

作者：任伟曼靳丽丽夏松云河北省第七人民医院神经内科定州073000 陆军第八十二集团军医院保定071000

目的探讨微小RNA-129-5p(miR-129-5p)和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在缺血性脑卒中(IS)患者中的表达水平及临床意义。方法选取2019年2月至2021年2月河北省第七人民医院收治的94例IS患者为观察组,另选取75例健康体检者为对照组。根据入院时... 详细信息

目的探讨微小RNA-129-5p(miR-129-5p)和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在缺血性脑卒中(IS)患者中的表达水平及临床意义。方法选取2019年2月至2021年2月河北省第七人民医院收治的94例IS患者为观察组,另选取75例健康体检者为对照组。根据入院时美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分将观察组分为轻度组32例、中度组43例、重度组19例。根据90 d随访的改良Rankin量表评分分为预后良好组65例,预后不良组29例。检测血清miR-129-5p、HMGB1水平,并收集观察组临床资料。采用pearson相关性分析血清miR-129-5p和HMGB1的关系。多因素Logistic回归分析IS患者预后的影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-129-5p和HMGB1对IS患者预后的预测价值。结果观察组血清miR-129-5p和HMGB1水平与对照组相比差异有统计学意义(t=3.038、24.863,p5)。观察组血清miR-129-5p水平随神经功能缺损程度的加重而降低,HMGB1水平随之升高(F=83.466、8.423,p5)。pearson相关性分析显示,观察组血清miR-129-5p和HMGB1水平呈负相关(r=-0.406,p5)。预后良好组和预后不良组的同型半胱氨酸、梗死体积、入院时NIHSS评分、发病到入院时间、miR-129-5p和HMGB1水平间差异具有统计学意义(t=4.636、4.034、11.618、19.522、8.063、6.177,p5)。ROC曲线分析显示,miR-129-5p和HMGB1水平对IS患者预后不良预测价值的曲线下面积分别为0.832、0.859。多因素Logistic回归分析显示,患者入院时NIHSS评分、发病到入院时间、HMGB1、miR-129-5p是IS患者预后不良的影响因素(OR=5.361、4.465、7.245、0.806,p5)。结论IS患者血清miR-129-5p低水平、HMGB1高水平与神经功能缺损程度有关,且对不良预后有一定的预测价值。

关键词：缺血性脑卒中微小RNA-129-5p 高迁移率族蛋白B1

长链非编码rna NUTM2A-AS1靶向微小RNA-129-5p调控氧化低密度脂蛋白诱导的血管内皮细胞损伤的机制研究

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实用临床医药杂志 2024年第3期28卷 45-50页

作者：李晓宇张永咏秦娟杨忠信河南大学第一附属医院心血管内科河南开封475000 河南大学第一附属医院胸外科河南开封475000

目的探讨长链非编码rna(lncrna)NUTM2A-AS1对氧化低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的血管内皮细胞损伤的影响及分子机制。方法将人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)在DMEM培养基中培养,采用100μg/mL oxLDL处理的HUVEC纳入oxLDL组,常规培养的细胞纳... 详细信息

目的探讨长链非编码rna(lncrna)NUTM2A-AS1对氧化低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的血管内皮细胞损伤的影响及分子机制。方法将人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)在DMEM培养基中培养,采用100μg/mL oxLDL处理的HUVEC纳入oxLDL组,常规培养的细胞纳入Con组。将lncrna NUTM2A-AS1干扰表达载体及阴性对照、miR-129-5p模拟物及阴性对照转染至HUVEC后采用100μg/mL oxLDL处理后的细胞分别纳入oxLDL+si-NUTM2A-AS1组、oxLDL+si-NC组、oxLDL+miR-129-5p组、oxLDL+miR-NC组。将lncrna NUTM2A-AS1干扰表达载体与微小rna(miR)-129-5p抑制剂或阴性对照共转染至HUVEC后采用100μg/mL的oxLDL处理的细胞分别纳入oxLDL+si-NUTM2A-AS1+anti-miR-129-5p组、oxLDL+si-NUTM2A-AS1+anti-miR-NC组。采用试剂盒测量细胞中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)活性;采用流式细胞术检测细胞凋亡;采用蛋白质印迹法检测蛋白表达;采用双荧光素酶报告实验及rna下拉实验检测NUTM2A-AS1与miR-129-5p的靶向关系。结果与Con组比较,oxLDL组lncrna NUTM2A-AS1表达水平升高,miR-129-5p表达水平降低,MDA含量升高,SOD、GSH-px活性降低,血管内皮细胞凋亡率和cleaved-caspase3、cleaved-caspase9表达水平升高,差异有统计学意义(p5)。干扰lncrna NUTM2A-AS1表达或过表达miR-129-5p后,MDA含量降低,SOD、GSH-px活性升高,细胞凋亡率降低,差异有统计学意义(p5)。lncrna NUTM2A-AS1敲低介导的oxLDL条件下血管内皮细胞的损伤抑制可以被miR-129-5p下调逆转。lncrna NUTM2A-AS1靶向调控miR-129-5p。结论干扰lncrna NUTM2A-AS1表达通过靶向上调miR-129-5p抑制oxLDL诱导的血管内皮细胞损伤。

