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黄芩苷对尿酸钠诱导的鸡单核细胞炎性损伤的影响

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黑龙江畜牧兽医 2023年第22期 123-129页

作者：邓琴余翔何利琼张维邱银生徐凌云武汉轻工大学生命科学与技术学院武汉430023 武汉轻工大学动物科学与营养工程学院武汉430023

为了探讨黄芩苷(baicalin,BA)对尿酸钠诱导的鸡单核细胞炎性损伤的影响,试验从采集的鸡抗凝血中分离单核细胞,先检测不同浓度(5,10,20,40,80,160μmol/L)BA对正常鸡单核细胞活力的影响,选择对细胞活力无显著影响的BA浓度和培养时间,用2 ... 详细信息

为了探讨黄芩苷(baicalin,BA)对尿酸钠诱导的鸡单核细胞炎性损伤的影响,试验从采集的鸡抗凝血中分离单核细胞,先检测不同浓度(5,10,20,40,80,160μmol/L)BA对正常鸡单核细胞活力的影响,选择对细胞活力无显著影响的BA浓度和培养时间,用2 mg/mL的尿酸钠晶体(monosodium urate,MSU)诱导细胞炎性反应,用不同浓度的BA干预细胞。试验分为空白对照组、MSU组(2 mg/mL)、MSU+不同浓度BA组,培养一定时间后用试剂盒检测细胞培养上清液中的一氧化氮(NO)浓度、乳酸脱氢酶(LDH)活力及白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)质量浓度。用荧光定量PCR方法检测细胞Toll样受体4(TLR4)、NOD样受体家族结构域3(NLRP3)、核因子-κB(NF-κB)、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、IL-1β、IL-18的mRNA相对表达量。结果表明:与空白对照组相比,MSU组NO浓度、LDH活力及IL-1β、IL-18、TNF-α质量浓度显著或极显著增加(P0.05)外,MSU+10μmol/L BA组、MSU+20μmol/L BA组、MSU+40μmol/L BA组及MSU+80μmol/L BA组TLR4、NLRP3、NF-κB、Caspase-1、IL-1β、IL-18的mRNA相对表达量显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01)。说明BA能够减轻MSU诱导的鸡单核细胞炎症损伤,其机制可能与下调炎症因子水平、抑制TLR4/NF-κB和NLRP3/Caspase-1信号通路相关基因表达有关。

关键词：黄芩苷鸡单核细胞尿酸钠乳酸脱氢酶 Toll样受体4

萆薢总皂苷对尿酸钠诱导THP-1细胞Toll样受体/核转录因子-κB(TLR/NF-κB)信号通路的影响

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中国实验方剂学杂志 2020年第5期26卷 34-41页

作者：李国莺章维志姜璐陈光亮安徽中医药大学中西医结合学院合肥230012 安徽省中药复方研究重点实验室合肥230012

目的:研究萆薢总皂苷(TSD)对尿酸钠(MSU)诱导THP^-1细胞Toll样受体/核转录因子-κB(TLR/NF-κB)信号通路的影响,探讨其抗痛风性关节炎的可能作用机制。方法:佛波酯(PMA)诱导THP^-1细胞分化为巨噬细胞,分为正常组,模型组,TSD低、中、高... 详细信息

