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基于尼罗红类ONOO^(-)近红外荧光探针的开发及其成像应用

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化学学报 2023年第11期81卷 1515-1521页

作者：贺晓梦袁方张素雅张健健西北大学化学与材料科学学院西安710021

过氧亚硝酸根(ONOO^(-))在氧化应激和炎症过程中的生成与细胞损伤、炎症反应和免疫调节等密切相关,因此,开发高灵敏且高度选择性的ONOO^(-)检测方法对于深入理解疾病发生和发展机制、提高疾病的早期诊断和治疗水平具有极其重要意义.设... 详细信息

过氧亚硝酸根(ONOO^(-))在氧化应激和炎症过程中的生成与细胞损伤、炎症反应和免疫调节等密切相关,因此,开发高灵敏且高度选择性的ONOO^(-)检测方法对于深入理解疾病发生和发展机制、提高疾病的早期诊断和治疗水平具有极其重要意义.设计合成了一种选择性检测ONOO^(-)的新型荧光探针NR-Pro.该探针通过使用烷基链将2-羟基尼罗红衍生物(NR-OH)与4,4’-氮杂二基二苯酚基团有机结合,在ONOO^(-)作用下,释放出近红外染料NR-OH.实验研究表明,该探针在658 nm处对ONOO^(-)表现出显著的“OFF-ON”型荧光信号响应,且对ONOO^(-)浓度在0~10μmol/L范围内呈现良好的线性关系,检出限低至17.7 nmol/L.这项研究进一步证实了NR-Pro探针在检测RAW264.7细胞中外源和内源ONOO^(-)方面具有优良的成像能力,这为早期诊断和治疗疾病提供了新的思路.

关键词：近红外荧光探针过氧亚硝酸根尼罗红细胞成像

尼罗红为探针对芳醚树枝形聚合物微环境的研究

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影像科学与光化学 2009年第1期27卷 1-7页

作者：郑少君曾毅李明李迎迎李嫕中国科学院理化技术研究所光化学转换与功能材料重点实验室北京100190 中国科学院研究生院北京100039

本工作合成了一系列羧基为外围末端基团的芳醚树枝形聚合物Gn(n=1—4),利用吸收光谱,稳态和时间分辨荧光发射光谱研究了Gn对尼罗红分子的增溶作用和Gn微环境极性.研究结果表明,尼罗红在Gn中的溶解度随代数增加而增大,从G1到G4,尼罗红溶... 详细信息

本工作合成了一系列羧基为外围末端基团的芳醚树枝形聚合物Gn(n=1—4),利用吸收光谱,稳态和时间分辨荧光发射光谱研究了Gn对尼罗红分子的增溶作用和Gn微环境极性.研究结果表明,尼罗红在Gn中的溶解度随代数增加而增大,从G1到G4,尼罗红溶解度相比水中分别增加了3、35、47和215倍.Gn的微环境极性比水低,2-4代芳醚树枝形聚合物具有相似的微环境极性.

关键词：树枝形聚合物微环境极性荧光尼罗红

尼罗红荧光优化法快速检测微拟球藻细胞内油脂含量

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微生物学通报 2017年第11期44卷 2588-2595页

作者：刘林聪杨菊平周健朱文杰罗锋张晓辉西南大学资源环境学院生物能源与环境修复研究中心重庆400715 西南大学资源环境学院重庆400715

【目的】利用尼罗红荧光染色法快速检测微拟球藻细胞内的油脂含量。【方法】系统性地调整激发波长与发射波长,确定最佳二甲基亚砜(DMSO)浓度、尼罗红终浓度、染色时间和细胞密度的范围,比较重量法和Triolein标准品的油脂含量分别与荧光... 详细信息

【目的】利用尼罗红荧光染色法快速检测微拟球藻细胞内的油脂含量。【方法】系统性地调整激发波长与发射波长,确定最佳二甲基亚砜(DMSO)浓度、尼罗红终浓度、染色时间和细胞密度的范围,比较重量法和Triolein标准品的油脂含量分别与荧光强度之间的关系。【结果】分析得出了尼罗红荧光强度与微拟球藻细胞油脂含量的关系,确定优化后染色条件为:二甲基亚砜浓度为5%,尼罗红终浓度为1 mg/L,染色时间为6 min,且细胞密度为(0.5-3.0)×10~6 cells/m L的范围内,激发波长和发射波长分别为515 nm和570 nm。重量法和Triolein标准品的油脂含量分别与尼罗红染色荧光强度之间的关联性,表明尼罗红荧光染色方法可以用来快速准确地检测细胞内的油脂含量,且油脂含量与荧光强度之间正相关,相关系数R^2为0.997 3。尼罗红染色优化后油脂的检测下限达到2μg,大大减少了测定油脂含量所需细胞量。【结论】针对不同种属系统性地确认了荧光激发波长和发射波长,并优化验证得到了最佳尼罗红荧光染色条件,可以快速准确地检测微量微拟球藻细胞内的油脂含量,便于大规模筛选高产油突变藻株。

