萆薢总皂苷对尿酸钠诱导THP-1细胞Toll样受体/核转录因子-κB(TLR/NF-κB)信号通路的影响

作     者：李国莺 章维志 姜璐 陈光亮 LI Guo-ying;ZHANG Wei-zhi;JIANG Lu;CHEN Guang-liang

作者机构：安徽中医药大学中西医结合学院合肥230012 安徽省中药复方研究重点实验室合肥230012 

出 版 物：《中国实验方剂学杂志》 (Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae)

年 卷 期：2020年第26卷第5期

页      面：34-41页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(81573670) 

主　　题：萆薢总皂苷 尿酸钠 Toll样受体/核转录因子-κB(TLR/NF-κB)信号通路 炎性因子 

摘      要：目的:研究萆薢总皂苷(TSD)对尿酸钠(MSU)诱导THP^-1细胞Toll样受体/核转录因子-κB(TLR/NF-κB)信号通路的影响,探讨其抗痛风性关节炎的可能作用机制。方法:佛波酯(PMA)诱导THP^-1细胞分化为巨噬细胞,分为正常组,模型组,TSD低、中、高质量浓度组(1,3,10 mg·L^-1)和秋水仙碱组(0.2 mg·L^-1),除正常组外,其余各组均用400 mg·L^-1MSU刺激6 h,诱导体外炎症反应。噻唑蓝(MTT)比色法检测TSD对细胞活力影响;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞上清液炎性因子如肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素^-1β(IL^-1β)的分泌水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测TLR4,髓样分化因子88(MyD88)及NF-κB蛋白表达;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测TLR4,NF-κB及IL^-1β前体(Pro-IL^-1β)mRNA表达水平;免疫荧光法检测NF-κB p65的核位移情况。结果:0~32 mg·L^-1TSD对细胞活力基本无影响;与正常组比较,模型组炎性因子TNF-α及IL^-1β的分泌水平显著升高(P0.01),通路关键蛋白(TLR4,MyD88及NF-κB)和基因(TLR4,NF-κB及Pro-IL^-1β)的表达显著升高(P0.01);与模型组比较,1~30 mg·L^-1TSD可显著下调炎性因子TNF-α及IL^-1β的分泌(P0.01),通路关键蛋白(TLR4,MyD88及NF-κB)和基因(TLR4,NF-κB及Pro-IL^-1β)的表达明显降低(P0.05,P0.01),细胞核内NF-κB p65叠加减少,部分转位至胞浆,抑制NF-κB p65核转位。结论:TSD可能通过下调TLR4,NF-κB及Pro-IL^-1βmRNA的表达,减少炎性因子TNF-α及IL^-1β分泌而发挥抗炎作用。