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不同日粮对滩羊尾部脂肪沉积及Leptin、GLUT4基因表达的影响

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家畜生态学报 2017年第1期38卷 13-19页

作者：代立霞周世卫田崇奇田春丽王小芳牛文智寇启芳陈玉林杨雨鑫西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100 宁夏回族自治区畜牧工作站宁夏银川750002 宁夏吴忠市红寺堡区天源良种羊繁育养殖有限公司宁夏吴忠751900

试验旨在研究日粮不同能蛋水平对滩羊尾部脂肪沉积的影响,滩羊Leptin基因与GLUT4基因在不同能蛋水平日粮的表达差异,以及基因表达与滩羊脂肪沉积间的相关性。试验设计4种不同能量蛋白水平日粮对4~8月龄滩羊分三个阶段进行饲养试验,测量... 详细信息

试验旨在研究日粮不同能蛋水平对滩羊尾部脂肪沉积的影响,滩羊Leptin基因与GLUT4基因在不同能蛋水平日粮的表达差异,以及基因表达与滩羊脂肪沉积间的相关性。试验设计4种不同能量蛋白水平日粮对4~8月龄滩羊分三个阶段进行饲养试验,测量尾重、GR值和胴体重,测量滩羊尾宽、尾长、尾周长和尾厚。采用实时荧光定量PCR技术检测Leptin与GLUT4的基因表达,对基因表达量与脂肪沉积作相关性分析。结果表明,滩羊随着日龄增加脂肪沉积增加,且高能蛋水平组增长值显著高于低能蛋水平组(P脂肪的沉积。通过对基因表达的定量分析表明了高能蛋日粮抑制滩羊Leptin的表达水平,促进滩羊GLUT4的表达。

关键词：滩羊能蛋水平尾部脂肪基因

野生盘羊×巴什拜羊杂交二代尾部脂肪差异表达lncRNA的鉴定与分析

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中国畜牧兽医 2022年第5期49卷 1796-1805页

作者：苏晓慧何海迎吐尔逊阿依·牙力坤王琼马海玉刘玲玲刘武军新疆农业大学动物科学学院乌鲁木齐830052 吐鲁番职业技术学院吐鲁番838000

【目的】分析不同脂尾型绵羊尾部脂肪组织中的长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)的表达谱,探究lncRNA与绵羊尾部脂肪沉积机制的关系,为揭示绵羊尾脂沉积机制提供理论依据。【方法】选择新疆地方绵羊巴什拜羊(肥尾型)和野生盘... 详细信息

【目的】分析不同脂尾型绵羊尾部脂肪组织中的长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)的表达谱,探究lncRNA与绵羊尾部脂肪沉积机制的关系,为揭示绵羊尾脂沉积机制提供理论依据。【方法】选择新疆地方绵羊巴什拜羊(肥尾型)和野生盘羊×巴什拜羊杂交二代(小尾型)作为研究对象,采集2个群体尾部脂肪组织,利用转录组测序技术筛选差异表达lncRNA并预测靶基因,对其进行GO功能和KEGG通路富集分析;利用实时荧光定量PCR技术验证转录组测序的表达结果。【结果】通过差异表达分析共筛选出728个差异表达lncRNAs,其中270个表达下调,458个表达上调;通过差异表达lncRNA靶基因的GO功能和KEGG通路富集分析,筛选到634个靶基因参与疾病、免疫、蛋白修饰、细胞代谢等相关功能分类,共涉及76条信号通路,部分lncRNA介导的靶基因SCD、GPAM、THRSP、FASN等与绵羊尾部脂肪沉积相关。实时荧光定量PCR与转录组测序结果趋势相同。【结论】lncRNA在绵羊脂尾进化中对尾部脂肪沉积具有重要的调控作用,为从lncRNA的角度分析绵羊脂肪沉积提供了理论依据。

关键词：绵羊尾部脂肪脂肪沉积 lncRNA 转录组测序

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兰州大尾羊尾部脂肪特性分析研究

黑龙江畜牧兽医 2019年第5期 62-65页

作者：鲁菁菁徐红伟王亚玲张麟文杨具田曹忻西北民族大学生命科学与工程学院兰州730000

为了综合利用兰州大尾羊尾部脂肪及进行种质资源保护,试验以兰州大尾羊尾部脂肪为研究对象,测定了其理化性质,采用气相色谱技术(GC)测定了尾部脂肪中脂肪酸的组成及含量,并进行分析。结果表明:兰州大尾羊尾部脂肪的熔点为47.0℃,碘值(I... 详细信息