关键词：尼罗红荧光强度油脂含量微拟球藻

以尼罗红为探针对新型两亲性树枝形聚合物微环境的研究

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影像科学与光化学 2010年第5期28卷 343-353页

作者：袁钊曾毅陈金平李迎迎韩永滨李嫕中国科学院理化技术研究所光化学转换与功能材料重点实验室北京100190 中国科学院研究生院北京100049

本工作合成了一系列外围以三缩四乙二醇单甲醚修饰的烷基芳醚骨架两亲性树枝形聚合物Gn(n=0—3),化合物通过了1H-NMR,IR和MALDI-TOF-MS的表征.利用吸收光谱,稳态和时间分辨荧光光谱研究了水溶液中Gn对尼罗红分子的增溶作用以及Gn内部微... 详细信息

本工作合成了一系列外围以三缩四乙二醇单甲醚修饰的烷基芳醚骨架两亲性树枝形聚合物Gn(n=0—3),化合物通过了1H-NMR,IR和MALDI-TOF-MS的表征.利用吸收光谱,稳态和时间分辨荧光光谱研究了水溶液中Gn对尼罗红分子的增溶作用以及Gn内部微环境的极性.研究结果表明,高代数树枝形聚合物Gn对尼罗红具有更好的增溶效果.1—3代树枝形聚合物Gn内部疏水孔腔微环境极性随代数增加而逐渐降低,G1和G2树枝形聚合物具有相似的微环境极性,而由于构象的变化使G3具有更加疏水的微环境.

关键词：树枝形聚合物微环境极性荧光光谱尼罗红

尼罗红染色荧光定量海洋微拟球藻胞内油脂含量

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中国油脂 2021年第11期46卷 121-127页

作者：李玉芹苏裴马怡然尹帅陈赛兰胡雅婷湘潭大学化工学院湖南湘潭411105

以海洋微拟球藻Nannochloropsis oceanica为受试对象,采用尼罗红染色荧光定量胞内油脂含量。采用单因素实验考察了激发波长、发射波长、二甲基亚砜体积分数、染色时间、尼罗红质量浓度对微藻胞内油脂荧光强度的影响,在此基础上,采用响... 详细信息

以海洋微拟球藻Nannochloropsis oceanica为受试对象,采用尼罗红染色荧光定量胞内油脂含量。采用单因素实验考察了激发波长、发射波长、二甲基亚砜体积分数、染色时间、尼罗红质量浓度对微藻胞内油脂荧光强度的影响,在此基础上,采用响应面实验进行染色荧光定量条件优化。结果表明,优化的微拟球藻胞内油脂尼罗红染色荧光定量最佳条件为二甲基亚砜体积分数25.6%、染色时间16 min、尼罗红质量浓度0.11μg/mL、激发波长430 nm、发射波长685 nm。在最佳条件下,尼罗红染色微拟球藻胞内油脂荧光强度与油脂含量显著正相关(R^(2)=0.9999),说明通过尼罗红染色荧光法可快速表征微拟球藻胞内油脂含量。研究结果为后续微拟球藻资源高值化应用及高产油脂海洋微藻快速筛选和动态追踪微藻产油过程提供了依据。

关键词：海洋微拟球藻油脂含量尼罗红荧光强度

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尼罗红-荧光光谱法测定亚心形扁藻油脂含量

中国油脂 2016年第10期41卷 98-101页

作者：宋琪李泉邴欣刘双于道永中国石油大学(华东)生物工程与技术中心山东青岛266580

尼罗红-荧光光谱法能够快速地对微藻细胞中的油脂含量进行检测,但是该方法对所测微藻物种具有一定依赖性,在分析不同微藻细胞油脂含量前需要对测试条件进行优化。优化后的亚心形扁藻油脂含量分析条件为:藻液800×g离心5 min去除培养基,... 详细信息

尼罗红-荧光光谱法能够快速地对微藻细胞中的油脂含量进行检测,但是该方法对所测微藻物种具有一定依赖性,在分析不同微藻细胞油脂含量前需要对测试条件进行优化。优化后的亚心形扁藻油脂含量分析条件为:藻液800×g离心5 min去除培养基,用体积分数4%的二甲基亚砜(DMSO)水溶液重悬至OD750=0.3,尼罗红质量浓度0.8μg/m L,避光40℃水浴恒温10 min,激发波长520 nm。发现亚心形扁藻在培养的对数生长后期油脂开始积累,稳定期后期油脂含量趋于恒定,优化后的尼罗红-荧光光谱法能够准确地检测亚心形扁藻生长过程中的油脂含量变化。

