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热痹痛合剂HPLC指纹图谱的建立和芍药苷、柚皮苷、黄芩苷、川续断皂苷Ⅵ的测定

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现代药物与临床 2022年第4期37卷 737-745页

作者：邱琼华李隽永韦倩毛桂福柳州市中医医院(柳州市壮医医院) 广西柳州545001

目的建立热痹痛合剂的HPLC指纹图谱和热痹痛合剂中芍药苷、柚皮苷、黄芩苷、川续断皂苷VI的HPLC测定方法。方法指纹图谱分析采用Agilent 1260 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈–0.2%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;检测波长为212 nm... 详细信息

目的建立热痹痛合剂的HPLC指纹图谱和热痹痛合剂中芍药苷、柚皮苷、黄芩苷、川续断皂苷VI的HPLC测定方法。方法指纹图谱分析采用Agilent 1260 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈–0.2%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;检测波长为212 nm;体积流量为1 mL/min;柱温30℃;进样量10μL。对指纹图谱进行相似度评价,并运用聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘法–判别分析分析热痹痛合剂样品图谱。采用HPLC法测定芍药苷、柚皮苷、黄芩苷、川续断皂苷VI,采用Agilent 1260 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈–0.2%磷酸溶液,梯度洗脱;检测波长230 nm(芍药苷)、280 nm(柚皮苷、黄芩苷)、260 nm(川续断皂苷VI);体积流量1 mL/min;柱温30℃;进样量为10μL。结果10批热痹痛合剂样品的指纹图谱中有26个共有峰,相似度均大于0.99,化学模式识别将10批样品分为2大类,OPLS-DA分析筛选出4个对制剂质量差异影响较大的化合物。含量测定中芍药苷、柚皮苷、黄芩苷、川续断皂苷VI分别在27.238~272.384、38.207~382.066、77.864~778.642、51.015~510.015μg/mL线性良好,平均回收率分别为95.34%、103.51%、103.51%、102.68%,RSD值分别0.65%、1.12%、0.86%、2.41%。结论所建立的方法准确、合理,重复性好,可用于热痹痛合剂的质量控制和评价。

关键词：热痹痛合剂指纹图谱相识度评价聚类分析芍药苷柚皮苷黄芩苷川续断皂苷VI 高效液相色谱

川续断皂苷VI对睡眠剥夺小鼠神经发生及认知功能的改善作用研究

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天然产物研究与开发 2023年

作者：王梅刘裕娥苏大鹏王映雪陈红梅董行行黄申荣张进强贵州中医药大学

本文旨在探讨川续断皂苷VI（asperosaponin vi，ASA vi）对睡眠剥夺小鼠认知功能的改善作用及相关机制。采用多平台水环境法对C57BL/6J小鼠进行睡眠剥夺，期间腹腔注射ASA vi进行干预，采用新物体识别实验及Morris水迷宫实验评估小鼠的... 详细信息

本文旨在探讨川续断皂苷VI（asperosaponin vi，ASA vi）对睡眠剥夺小鼠认知功能的改善作用及相关机制。采用多平台水环境法对C57BL/6J小鼠进行睡眠剥夺，期间腹腔注射ASA vi进行干预，采用新物体识别实验及Morris水迷宫实验评估小鼠的认知功能，运用q-PCR、免疫组化、Western blotting分别检测小鼠海马区的炎症水平、神经发生及信号通路变化。结果显示：与对照组相比，模型组小鼠海马中的小胶质细胞呈激活状态，炎症因子的表达水平显著提高（P ＜ 0.05），新生神经元数量显著减少（P ＜ 0.05），并导致认知功能下降。ASA vi干预显著改善了睡眠剥夺小鼠的认知功能，抑制海马中促炎性细胞因子IL-1β、TNF-α和IL-6的表达（P ＜ 0.05），同时显著提高抗炎性细胞因子IL-4、IL-10和神经营养因子BDNF的表达水平（P ＜ 0.05）。ASA vi干预还显著提高了睡眠剥夺小鼠海马中的p-PI3K、PI3K、Akt蛋白表达水平及新生神经元数量（P ＜ 0.05）。PI3K/Akt抑制剂LY294002处理显著降低ASA vi的干预效果。结果表明，ASA vi可改善睡眠剥夺小鼠学习记忆能力，其机制与PI3K/Akt信号通路激活相关。因此，作为抗炎、神经保护药物，ASA vi具有潜在的开发前景。

