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左、右归丸干预PGC-1α/PPARγ对BMSCs线粒体生物发生的影响

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中国实验方剂学杂志 2025年

作者：杨莹冯秀芝陈怡然王智民郭晛任艳玲辽宁中医药大学辽宁中医药大学附属医院

目的：基于“阳化气，阴成形”理论，探讨左、右归丸通过过氧化物酶体增殖激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)影响大鼠骨髓间充质干细胞成脂分化过程中线粒体生物发生的分子机制，为左、右归丸防... 详细信息

目的：基于“阳化气，阴成形”理论，探讨左、右归丸通过过氧化物酶体增殖激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)影响大鼠骨髓间充质干细胞成脂分化过程中线粒体生物发生的分子机制，为左、右归丸防治绝经后骨质疏松症（PMOP）奠定更多理论依据。方法：将骨髓间充质干细胞（BMSCs）分为成脂诱导组（MX组）、左归丸组（ZGW组）、右归丸组（YGW组）、补佳乐组（BJL组），采用流式细胞仪进行细胞鉴定；噻唑蓝（MTT）法绘制BMSCs的生长曲线，并检测左、右归丸对BMSCs增殖的影响；油红O染色法检测脂滴的形成；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测成脂相关因子PPARγ、C/EBPα、C/EBPβ、脂蛋白脂肪酶（LPL）蛋白，棕色脂肪相关蛋白PGC-1α、UCP1、PRDM16蛋白，线粒体生物发生相关PGC-1α、核呼吸因子1（NRF1）、核转录因子红系2相关因子2（NRF2）、TFAM蛋白的表达；RT-qPCR法检测成脂相关因子PPARγ、C/EBPα、C/EBPβ、LPL基因以及CytoB mtDNA拷贝数的表达；透射电镜观察线粒体超微结构。结果：与MX组比较，各给药组BMSCs增殖能力随干预时间增强而增强，药物干预后脂滴明显减少，成脂相关PPARγ、C/EBPα、C/EBPβ、LPL mRNA及蛋白表达水平显著下调（P左、右归丸均能通过PGC-1α/PPARγ影响BMSCs线粒体生物发生以防治PMOP。

关键词：左归丸右归丸绝经后骨质疏松症 PGC-1α 线粒体生物发生

左归丸对老年大鼠大脑皮质8-羟基脱氧鸟苷酸的调节作用

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复旦学报（医学版） 2002年第3期29卷 208-210页

作者：赵刚蔡定芳范钰袁中君复旦大学中西医结合研究所上海200040 复旦大学附属华山医院消化科上海200040 沈阳市第五人民医院中医科沈阳110023

目的　探讨老龄大鼠大脑皮质基因组DNA中 8 羟基 2′ 脱氧鸟苷 (8 OH dG)变化规律和左归丸的调节作用。方法　建立 2 4月龄自然衰老实验模型 ,随机分为老年组 (生理盐水灌胃 )和治疗组 (左归丸灌胃 ) ,处理 3个月 ;以 3月龄大鼠为青年... 详细信息

目的　探讨老龄大鼠大脑皮质基因组DNA中 8 羟基 2′ 脱氧鸟苷 (8 OH dG)变化规律和左归丸的调节作用。方法　建立 2 4月龄自然衰老实验模型 ,随机分为老年组 (生理盐水灌胃 )和治疗组 (左归丸灌胃 ) ,处理 3个月 ;以 3月龄大鼠为青年对照组。取大脑皮质 ,抽提DNA ,采用酶联免疫吸附法 (ELISA)测定 8 OH dG水平。结果　老龄大鼠大脑皮质基因组DNA 8 OH dG水平比青年对照组明显升高 ,左归丸组低于老年组 (P <0 .0 5)。结论　8 OH dG在大脑皮质老化过程中上调。

关键词：衰老大脑皮质 8-羟基-2′-脱氧鸟苷酶联免疫吸附法左归丸老龄大鼠

左归丸对老龄大鼠海马糖皮质激素受体位点及其基因表达的影响

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复旦学报（医学版） 2002年第5期29卷 357-360页

作者：赵刚蔡定芳陈伟华陈元新范钰复旦大学中西医结合研究所上海200040 复旦大学附属华山医院核医学科上海200040 复旦大学附属华山医院消化科上海200040

目的　观察左归丸 (ZGW)对老龄大鼠海马糖皮质激素受体 (GR)位点及其基因表达的影响。方法　以2 4月龄大鼠为自然老化模型 ,随机分为老龄组、左归丸组 ,并以 3月龄大鼠为青龄组 ,各组处理 3个月。采用放射配基饱和分析技术及RT PCR方法... 详细信息

