检索结果-南通市图书馆

差异凝胶电泳筛选人骨肉瘤细胞多药耐药相关蛋白

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中国肿瘤生物治疗杂志 2008年第5期15卷 440-443,450页

作者：孙大辉张德宝谷贵山吉林大学第一医院骨关节一科长春130021

目的:应用差异凝胶电泳分析骨肉瘤多药耐药细胞株与亲本细胞株蛋白质表达的差别,筛查骨肉瘤细胞多药耐药相关蛋白。方法:以小剂量多柔比星(doxorubicin,DXR)诱导人骨肉瘤细胞株MG-63,建立骨肉瘤多药耐药细胞株MG-63/DXR100。以差异凝胶... 详细信息

目的:应用差异凝胶电泳分析骨肉瘤多药耐药细胞株与亲本细胞株蛋白质表达的差别,筛查骨肉瘤细胞多药耐药相关蛋白。方法:以小剂量多柔比星(doxorubicin,DXR)诱导人骨肉瘤细胞株MG-63,建立骨肉瘤多药耐药细胞株MG-63/DXR100。以差异凝胶电泳分离两组细胞中的全部蛋白质,应用图像扫描和DeCyder软件分析差异(表达增加或减少>30%)表达的蛋白质点,对其进行质谱鉴定,并在Mascot数据库中检索。结果:共检测到明显差异表达的蛋白质点30个,选择其中18个点进行质谱鉴定,有5个蛋白质点鉴定成功,它们分别是与肿瘤细胞转移相关的基质金属蛋白酶1(matrix metalloprotein-ases1,MMP1)、具有解毒功能的乙醇脱氢酶6(alcohol dehydrogenase6,ADH6)、属于抑癌基因的FERM域结合蛋白3(FERM domain containing protein3,FRMD3),以及两个分别由128和300个氨基酸残基构成的未知蛋白。MMP1、ADH6和2种未知蛋白在耐药细胞表达显著高于非耐药细胞组,而FRMD3表达显著显著低于非耐药细胞。结论:通过差异凝胶电泳筛查到,MMP1、ADH6、FRMD3及2种未知蛋白质在骨肉瘤细胞的多药耐药细胞和非耐药细胞中差异表达,它们可能参与骨肉瘤细胞的多药耐药机制。

关键词：差异凝胶电泳骨肉瘤细胞多药耐药基质金属蛋白酶1 乙醇脱氢酶6 FERM域结合蛋白3

人高转移性和低转移性前列腺癌细胞株荧光差异凝胶电泳图像分析

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吉林大学学报（医学版） 2008年第2期34卷 343-346页

作者：李群李一雷常明杨新宇王志新梅红夏阳李玉林吉林大学基础医学院病理生物学教育部重点实验室吉林长春130021 吉林大学第一医院神经内科吉林长春130021 吉林大学第二医院普通外科吉林长春130041 吉林大学中日联谊医院泌尿外科吉林长春130033 吉林大学第二医院病理科吉林长春130041

目的:比较人高转移性前列腺癌细胞株(PC-3M)和人低转移性前列腺癌细胞株(PC-3)间差异表达的蛋白质,拟发现早期诊断和逆转前列腺癌转移的分子标志物。方法:应用差异凝胶电泳(DIGE),分离PC-3M和PC-3细胞株的总蛋白,用图像分析软件比较分... 详细信息

目的:比较人高转移性前列腺癌细胞株(PC-3M)和人低转移性前列腺癌细胞株(PC-3)间差异表达的蛋白质,拟发现早期诊断和逆转前列腺癌转移的分子标志物。方法:应用差异凝胶电泳(DIGE),分离PC-3M和PC-3细胞株的总蛋白,用图像分析软件比较分析并识别细胞间的差异表达蛋白质。结果:应用DIGE进行分离后,成功地获得了蛋白质组分辨率高、重复性好的双向凝胶电泳图谱,用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)成功鉴定出11种蛋白质,其中9个蛋白质点仅在PC-3中有表达,2个蛋白质点仅在PC-3M中有表达。结论:人高、低转移前列腺癌细胞株的蛋白质组表达存在明显差异,这些差异蛋白质有可能为进一步发现前列腺癌转移相关分子和阐明前列腺癌侵袭转移的分子机制提供实验证据。

