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弱氧化修饰低密度脂蛋白诱导ECV304组织因子基因表达及银杏内酯B的抑制作用

基础医学与临床 2002年第3期22卷 241-244页

作者：陆晓茜李晓冬祖淑玉朱广瑾中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系北京100005

为研究弱氧化修饰低密度脂蛋白 (mmLDL)对ECV30 4组织因子 (TF)蛋白含量和mRNA水平的影响、对胞浆游离钙离子 ([Ca2 + ]i)的影响 ,以及银杏内酯B等的干预作用。采用ELISA法检测细胞内TF蛋白含量 ,用RT PCR法检测细胞内TFmRNA水平 ,用激... 详细信息

为研究弱氧化修饰低密度脂蛋白 (mmLDL)对ECV30 4组织因子 (TF)蛋白含量和mRNA水平的影响、对胞浆游离钙离子 ([Ca2 + ]i)的影响 ,以及银杏内酯B等的干预作用。采用ELISA法检测细胞内TF蛋白含量 ,用RT PCR法检测细胞内TFmRNA水平 ,用激光共聚焦显微镜观察 [Ca2 + ]i 的变化。结果显示 ,4 0mg LmmLDL作用ECV30 4 4h ,能使TF蛋白含量及mRNA水平显著增加 ,并迅速升高 [Ca2 + ]i。抗氧化剂银杏内酯B及PKC抑制剂Staurosporine可拮抗mmLDL的上述诱导反应。以上结果提示 ,mmLDL可诱导ECV30 4TF表达 ,Ca2 + 与PKC参与mmLDL诱导ECV30 4TF基因表达过程。

关键词：弱氧化修饰低密度脂蛋白组织因子钙 ECV304 银杏内酯B 抑制作用基因表达

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胞浆型磷脂酶A_2介导弱氧化修饰低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡

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生物化学与生物物理进展 2004年第4期31卷 350-355页

作者：王■ 周新汪炳华陈丽达张冀曹金秀武汉大学中南医院基因诊断中心武汉大学医学院生物化学与分子生物学系武汉430071 武汉大学医学院生物化学与分子生物学系

探讨弱氧化修饰低密度脂蛋白 (MM LDL)能否诱导人脐静脉内皮细胞 (HUVECs)凋亡以及胞浆型磷脂酶A2 (cPLA2 )在此过程中的作用 .MTT法测定细胞存活率 ;相差显微镜、荧光显微镜和流式细胞仪检测细胞凋亡 ;3 H 花生四烯酸 (3 H AA)预标法测... 详细信息

探讨弱氧化修饰低密度脂蛋白 (MM LDL)能否诱导人脐静脉内皮细胞 (HUVECs)凋亡以及胞浆型磷脂酶A2 (cPLA2 )在此过程中的作用 .MTT法测定细胞存活率 ;相差显微镜、荧光显微镜和流式细胞仪检测细胞凋亡 ;3 H 花生四烯酸 (3 H AA)预标法测定PLA2 活性 ;蛋白质印迹检测cPLA2 磷酸化 ;激光共聚焦显微镜检测单个细胞内钙离子浓度的变化 .结果表明 ,MM LDL (10 0～ 30 0mg/L)作用后的HUVECs呈现凋亡典型的形态特征 ,凋亡率随MM LDL浓度的增加而上升 .MM LDL能引起胞内钙离子浓度增加 ,cPLA2 的活化及磷酸化 .15 μmol/LAACOCF3 和 5mmol/LEGTA在抑制cPLA2 活性的同时 ,部分抑制MM LDL诱导的HUVECs凋亡 .加入外源性AA (5 0 μmol/L)能逆转AACOCF3 引起的凋亡抑制 .结果提示 ,cPLA2 参与了MM LDL诱导HUVECs凋亡的信号传递 .

关键词：弱氧化修饰低密度脂蛋白钙花生四烯酸内皮细胞细胞凋亡胞浆型磷脂酶A2

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胞浆型磷脂酶A2介导弱氧化修饰低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡

胞浆型磷脂酶A2介导弱氧化修饰低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细...

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2004全国血脂分析及其临床应用学术研讨会、第七届全国脂蛋白学术会议

作者：王韻周新汪炳华陈丽达曹金秀武汉大学中南医院基因诊断中心武汉大学中南医院基因诊断中心武汉大学医学院生物化学与分子生物学系武汉大学医学院生物化学与分子生物学系武汉大学医学院生物化学与分子生物学系

目的探讨弱氧化修饰低密度脂蛋白(MM-LDL)能否诱导人脐静脉内皮细胞(HU-VECs)凋亡以及胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)在此过程中的作用。方法MTT法测定细胞存活率;相差显微镜、荧光显微镜和流式细胞仪检测细胞凋亡;3H-花生四烯酸(3H-AA)预标法测... 详细信息

