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桑黄菌丝体对小鼠肉瘤s_(180)的抑制作用

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食用菌学报 2015年第3期22卷 60-63页

作者：雷萍吴亚召张文隽谢艳华杜芳陕西省微生物研究所陕西西安710043 第四军医大学陕西西安710032

建立荷瘤(s180)小鼠模型,用桑黄(Phellinus igniarius)菌丝体灌胃(低、中和高剂量组分别为0.25、0.5和1.0g/kg/d)至模型组肿瘤直径达1cm停止给药,测定抑瘤率和各脏器指数。结果表明:阳性对照组(顺铂3mg/kg/d)显著抑制小鼠体重的增加,而... 详细信息

建立荷瘤(s180)小鼠模型,用桑黄(Phellinus igniarius)菌丝体灌胃(低、中和高剂量组分别为0.25、0.5和1.0g/kg/d)至模型组肿瘤直径达1cm停止给药,测定抑瘤率和各脏器指数。结果表明:阳性对照组(顺铂3mg/kg/d)显著抑制小鼠体重的增加,而桑黄菌丝体3个剂量组对小鼠体重的增加没有显著的抑制作用;低、中和高3个剂量组抑瘤率分别为18.3%、29.5%和40.7%。桑黄菌丝体对脾脏指数与胸腺指数的影响小于阳性对照药物顺铂。

关键词：桑黄菌丝体小鼠肉瘤s180 抑瘤作用

异功化瘤颗粒对小鼠肉瘤s_(180)(实体型)的抑制作用

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成都中医药大学学报 2007年第4期30卷 31-32页

作者：肖桦黄秀凤黄秀深陈洁成都中医药大学四川成都610075

目的:观察异功化瘤颗粒对小鼠肉瘤s180(实体型)的抑制作用,并与标准化疗药比较,了解其药效学特点,为临床应用提供药理学依据。方法:荷s180肉瘤的昆明种小鼠分为5-FU组,异功化瘤颗粒大、中、小剂量组与空白对照组一起,通过检测各组小鼠... 详细信息

目的:观察异功化瘤颗粒对小鼠肉瘤s180(实体型)的抑制作用,并与标准化疗药比较,了解其药效学特点,为临床应用提供药理学依据。方法:荷s180肉瘤的昆明种小鼠分为5-FU组,异功化瘤颗粒大、中、小剂量组与空白对照组一起,通过检测各组小鼠体重、瘤重变化和抑瘤率观察异功化瘤颗粒对s180肉瘤的治疗作用。结果:各组小鼠体重均增加,异功化瘤颗粒大剂量组(21.6g/kg)、中剂量组(10.8g/kg)和5-FU组的抑瘤率分别为52.3%、37.9%和60.1%(Ps180肉瘤均有明显抑制作用。

关键词：异功化瘤颗粒小鼠肉瘤s180 抑瘤率

软骨多糖对小鼠肉瘤细胞s_(180)抑制作用的实验研究

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中国肿瘤 2006年第11期15卷 772-774页

作者：刘安军尤玲玲贾永利张国蓉天津科技大学食品工程与生物技术学院天津300457

[目的]研究软骨多糖对s180荷瘤小鼠的生命延长率和抑瘤率的影响。[方法]以小鼠肉瘤s180细胞腹腔及皮下造模,设对照组﹑低剂量组﹑高剂量组3组,分别观察软骨多糖对各组小鼠的生存时间、生命延长率和抑瘤率的影响。[结果]高剂量组小鼠的... 详细信息

[目的]研究软骨多糖对s180荷瘤小鼠的生命延长率和抑瘤率的影响。[方法]以小鼠肉瘤s180细胞腹腔及皮下造模,设对照组﹑低剂量组﹑高剂量组3组,分别观察软骨多糖对各组小鼠的生存时间、生命延长率和抑瘤率的影响。[结果]高剂量组小鼠的生存时间为19.0天,生命延长率为25.0%,抑瘤率为73.5%,而低剂量组小鼠分别为16.5天,8.6%和27%。[结论]软骨多糖能有效抑制小鼠肉瘤s180细胞的生长,是一种新型的抑癌物质。

关键词：软骨多糖小鼠肉瘤s180 生命延长率抑瘤率

人造靶点免疫导向阿霉素对荷肉瘤小鼠瘤质量及生存期的影响

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南方医科大学学报 2008年第4期28卷 646-648页

作者：张婧罗敏周媛张积仁南方医科大学珠江医院肿瘤中心广东广州510282

目的制备小鼠抗人IgG-葡聚糖-阿霉素免疫靶向偶联物,在肿瘤组织中接种人IgG非特异性靶点,探讨人造靶点免疫导向治疗肿瘤的可行性。方法制备小鼠抗人IgG-葡聚糖-阿霉素(阿霉素)偶联物,建立荷瘤小鼠模型。采用ELIsA法测定小鼠抗人IgG-葡聚... 详细信息