为了综合利用兰州大尾羊尾部脂肪及进行种质资源保护,试验以兰州大尾羊尾部脂肪为研究对象,测定了其理化性质,采用气相色谱技术(GC)测定了尾部脂肪中脂肪酸的组成及含量,并进行分析。结果表明:兰州大尾羊尾部脂肪的熔点为47.0℃,碘值(I_2)为64.5 g/100 g,酸值(KOH)为0.116 mg/g,皂化值(KOH)为195.14 mg/g。尾部脂肪中共检测出37种脂肪酸,含量占脂肪酸总量的99.75%;不饱和脂肪酸含量为56.68%,其中油酸占比最大,为41.18%;饱和脂肪酸含量为43.32%,主要含有棕榈酸、硬脂酸,含量分别为20.64%、11.37%;共轭亚油酸(CLA)含量为1.15%。说明兰州大尾羊尾部脂肪不饱和脂肪酸含量较高。

关键词：兰州大尾羊尾部脂肪脂肪特性脂肪酸种类脂肪酸含量

不同尾型绵羊尾部脂肪miRNA-Seq分析及表达验证

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不同尾型绵羊尾部脂肪miRNA-Seq分析及表达验证

作者：费晓娟中国农业科学院

学位级别：硕士

绵羊的尾型是受多基因调控的数量性状,在生产中绵羊尾部沉积大量的脂肪使经济效益受到了制约。绵羊的尾型是由尾部脂肪沉积的程度和尾椎骨的发育共同决定的,目前已挖掘出大量关于绵羊尾部脂肪沉积和尾椎骨发育的候选基因,但是绵羊尾型... 详细信息

绵羊的尾型是受多基因调控的数量性状,在生产中绵羊尾部沉积大量的脂肪使经济效益受到了制约。绵羊的尾型是由尾部脂肪沉积的程度和尾椎骨的发育共同决定的,目前已挖掘出大量关于绵羊尾部脂肪沉积和尾椎骨发育的候选基因,但是绵羊尾型的形成机制尚不明确。miRNA(micro RNA)是非编码RNA中的一种,在机体脂代谢等方面有重要的调控作用。因此,本试验以湖羊和藏羊的尾部脂肪组织为研究对象,分别采取湖羊(短脂尾)和藏羊(短瘦尾)的尾部脂肪组织进行miRNA-Seq分析,筛选出与绵羊尾部脂肪沉积相关的miRNA,并对筛选到的关键miRNA进行表达分析,为揭示绵羊尾部脂肪沉积机理提供理论依据。全文主要内容和结果如下:1.本研究使用miRNA-Seq在湖羊和藏羊的尾部脂肪组织中筛选与绵羊尾部脂肪沉积相关的miRNA。分析结果表明,在湖羊和藏羊的尾部脂肪组织中筛选到155个差异表达的miRNA,包括77个下调,78个上调。其中17个已被报道与脂肪代谢相关,丰富了绵羊尾部脂肪组织中miRNA的表达模式。2.使用miRanda和RNAhybrid软件预测绵羊尾部脂肪组织中筛选到的差异表达的miRNA靶基因,经过滤筛选获得15207个靶基因。对靶基因进行功能富集分析,结果显示这些靶基因显著富集到细胞生长等742条GO条目和302条信号通路。其中与脂肪生成相关的ECM-受体相互作用信号通路、PI3K-Akt信号通路、AMPK信号通路、MAPK信号通路、TGF-beta信号通路和Wnt信号通路在本研究中显著富集。一些与脂代谢相关的靶基因也在这些通路中富集,其中PIK3R5富集在PI3K-AKT信号通路中,SIRT1富集在AMPK信号通路中。3.通过对与脂代谢相关的差异miRNA及其对应的与脂代谢相关的靶基因构建互作网络,共获得30对互作关系。其中,IGF2R基因被oar-miR-25、oar-miR-133和oar-miR-432同时调控。4.通过检测oar-miR-379-5p、novel＿mir61和oar-miR-432在湖羊和藏羊的尾部脂肪组织、肝脏、心、肺和肌肉组织中的表达。其中在湖羊和藏羊的尾部脂肪组织中oar-miR-379-5p、novel＿mir61和oar-miR-432的表达差异显著。5.成功克隆出绵羊HOXC93’UTR、PIK3R53’UTR和SIRT13’UTR的部分序列,并构建野生型和突变型psi CHECK2质粒。双荧光素酶试验证明HOXC9是oar-miR-379-5p的靶基因,PIK3R5是novel＿mir61的靶基因,SIRT1是oar-miR-432的靶基因。6.实时荧光定量结果证明HOXC9在湖羊尾部脂肪组织中的表达显著高于藏羊尾部脂肪组织中的表达;PIK3R5在湖羊的尾部脂肪组织中的表达显著低于藏羊尾部脂肪组织中的表达;SIRT1在湖羊的尾部脂肪组织中的表达显著低于藏羊的尾部脂肪中的表达。Western Blot结果证明PIK3R5在湖羊尾部脂肪组织中的表达显著高于藏羊尾部脂肪组织中的表达。说明HOXC9、PIK3R5和SIRT1可能与绵羊尾部脂肪合成相关。

