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细胞松弛素B改善冷冻引起的猪卵母细胞皮质颗粒迁移障碍

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畜牧兽医学报 2024年第5期55卷 1999-2010页

作者：李婉君徐皆欢何孟纤孔钰婷张德福戴建军上海海洋大学水产与生命学院上海201306 上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海市农业遗传育种重点实验室上海201106 农业农村部畜禽资源(猪)评价利用重点实验室上海201106 上海种猪工程技术研究中心上海201302

旨在揭示冷冻后的猪GV期卵母细胞体外成熟过程中细胞骨架与皮质颗粒迁移之间的相互关系和影响。所采集猪卵巢样品来自上海市嘉定区五丰上食屠宰场的健康经产母猪,每次采样选用体重70~90 kg、生产性能良好的浦东白母猪300头左右采取卵巢... 详细信息

旨在揭示冷冻后的猪GV期卵母细胞体外成熟过程中细胞骨架与皮质颗粒迁移之间的相互关系和影响。所采集猪卵巢样品来自上海市嘉定区五丰上食屠宰场的健康经产母猪,每次采样选用体重70~90 kg、生产性能良好的浦东白母猪300头左右采取卵巢样品,采集卵巢数量120~150枚·次^(-1),挑选胞质分布均匀且紧密的GV期卵母细胞按试验要求随机分为3组,每组设3个重复,每组至少30枚细胞,利用细胞骨架稳定剂细胞松弛素B (cytochalasin B,CB)冻前处理猪GV期卵母细胞,冷冻解冻后经体外成熟培养,检测卵母细胞存活率、各时间点微丝与皮质颗粒荧光共定位情况、卵丘扩散程度、第一极体排出率、谷胱甘肽(glutathione, GSH)水平和发育能力等指标。结果显示,冷冻前用CB处理可有效提高GV期卵母细胞解冻后存活率(44.11%vs. 27.91%,P微丝存在共迁移。冷冻会引起皮质颗粒-微丝迁移异常,而冷冻前CB的添加会缓解冷冻引起的迁移障碍,表现为CB处理组的微丝与皮质颗粒均成功迁移至质膜的比例更高,迁移均匀分布于质膜效果更好。冷冻卵母细胞体外成熟后,CB预处理的第一极体排出率((26.79±2.37)%vs.(8.13±0.30)%,P微丝细胞骨架对卵母细胞体外成熟过程中胞内皮质颗粒由内部向质膜迁移有一定的调节作用,且两者存在一定共定位关系,通过冻前添加CB孵育可有效影响细胞微丝骨架与皮质颗粒的迁移程度,减轻了冷冻引起的细胞骨架异常分布,缓解了由冷冻引起的皮质颗粒-微丝迁移障碍,进而提升细胞抗冻能力,表现为促进胞质成熟的同时,提高了冷冻卵母细胞存活率、核成熟率与胚胎体外发育潜能。

关键词：皮质颗粒微丝玻璃化冷冻猪卵母细胞

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长链非编码RNAXR_923426参与调控电离辐射诱导的微丝骨架变化

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原子核物理评论 2022年第4期39卷 505-511页

作者：张雨沈陆恒周光明裴海龙苏州大学医学院放射医学与防护学院江苏苏州215123

细胞微丝骨架是多功能亚细胞结构,是电离辐射的感受器也是效应器。为了明确长链非编码RNA(lncRNA)是否参与调控电离辐射引起的微丝骨架动力学变化,采用Swinholide A处理诱导细胞微丝骨架解聚之后,进行lncRNA组学分析并验证差异表达的lnc... 详细信息

细胞微丝骨架是多功能亚细胞结构,是电离辐射的感受器也是效应器。为了明确长链非编码RNA(lncRNA)是否参与调控电离辐射引起的微丝骨架动力学变化,采用Swinholide A处理诱导细胞微丝骨架解聚之后,进行lncRNA组学分析并验证差异表达的lncRNA;采用鬼笔环肽染色和微丝网络结构分析等方法评价电离辐射引起微丝骨架动力学变化的程度。结果发现,微丝骨架解聚后,lncRNA XR_923426的表达下调;人为上调lncRNA XR_923426的表达水平能够显著缓解辐射导致的微丝骨架结构异常和微丝网络连接减少。这些发现为微丝通过lncRNA调控辐射导致细胞死亡或肿瘤转移的机制提供了新的研究思路,有望成为肿瘤治疗和正常组织辐射防护的新靶点。

关键词：电离辐射长链非编码RNA 微丝细胞骨架

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细胞骨架系统调控花粉管发育的研究进展

中国科学：生命科学 2023年第6期53卷 763-774页

作者：李彤辉王婷任海云北京师范大学生命科学学院细胞增殖与调控生物学教育部重点实验室北京100875 北京师范大学珠海校区自然科学高等研究院生物科技研究中心珠海519085