关键词：长链非编码rna NUTM2A-AS1 微小RNA-129-5p 氧化低密度脂蛋白血管内皮细胞损伤氧化应激凋亡

二甲双胍通过miR-129-5p缓解脓毒症相关肺损伤

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中国药理学通报 2023年第11期39卷 2089-2095页

作者：袁媛刘金虹袁江汉周发春重庆医科大学附属第一医院重症医学科重庆400016 天津市宝坻区人民医院药剂科天津医科大学宝坻临床学院天津301800

目的探究二甲双胍(metformin,MET)与miR-129-5p在脓毒症相关肺损伤中的相互作用及其可能的作用机制。方法脂多糖(lipopolysaccharide,LpS)诱导MHS细胞构建脓毒症细胞模型,盲肠结扎穿孔建立脓毒症动物模型,MET干预细胞、动物模型,CCK-8... 详细信息

目的探究二甲双胍(metformin,MET)与miR-129-5p在脓毒症相关肺损伤中的相互作用及其可能的作用机制。方法脂多糖(lipopolysaccharide,LpS)诱导MHS细胞构建脓毒症细胞模型,盲肠结扎穿孔建立脓毒症动物模型,MET干预细胞、动物模型,CCK-8、流式细胞术检测细胞活力及凋亡,RT-qpCR测定miR-129-5p表达变化,酶ELISA测定TNF-α、IL-6、IL-1β炎症因子表达,HE染色探索肺组织病理学改变,并测量肺干湿比重(D/W);Western blot测定pI3K、p-pI3K、AKT、p-AKT蛋白水平。结果与模型组相比,MET处理可抑制细胞凋亡并提高细胞活力。还可降低TNF-α、IL-6、IL-1β,上调miR-129-5p的表达。而过表达miR-129-5p能改善LpS诱导的炎症反应,敲低miR-129-5p则显示出相反的炎症调控反应,并减弱MET的保护作用。在小鼠模型中,MET处理可下调TNF-α、IL-6、IL-1β水平,减轻肺水肿,提高其存活率。此外,MET可使LpS诱导的pI3K/AKT通路激活,上调p-pI3K、p-AKT蛋白的表达。结论MET可能通过调控miR-129-5p水平,激活pI3K/AKT通路,减轻脓毒症相关肺损伤炎症反应,降低细胞凋亡,起到肺保护作用。

关键词：二甲双胍脓毒症肺损伤微小RNA-129-5p pI3K/AKT 凋亡

塞来昔布调节miR-129-5p/HMGB1抑制TNF-α诱导类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞炎症因子分泌

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中国比较医学杂志 2022年第9期32卷 82-89页

作者：时萍陶野王晨静李欣柳艳平曹玉青岛大学附属医院山东青岛266001

目的探讨塞来昔布对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLSs)MH7A炎症因子分泌的影响及其机制。方法以0、2.5、5、10、20和40μmol/L塞来昔布处理MH7A细胞24 h后,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力以筛选无... 详细信息