目的:研究萆薢总皂苷(TSD)对尿酸钠(MSU)诱导THP^-1细胞Toll样受体/核转录因子-κB(TLR/NF-κB)信号通路的影响,探讨其抗痛风性关节炎的可能作用机制。方法:佛波酯(PMA)诱导THP^-1细胞分化为巨噬细胞,分为正常组,模型组,TSD低、中、高质量浓度组(1,3,10 mg·L^-1)和秋水仙碱组(0.2 mg·L^-1),除正常组外,其余各组均用400 mg·L^-1MSU刺激6 h,诱导体外炎症反应。噻唑蓝(MTT)比色法检测TSD对细胞活力影响;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞上清液炎性因子如肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素^-1β(IL^-1β)的分泌水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测TLR4,髓样分化因子88(MyD88)及NF-κB蛋白表达;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测TLR4,NF-κB及IL^-1β前体(Pro-IL^-1β)mRNA表达水平;免疫荧光法检测NF-κB p65的核位移情况。结果:0~32 mg·L^-1TSD对细胞活力基本无影响;与正常组比较,模型组炎性因子TNF-α及IL^-1β的分泌水平显著升高(P<0.01),通路关键蛋白(TLR4,MyD88及NF-κB)和基因(TLR4,NF-κB及Pro-IL^-1β)的表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,1~30 mg·L^-1TSD可显著下调炎性因子TNF-α及IL^-1β的分泌(P<0.01),通路关键蛋白(TLR4,MyD88及NF-κB)和基因(TLR4,NF-κB及Pro-IL^-1β)的表达明显降低(P<0.05,P<0.01),细胞核内NF-κB p65叠加减少,部分转位至胞浆,抑制NF-κB p65核转位。结论:TSD可能通过下调TLR4,NF-κB及Pro-IL^-1βmRNA的表达,减少炎性因子TNF-α及IL^-1β分泌而发挥抗炎作用。

关键词：萆薢总皂苷尿酸钠 Toll样受体/核转录因子-κB(TLR/NF-κB)信号通路炎性因子

清热祛湿法对尿酸钠关节炎大鼠OPG/RANKL/NF-κB信号通路调控的影响

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中华中医药杂志 2018年第6期33卷 2560-2562页

作者：刘欢庞学丰吴燕红蒙宇华汪东涛广西中医药大学附属瑞康医院南宁530011 南方医科大学深圳医院深圳518000

目的:观察清热祛湿法对尿酸钠关节炎大鼠OPG/RANKL/NF-κB信号通路的影响。方法:检测大鼠受试踝关节周长变化值。用ELISA法测定大鼠血清IL-12、IL-6、TNF-α、OPG、RANKL的含量以及滑膜组织中NF-κB p65蛋白的表达变化。结果:与正常组比... 详细信息

目的:观察清热祛湿法对尿酸钠关节炎大鼠OPG/RANKL/NF-κB信号通路的影响。方法:检测大鼠受试踝关节周长变化值。用ELISA法测定大鼠血清IL-12、IL-6、TNF-α、OPG、RANKL的含量以及滑膜组织中NF-κB p65蛋白的表达变化。结果:与正常组比较,模型组大鼠受试踝关节周长显著增加(P<0.01),血清IL-12、IL-6、TNF-α及RANKL的含量显著升高(P<0.01),血清中OPG的含量及OPG/RANKL显著降低(P<0.01),滑膜组织中NF-κB p65蛋白表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,中药低、中、高剂量组大鼠受试踝关节周长显著降低(P<0.05),血清IL-12、IL-6、TNF-α及RANKL的含量显著降低(P<0.05),而血清中OPG的含量及OPG/RANKL显著升高(P<0.05);滑膜组织NF-κB p65蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论:自拟痛风方抑制急性痛风关节炎性反应可能与降低血清中IL-12、IL-6、TNF-α、RANKL含量,并上调血清中OPG的分泌及OPG/RANKL,降低滑膜组织中NF-κB p65蛋白表达有关。

关键词：痛风清热祛湿关节炎尿酸钠

黄芩苷对尿酸钠诱导RAW264.7细胞NLRP3及炎症因子表达的影响

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中国新药杂志 2018年第2期27卷 190-194页

作者：文学平刘德俊裴忆雪徐凌云武汉轻工大学生物与制药工程学院武汉430023

目的:研究黄芩苷对尿酸钠诱导RAW264.7细胞NLRP3炎性小体及炎症因子表达的影响。方法:取RAW264.7细胞分为对照组、模型组和药物组,模型组用尿酸钠(终浓度2 mg·m L^(-1))刺激,药物组先加入不同浓度黄芩苷(终浓度为2.5,5,10和20μg·m L^... 详细信息