目的　观察左归丸 (ZGW)对老龄大鼠海马糖皮质激素受体 (GR)位点及其基因表达的影响。方法　以2 4月龄大鼠为自然老化模型 ,随机分为老龄组、左归丸组 ,并以 3月龄大鼠为青龄组 ,各组处理 3个月。采用放射配基饱和分析技术及RT PCR方法检测大鼠海马GR位点及GRmRNA表达。结果　老龄组、青龄组及左归丸组海马GR位点分别为 (439.6 4± 4 8.0 9)、(85 0 .32± 34.96 )和 (1171.5 7± 5 4 .85 )fmol/mg蛋白 ,老龄组明显低于青龄组 (P 左归丸组较老龄组明显上调 (P 左归丸组海马GRmRNA表达量明显高于老龄组 (P <0 .0 0 1)。

关键词：左归丸老龄大鼠海马糖皮质激素受体基因表达中药药理

基于自噬与凋亡机制研究左归丸对化疗损伤颗粒细胞及膜细胞的影响

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生物化学与生物物理进展 2022年第9期49卷 1741-1750页

作者：刘涛孙晓峰曾贵荣黄欣怡曾文卓龚力民阳松威刘梦琳湖南中医药大学医学院长沙410208 湖南中医药大学医学院组织学与胚胎学教研室长沙410208 湖南省药物安全评价研究中心&新药药效与安全性评价湖南省重点实验室长沙410331 中南大学湘雅三医院心内科长沙410006 湖南中医药大学药学院长沙410208

目的探讨左归丸含药血清对化疗损伤性颗粒细胞和膜细胞的影响及作用机制。方法制备左归丸含药血清,培养大鼠卵巢颗粒细胞和膜细胞,使用磷酰胺氮芥造模分组后给药。CCK-8法测定颗粒细胞和膜细胞存活率,实时荧光定量PCR法(RT-PCR)及蛋白... 详细信息

目的探讨左归丸含药血清对化疗损伤性颗粒细胞和膜细胞的影响及作用机制。方法制备左归丸含药血清,培养大鼠卵巢颗粒细胞和膜细胞,使用磷酰胺氮芥造模分组后给药。CCK-8法测定颗粒细胞和膜细胞存活率,实时荧光定量PCR法(RT-PCR)及蛋白质免疫印迹法(Western blot)分别检测卵巢自噬启动因子Beclin-1、微管结合蛋白轻链3(LC3B)、自噬受体蛋白p62、凋亡蛋白Bax、Caspase3在转录水平和翻译水平上的表达。结果10%左归丸含药血清对于细胞存活的挽救率最高。Beclin-1、LC3B、Bax、Caspase3在磷酰胺氮芥作用的颗粒细胞和膜细胞中,相对于空白对照组有高表达(P左归丸含药血清可下调上述蛋白质在模型组中的表达(P左归丸含药血清可上调模型组p62的表达(P左归丸含药血清能缓解由此带来的损伤,同时影响了颗粒细胞和膜细胞自噬和凋亡过程。在磷酰胺氮芥损伤颗粒细胞的过程和10%左归丸含药血清缓解其损伤过程中均存在自噬与凋亡串流(cross-talk)。

关键词：左归丸化疗颗粒细胞膜细胞自噬凋亡

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左归丸对去势大鼠钙转运通路相关蛋白的影响

中国实验方剂学杂志 2020年第2期26卷 13-18页

作者：唐皓余娜仇湘中王哲享湖南省中医药研究院附属医院长沙410006 湖南中医药大学长沙410208

目的:探讨左归丸对去势大鼠骨密度和骨组织中钙转运通路相关蛋白的影响。方法:选取48只雌性SD大鼠,随机分为正常组,假手术组,模型组,尼尔雌醇组(0.167 mg·kg^-1),左归丸低、高剂量组(9.6,38.4 g·kg^-1)。除假手术组和正常组,其余组切... 详细信息

目的:探讨左归丸对去势大鼠骨密度和骨组织中钙转运通路相关蛋白的影响。方法:选取48只雌性SD大鼠,随机分为正常组,假手术组,模型组,尼尔雌醇组(0.167 mg·kg^-1),左归丸低、高剂量组(9.6,38.4 g·kg^-1)。除假手术组和正常组,其余组切除大鼠卵巢,造模成功后3个月进行各组干预。3个月后处死大鼠,检测大鼠骨密度(BMD)和骨代谢标志物;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测钙转运通路(骨组织)瞬时受体电位通道V5(TRPV5),钙结合蛋白-D28K(CaBP-D28K),钠钙交换器1(NCX1)和细胞膜钙汞(PMCA1b)蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组血钙降低(P左归丸高剂量组和尼尔雌醇组大鼠血钙显著升高(P左归丸高剂量组与尼尔雌醇组大鼠BMD均有改善(P左归丸高剂量组中TRPV5蛋白表达有显著下调(P左归丸低剂量组和尼尔雌醇组内表达均有不同程度下调(P左归丸可不同程度的降低大鼠破骨细胞中TRPV5,CAPB-D28K,PMCA1b,NCX1等介导破骨细胞吸收钙离子的重要通道蛋白的表达,左归丸的抗骨质疏松机理有可能是通过抑制TRPV5介导的破骨细胞的骨吸收而起作用。