目的探讨塞来昔布对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLSs)MH7A炎症因子分泌的影响及其机制。方法以0、2.5、5、10、20和40μmol/L塞来昔布处理MH7A细胞24 h后,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力以筛选无毒性作用浓度;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法、实时荧光定量pCR(RT-qpCR)法和Western blot法分别检测2.5、5、10μmol/L塞来昔布处理TNF-α诱导的MH7A细胞上清液中炎症因子白细胞介素(IL)-6、IL-1β水平和微小rna(miR)-129-5p表达水平以及高迁移率族蛋白1(HMGB1)表达水平;双荧光素酶报告基因实验检测miR-129-5p和HMGB1的靶向关系;转染miR-129-5p mimics或HMGB1-sirna至MH7A细胞中,观察miR-129-5p过表达或下调HMGB1表达对TNF-α诱导的MH7A细胞炎症因子分泌的影响;另外,将miR-129-5p inhibitor转染至TNF-α诱导的MH7A细胞中,观察miR-129-5p低表达对10μmol/L塞来昔布作用下TNF-α诱导MH7A细胞炎症因子分泌的影响。结果与0μmol/L比较,2.5、5、10μmol/L塞来昔布处理后MH7A细胞活性差异无统计学意义(p>0.05),但20和40μmol/L塞来昔布处理后MH7A细胞活性明显降低(p5)。在TNF-α诱导下,2.5、5、10μmol/L塞来昔布可呈浓度依赖性抑制MH7A细胞上清液中IL-6、IL-1β水平和细胞中HMGB1蛋白表达并促进miR-129-5p表达;miR-129-5p可与HMGB1靶向结合,且miR-129-5p可负向调控HMGB1蛋白表达;miR-129-5p过表达或下调HMGB1表达后,TNF-α诱导的MH7A细胞上清液中IL-6、IL-1β水平明显降低(p5);并且,miR-129-5p低表达可明显逆转10μmol/L塞来昔布对TNF-α诱导的MH7A细胞上清液中IL-6、IL-1β水平抑制作用。结论塞来昔布可抑制TNF-α诱导MH7A细胞炎症因子分泌,其作用机制可能与调控miR-129-5p/HMGB1有关。

关键词：类风湿关节炎炎症因子塞来昔布微小RNA-129-5p 高迁移率族蛋白1

lncrna RGMB-AS1通过靶向miR-129-5p调控类风湿关节炎滑膜成纤维细胞的增殖、迁移和侵袭

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现代免疫学 2022年第5期42卷 387-394,426页

作者：沈瑞明李国铨李莉李娟郭峰王华南马丽辉海南医学院第一附属医院风湿免疫科海口570102 海南医学院第一附属医院血液净化中心海口570102

为探讨长链非编码rna(long non-coding rna,lncrna)排斥性引导分子骨形态发生蛋白辅助受体b反义rna 1 (repulsive guide molecule bone morphogenetic protein coreceptor b antisense rna 1, RGMB-AS1)对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)滑膜成纤维细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制,选取20例活动期和缓解期RA患者滑膜组织及20例正常滑膜组织,用qRT-pCR检测lncrna RGMB-AS1和miR-129-5p的表达水平;分离培养RA滑膜成纤维细胞,将其分为si-NC组、si-RGMB-AS1组、pcDNA组、pcDNA-RGMB-AS1组、miR-NC组、miR-129-5p组、si-RGMB-AS1+anti-miR-NC组、si-RGMB-AS1+anti-miR-129-5p组;用MTT试验检测细胞活性;Transwell试验检测细胞迁移和侵袭;Western blotting检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(p21)、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMp)-2、MMp-9、MMp-3、MMp-13蛋白表达;荧光素酶报告基因试验检测lncrna RGMB-AS1和miR-129-5p的靶向关系。结果显示,与正常滑膜组织比较,缓解期和活动期RA患者滑膜组织中lncrnaRGMB-AS1表达水平升高,miR-129-5p表达水平降低(p5);与缓解期RA患者滑膜组织比较,活动期RA患者滑膜组织中lncrna RGMB-AS1表达水平升高,miR-129-5p表达水平降低(p5)。干扰lncrna RGMB-AS1表达或过表达miR-129-5p后,RA滑膜成纤维细胞活性降低,迁移、侵袭细胞数减少,Cyclin D1、MMp-2、MMp-9、MMp-3、MMp-13表达水平降低,p21表达水平升高(p5)。lncrna RGMB-AS1靶向调控miR-129-5p,抑制miR-129-5p表达逆转了干扰lncrna RGMB-AS1表达对RA滑膜成纤维细胞增殖、迁移和侵袭的作用。该研究提示,干扰lncrna RGMB-AS1表达可能通过上调miR-129-5p抑制RA滑膜成纤维细胞增殖、迁移和侵袭。

关键词：长链非编码rna 排斥性引导分子骨形态发生蛋白辅助受体b反义rna 1 微小RNA-129-5p 类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖转移

microrna-129-5p对脂多糖致小鼠肺上皮细胞损伤的影响

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中国临床药理学杂志 2021年第20期37卷 2752-2754页