细胞骨架是真核细胞的重要组成成分,广泛参与了包括细胞形态建成、细胞器运动、胞内物质运输和信息传递等在内的许多细胞生理活动.已有研究表明,细胞骨架系统在开花植物有性生殖的重要环节——花粉萌发及花粉管生长过程中发挥重要作用.... 详细信息

细胞骨架是真核细胞的重要组成成分,广泛参与了包括细胞形态建成、细胞器运动、胞内物质运输和信息传递等在内的许多细胞生理活动.已有研究表明,细胞骨架系统在开花植物有性生殖的重要环节——花粉萌发及花粉管生长过程中发挥重要作用.本文针对该过程中细胞骨架系统的组织结构、动态变化及功能调控等进行系统综述,以期使读者深入理解细胞骨架系统在花粉极性建立和维持过程中的重要作用.

关键词：花粉萌发花粉管生长微丝微管

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稳态磁场对真核生物细胞骨架的影响

科学通报 2019年第8期64卷 748-760页

作者：张磊李志元张欣中国科学院合肥物质科学研究院强磁场科学中心合肥230031

细胞骨架是一种重要的细胞器,主要包括微管、微丝和中间纤维,在维持细胞形态、调控胞内物质运输、调节细胞分裂和细胞迁移等方面起着重要的作用,参与生殖发育和肿瘤发生等多个生理和病理过程,是细胞生物学以及肿瘤生物学领域的重要研究... 详细信息

细胞骨架是一种重要的细胞器,主要包括微管、微丝和中间纤维,在维持细胞形态、调控胞内物质运输、调节细胞分裂和细胞迁移等方面起着重要的作用,参与生殖发育和肿瘤发生等多个生理和病理过程,是细胞生物学以及肿瘤生物学领域的重要研究对象.从二十世纪七八十年代起,关于稳态磁场对真核生物细胞骨架影响的研究在理论解释和实验观测方面都取得了一系列进展.在理论解释方面,研究者不仅计算了肽键的微弱抗磁各向异性,而且进一步计算了微管多聚体较强的抗磁各向异性.在实验观测方面,研究者发现不仅体外纯化的微管或微丝能够沿着强磁场方向排列,并且细胞内由微管或微丝构成的相关结构也会受到稳态磁场的影响,例如纺锤体、精子和草履虫纤毛等.相比之下,磁场对中间纤维的影响研究较少.随着高场磁共振成像(magneticresonanceimaging,MRI)的研发与应用,以及稳态磁场在肿瘤治疗领域的潜在应用的逐步开发,进一步研究不同参数稳态磁场与体内细胞骨架之间的关系对研究和解释磁场对肿瘤发生和生殖发育等的影响至关重要.

关键词：稳态磁场细胞骨架微管微丝抗磁各向异性有丝分裂纺锤体细胞分裂

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果蝇合胞体胚胎中微丝和微管的动态调控

中国细胞生物学学报 2023年第9期45卷 1382-1389页

作者：王国庆尹传淏吕志一中国海洋大学海洋生物多样性与进化研究所青岛266000 中国海洋大学海洋生物多样性与进化教育部重点实验室青岛266000 中国海洋大学海洋生命学院青岛266000 康复大学青岛医院(青岛市市立医院) 青岛266000

果蝇胚胎的卵裂为不完全卵裂,经过十三次细胞核分裂,形成合胞体囊胚。从受精到形成合胞体囊胚,经历了雌雄原核融合、细胞核轴向延伸、皮质迁移、皮质有丝分裂等过程。微丝和微管广泛参与果蝇合胞体胚胎的发育过程。该文梳理了果蝇合胞... 详细信息

果蝇胚胎的卵裂为不完全卵裂,经过十三次细胞核分裂,形成合胞体囊胚。从受精到形成合胞体囊胚,经历了雌雄原核融合、细胞核轴向延伸、皮质迁移、皮质有丝分裂等过程。微丝和微管广泛参与果蝇合胞体胚胎的发育过程。该文梳理了果蝇合胞体胚胎形态发生的细胞学基础以及细胞骨架动态特征,并探讨了果蝇合胞体胚胎的特殊属性对细胞骨架研究的潜在价值。

关键词：果蝇胚胎合胞体微丝微管

转化生长因子β1受体抑制剂SD-208对人增生性瘢痕的作用

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中华烧伤杂志 2016年第7期32卷 389-395页

作者：李明方勇姚敏俞为荣倪涛顾钏杨鹏高毛志刚上海交通大学医学院附属第九人民医院烧伤整形科 201999

目的探讨TGF—β1受体抑制剂SD-208对人增生性瘢痕的作用及其机制。方法取。i废弃人增生性瘢痕组织，分离瘢痕Fb，并进行传代培养，采用第5代细胞进行以下实验。（1）按照随机数字表法（分组方法下同）将细胞分为空白对照组及0．5、1．0... 详细信息