目的:研究黄芩苷对尿酸钠诱导RAW264.7细胞NLRP3炎性小体及炎症因子表达的影响。方法:取RAW264.7细胞分为对照组、模型组和药物组,模型组用尿酸钠(终浓度2 mg·m L^(-1))刺激,药物组先加入不同浓度黄芩苷(终浓度为2.5,5,10和20μg·m L^(-1))预处理1 h后再加入尿酸钠。24 h后收集细胞,用qRT-PCR法检测TNF-α,IL-1β,IL-18和NLRP3的mRNA表达水平;收集细胞培养上清液,用ELISA法检测TNF-α,IL-1β和IL-18的浓度。结果:与对照组比较,模型组巨噬细胞NLRP3及炎症因子TNF-α,IL-1β和IL-18的基因表达显著上调,巨噬细胞分泌TNF-α,IL-1β和IL-18显著增加;与模型组比较,黄芩苷组显著抑制上述指标。结论:NLRP3炎性小体参与尿酸钠诱导的炎性反应,黄芩苷可抑制NLRP3的mRNA表达,减少炎症因子TNF-α,IL-1β和IL-18的分泌而发挥抗炎作用。

关键词：黄芩苷 RAW264.7细胞尿酸钠 NLRP3炎性小体 IL-1β IL-18 TNF-α

清溪花鳖肽对尿酸钠所致大鼠痛风性关节炎的作用

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药物生物技术 2021年第6期28卷 579-584页

作者：刘嵘胡晓川卞筱泓中国药科大学工学院江苏南京211198 青岛市中心医院健康管理中心山东青岛266042 中国药科大学生命科学与技术学院江苏南京211198

清溪花鳖肽(QXSTP)是浙江清溪花鳖中蛋白质的酶法水解产物,本研究将探讨QXSTP治疗尿酸钠所致大鼠痛风性关节炎的作用,为进一步开发该产品提供试验依据。将雄性SD大鼠随机分成空白对照组、模型对照组、秋水仙碱对照组、痛风舒片对照组、Q... 详细信息

清溪花鳖肽(QXSTP)是浙江清溪花鳖中蛋白质的酶法水解产物,本研究将探讨QXSTP治疗尿酸钠所致大鼠痛风性关节炎的作用,为进一步开发该产品提供试验依据。将雄性SD大鼠随机分成空白对照组、模型对照组、秋水仙碱对照组、痛风舒片对照组、QXSTP高、中、低剂量组,每天给药1次,连续给药28 d。d 26给药后30 min,除空白对照组外,其余各组尿酸钠溶液注入大鼠踝关节腔,造大鼠痛风性关节炎模型,分别进行踝关节肿胀度检测、步态评分、血清尿素(UA)、TNF-α和IL-6含量测定及组织病理学检测。与模型对照组相比,造模后12和24 h,QXSTP低、中、高剂量组大鼠踝关节肿胀度均有不同程度的降低;造模后24 h,QXSTP中、高剂量组大鼠步态评分显著降低;QXSTP中、高剂量组大鼠血清中UA和TNF-α含量有不同程度的降低,高剂量组大鼠血清中IL-6的含量极显著降低;与模型对照组相比,QXSTP低、中、高剂量预防给药均能显著降低HE染色病理评分。在本实验条件下,QXSTP对尿酸钠所致大鼠痛风性关节炎有一定的治疗作用。

关键词：清溪花鳖肽痛风关节炎尿酸钠秋水仙碱痛风舒

祛瘀清热方对尿酸钠诱导的痛风性关节炎大鼠NLRP6/Caspase-1/IL-1β信号通路的影响

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新中医 2023年第18期55卷 1-5页

作者：钟秋生杨巧玉邵洁琦黄欢欢陈博王昱东莞市松山湖中心医院广东东莞523326

目的:观察祛瘀清热方对尿酸钠诱导的痛风性关节炎(GA)大鼠NLRP6/Caspase-1/IL-1β信号通路的影响。方法:检测受试大鼠踝关节肿胀度。用酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠血清白细胞介素-1β (IL-1β)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)的含量,用We... 详细信息