作者：张晓强余建平浙江大学医学院附属第二医院余杭院区感染科浙江杭州311100 杭州市余杭区第一人民医院感染科浙江杭州311100

目的研究microrna-129-5p(miR-129-5p)对脂多糖(LpS)诱导的小鼠肺上皮细胞凋亡和自噬的影响。方法取小鼠肺上皮细胞MLE-12,分别转染miR-129-5p模拟物(设为miR-129-5p mi组)和阴性对照寡核苷酸(设为miR-NC组),随后用500 ng·mL^(-1)LpS处理MLE-12细胞。用细胞计数法-8(CCK-8)检测各组细胞的增殖能力;用流式细胞术检测各组细胞的凋亡率;用蛋白质印迹(Western blot)法检测各组细胞中自噬相关蛋白p62和Bec-lin-1的表达水平。结果miR-NC组和miR-129-5p mi组细胞在24 h的细胞存活率分别为(52.73±1.41)%,(68.70±3.55)%,在48 h的细胞存活率分别为(48.75±7.22)%,(69.24±3.05)%,在72 h的细胞存活率分别为(48.22±4.28)%,(65.61±2.53)%;细胞凋亡率分别为(28.46±2.51)%,(17.24±2.06)%;p62蛋白的表达水平分别为1.01±0.03和1.54±0.07,Beclin-1蛋白的表达水平分别为0.98±0.09和0.52±0.05,差异均有统计学意义(均p5)。结论过表达miR-129-5p可显著促进LpS诱导小鼠肺上皮细胞MLE-12增殖,并抑制细胞凋亡和自噬,从而改善LpS诱导的急性肺损伤。

关键词：微小RNA-129-5p 脂多糖急性肺损伤凋亡自噬

化瘀散水煎剂通过调控miR-129-5p/FOXC1轴抑制肝癌裸鼠移植瘤生长

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现代肿瘤医学 2024年第6期32卷 1003-1009页

作者：许丹郑超余首德严红梅黄超群武汉市中医医院脾胃病科湖北武汉430014 武汉市中医医院外科湖北武汉430014 湖北省中医院脾胃病科湖北武汉430070 湖北中医药大学附属医院脾胃病科湖北武汉430000 湖北中医药大学疫病研究所湖北武汉430061

目的:探讨化瘀散水煎剂通过调控微小RNA-129-5p/叉头框蛋白C1(FOXC1)轴对肝癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法:建立肝癌裸鼠移植瘤模型,并分为裸鼠NC组、化瘀散水煎剂组、化瘀散水煎剂+inhibitor-NC组、化瘀散水煎剂+miR-129-5p inhibitor组... 详细信息

目的:探讨化瘀散水煎剂通过调控微小RNA-129-5p/叉头框蛋白C1(FOXC1)轴对肝癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法:建立肝癌裸鼠移植瘤模型,并分为裸鼠NC组、化瘀散水煎剂组、化瘀散水煎剂+inhibitor-NC组、化瘀散水煎剂+miR-129-5p inhibitor组,每组8只。qRT-pCR法检测miR-129-5p、FOXC1 mrna表达水平,双荧光素酶报告基因实验验证miR-129-5p与FOXC1靶向调控关系,观察记录裸鼠的瘤重及移植瘤体积,HE染色观察移植瘤组织形态,TUNEL检测肿瘤组织细胞凋亡,免疫组织化学染色检测瘤组织Ki-67、Cleaved Caspase-3、FOXC1表达,Western blot检测Ki-67、Cleaved Caspase-3、FOXC1蛋白表达。结果:miR-129-5p在肝癌细胞中表达显著下降,FOXC1 mrna表达显著升高,其中HepG2细胞变化最显著(p129-5p与FOXC1存在靶向调控关系;与NC组相比,化瘀散水煎剂组肿瘤细胞出现坏死,凋亡数增加,miR-129-5p、Cleaved Caspase-3显著升高,移植瘤质量和体积、FOXC1、Ki-67表达显著降低(p129-5p逆转化瘀散水煎剂对肝癌移植瘤的抑制作用(p129-5p从而下调FOXC1表达,进而抑制肝癌移植瘤生长。

关键词：肝癌化瘀散水煎剂微小RNA-129-5p 叉头框蛋白C1

血清miR-129-5p、miR-103a-3p在重症肺炎并发脓毒症患者中的水平及意义

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检验医学与临床 2024年第12期21卷 1750-1754,1758页

作者：邵丽娇李宁王姣王鑫河北省胸科医院重症医学科河北石家庄050000

目的探讨微小rna(miR)-129-5p和miR-103a-3p在重症肺炎并发脓毒症患者血清中的水平及意义。方法收集2021年1月至2022年12月在该院接受治疗的128例重症肺炎并发脓毒症患者(重症肺炎并发脓毒症组)作为研究对象,根据患者入院28 d内的生存... 详细信息