关键词：蛋白质组差异凝胶电泳人前列腺癌细胞株差异表达

应用差异凝胶电泳及质谱技术筛选肺癌患者血浆差异蛋白

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上海交通大学学报（医学版） 2010年第4期30卷 399-403页

作者：沙慧芳孙强玲杨晓华储天晴谢银银鲁静包国良冯久贤龚乐罗上海交通大学胸科医院基础研究室 200030 上海交通大学胸科医院.肺内科 200030 上海交通大学胸科医院医学院瑞金医院血液学研究所 200025

目的建立健康者、肺部炎症患者和肺癌患者的血浆蛋白表达谱,寻找与肺癌早期发生相关的差异蛋白。方法应用差异凝胶电泳(DIGE)和基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对健康者、肺部炎症患者和Ⅰ期肺癌患者血浆进行蛋白质组学比... 详细信息

目的建立健康者、肺部炎症患者和肺癌患者的血浆蛋白表达谱,寻找与肺癌早期发生相关的差异蛋白。方法应用差异凝胶电泳(DIGE)和基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对健康者、肺部炎症患者和Ⅰ期肺癌患者血浆进行蛋白质组学比较研究,寻找肺癌相关差异蛋白。结果应用DIGE进行分离后,成功获得了蛋白质组分辨率高、重复性好的双向凝胶电泳图谱;DeCyder 6.5软件分析获得差异大于2倍的蛋白质点共有72个;质谱鉴定去冗余后确定了12种蛋白质,其中7种与肿瘤相关,分别为酰基辅酶A合成酶家族成员3、抗血小板膜糖蛋白Ⅰb特异性抗体、γ-纤维蛋白原、4型血清淀粉样蛋白A、补体因子H、钙结合微丝蛋白、载脂蛋白Ⅰ。结论应用DIGE及MALDI-TOF-MS分离并初步鉴定了12种蛋白质,筛选出7种在肺癌患者血浆中高表达的肿瘤相关蛋白。

关键词：差异凝胶电泳蛋白组学血浆肺癌

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矮化杉木蛋白质组的差异凝胶电泳分析

浙江林学院学报 2006年第3期23卷 265-269页

作者：黄华宏童再康朱玉球高燕会许长寿何福基浙江林学院林业与生物技术学院浙江临安311300 浙江省临安市马啸乡林业站浙江临安311323

建立具有高分辨率和稳定性的矮化杉木Cunninghamia lanceolata叶片蛋白质的双向电泳图谱,研究杉木矮化突变的机理。取同一生长环境下的野生型杉木及矮化突变型杉木新梢顶端的叶片,液氮研磨成粉末后用改良TCA-丙酮沉淀法提取总蛋白,分别... 详细信息

建立具有高分辨率和稳定性的矮化杉木Cunninghamia lanceolata叶片蛋白质的双向电泳图谱,研究杉木矮化突变的机理。取同一生长环境下的野生型杉木及矮化突变型杉木新梢顶端的叶片,液氮研磨成粉末后用改良TCA-丙酮沉淀法提取总蛋白,分别用CY2和CY3标记,用DIGE技术进行分析。与野生型杉木相比,在矮化突变型杉木的叶片组织中,有14个蛋白质表达水平显著增加,另外15个蛋白质表达水平显著下降。所得的29个差异蛋白质可能与杉木矮化突变的发生有关。

关键词：林木遗传育种学杉木矮化突变蛋白质组差异凝胶电泳

紫杉醇耐药细胞与敏感细胞分泌蛋白差异凝胶电泳分析

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中国肺癌杂志 2009年第7期12卷 735-740页

作者：孙强玲杨晓华鲁静谢银银储天晴沙慧芳上海交通大学附属胸科医院基础研究室上海200030 上海交通大学附属瑞金医院血液研究所上海200025 上海交通大学附属胸科医院肺内科上海200030

背景与目的紫杉醇是用于肺癌临床一线治疗的作用于微管蛋白的化疗药物,而耐药是影响其疗效的关键因素。本研究应用蛋白组学技术整体比较紫杉醇耐药细胞与敏感细胞分泌蛋白表达谱,以期发现肺癌紫杉醇耐药相关分泌蛋白标志物,为临床选择... 详细信息