目的探讨TGF—β1受体抑制剂SD-208对人增生性瘢痕的作用及其机制。方法取。i废弃人增生性瘢痕组织，分离瘢痕Fb，并进行传代培养，采用第5代细胞进行以下实验。（1）按照随机数字表法（分组方法下同）将细胞分为空白对照组及0．5、1．0、3．0、5．0μmol／LSD-208组，每组6孔。空白对照组加入lμLPBS，后4组分别加入1μL0．5、1．0、3．0、5．0μmol／LSD-208，培养12h，细胞计数试剂盒8及酶标仪检测细胞增殖活性（以吸光度值表示）。根据细胞增殖活性结果选取适宜物质的量浓度的SD-208用于后续实验。（2）另取细胞，分为空白对照组及1、3μmol／LSD-208组，同（1）处理，每组8孔，Transwell法检测迁移细胞数。（3）另取细胞，同（2）分组处理，罗丹明-鬼笔环肽染色，观察细胞微丝形态。（4）另取细胞，同（2）分组处理，蛋白质印迹法检测TGF—p，蛋白表达。（5）取48只BALB／c裸鼠，分为生理盐水组24只与μmol／LSD-208组24只，于背部做长度为1cm的纵行切口，埋置人增生性瘢痕组织块。伤后7d，生理盐水组与1μmol／LSD-208组裸鼠瘢痕内分别多点注射0．05mL生理盐水及1Ixmol／LSD-208，每日注射1次。于首次给药后0（当日）、2、4、6、8、10、12、14、16、18、20d，取8只裸鼠，电子秤称量体质量；用游标卡尺测量瘢痕面积，计算剩余瘢痕面积百分比。于首次给药后1、2、3周，取出人增生性瘢痕组织块，免疫组织化学染色法检测TGF-β1。蛋白表达。对数据行单因素方差分析、两独立样本t检验。结果（1）空白对照组及0．5、1．0、3．0、5．0μmol／LSD-208组细胞增殖活性分别为1．00±0．03、0．90±0．08、0．68±0．11、0．54±0．04、0．42±0．09，0．5、1．0、3．0、5．0μmol／LSD-208组细胞增殖活性均明显低于空白对照组（t值为2．9～22．1，P〈0．05或P〈0．01）。（2）1、3μmol／LSD-208组迁移细胞数均明显少于空白对照组（t值分别为6．5、6．4，P值均小于0．01）。（3）与空白对照组比较，1、3μmol／LSD-208组细胞的微丝荧光强度减弱，伪足伸出减少。（4）空白对照组及1、3μmol／LSD-208组细胞TGF-β1。蛋白表达量分别为1．00±0．08、0．80±0．08、0．61±0．05，1、3μmol／LSD-208组细胞TGF-β1。蛋白表达量均明显低于空白对照组（t值分别为4．0、9．2，P值均小于0．01）。（5）生理盐水组、1μmol／LSD-208组裸鼠各时相点体质量相近（t值为0．2～1．1，P值均大于0．05）。2组裸鼠剩余瘢痕面积百分比随给药时间延长降低，首次给药后6～20d，μmol／LSD-208组裸鼠剩余瘢痕面积百分比明显小于生理盐水组（t值为1．8～15．9，P〈0．05或P〈0．01）。首次给药后1、2、3周，2组裸鼠体内人增生性瘢痕TGF—β1，蛋白表达量均呈下降趋势，且1μmol／LSD-208组裸鼠体内人增生性瘢痕TGF-B，蛋白表达量明显低于生理盐水组（t值为6．2～19．1，P值均小于0．01）。结论SD-208对人增生性瘢痕有明显的抑制作用，其作用机制与抑制内源性TGF-β1．蛋白表达有关。

关键词：瘢痕转化生长因子β1 细胞增殖细胞运动微丝 SD-208

细胞骨架相关蛋白PDLIM5在人成纤维细胞内的定位及调控作用

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中国临床解剖学杂志 2022年第5期40卷 536-540页

作者：黄小兰彭彦杨宇超樊庭宇孙冰 Asmat Ullah Khan 戴景兴欧阳钧钟世镇南方医科大学基础医学院人体解剖学教研室暨广东省医学生物力学重点实验室广州510515

目的研究细胞骨架相关蛋白PDLIM5在人成纤维细胞内的定位及其调控作用。方法通过慢病毒转染下调PDLIM5在人成纤维细胞中的表达后,进行CCK8细胞增殖实验、细胞划痕实验、Transwell迁移实验来检测PDLIM5对细胞增殖和运动迁移能力的影响,... 详细信息

