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检验检疫科学 2009年第2期19卷 12-15页

作者：粟智平耿金培鲁闽张京萱王颖烟台出入境检验检疫局山东烟台264000

马铃薯黑环斑病毒(Potato black ringspot virus,PBRSV)是马铃薯重要病毒病害之一。本研究根据PBRSV基因组中RNA依赖的RNA聚合酶(RDRP)保守序列,设计合成了两对巢式PCR引物和1条Taq-MAN荧光探针,建立了巢式-多重rt-Realtime PCR检测PBRS... 详细信息

马铃薯黑环斑病毒(Potato black ringspot virus,PBRSV)是马铃薯重要病毒病害之一。本研究根据PBRSV基因组中RNA依赖的RNA聚合酶(RDRP)保守序列,设计合成了两对巢式PCR引物和1条Taq-MAN荧光探针,建立了巢式-多重rt-Realtime PCR检测PBRSV的新方法。该方法采用***试剂盒快速提取植物总RNA,并有机地结合了巢式PCR、多重PCR和探针检测技术。实验结果表明,该方法检测灵敏度可达450fg/μL植物总RNA。利用4对引物和1条TaqMAN探针对PCR阳性产物进行确认,本方法检测的准确性、灵敏度比巢式PCR、单重Realtime PCR等方法高。

关键词：马铃薯黑环斑病毒(PBRSV) 巢式-多重rt-realtimepcr 检测

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巢式-多重rt-Realtime PCR检测马铃薯Y病毒脉坏死株系的方法

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检验检疫科学 2009年第4期19卷 8-11页

作者：粟智平耿金培杨益娥钟响张京萱烟台出入境检验检疫局山东烟台264000

马铃薯Y病毒脉坏死株系(Potato virus Yvein necrosis strain,PVYn)是马铃薯中一个非常重要的病毒病害。本研究根据PVYn基因组中RNA依赖的RNA聚合酶(RNA dependentRNA polymerase,RDRP)基因序列保守区域,设计合成了两对巢式PCR引物和一... 详细信息

马铃薯Y病毒脉坏死株系(Potato virus Yvein necrosis strain,PVYn)是马铃薯中一个非常重要的病毒病害。本研究根据PVYn基因组中RNA依赖的RNA聚合酶(RNA dependentRNA polymerase,RDRP)基因序列保守区域,设计合成了两对巢式PCR引物和一条TaqMAN荧光探针,建立了巢式-多重rt-Real-time PCR检测PVYn的新方法。该方法采用***快速提取植物总RNA,并有机地结合了巢式PCR、多重PCR和探针检测技术。实验结果表明,本方法检测的准确性、灵敏度比巢式PCR、单重Real time PCR等方法高。该方法检测灵敏度可达3 fg/μL植物总RNA。利用四对引物和一条TaqMAN探针对PCR阳性产物进行确认,检测的准确性比其它方法高。

关键词：马铃薯Y病毒脉坏死株系(PVY^N) 巢式-多重rt-realtimepcr 检测

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