关键词：川续断皂苷VI 睡眠剥夺认知功能神经炎症神经发生 PI3K-Akt

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模式生物斑马鱼对川续断皂苷VI的代谢研究

药学学报 2013年第2期48卷 281-285页

作者：韦英杰薛小露刘炜王长梅詹扬贾晓斌江苏省中医药研究院国家中医药管理局中药口服释药系统重点研究室江苏南京210028

首次采用模式生物斑马鱼研究续断中主要活性成分川续断皂苷VI的代谢,探索斑马鱼用于微量中药皂苷类成分代谢的可行性及合理性。采用高效液相色谱电喷雾质谱检测,Zorbax Extend C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,0.05%甲酸乙腈0.05%甲酸... 详细信息

首次采用模式生物斑马鱼研究续断中主要活性成分川续断皂苷VI的代谢,探索斑马鱼用于微量中药皂苷类成分代谢的可行性及合理性。采用高效液相色谱电喷雾质谱检测,Zorbax Extend C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,0.05%甲酸乙腈0.05%甲酸水梯度洗脱,正、负离子模式同时检测,根据准分子离子峰获得化合物分子量信息,通过与文献数据或对照品对照,鉴定川续断皂苷VI经斑马鱼暴露24 h后的药液及鱼体中的代谢产物。结果川续断皂苷VI经斑马鱼作用后,产生了脱去1分子、2分子及全部糖基的5种脱糖基代谢产物和1个羟基化产物,这与川续断皂苷VI在大鼠体内的代谢机制一致,提示斑马鱼对川续断皂苷VI的代谢具合理性,更具有化合物用量少,成本低、简单、高效的优势,特别是能体现在体代谢的综合结果,有望成为快速预测少量中药成分代谢、补充现有模型不足的全新的、模式生物代谢模型。

关键词：斑马鱼川续断皂苷VI HPLC-ESI MS

利用斑马鱼模型评价川续断皂苷Ⅴ和Ⅵ的抗骨质疏松活性

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中国药科大学学报 2014年第1期45卷 88-91页

作者：王长梅景莉君韦英杰贾晓斌中国中医科学院江苏分院江苏省中医药研究院南京210028 南京中医药大学附属江苏省中西医结合医院南京210028

为探讨斑马鱼模型评价中药微量成分在体抗骨质疏松活性的适用性与合理性,以25μmol/L泼尼松龙诱导的斑马鱼幼鱼骨质疏松模型考察川续断皂苷V和川续断皂苷VI抗骨质疏松活性。采用茜素红对斑马鱼幼鱼骨骼染色,并以显微检测、数码成像方法... 详细信息

为探讨斑马鱼模型评价中药微量成分在体抗骨质疏松活性的适用性与合理性,以25μmol/L泼尼松龙诱导的斑马鱼幼鱼骨质疏松模型考察川续断皂苷V和川续断皂苷VI抗骨质疏松活性。采用茜素红对斑马鱼幼鱼骨骼染色,并以显微检测、数码成像方法定量分析骨骼染色区域。结果 25μmol/L泼尼松龙使斑马鱼骨量显著丢失,与模型组比较,川续断皂苷V和川续断皂苷VI及依替膦酸二钠阳性药均能阻止泼尼松龙诱导的斑马鱼骨量丢失,提示斑马鱼模型成功评价了微量川续断皂苷V和川续断皂苷VI的抗骨质疏松活性,具有在体化、微板化,简单、高效的特点。

关键词：斑马鱼骨质疏松川续断皂苷V 川续断皂苷VI 泼尼松龙

川续断皂苷Ⅵ对非酒精性脂肪肝小鼠的降脂作用研究

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时珍国医国药 2014年第8期25卷 1800-1802页