背景与目的紫杉醇是用于肺癌临床一线治疗的作用于微管蛋白的化疗药物,而耐药是影响其疗效的关键因素。本研究应用蛋白组学技术整体比较紫杉醇耐药细胞与敏感细胞分泌蛋白表达谱,以期发现肺癌紫杉醇耐药相关分泌蛋白标志物,为临床选择有针对性的化疗药物提供依据。方法收集A549亲代及耐药细胞培养液中的蛋白,应用差异凝胶电泳(DIGE)进行分离,Decyder 6.5软件分析后获得的差异蛋白点通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行鉴定。结果应用DIGE进行分离后,成功获得了蛋白质组分辨率高、重复性好的双向凝胶电泳图谱,Decyder 6.5软件分析获得差异>2倍以上的蛋白质点共有76个,经质谱鉴定了19种蛋白,鉴定的蛋白涉及代谢酶类、细胞外基质降解酶类、粘附分子、细胞因子和信号转导相关蛋白质。结论本研究首次应用双向电泳技术整体展示了紫杉醇耐药细胞株及敏感细胞株的分泌蛋白表达谱,并分析、鉴定、筛选出与紫杉醇耐药相关的差异分泌蛋白。该研究为非小细胞肺癌血清耐药标志物的筛选提供了新的方法和候选分子。

关键词：差异凝胶电泳蛋白组学分泌蛋白紫杉醇肺肿瘤

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不稳定性心绞痛血瘀证的血浆蛋白质组学研究

化学学报 2009年第2期67卷 167-173页

作者：赵慧辉王伟北京中医药大学研究生院北京100029

为了寻找冠心病不稳定性心绞痛血瘀证血浆差异表达蛋白,探索冠心病不稳定性心绞痛血瘀证的蛋白质组学特点,采用差异凝胶双向电泳和质谱联用技术对12例冠心病不稳定性心绞痛血瘀证患者和12例健康人血浆进行比较研究.初步发现了Fibrinogen... 详细信息

为了寻找冠心病不稳定性心绞痛血瘀证血浆差异表达蛋白,探索冠心病不稳定性心绞痛血瘀证的蛋白质组学特点,采用差异凝胶双向电泳和质谱联用技术对12例冠心病不稳定性心绞痛血瘀证患者和12例健康人血浆进行比较研究.初步发现了Fibrinogen β chain,Fibrinogen γ chain,α1-Antitrypsin,Haptoglobin β chain,Haptoglobin α2 chain在冠心病不稳定性心绞痛血瘀证患者中高表达,ApoA-IV,ApoA-I,Transthyretin,ApoJ在冠心病不稳定性心绞痛血瘀证患者中低表达.差异表达蛋白根据功能可分为以下三类:(1)急性时相反应负相蛋白;(2)载脂蛋白;(3)凝血相关蛋白.冠心病不稳定性心绞痛血瘀证可能与炎症反应、脂代谢紊乱以及凝血功能异常相关.

关键词：心绞痛血瘀证差异凝胶电泳蛋白质组生物标志物

荧光双向电泳和串联质谱技术检测卵巢上皮癌血清标志物的研究

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中华肿瘤杂志 2008年第10期30卷 754-758页

作者：赵群段微吴玉梅钱小红邓小虹首都医科大学附属北京妇产医院肿瘤科 100026 北京蛋白质组研究中心

目的通过差异蛋白质组学的方法寻找卵巢上皮癌血清标志物，以提高卵巢癌诊断的灵敏度和特异度。方法收集103例卵巢上皮癌、60例正常对照、63例卵巢良性肿瘤和63例盆腔良性病变患者的血清。按照患者年龄匹配，选取卵巢上皮癌、盆腔良性... 详细信息