关键词：左归丸去势大鼠瞬时受体电位通道V5(TRPV5) 钙结合蛋白-D28K(CaBP-D28K) 钠钙交换器1(NCX1) 质膜钙离子ATP酶1b(PMCA1b)

左归丸促初老大鼠生殖器官血管生成与EPCs促动员因素GM-CSF、SDF-1及其受体关系的研究

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中国中药杂志 2023年第16期48卷 4467-4474页

作者：宋谦谦段恒彭万春魏小晶重庆医科大学中医药学院中医药防治代谢性疾病重庆市重点实验室重庆400016

该实验旨在研究左归丸促进初老大鼠生殖器官卵巢、阴道血管生成与内皮祖细胞(EPCs)促动员因素粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、基质细胞衍生因子-1(SDF-1)及其受体的关系,探讨左归丸改善初老大鼠生殖功能低下的作用机制。采用超高效... 详细信息

该实验旨在研究左归丸促进初老大鼠生殖器官卵巢、阴道血管生成与内皮祖细胞(EPCs)促动员因素粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、基质细胞衍生因子-1(SDF-1)及其受体的关系,探讨左归丸改善初老大鼠生殖功能低下的作用机制。采用超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)对左归丸浸膏进行中药化学成分分析。然后选用14月龄动情周期紊乱的雌性初老大鼠40只,随机分为初老空白组、结合雌激素组、左归丸低剂量组、左归丸高剂量组,每组各10只;另外选用10只4月龄雌性大鼠作为青年对照组。初老空白组和青年对照组均用20 g·kg-1蒸馏水灌胃,结合雌激素组用65μg·kg-1结合雌激素悬液进行灌胃,低剂量组用11g·kg-1左归丸浸膏灌胃,高剂量组用33 g·kg-1左归丸浸膏进行灌胃,每日1次,连续灌胃15 d。收集各组大鼠血清,用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测血清中促EPCs动员因素SDF-1、GM-CSF水平;苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察卵巢各级卵泡数目、黄体数目、阴道上皮层数、阴道皱襞数以及卵巢、阴道组织血管等在用药组的变化;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测卵巢、阴道组织雌激素受体(ER)、粒-巨噬细胞集落刺激因子受体(GM-CSFR)、趋化因子受体(CXCR)4、CXCR7蛋白表达水平。结果发现,初老空白组大鼠黄体数、各级生长卵泡数和血管数减少(P左归丸可能通过上调EPCs促动员因素SDF-1、GM-CSF及其受体水平,进而促进卵巢、阴道血管生成,改善初老大鼠生殖功能。

关键词：左归丸生殖器官血管生成内皮祖细胞粒-巨噬细胞集落刺激因子基质细胞衍生因子-1

左归丸对去卵巢大鼠下丘脑Orexin及其受体mRNA表达的影响

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中国实验方剂学杂志 2019年第18期25卷 9-15页

作者：叶素敏谭峰刘飞祥徐道明柴毅张明玥樊巧玲南京中医药大学基础医学院南京210029 江苏省中医院南京210029

目的:观察去卵巢骨质疏松症大鼠下丘脑食欲素(Orexin)及其受体mRNA水平,探讨绝经后骨质疏松症(PMOP)的发病机制以及左归丸的作用机制。方法:去势法建立骨质疏松症模型,32只雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、雌二醇组和左归丸组,每组... 详细信息

目的:观察去卵巢骨质疏松症大鼠下丘脑食欲素(Orexin)及其受体mRNA水平,探讨绝经后骨质疏松症(PMOP)的发病机制以及左归丸的作用机制。方法:去势法建立骨质疏松症模型,32只雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、雌二醇组和左归丸组,每组8只。灌胃给药12周后,通过显微CT(μ-CT)检测股骨骨密度(BMD)和骨小梁微观三维形态结构,苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠骨组织形态学变化,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清骨转换标志物骨钙素(OCN),I型前胶原氨基端前肽(PINP),抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠下丘脑Orexin,食欲素受体1(OX1R)和食欲素受体2(OX2R) mRNA表达水平。结果:与假手术组比较,μ-CT示模型组大鼠BMD,骨体积分数(BV/TV),骨小梁厚度(Tb. Th)和骨小梁数量(Tb. N)显著下降(P 左归丸治疗后,大鼠BMD,BV/TV,Tb. Th,Tb. N升高(P 左归丸可通过上调下丘脑Orexin及其受体mRNA表达,从而纠正骨代谢失衡,改善骨小梁微结构,提高骨密度,发挥治疗PMOP的作用。