关键词：绵羊尾部脂肪 miRNA 表达分析验证

LPL、C/EBPα基因在不同尾型绵羊尾部脂肪组织中的表达分析

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LPL、C/EBPα基因在不同尾型绵羊尾部脂肪组织中的表达分析

作者：韦璇西北农林科技大学

学位级别：硕士

本研究旨在探讨LPL、C/EBPα基因与绵羊尾部脂肪沉积的关系。为进一步探寻阻断尾部脂肪过度沉积的机制，实现既能节约饲养成本又能充分发挥本品种的优良生产性能这一目的提供理论基础。根据NCBI上牛C/EBPα基因(GenBank登陆号: NM76784... 详细信息

本研究旨在探讨LPL、C/EBPα基因与绵羊尾部脂肪沉积的关系。为进一步探寻阻断尾部脂肪过度沉积的机制，实现既能节约饲养成本又能充分发挥本品种的优良生产性能这一目的提供理论基础。根据NCBI上牛C/EBPα基因(GenBank登陆号: NM76784.2)全长设计引物，采用RT-PCR技术克隆C/EBPα基因CDs区序列，并用生物信息学方法分析序列和蛋白的特征;分别采用实时荧光定量PCR技术和Western blot技术检测LPL和C/EBPα基因在9月龄陕北细毛羊(长瘦尾型)、同羊(长脂尾型、短脂尾型)、西藏羊(短瘦尾型)、滩羊(长脂尾型)和哈萨克羊(肥臀型)5个品种绵羊共计18个个体的尾部脂肪组织中mRNA与蛋白的表达水平;随机选择6个月龄(3、6、9、12、15、18月龄)的滩羊，每个月龄体重大小一致的健康雄性个体3只，共计18只，采集其尾部脂肪，探讨滩羊LPL、C/EBPα基因随月龄增长在尾部脂肪组织中的mRNA表达规律;比较滩羊(长脂尾)、陕北细毛羊(长瘦尾)两种不同尾型绵羊品种在同一月龄(9月龄)时，其LPL、C/EBPα基因在尾部脂肪、皮下脂肪以及背最长肌中mRNA表达规律;以20日龄绵羊尾部脂肪作为试验样本，用酶消化法分离前体脂肪细胞，研究前体脂肪细胞的增殖与分化规律，并对分化过程中(诱导第0、2、4、6、8、10d)LPL、C/EBPα基因的mRNA表达水平进行检测。主要研究结果如下： 1.成功克隆绵羊C/EBPα基因全长序列，生物信息学分析结果表明，其编码区长度为1062bp，起始密码子为ATG，终止密码子为TGA，编码353个氨基酸，C/EBPα蛋白的分子量为37150.8Da，与牛C/EBPα基因的相似性达99%，其编码的蛋白含一个典型的亮氨酸拉链结构。 2. LPL、C/EBPα蛋白表达趋势与mRNA表达趋势大致相同，均在脂尾型(同羊和滩羊)和肥臀型(哈萨克羊)绵羊尾部脂肪组织中具有较高的表达水平，而在瘦尾型(陕北细毛羊和西藏羊)绵羊尾部脂肪中具有相对较低的表达水平，且在同一品种内，同羊长脂尾型尾部脂肪中C/EBPα和LPL mRNA与蛋白表达水平均显著高于短脂尾型(P尾部脂肪的沉积有显著相关性，并且两基因可能都在一定程度上促进了脂肪的合成。 3.滩羊尾部脂肪组织中LPL、C/EBPα基因的mRNA表达水平随个体发育性增长存在阶段性变化规律，均在3、9、18月龄时达较高水平，且与其余月份相比差异显著(P尾部脂肪中LPL、C/EBPα基因的mRNA表达水平均远远高于皮下脂肪和背最长肌，而在陕北细毛羊的皮下脂肪组织中C/EBPα基因却有相对较高的表达水平，说明尾部脂肪的过度沉积对全身脂肪的分配影响较大，且尾型不同的绵羊品种可能具有不同的脂肪沉积模式。 5.成功分离了原代绵羊尾部前体脂肪细胞，并诱导其向成熟脂肪细胞的分化，对LPL和C/EBPα基因的mRNA表达水平进行时序测定，证明在前体脂肪细胞分化过程中，LPL基因确实先于C/EBPα基因表达。

