紫杉醇耐药细胞与敏感细胞分泌蛋白差异凝胶电泳分析

作     者：孙强玲 杨晓华 鲁静 谢银银 储天晴 沙慧芳 Qiangling SUN;Xiaohua YANG;Jing LU;Yinyin XIE;Tianqing CHU;Huifang SHA

作者机构：上海交通大学附属胸科医院基础研究室上海200030 上海交通大学附属瑞金医院血液研究所上海200025 上海交通大学附属胸科医院肺内科上海200030 

出 版 物：《中国肺癌杂志》 (Chinese Journal of Lung Cancer)

年 卷 期：2009年第12卷第7期

页      面：735-740页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：上海市市级医院新兴前沿技术联合攻关项目(沙慧芳)(No.SHDC12007103) 上海市癌症研究慈善基金(孙强玲)资助~~ 

主　　题：差异凝胶电泳 蛋白组学 分泌蛋白 紫杉醇 肺肿瘤 

摘      要：背景与目的紫杉醇是用于肺癌临床一线治疗的作用于微管蛋白的化疗药物,而耐药是影响其疗效的关键因素。本研究应用蛋白组学技术整体比较紫杉醇耐药细胞与敏感细胞分泌蛋白表达谱,以期发现肺癌紫杉醇耐药相关分泌蛋白标志物,为临床选择有针对性的化疗药物提供依据。方法收集A549亲代及耐药细胞培养液中的蛋白,应用差异凝胶电泳(DIGE)进行分离,Decyder 6.5软件分析后获得的差异蛋白点通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行鉴定。结果应用DIGE进行分离后,成功获得了蛋白质组分辨率高、重复性好的双向凝胶电泳图谱,Decyder 6.5软件分析获得差异2倍以上的蛋白质点共有76个,经质谱鉴定了19种蛋白,鉴定的蛋白涉及代谢酶类、细胞外基质降解酶类、粘附分子、细胞因子和信号转导相关蛋白质。结论本研究首次应用双向电泳技术整体展示了紫杉醇耐药细胞株及敏感细胞株的分泌蛋白表达谱,并分析、鉴定、筛选出与紫杉醇耐药相关的差异分泌蛋白。该研究为非小细胞肺癌血清耐药标志物的筛选提供了新的方法和候选分子。