作者：李广润宫丽丽吕亚丽刘河韩菲菲王子惠刘丽宏苏州大学药学院江苏苏州215123 首都医科大学附属北京朝阳医院北京100020

目的研究川续断皂苷Ⅵ对非酒精性脂肪肝的降脂作用。方法利用高脂饲料建立ob/ob小鼠非酒精性脂肪肝模型,并给小鼠腹腔注射不同剂量(30,60,120 mg/kg)的川续断皂苷VI,连续4周后检测血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇... 详细信息

目的研究川续断皂苷Ⅵ对非酒精性脂肪肝的降脂作用。方法利用高脂饲料建立ob/ob小鼠非酒精性脂肪肝模型,并给小鼠腹腔注射不同剂量(30,60,120 mg/kg)的川续断皂苷VI,连续4周后检测血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平,同时观察其对小鼠体重、肝指数和肝组织病理学的影响。利用油酸(oleic acid,OA)诱导人肝癌HepG2细胞发生脂肪变性,通过荧光染料Bodipy 493/503染色检测川续断皂苷VI对细胞内脂滴沉积的影响。结果在ob/ob小鼠非酒精性脂肪肝动物模型中,川续断皂苷Ⅵ高、中剂量组均能显著降低TC、TG、LDL-C水平,增加HDL-C水平。川续断皂苷Ⅵ高剂量组可明显降低ob/ob小鼠体重、肝指数,减轻肝组织中肝细胞的脂肪变性。此外,川续断皂苷Ⅵ对HeG-2细胞中脂滴形成也具有明显的抑制作用。结论川续断皂苷VI具有明显的降脂做用,可明显改善肝细胞脂肪变性,可能是一种潜在的治疗非酒精性脂肪肝的药物。

关键词：川续断皂苷VI 非酒精性脂肪肝降脂作用

川续断皂苷VI对大鼠正畸牙周组织改建影响的研究

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口腔医学 2018年第5期38卷 410-416页

作者：陈佩佩王旭霞王媛崔金婕马丹张君山东大学口腔医学院正畸科山东济南250012 山东省口腔生物医学重点实验室山东济南250012 山东大学口腔医学院颌面外科山东济南250012 浙江大学附属口腔医学院正畸科浙江杭州310003

目的探究局部注射川续断皂苷VI(ASD)是否通过促进大鼠正畸牙移动过程中破骨细胞分化而影响牙周组织改建。方法选择40只6周龄雌性Wistar大鼠,随机分为4组(10只/组):A组:空白对照组(局部注射生理盐水),B组:ASD低浓度组(局部注射5 mg/kg AS... 详细信息

目的探究局部注射川续断皂苷VI(ASD)是否通过促进大鼠正畸牙移动过程中破骨细胞分化而影响牙周组织改建。方法选择40只6周龄雌性Wistar大鼠,随机分为4组(10只/组):A组:空白对照组(局部注射生理盐水),B组:ASD低浓度组(局部注射5 mg/kg ASD),C组ASD高浓度组(局部注射10 mg/kg ASD),D组:前列腺素E2组(局部注射适宜浓度PGE_2)。实验分别于第3、7、14、21及28天5个时间点处死2只大鼠,对大鼠上颌第一磨牙近中压力侧牙周组织进行TRAP染色以观察破骨细胞数及免疫组化以观察破骨细胞分化因子(ODF)表达情况。结果从第3天到第21天,4组上颌第一磨牙近中压力侧TRAP阳性细胞的数目及ODF的表达随加力时间不断增多,第28天时出现下降。从第7天开始,与A组相比,实验组破骨细胞数量和ODF表达均增加,B组比C组、D组减少且有统计学差异,C组与D组无统计学差异。结论局部注射ASD和适宜浓度的PGE_2可有效促进压力侧牙周组织破骨细胞的分化,加快牙周改建。局部注射10 mg/kg ASD与PGE_2效果基本相近,而稍低浓度ASD效果弱于PGE_2和稍高浓度ASD。