关键词：绵羊 C/EBPα LPL 尾部脂肪前体脂肪细胞

不同月龄苏尼特羊羊尾脂肪组织特性与差异代谢物分析

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不同月龄苏尼特羊羊尾脂肪组织特性与差异代谢物分析

作者：何雨内蒙古农业大学

学位级别：硕士

随着苏尼特羊数量的逐年上升,羊尾油脂产量随之增多。但目前羊尾脂肪不能得到合理的利用和开发,造成了羊尾脂肪大量的堆积浪费,因此针对肉羊副产物的开发利用有待于提供系统化的基础数据。本实验采用自然放牧条件下6月龄,18月龄,30月龄... 详细信息

随着苏尼特羊数量的逐年上升,羊尾油脂产量随之增多。但目前羊尾脂肪不能得到合理的利用和开发,造成了羊尾脂肪大量的堆积浪费,因此针对肉羊副产物的开发利用有待于提供系统化的基础数据。本实验采用自然放牧条件下6月龄,18月龄,30月龄苏尼特羊羊尾脂肪,对其进行水分含量、灰分含量、粗脂肪含量、胶原蛋白含量及抗氧化值测定,并通过脂肪组织蛋白提取试剂盒及BCA蛋白浓度测定试剂盒测定羊尾脂肪粗蛋白含量,色差仪测定羊尾脂肪中L*、a*、b*值;利用超高效液相色谱（UPLC）系统与高分辨率串联质谱仪进行了样品检测与数据采集,对代谢物进行提取,注释与定量,以ratio≧0.5或ratio≦0.5;p value≦0.05;VIP≧1为标准对代谢物进行差异分析,探索不同月龄苏尼特羊羊尾脂肪代谢物中氨基酸与脂肪酸组成与变化。研究结果显示:6月龄,18月龄与30月龄苏尼特羊尾脂肪中水分含量分别为5.82%、5.14%、5.14%;灰分含量分别为0.87%、0.81%、0.85%;脂肪含量分别为94.09%、93.38%、91.85%,其中30月龄与6月龄脂肪含量差异显著（p＜0.05）;蛋白含量分别为2.37%、3.37%、2.30%;胶原蛋白含量分别为1.51mg/100ml、1.48mg/100ml、1.08mg/100ml;过氧化值分别为0.90mg/kg、0.88mg/kg、0.87mg/kg。色度值测定结果显示,30月龄L*值,a*值与其它两个月龄差异显著（p＜0.05）。根据筛选差异物阈值标准在代谢物中筛选出饱和脂肪酸,单不饱和脂肪酸及双不饱和脂肪酸,主要包含亚油酸,油酸及棕榈酸等脂肪酸。在30月龄与6月龄,30月龄与18月龄组间,油酸、亚油酸及反油酸呈显著性上调趋势,在30月龄与18月龄组间棕榈酸呈显著性上调趋势,说明羊尾脂肪中不饱和脂肪酸含量随着苏尼特羊月龄增长而增加。根据筛选差异物阈值标准在代谢物中筛选出必需氨基酸:苯丙氨酸,亮氨酸及缬氨酸等;鲜味氨基酸:丙氨酸,谷氨酸及精氨酸等,说明羊尾脂肪中必需氨基酸与功能氨基酸种类较为丰富。本研究对苏尼特羊尾脂肪研究与产品开发利用提供较为全面系统的基础数据,对提高羊尾脂肪的利用和附加值,以及开发新产品具有重要意义。

关键词：苏尼特羊氨基酸脂肪酸尾部脂肪营养成分

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藏羊与小尾寒羊不同部位脂肪组织特性对比

现代畜牧兽医 2022年第2期 32-35页

作者：杨雪覃圣王慧千志松戴珍珍彭瑜雪马小琴蔡勇西北民族大学生命科学与工程学院甘肃兰州730030 西北民族大学实验教学部甘肃兰州730030

试验旨在探究藏羊不同部位脂肪组织结构特点及其与小尾寒羊脂肪组织结构的差异。选择健康8月龄藏羊和小尾寒羊各5只,不区分雌、雄,利用常规组织学染色方法对两种羊不同部位脂肪组织结构及其脂肪细胞形态进行研究。结果显示,藏羊大网膜... 详细信息

试验旨在探究藏羊不同部位脂肪组织结构特点及其与小尾寒羊脂肪组织结构的差异。选择健康8月龄藏羊和小尾寒羊各5只,不区分雌、雄,利用常规组织学染色方法对两种羊不同部位脂肪组织结构及其脂肪细胞形态进行研究。结果显示,藏羊大网膜脂肪细胞及尾部脂肪细胞形态多样;两种羊不同部位的脂肪细胞平均直径、面积、数量均存在差异;藏羊肾周脂肪、尾部脂肪的平均直径和面积均显著大于小尾寒羊(P尾部、肾周脂肪数量均显著高于藏羊(P脂肪组织结构特点不一,且脂肪组织沉积能力不同。

关键词：藏羊小尾寒羊大网膜脂肪肾周脂肪尾部脂肪