目的研究细胞骨架相关蛋白PDLIM5在人成纤维细胞内的定位及其调控作用。方法通过慢病毒转染下调PDLIM5在人成纤维细胞中的表达后,进行CCK8细胞增殖实验、细胞划痕实验、Transwell迁移实验来检测PDLIM5对细胞增殖和运动迁移能力的影响,通过免疫荧光染色来观察PDLIM5的亚细胞定位。结果下调PDLIM5表达后抑制了人成纤维细胞的增殖、运动和迁移能力,免疫荧光发现PDLIM5主要表达在细胞质并定位于微丝。结论 PDLIM5定位于细胞骨架微丝,下调PDLIM5表达可抑制人成纤维细胞的增殖、运动和迁移能力。

关键词：人成纤维细胞 PDLIM5 微丝细胞骨架相关蛋白

RIC蛋白家族调控植物发育的分子机制研究进展

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分子植物育种 2022年第8期20卷 2637-2644页

作者：吴雪凝刘敏陈勉张勤芳林德书任慧波柏文婷福建农林大学生命科学学院福州350002 福建农林大学农学院福州350002 福建农林大学海峡联合研究院基础林学与蛋白质组学研究中心福州350002

细胞极性建立和形态建成是植物组织器官发育的关键。根毛、花粉管和子叶铺板细胞已成为研究细胞极性建立以及细胞形态建成的模式系统。植物器官中,细胞形态的形成依赖分子开关传递环境或发育信号。植物中特有的一类小G蛋白(rho of plant... 详细信息

细胞极性建立和形态建成是植物组织器官发育的关键。根毛、花粉管和子叶铺板细胞已成为研究细胞极性建立以及细胞形态建成的模式系统。植物器官中,细胞形态的形成依赖分子开关传递环境或发育信号。植物中特有的一类小G蛋白(rho of plant,ROP)在许多细胞过程中起着信号转导的作用,ROP interactive CRIB-containing proteins(RIC)蛋白家族作为ROP下游的效应蛋白,是植物中特有的蛋白家族,参与ROP介导的复杂的信号网络。目前对RIC的研究主要集中在拟南芥中。本研究通过生物信息学方法对RIC蛋白进行α-螺旋、β-折叠、延伸链、无规则卷曲比例和亚细胞定位进行分析,并总结了RIC在根毛、花粉管和子叶铺板细胞形态建成以及植物适应逆境胁迫中所起的作用。本研究是对RIC蛋白家族系统的总结,将为进一步研究RIC的生物学功能网络提供理论参考。

关键词：拟南芥(Arabidopsis thaliana) 微管微丝 RIC ROP

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微丝错构介导的小金蝠蛾细胞免疫耐受反应

应用昆虫学报 2021年第6期58卷 1305-1311页

作者：倪若尧李苗苗吴佩佩高欣欣张寰秦启联张继红孟茜中国科学院动物研究所农业虫害鼠害综合治理研究国家重点实验室北京100101 中国科学院大学生命科学学院北京100049

【目的】小金蝠蛾Thitarodes xiaojinensis细胞免疫反应耐受冬虫夏草菌Ophiocordyceps sinensis的侵染,是非常独特的宿主昆虫与病原真菌免疫互作的研究模型。本研究旨在明确冬虫夏草菌侵染对小金蝠蛾血细胞形态以及伪足形成相关基因表... 详细信息

【目的】小金蝠蛾Thitarodes xiaojinensis细胞免疫反应耐受冬虫夏草菌Ophiocordyceps sinensis的侵染,是非常独特的宿主昆虫与病原真菌免疫互作的研究模型。本研究旨在明确冬虫夏草菌侵染对小金蝠蛾血细胞形态以及伪足形成相关基因表达的影响,初步解析宿主细胞免疫反应耐受该真菌侵染的机制。【方法】利用扫描电子显微镜技术和激光共聚焦荧光显微技术,分别观察并比较健康小金蝠蛾和感染冬虫夏草菌的小金蝠蛾血细胞的形态差异。通过实时定量PCR技术检测冬虫夏草菌感染前后,宿主血细胞微丝组装相关基因的表达变化。【结果】冬虫夏草菌侵染后,小金蝠蛾血细胞丝状伪足和片状伪足的形成受到抑制;促微丝组装基因DRF显著下调表达(P微丝组装基因thymosin显著上调表达(P微丝的组装受到阻碍,导致血细胞伪足的形成受到抑制,进而使得宿主细胞免疫反应耐受该真菌的侵染。

关键词：冬虫夏草菌小金蝠蛾细胞免疫反应微丝丝状伪足