关键词：川续断皂苷VI 正畸牙移动破骨细胞分化牙周改建

基于UPLC-Triple-TOF/MS分析续断“发汗”前后化学成分

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中草药 2020年第5期51卷 1233-1241页

作者：洪智慧杜伟锋杨莹康显杰洪浩朱伟豪葛志伟李昌煜葛卫红浙江中医药大学药学院浙江杭州310053 浙江中医药大学中药炮制技术研究中心浙江杭州311401 浙江中医药大学中药饮片有限公司浙江杭州311401 浙江大学农业生命环境测试中心浙江杭州310058 浙江中医药大学中医药科学院浙江杭州310053

目的通过超高效液相色谱串联三重四级杆飞行时间质谱法(UPLC-Triple-TOF-MS)快速分析续断DipsaciRadix"发汗"前后的化学成分。方法采用Agilent Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5.0μm)色谱柱;流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈,梯度洗脱,体... 详细信息

目的通过超高效液相色谱串联三重四级杆飞行时间质谱法(UPLC-Triple-TOF-MS)快速分析续断DipsaciRadix"发汗"前后的化学成分。方法采用Agilent Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5.0μm)色谱柱;流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈,梯度洗脱,体积流量为0.8 mL/min,检测波长215 nm,柱温为25℃;质谱采用UPLC-Triple-TOF 5600+飞行时间液质联用仪,负离子模式下扫描检测,扫描范围m/z 100~1500。根据高分辨质谱结合二级质谱所得的信息对续断"发汗"前后化学成分进行快速的鉴定。结果根据化合物保留时间、质谱信息,推测了续断"发汗"前后52个共有化学成分,主要包括三萜皂苷类、环烯醚萜类、酚酸类等,同时分析了主要成分的裂解规律。并比较了续断"发汗"前后化学成分的差异,发现发汗后马钱苷酸、绿原酸、马钱苷、异绿原酸A、川续断皂苷VI等20种成分含量降低,咖啡酸、异绿原酸、异绿原酸C、大花双参苷A等成分含量在发汗后升高。结论研究发现续断"发汗"前后化学成分种类上无明显差异,而在成分含量上存在一定差异,未"发汗"续断化学成分含量普遍高于"发汗"续断。本实验采用UPLC-Triple-TOF-MS技术分析"发汗"对续断的化学成分的影响,为探究续断"发汗"前后化学成分物质基础和进一步为续断产地加工方式的研究提供理论依据。

关键词：续断发汗超高效液相色谱串联三重四级杆飞行时间质谱法三萜皂苷环烯醚萜酚酸马钱苷酸绿原酸马钱苷异绿原酸A 川续断皂苷VI 咖啡酸异绿原酸异绿原酸C 大花双参苷A

基于多成分测定的血竭三七接骨膏中粉体粒径与溶出度的相关性研究

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中草药 2017年第21期48卷 4432-4439页

作者：闫丹江敏瑜张传辉王云红赵凤平张琳杨荣平成都中医药大学药学院四川成都611137 重庆市中药研究院重庆400065 西南大学药学院重庆400715

目的考察血竭三七接骨膏(XSJP)中不同粉体粒径和体外溶出度之间的相关性。方法采用激光粒度仪测定3种不同XSJP粉体(超微粉、极细粉、细粉)的粒径分布;采用桨法,以羟基红花黄色素A、三七皂苷R_1、人参皂苷Rg_1、川续断皂苷VI、人参皂苷R... 详细信息

目的考察血竭三七接骨膏(XSJP)中不同粉体粒径和体外溶出度之间的相关性。方法采用激光粒度仪测定3种不同XSJP粉体(超微粉、极细粉、细粉)的粒径分布;采用桨法,以羟基红花黄色素A、三七皂苷R_1、人参皂苷Rg_1、川续断皂苷VI、人参皂苷Rb_1、血竭素6种成分为评价指标考察上述不同粉体溶出度,采用SPSS 17.0软件对不同粒径粉体与所对应的溶出度进行相关性分析。结果 3种粉体的粒径与指标成分溶出度具有相关性,其中羟基红花黄色素A、三七皂苷R_1、人参皂苷Rg_1、川续断皂苷VI、人参皂苷Rb_1 5种成分累积释放率与粒径呈负相关,超微粉较细粉累积溶出率分别提高6.8%、16.6%、6.6%、6.7%、5.4%,血竭素无相关性。结论含有细胞结构的纤维类药材不同粉体粒径与其溶出度存在相关性。