目的探讨微小rna(miR)-129-5p和miR-103a-3p在重症肺炎并发脓毒症患者血清中的水平及意义。方法收集2021年1月至2022年12月在该院接受治疗的128例重症肺炎并发脓毒症患者(重症肺炎并发脓毒症组)作为研究对象,根据患者入院28 d内的生存情况分为生存组(n=75)和死亡组(n=53);另选取同期在该院体检的128例健康志愿者作为对照组。比较各组血清miR-129-5p、miR-103a-3p及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)水平;采用多因素Logistic回归分析影响重症肺炎并发脓毒症患者预后的因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-129-5p、miR-103a-3p水平对重症肺炎并发脓毒症患者预后的预测价值。结果与对照组相比,重症肺炎并发脓毒症组血清miR-129-5p、miR-103a-3p水平明显降低,TNF-α、IL-6、HMGB1水平明显升高,差异均有统计学意义(p5)。死亡组血清miR-129-5p、miR-103a-3p水平明显低于生存组,TNF-α、IL-6、HMGB1水平明显高于生存组,差异均有统计学意义(p5)。多因素Logistic回归分析结果显示,miR-129-5p、miR-103a-3p水平升高是重症肺炎并发脓毒症患者死亡的保护因素(p5),TNF-α、IL-6、HMGB1水平升高是重症肺炎并发脓毒症患者死亡的危险因素(p5)。血清miR-129-5p、miR-103a-3p单项及联合检测预测重症肺炎并发脓毒症患者死亡的曲线下面积(AUC)分别为0.799(95%CI:0.719~0.865)、0.845(95%CI:0.770~0.903)、0.923(95%CI:0.862~0.963),2项联合检测预测的AUC大于血清miR-129-5p、miR-103a-3p单项检测(Z=3.270,p=0.001;Z=2.843,p=0.005)。结论重症肺炎并发脓毒症患者血清miR-129-5p和miR-103a-3p水平下调,二者联合检测对重症肺炎并发脓毒症患者死亡有较高的预测价值。

关键词：微小RNA-129-5p 微小rna-103a-3p 重症肺炎脓毒症预后

Lncrna FGD5-AS1调节miR-129-5p/CDK6轴对膀胱癌细胞恶性生物行为的影响

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现代泌尿外科杂志 2023年第12期28卷 1079-1085,1100页

作者：刘晶张国民李强王亮刘志飞开滦总医院林西医院泌尿外科河北唐山063100 唐山市人民医院泌尿外科河北唐山063000

目的探究长链非编码rna(lncrna)FGD5-AS1调节微小rna(miR)-129-5p/周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)轴对膀胱癌(BC)细胞恶性生物行为的影响。方法选取105例经确诊为BC的患者肿瘤组织与癌旁组织标本,培养人BC细胞株T24,采用RT-qpCR法测定组织和... 详细信息

目的探究长链非编码rna(lncrna)FGD5-AS1调节微小rna(miR)-129-5p/周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)轴对膀胱癌(BC)细胞恶性生物行为的影响。方法选取105例经确诊为BC的患者肿瘤组织与癌旁组织标本,培养人BC细胞株T24,采用RT-qpCR法测定组织和T24细胞中FGD5-AS1、miR-129-5p和CDK6 mrna的表达。将T24细胞随机分为对照组(Control组)、si-NC组、si-FGD5-AS1组、si-FGD5-AS1+inhibitor NC组、si-FGD5-AS1+miR-129-5p inhibitor组。CCK-8法检测T24细胞活力、Wound healing实验测定T24细胞迁移、Transwell实验测定T24细胞侵袭、流式细胞术测定T24细胞凋亡、Western blot检测Bax、Bcl-2、Caspase3和CDK6蛋白的表达。双荧光素酶报告基因实验分别验证FGD5-AS1和miR-129-5p、miR-129-5p和CDK6的关系。结果BC肿瘤组织中FGD5-AS1、CDK6 mrna高表达,miR-129-5p低表达(p129-5p表达、凋亡率、Bax、Caspase3蛋白表达升高(p129-5p表达逆转了FGD5-AS1沉默对BC细胞各指标的影响(p129-5p表达,miR-129-5p靶向负调控CDK6表达。结论沉默FGD5-AS1可能通过上调miR-129-5p来抑制CDK6蛋白的表达,从而抑制BC细胞增殖、迁移和侵袭等恶性生物学行为,促进细胞凋亡。

关键词：长链非编码rna FGD5-AS1 微小RNA-129-5p 周期蛋白依赖性激酶6 膀胱癌恶性生物行为