目的:观察祛瘀清热方对尿酸钠诱导的痛风性关节炎(GA)大鼠NLRP6/Caspase-1/IL-1β信号通路的影响。方法:检测受试大鼠踝关节肿胀度。用酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠血清白细胞介素-1β (IL-1β)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)的含量,用Western Blot检测滑膜组织NLRP6和Caspase-1含量。结果:与正常组比较,其余各组造模之后,在不同时间点上,受试大鼠踝关节肿胀度增加(P<0.05)。与模型组比较,祛瘀清热方低、中、高剂量组及秋水仙碱组大鼠,在造模后各时间节点,大鼠踝关节肿胀度降低(P<0.05)。与秋水仙碱组比较,祛瘀清热方低、中、高剂量组受试大鼠,在造模后各时间节点,大鼠踝关节肿胀度增加(P<0.05)。模型组大鼠血清IL-1β、TNF-α水平较正常组上升(P<0.05)。与模型组比较,祛瘀清热方低、中、高3个剂量组及秋水仙碱组大鼠血清IL-1β、TNF-α的水平降低(P<0.05)。与秋水仙碱组比较,祛瘀清热方低、中、高剂量组IL-1β、TNF-α水平增加(P<0.05)。与正常组比较,模型组及祛瘀清热方中、高剂量组滑膜组织NLRP6蛋白表达下调(P<0.05),模型组Caspase-1蛋白表达上调(P<0.05)。与模型组比较,祛瘀清热方高剂量组滑膜组织NLRP6蛋白表达上调(P<0.05),Caspase-1蛋白表达下调(P<0.05)。结论:祛瘀清热方可抑制GA炎性反应,降低血清中IL-1β、TNF-α含量,上调滑膜组织NLRP6蛋白和下调滑膜组织Caspase-1蛋白的表达。

关键词：痛风性关节炎祛瘀清热方尿酸钠炎性反应

尿酸钠对BALB/c小鼠抗体应答及树突状细胞和迟发型超敏反应的影响

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中国病理生理杂志 2010年第3期26卷 424-429页

作者：刘春永王飞鹏郭贺高琦何贤辉暨南大学组织移植与免疫实验中心广东广州510632 暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632

目的:探讨尿酸钠作为佐剂对BALB/c小鼠体液和细胞免疫应答的影响。方法:利用尿酸钠悬浮液为佐剂、天花粉蛋白(TCS)为免疫原对BALB/c小鼠进行免疫,以酶联免疫测定法检测特异性抗体IgG的效价。体外诱导小鼠树突状细胞(DC),流式细胞术分析D... 详细信息

目的:探讨尿酸钠作为佐剂对BALB/c小鼠体液和细胞免疫应答的影响。方法:利用尿酸钠悬浮液为佐剂、天花粉蛋白(TCS)为免疫原对BALB/c小鼠进行免疫,以酶联免疫测定法检测特异性抗体IgG的效价。体外诱导小鼠树突状细胞(DC),流式细胞术分析DC表型,评价尿酸钠体外对DC成熟的效应。以二硝基氟苯建立迟发型超敏反应(DTH)模型,分析尿酸钠在体内对细胞免疫应答的影响。结果:传统弗氏佐剂可极大地增强小鼠对TCS的抗体应答,尿酸钠佐剂对抗体应答不但没有促进,与单独使用免疫原相比,抗体应答反而明显降低。流式细胞术分析显示,尿酸钠对DC表达CD11c和CD83没有影响,但可明显提高MHCII的表达水平。DTH模型中,尿酸钠增强致敏原引发的耳廓肿胀程度,并促进DTH小鼠淋巴细胞的体外增殖能力。结论:尿酸钠悬浮液作为佐剂,对细胞免疫有显著增强作用,而对体液免疫应答却有一定的抑制作用,提示该佐剂在疫苗研究中有潜在应用前景。