关键词：血竭三七接骨膏粉体粒径溶出度多指标评价相关性超微粉极细粉细粉羟基红花黄色素A 三七皂苷R1 人参皂苷Rg1 川续断皂苷VI 人参皂苷Rb1 血竭素

变波长RP-HPLC法同时测定调经丸中12种成分

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中草药 2016年第8期47卷 1332-1336页

作者：陈雪梅周慧天津医科大学第二医院药学部天津300211 天津市临床药物关键技术重点实验室天津医科大学药学院天津300070

目的建立同时测定调经丸中芍药苷、毛蕊花糖苷、阿魏酸、盐酸益母草碱、橙皮苷、丹皮酚、黄芩苷、川续断皂苷VI、柠檬苦素、白术内酯I、白术内酯III、茯苓酸12种成分的RP-HPLC方法。方法采用RP-HPLC法,色谱柱为Venusil MP C18（250 mm×... 详细信息

目的建立同时测定调经丸中芍药苷、毛蕊花糖苷、阿魏酸、盐酸益母草碱、橙皮苷、丹皮酚、黄芩苷、川续断皂苷VI、柠檬苦素、白术内酯I、白术内酯III、茯苓酸12种成分的RP-HPLC方法。方法采用RP-HPLC法,色谱柱为Venusil MP C18（250 mm×4.6 mm,5.0μm）;流动相为乙醇-乙腈（40∶60,A）和0.2%磷酸水溶液（B）,梯度洗脱,体积流量0.8m L/min;柱温45℃。结果 12种指标成分芍药苷、毛蕊花糖苷、阿魏酸、盐酸益母草碱、橙皮苷、丹皮酚、黄芩苷、川续断皂苷VI、柠檬苦素、白术内酯I、白术内酯III、茯苓酸分别在0.5~50.0 mg/L（r=0.999 5）、0.1~10.0 mg/L（r=0.999 1）、0.2~20.0 mg/L（r=0.999 2）、0.3~30.0 mg/L（r=0.999 3）、4.0~400.0 mg/L（r=0.999 8）、0.2~20.0 mg/L（r=0.999 1）、0.6~60.0 mg/L（r=0.999 4）、1.5~150.0 mg/L（r=0.999 8）、7.0~700.0 mg/L（r=0.999 9）、0.5~50.0 mg/L（r=0.999 3）、0.5~50.0 mg/L（r=0.999 4）、1.0~100.0 mg/L（r=0.999 6）与峰面积呈良好的线性关系;精密度良好,RSD≤0.97%;重复性良好,RSD≤1.25%;加样回收率在98.5%~103.5%,RSD≤1.24%。供试品溶液在室温条件下24 h内稳定,RSD≤1.09%。12批次供试品中芍药苷、毛蕊花糖苷、阿魏酸、盐酸益母草碱、橙皮苷、丹皮酚、黄芩苷、川续断皂苷VI、柠檬苦素、白术内酯I、白术内酯III、茯苓酸质量分数分别为4.328~4.688、0.033~0.054、0.073~0.091、0.177~0.199、0.243~0.283、0.043~0.069、1.144~1.173、0.037~0.061、0.094~0.126、0.127~0.157、0.155~0.179、0.285~0.327 mg/g。结论所建立的方法快速、灵敏度高、准确度高、专属性好,为调经丸的质量控制提供依据。

关键词：调经丸高效液相色谱法芍药苷毛蕊花糖苷阿魏酸盐酸益母草碱橙皮苷丹皮酚黄芩苷川续断皂苷VI 柠檬苦素白术内酯I 白术内酯III 茯苓酸