关键词：亚心形扁藻尼罗红荧光光谱法油脂含量

尼罗红在测定细菌细胞中聚-β-羟基丁酸和其他脂类贮藏物质中的应用

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微生物学报 1994年第1期34卷 71-75页

作者：王敬国北京农业大学农业资源与环境学院北京100094

通过对含有PHB和非PHB(脂类贮存物质(NPLD)的细菌细胞的尼罗红染色和荧光显微观察,证实尼罗红是一种很好的细菌细胞内贮存的脂类物质的荧光染色剂,灵敏度较高.可用于PHB和非PHB脂类贮藏物质荧光显微观察,并能在一定程度上将两者区分开来.

关键词：尼罗红细菌脂类羟基丁酸贮藏物

利用卡氏白和尼罗红染色观察稻瘟病菌有性世代的结构

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中国水稻科学 2016年第6期30卷 668-672页

作者：顾卓侃李玲王教瑜柴荣耀王艳丽张震毛雪琴邱海萍孙国昌杭州师范大学生命与环境科学学院杭州310036 浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所杭州310021 浙江农林大学农业与食品科学学院浙江临安311300

稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)是异宗配合的子囊菌,但至目前,关于其有性世代产生过程和结构的研究相对较少。本研究利用两个稻瘟病菌菌株Guy-11与2539在多种培养基上进行杂交试验,观察有性世代产生情况。结果表明,两菌株在所有参试培养... 详细信息

稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)是异宗配合的子囊菌,但至目前,关于其有性世代产生过程和结构的研究相对较少。本研究利用两个稻瘟病菌菌株Guy-11与2539在多种培养基上进行杂交试验,观察有性世代产生情况。结果表明,两菌株在所有参试培养基上杂交后均能产生子囊壳,但子囊壳的数量、产生速度和成熟度各不相同,以燕麦培养基为最佳。为了进一步观察有性世代的结构,我们采用卡氏白和尼罗红对子囊和子囊孢子进行染色和荧光观察。荧光显微镜下,子囊和子囊孢子的细胞壁均能被卡氏白染成清晰的亮蓝色,细胞结构清晰可辨。成熟的子囊壳内可产生大量的子囊,子囊中含有8个子囊孢子,子囊孢子通常含有4个细胞。同时,子囊孢子能够被尼罗红染成橘红色,表明子囊孢子中储藏大量的脂肪类物质。本研究提供了一种有效的观察稻瘟病菌有性世代结构的荧光染色方法,为后续的研究奠定了基础。

关键词：稻瘟病菌有性生殖卡氏白尼罗红

尼罗红荧光光谱法快速测定解脂耶氏酵母油脂含量的研究

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食品工业科技 2017年第15期38卷 270-274,323页

作者：高山刘相岑朱晨光史吉平张保国上海大学生命科学学院上海200444 中国科学院上海高等研究院上海201210

为了建立快速简便检测解脂耶氏酵母油脂含量的方法,探讨了尼罗红-光谱法测定解脂耶氏酵母油脂含量的检测条件。通过研究解脂耶氏酵母最佳发射光波长、细胞密度、尼罗红染液用量、染色时间、不同助溶剂效能及最佳体积分数对荧光强度的影... 详细信息

为了建立快速简便检测解脂耶氏酵母油脂含量的方法,探讨了尼罗红-光谱法测定解脂耶氏酵母油脂含量的检测条件。通过研究解脂耶氏酵母最佳发射光波长、细胞密度、尼罗红染液用量、染色时间、不同助溶剂效能及最佳体积分数对荧光强度的影响,确定了最佳检测条件,得到细胞油脂含量与荧光强度的线性关系。解脂耶氏酵母在激发光560 nm、发射光650 nm处有最高荧光值,每毫升菌液加入质量分数为0.1 mg/m L的尼罗红染液20μL,加入体积分数为15%的异丙醇,黑暗染色5 min,在细胞OD600=0~1.3的范围内,菌液的油脂含量(X)与荧光值(Y)呈较好的线性关系,线性关系式为Y=6.3651X+10.097,R2=0.9902,灵敏度达0.0001 g。该方法能够准确地反映出解脂耶氏酵母胞内油脂含量。尼罗红-荧光法可成为一种快速检测解脂耶氏酵母胞内油脂含量的新方法。

关键词：解脂耶氏酵母油脂含量尼罗红荧光光谱法