目的探讨弱氧化修饰低密度脂蛋白(MM-LDL)能否诱导人脐静脉内皮细胞(HU-VECs)凋亡以及胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)在此过程中的作用。方法MTT法测定细胞存活率;相差显微镜、荧光显微镜和流式细胞仪检测细胞凋亡;3H-花生四烯酸(3H-AA)预标法测定PLA2活性;Western blot检测cPLA2磷酸化;激光共聚焦显微镜检测单个细胞内钙离子浓度的变化。结果MM-LDL(100-300μg/ml)作用后的HUVECs呈现凋亡典型的形态特征,凋亡率随MM-LDL浓度的增加而上升。MM-LDL能引起胞内钙离子浓度增加,cPLA2的活化及磷酸化。15(mol/L AACOCF3和5mmol/L EGTA在抑制cPLA2活性的同时,部分抑制MM-LDL诱导的HUVECs凋亡。加入外源性AA(50μmol/L)能逆转AACOCF3引起的凋亡抑制。结论:cPLA2参与了MM-LDL诱导HUVECs凋亡的信号传递。

关键词：弱氧化修饰低密度脂蛋白细胞凋亡胞浆型磷脂酶A2 钙花生四烯酸内皮细胞

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胞浆型磷脂酶A2介导弱氧化修饰低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡

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湖北省暨武汉生物化学与分子生物学学会第八届会员代表大会和第十五次学术年会

作者：王韻周新汪炳华陈丽达曹金秀武汉大学医学院生物化学与分子生物学系武汉大学中南医院基因诊断中心

目的:探讨弱氧化修饰低密度脂蛋白(minimally modified oxidized LDL MM-LDL)能否诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)凋亡,以及cPLA在此过程中的作用。方法:密度梯度离心分离纯化正常人血浆LDL。利... 详细信息

目的:探讨弱氧化修饰低密度脂蛋白(minimally modified oxidized LDL MM-LDL)能否诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)凋亡,以及cPLA在此过程中的作用。方法:密度梯度离心分离纯化正常人血浆LDL。利用亚铁离子氧化法制备MM-LDL。MTT法测定细胞存活率,相差显微镜和荧光显微镜观察凋亡细胞形态学变化,流式细胞仪计数细胞凋亡率。H-花生四烯酸(H-AA)预标法测定PLA活性:蛋白质印迹检测cPLA磷酸化;激光共聚焦显微镜检测单个细胞内钙离子浓度的变化。

关键词：弱氧化修饰低密度脂蛋白细胞凋亡胞浆型磷脂酶 A2 钙花生四烯酸内皮细胞

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mmLDL通过p38 MAPK通路上调小鼠肠系膜动脉ET受体

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中国病理生理杂志 2020年第5期36卷 779-787页

作者：谢希陈琛林杰汤宏霞秦旭平李洁南华大学附属郴州医院郴州市第一人民医院湖南郴州423000 南华大学药物药理研究所湖南衡阳421001

目的:探讨弱氧化修饰低密度脂蛋白(mm LDL)是否通过激活p38 MAPK炎症通路上调小鼠肠系膜动脉内皮素(ET)A型(ETA)和B型(ETB)受体。方法:将昆明小鼠分为正常对照组(尾静脉注射生理盐水)、mm LDL组(尾静脉注射mm LDL)、LDL组(尾静脉注射LDL... 详细信息

目的:探讨弱氧化修饰低密度脂蛋白(mm LDL)是否通过激活p38 MAPK炎症通路上调小鼠肠系膜动脉内皮素(ET)A型(ETA)和B型(ETB)受体。方法:将昆明小鼠分为正常对照组(尾静脉注射生理盐水)、mm LDL组(尾静脉注射mm LDL)、LDL组(尾静脉注射LDL)、mm LDL+SB 203580组(尾静脉注射mm LDL及腹腔注射p38 MAPK抑制剂SB 203580)和mm LDL+DMSO组(尾静脉注射mm LDL及腹腔注射DMSO)。微血管张力描记仪记录ETB受体激动剂角蝰毒素6c和ET-1引起肠系膜动脉收缩的量效曲线;RT-q PCR检测ETB受体、ETA受体和白细胞介素(IL-6)的m RNA表达;ELISA检测血清IL-6的水平;Western blot检测ETB受体、ETA受体、IL-6、p38 MAPK、p-p38MAPK、NF-κB和p-NF-κB的蛋白水平。结果:mm LDL引起ETB受体和ETA受体介导的血管收缩反应显著增强(P蛋白表达显著增加(P蛋白水平显著升高(P<0.01),血清中IL-6水平显著升高(P<0.01);腹腔注射SB 203580抑制了mm LDL的作用。mm LDL引起的IL-6血清浓度升高分别与ETB受体和ETA受体介导的最大收缩率呈正相关。结论:mm LDL通过激活p38 MAPK通路及下游NF-κB转录因子,提高炎症因子IL-6血清水平,增加小鼠肠系膜动脉IL-6、ETA受体和ETB受体表达,增强ETA受体和ETB受体介导的血管收缩功能。

关键词：弱氧化修饰低密度脂蛋白 p38 MAPK信号通路内皮素受体白细胞介素6

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