关键词：尿酸钠体液免疫应答树突细胞迟发型超敏反应

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尿酸钠制备急性痛风性关节炎模型研究进展

山东中医杂志 2020年第12期39卷 1380-1383页

作者：朱英张莉娟覃倩江海燕陈日兰广西中医药大学附属瑞康医院广西南宁530011 广西中医药大学广西南宁530001

从造模动物种类、造模用药情况、造模用药剂量与浓度、造模注射部位等四个方面归纳总结近年尿酸钠制备急性痛风性关节炎(AGA)模型的研究进展,发现尿酸钠制备AGA动物模型具有操作简单、成功率高等优势,但存在破坏模型动物关节部位的软骨... 详细信息

从造模动物种类、造模用药情况、造模用药剂量与浓度、造模注射部位等四个方面归纳总结近年尿酸钠制备急性痛风性关节炎(AGA)模型的研究进展,发现尿酸钠制备AGA动物模型具有操作简单、成功率高等优势,但存在破坏模型动物关节部位的软骨组织、不同种类动物对尿酸钠的敏感性不同、尿酸钠剂量与浓度缺乏统一等不足,而且尿酸钠诱导的AGA动物模型与人体AGA发病机制存在一定的差异。参考文献32篇。

关键词：急性痛风性关节炎动物模型综述尿酸钠机制研究剂量浓度

异落新妇苷通过调节NLRP3炎症小体和NF-κB信号通路减轻尿酸钠诱导的小鼠急性痛风性关节炎机制研究

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浙江中医药大学学报 2022年第9期46卷 929-935,944页

作者：姚燕箐汪焱徐文静吴晨曦楚秉泉夏道宗浙江中医药大学药学院杭州310053

[目的]基于NOD样受体蛋白3(NOD-like receptor pyrin domain 3,NLRP3)炎症小体和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路,研究异落新妇苷(isoastilbin,IA)对小鼠急性痛风性关节炎模型的抗炎作用及机制。[方法]通过关节腔注射尿... 详细信息

[目的]基于NOD样受体蛋白3(NOD-like receptor pyrin domain 3,NLRP3)炎症小体和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路,研究异落新妇苷(isoastilbin,IA)对小鼠急性痛风性关节炎模型的抗炎作用及机制。[方法]通过关节腔注射尿酸钠(monosodium urate,MSU)混悬液,建立小鼠急性痛风性关节炎模型,以自制足趾容积测量装置测定踝关节肿胀度;苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法观察踝关节炎性浸润情况;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测踝关节中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的水平;免疫印迹法检测踝关节中NLRP3炎症小体和NF-κB信号通路中相关蛋白的表达情况。[结果]踝关节注射MSU混悬液诱导小鼠产生急性痛风性关节炎。与正常组比较,模型组小鼠踝关节肿胀率明显升高(P<0.01),炎性浸润增加,IL-1β、IL-6、TNF-α分泌水平显著增高(P<0.01),NLRP3炎症小体和NF-κB信号通路相关蛋白表达增加(P<0.01)。与模型组比较,IA具有较强的抗炎效果,剂量依赖性地降低小鼠踝关节肿胀率(P<0.05,P<0.01),减轻炎性浸润情况,减少相关炎症因子的分泌(P<0.01),下调NLRP3炎症小体和NF-κB信号通路相关蛋白表达(P<0.01)。[结论] IA对小鼠急性痛风性关节炎模型表现出较强的抗炎效果,其机制与调节NLRP3炎症小体和NF-κB信号通路相关。

关键词：异落新妇苷急性痛风性关节炎尿酸钠踝关节肿胀炎症因子 NLRP3炎症小体 NF-κB信号通路机制研究