胞浆型磷脂酶A2介导弱氧化修饰低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡
作者单位:武汉大学医学院生物化学与分子生物学系 武汉大学中南医院基因诊断中心
会议名称:《湖北省暨武汉生物化学与分子生物学学会第八届会员代表大会和第十五次学术年会》
会议日期:2004年
学科分类:1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 10[医学]
关 键 词:弱氧化修饰低密度脂蛋白 细胞凋亡 胞浆型磷脂酶 A2 钙 花生四烯酸 内皮细胞
摘 要:目的:探讨弱氧化修饰低密度脂蛋白(minimally modified oxidized LDL MM-LDL)能否诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)凋亡,以及cPLA在此过程中的作用。方法:密度梯度离心分离纯化正常人血浆LDL。利用亚铁离子氧化法制备MM-LDL。MTT法测定细胞存活率,相差显微镜和荧光显微镜观察凋亡细胞形态学变化,流式细胞仪计数细胞凋亡率。H-花生四烯酸(H-AA)预标法测定PLA活性:蛋白质印迹检测cPLA磷酸化;激光共聚焦显微镜检测单个细胞内钙离子浓度的变化。