关键词：左归丸绝经后骨质疏松症食欲素食欲素受体1 食欲素受体2

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左归丸防治骨质疏松症的动物模型和评价方法

中国实验方剂学杂志 2019年第18期25卷 16-23页

作者：刘飞祥林子璇徐道明叶素敏张明玥樊巧玲谭峰李星柴毅尚文斌卢圣峰南京中医药大学基础医学院第一临床医学院国家重点省部共建针药结合实验室南京210023 南京中医药大学附属医院南京210029

左归丸是滋阴补肾、填精益髓的经典名方,体现了'阳中求阴'的配伍思路,是防治骨质疏松症(OP)的常用有效方剂之一。OP动物模型模拟了OP在人体的病理状态和发病机制,是OP防治和新药研发的重要手段。该文详细论述了左归丸防治OP的2大类常用... 详细信息

左归丸是滋阴补肾、填精益髓的经典名方,体现了'阳中求阴'的配伍思路,是防治骨质疏松症(OP)的常用有效方剂之一。OP动物模型模拟了OP在人体的病理状态和发病机制,是OP防治和新药研发的重要手段。该文详细论述了左归丸防治OP的2大类常用动物模型和特点,即原发性OP动物模型,包括去卵巢法动物模型和自发性老年OP动物模型;继发性OP动物模型,包括糖皮质激素诱导性动物模型,环磷酰胺诱导性动物模型以及肾大部切除性动物模型。左归丸防治OP的效用评价,包括酶联免疫吸附测定实验检测骨吸收标记物和骨形成标记物含量,双能X射线检测骨密度,显微CT分析骨小梁数量、骨小梁分离度、骨小梁厚度、骨体积/组织体积比以及骨表面/体积比,以衡量骨微结构水平,苏木精-伊红染色法观察骨病理形态,生物力学实验测试骨最大载荷力等生物力学特性。OP动物模型的成功与否,以及左归丸的药效作用,必须与5种不同的客观评价方法结合起来进行综合衡量,才能为左归丸的基础和临床研究提供科学的参考依据。但OP动物模型有待进一步优化,以凸显左归丸治疗OP的中医病机和证候特征。

关键词：左归丸骨质疏松动物模型评价方法

左归丸对妊娠糖尿病大鼠血清相关指标及胰腺PDX-1表达的影响

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中国实验方剂学杂志 2020年第19期26卷 114-119页

作者：王超群王永辉刘涛许凯霞赵乐周然湖北中医药大学武汉430065 山西中医药大学太原030024

目的:研究左归丸母代干预对妊娠糖尿病(GDM)模型大鼠血清及以胰腺指标改善作用的影响。方法:通过雌雄同笼及腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法复制GDM孕鼠模型,采用随机数字表法将孕鼠分为正常组,模型组,门冬胰岛素组(20 U·kg^-1),左归丸... 详细信息

目的:研究左归丸母代干预对妊娠糖尿病(GDM)模型大鼠血清及以胰腺指标改善作用的影响。方法:通过雌雄同笼及腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法复制GDM孕鼠模型,采用随机数字表法将孕鼠分为正常组,模型组,门冬胰岛素组(20 U·kg^-1),左归丸低、中、高剂量组(2.5,5.0,10.0 g·kg^-1)。各组分别灌服相应药物2周,正常组和模型组予以等体积生理盐水,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清胰岛素,空腹血糖(FBG),及炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-8(IL-8)的水平;蛋白免疫印迹法(Western blot),实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠胰腺十二指肠同源盒因子-1(PDX-1)蛋白及mRNA的表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠空腹血糖及炎性因子TNF-α,IL-6均显著升高(P左归丸中剂量组血糖及炎性因子TNF-α,IL-6,IL-8显著降低(P左归丸可能通过降低GDM大鼠血清炎性因子水平,减少炎症反应及氧化应激反应的发生,以提升胰岛素的分泌,同时上调PDX-1蛋白和mRNA的表达,改善胰岛素抵抗,减少胰岛β细胞的损伤,降低大鼠血糖。

关键词：左归丸妊娠糖尿病胰腺十二指肠同源盒因子1 炎性因子肿瘤坏死因子-α