目的通过差异蛋白质组学的方法寻找卵巢上皮癌血清标志物，以提高卵巢癌诊断的灵敏度和特异度。方法收集103例卵巢上皮癌、60例正常对照、63例卵巢良性肿瘤和63例盆腔良性病变患者的血清。按照患者年龄匹配，选取卵巢上皮癌、盆腔良性病变、卵巢良性肿瘤和正常对照者血清各20例，等容积混合，去除高丰度白蛋白和IgG后，进行荧光双向电泳（2-DE DIGE），实验重复3次。以DyCyder软件分析得出有显著差异的蛋白质点，以基质辅助激光解吸离子飞行时间串联质谱（MALDI TOF／TOF）鉴定差异蛋白质，分别采用Western blot和酶联免疫吸附实验（ELISA）验证获选的血清标志物。结果2-DEDIGE得出有显著差异的蛋白质点41个，MALDI TOF／TOF成功鉴定出其中的28个蛋白质。上调最显著的蛋白质为结合珠蛋白（Hp），下调最显著的蛋白质为转铁蛋白（Tf）。Western blot和ELISA验证结果显示，Hp和Tf在卵巢上皮癌与正常对照、卵巢上皮癌与卵巢良性肿瘤、卵巢上皮癌与盆腔良性病变之间的差异有统计学意义（均P=0．000）。CA125＋Hp＋Tf联合检测诊断卵巢上皮癌的灵敏度（81．6％）和特异度（76．9％）高于CA125（78．6％和70．4％）、Hp（69．9％和70．4％）和Tf（66．0％和70．4％）单独检测。结论Hp和Tf是卵巢上皮癌血清中差异表达的蛋白质，可作为卵巢上皮癌的血清标志物，CA125＋Hp＋Tf联合检测有助于提高卵巢上皮癌诊断的灵敏度和特异度。

关键词：卵巢肿瘤肿瘤标志物蛋白质组学差异凝胶电泳串联质谱结合珠蛋白转铁蛋白诊断

卵巢癌顺铂化疗耐药细胞中细胞核自身抗原精子蛋白的表达

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中华医学杂志 2010年第1期90卷 61-63页

作者：王慧香谭岩清华大学附属玉泉医院妇产中心北京100049 吉林大学第一医院中心实验室

目的探讨细胞核自身抗原精子蛋白（NASP）在卵巢癌顺铂化疗耐药细胞中的表达。方法分别提取卵巢癌顺铂耐药和敏感细胞的蛋白质，应用差异凝胶电泳（DIGE），通过Decyder^TM分析软件获得差异表达蛋白质点，进行基质辅助激光解吸／电离飞... 详细信息

目的探讨细胞核自身抗原精子蛋白（NASP）在卵巢癌顺铂化疗耐药细胞中的表达。方法分别提取卵巢癌顺铂耐药和敏感细胞的蛋白质，应用差异凝胶电泳（DIGE），通过Decyder^TM分析软件获得差异表达蛋白质点，进行基质辅助激光解吸／电离飞行时间质谱（MALDI—TOF-MS）分析、鉴定。结果DIGE分析胶经BVA软件分析发现卵巢癌顺铂耐药细胞中1个表达明显降低的差异蛋白质点，此蛋白质点在耐药细胞中表达下调了21％（P〈0．01）。经质谱分析确认为细胞核自身抗原精子蛋白。结论NASP蛋白的鉴定为深入研究卵巢癌顺铂化疗耐药机制奠定了基础。

关键词：卵巢癌耐药细胞核自身抗原精子蛋白差异凝胶电泳

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专家答疑

中华检验医学杂志 2006年第7期 582-582页

作者：秦雪

问:什么是蛋白质组学?答: 1994年澳大利亚Maequaie大学的Wilkins和Williams等在意大利的一次科学会议上首次提出了蛋白质组(proteome)这个新概念,定义为“蛋白质组指的是一个基因组所表达的蛋白质”,即“PROTEOME”是由蛋白质的“PROTE... 详细信息

问:什么是蛋白质组学?答: 1994年澳大利亚Maequaie大学的Wilkins和Williams等在意大利的一次科学会议上首次提出了蛋白质组(proteome)这个新概念,定义为“蛋白质组指的是一个基因组所表达的蛋白质”,即“PROTEOME”是由蛋白质的“PROTE”和基因组的“OME”字母拼接而成。现在比较公认的概念是:一个给定的细胞或有机体在一定时间表达的所有

关键词：双向凝胶电泳编辑收稿日期疾病蛋白质组学等电点差异凝胶电泳张莉修饰状态