检索结果-南通市图书馆

植物学研究 2023年第4期12卷 200-205页

作者：陈哲卿廖家妮胡超任春梅黄丽华湖南农业大学生物科学技术学院湖南长沙

尿黑酸双加氧酶(Homogentisate dioxygenase, HGO)催化酪氨酸降解代谢第三步反应。HGO突变会促进拟南芥生长。该研究对拟南芥hgo突变体和野生型的转录组进行分析,探究HGO影响拟南芥生长的机制。结果表明,突变体和野生型间1413个基因表... 详细信息

尿黑酸双加氧酶(Homogentisate dioxygenase, HGO)催化酪氨酸降解代谢第三步反应。HGO突变会促进拟南芥生长。该研究对拟南芥hgo突变体和野生型的转录组进行分析,探究HGO影响拟南芥生长的机制。结果表明,突变体和野生型间1413个基因表达存在差异;其中741个基因在突变体中表达上调,672个基因在突变体中表达下调。GO功能注释显示,差异基因显著富集在生长素响应、氨基酸代谢、谷胱甘肽代谢等过程。KEGG通路分析显示,差异基因主要涉及苯丙烷类生物合成、类黄酮生物合成、MAPK信号途径、谷胱甘肽代谢、植物激素信号传导、淀粉和蔗糖代谢等通路。研究结果表明HGO可能通过影响苯丙烷类生物合成和激素信号传导等调控拟南芥生长。该研究结果可为进一步探究酪氨酸降解代谢在植物中的功能奠定基础。

关键词：拟南芥尿黑酸双加氧酶酪氨酸降解代谢转录组

来源：

维普期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

苏云金芽胞杆菌高产黑色素工程菌株的构建

苏云金芽胞杆菌高产黑色素工程菌株的构建

引用

作者：詹云达南开大学

学位级别：硕士

苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)是一种能够产生杀虫晶体蛋白的革兰氏阳性菌。Bt来源的微生物杀虫剂现在已经在世界范围上用于防治农作物害虫,但是在野外条件下由于阳光中的紫外线辐射,Bt杀虫剂会迅速失去生物活性。黑色素... 详细信息

苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)是一种能够产生杀虫晶体蛋白的革兰氏阳性菌。Bt来源的微生物杀虫剂现在已经在世界范围上用于防治农作物害虫,但是在野外条件下由于阳光中的紫外线辐射,Bt杀虫剂会迅速失去生物活性。黑色素能够作为光保护剂来提高Bt抗紫外的能力,因此获得一株可以高产黑色素的Bt菌株用来保护杀虫晶体蛋白具有十分重要的意义。我们实验室前期研究发现在大多数Bt菌株中存在尿黑酸(HGA)黑色素合成途径,在该途径中,L-酪氨酸可在芳香族氨基酸转氨酶(PhhC)的作用下转化为4-羟苯基丙酮酸,该产物可在羟苯基丙酮酸双加氧酶(Hpp D)的作用下生成尿黑酸。HGA可在尿黑酸双加氧酶(HmgA)的催化下被分解,而当HmgA发生突变不再具有活性后,HGA会进行氧化聚合,进一步生成脓黑色素。在前期的研究工作中,本实验室敲除了hmgA基因,获得了能产生黑色素的Bt菌株BMB171(35)hmgA,但该突变菌株的黑色素产量并不高。为获得高产黑色素的Bt菌株,本研究以能够产黑色素的BMB171(35)hmgA为出发菌株,进行了系列研究。首先探究L-酪氨酸的量对黑色素产量的影响。当培养基中L-酪氨酸低于1.2 g/L时,随着L-酪氨酸浓度的逐渐增加,反应黑色素产量的OD的值也在不断升高。与不添加L-酪氨酸的对照相比,添加L-酪氨酸后发酵上清OD提升幅度较小,最高能增加到1.39倍,说明L-酪氨酸底物的量并不是限制黑色素产量的主要因素。当培养基中L-酪氨酸到达1.4 g/L时,黑色素产量反而有一定的下降。因此可以通过在培养基中添加1.0 g/L～1.2g/L浓度的L-酪氨酸来提高黑色素的产量。芳香族氨基酸转氨酶(PhhC)是HGA黑色素合成途径的代谢酶之一,可能对黑色素的产量有着一定的影响。实验室前期的研究只是确定在Bt中存在HGA黑色素合成途径,并未明确Bt中对应的PhhC。根据NCBI上BMB171基因组的注释,发现有两个基因可能编码PhhC-1(AQY41390)和Phh C-2(AQY40477)。成功构建这两个基因的过表达菌株以及phh C-2基因的敲除株,确定这两个基因能够编码在HGA途径中起作用的芳香族氨基酸转氨酶。过表达PhhC-2的菌株(35)hmgA-P-phh C-2在添加L-酪氨酸(1.0 g/L)的LB培养基中发酵,与在LB培养基中培养对照菌株的(35)hmg A-pCB发酵液相比,OD的值能增加到1.85倍,说明提高芳香族氨基酸转氨酶的量也能提高黑色素的产量。在本研究中利用一系列强启动子表达羟苯基丙酮酸双加氧酶(HppD),发现利用强启动子Prsi构建的重组菌株BMB171 Prsi-hppD黑色素产量最高。在含有1.0 g/L L-酪氨酸发酵培养基中该重组菌株的的黑色素产量与在LB培养基中的对照菌株(35)hmg A-pCB相比大概增加到3.77倍。此基础上,在本研究中构建了一株同时过表达phhC-2和hppD的菌株BMB171 Pdc-2,发现黑色素的产量大幅度提高,在含有L-酪氨酸(1.0 g/L)的发酵培养基中BMB171 Pdc-2的OD的值为10.50左右,与在LB培养基中培养的BMB171(35)hmg A-pCB相比增加到5.70倍,即将HGA途径中的phh C-2和hppD两个关键酶同时过量表达,且也没有L-酪氨酸底物限制时,黑色素产量最高可增加到5.70倍,此外,我们发现增加培养基中的溶氧量虽然不能提高黑色素的产量,但可加速黑色素的生成,缩短发酵时间。本研究获得的高产黑色素的Bt菌株对Bt杀虫剂的工业化应用具有重要实际价值。

关键词：苏云金芽胞杆菌黑色素芳香族氨基酸转氨酶对羟苯丙酮酸双加氧酶尿黑酸双加氧酶

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：