目的制备小鼠抗人IgG-葡聚糖-阿霉素免疫靶向偶联物,在肿瘤组织中接种人IgG非特异性靶点,探讨人造靶点免疫导向治疗肿瘤的可行性。方法制备小鼠抗人IgG-葡聚糖-阿霉素(阿霉素)偶联物,建立荷瘤小鼠模型。采用ELIsA法测定小鼠抗人IgG-葡聚糖-阿霉素偶联物抗体活性;体外细胞毒性实验比较分析小鼠抗人IgG、游离阿霉素、小鼠抗人IgG-葡聚糖-阿霉素对s180细胞的毒性作用,比较阿霉素、小鼠抗人IgG-葡聚糖-阿霉素、小鼠抗人IgG-葡聚糖-阿霉素+人IgG的抑瘤作用及对荷瘤小鼠生存时间的影响。结果制备的偶联物中,小鼠抗人IgG、葡聚糖与阿霉素物质的量比为1∶2.5∶38;偶联物保留了小鼠抗人IgG抗体活性;体外细胞毒性实验表明偶联物对s180细胞有体外杀伤作用。小鼠抗人IgG-葡聚糖-阿霉素+肿瘤中接种人IgG组对小鼠移植性s180肉瘤的抑瘤率达17.72%,与其他组比较有显著性差异,但并未延长荷瘤小鼠的生存时间。结论通过在肿瘤组织中接种IgG非特异性靶点,用抗人IgG单克隆免疫靶向阿霉素治疗小鼠s180肉瘤较对照组具有靶向作用。

关键词：阿霉素靶向偶联物小鼠肉瘤s180 抑瘤率

干壁虎对食管癌细胞和s180荷瘤小鼠的抑制作用

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中药材 2008年第9期31卷 1304-1307页

作者：刘菲王淑英李艳王建刚河南科技大学医学院河南洛阳471003

目的:观察干壁虎体外对食管癌细胞,体内对s180荷瘤小鼠的抑制作用及对免疫系统的影响。方法:体外实验应用血清药理学方法,MTT法测定含干壁虎血清对食管癌EC9706和食管癌EC1细胞系生长的抑制作用,按台盼蓝排染法绘制细胞生长曲线。体内... 详细信息

目的:观察干壁虎体外对食管癌细胞,体内对s180荷瘤小鼠的抑制作用及对免疫系统的影响。方法:体外实验应用血清药理学方法,MTT法测定含干壁虎血清对食管癌EC9706和食管癌EC1细胞系生长的抑制作用,按台盼蓝排染法绘制细胞生长曲线。体内实验建立移植瘤小鼠s180肉瘤模型,给药后计算抑瘤率、胸腺指数、脾脏指数,观察腹腔巨噬细胞吞噬鸡血红细胞实验指标;用sABC免疫组化法检测血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的蛋白表达,TUNEL方法检测细胞凋亡率。结果:干壁虎体外可抑制食管癌细胞的生长,体内可抑制小鼠肉瘤s180生长,对免疫系统无影响;可降低肿瘤组织VEGF、bFGF蛋白的表达,诱导肿瘤细胞凋亡。结论:干壁虎有抗肿瘤活性;其抗肿瘤的部分作用可能通过诱导肿瘤细胞的凋亡及抑制肿瘤血管的生成而实现。

关键词：干壁虎 MTT法食管癌细胞小鼠肉瘤s180

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中药壁虎抗肿瘤作用的实验研究

时珍国医国药 2008年第4期19卷 957-959页

作者：刘菲王建刚席守民马晓娟河南科技大学医学院河南洛阳471003

目的探讨中药壁虎抗肿瘤作用及其作用机制。方法建立移植瘤小鼠s180肉瘤模型,将50只雌鼠随机分为对照组、环磷酰胺组、壁虎高组、中组、低组共5组,分别给于生理盐水灌胃1次/d,CTX(100 mg/kg)腹腔注射1次,壁虎高、中、低组(13.5,9,4.5 g/... 详细信息

目的探讨中药壁虎抗肿瘤作用及其作用机制。方法建立移植瘤小鼠s180肉瘤模型,将50只雌鼠随机分为对照组、环磷酰胺组、壁虎高组、中组、低组共5组,分别给于生理盐水灌胃1次/d,CTX(100 mg/kg)腹腔注射1次,壁虎高、中、低组(13.5,9,4.5 g/kg),每天灌胃1次。14 d后,称取荷瘤小鼠瘤重、胸腺重、脾脏重,计算抑瘤率、胸腺指数、脾脏指数,观察腹腔巨噬细胞吞噬鸡血红细胞实验指标;用sABC免疫组化法检测血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的蛋白表达,TUNEL方法检测细胞凋亡率。结果中药壁虎可抑制小鼠肉瘤s180生长,高、中、低组抑瘤率可达49.8%,52.8%,43.1%;对免疫器官无影响;可降低肿瘤组织VEGF,bFGF蛋白的表达,诱导肿瘤细胞凋亡。结论中药壁虎有抗肿瘤活性,其抗肿瘤的部分作用可能通过诱导肿瘤细胞的凋亡及抑制肿瘤血管的生成而实现。

关键词：中药壁虎小鼠肉瘤s180 血管内皮生长因子碱性成纤维细胞生长因子

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扶正中药动物抑瘤的实验研究

时珍国医国药 2007年第10期18卷 2410-2411页

作者：王钢胜费国新费新雄陈琳苏春燕杨岳珍柏晶妹胡世林谢明高小海湖北省黄石市第一医院.肿瘤医院 435001 湖北省肿瘤研究所湖北武汉430001

目的观察扶正中药的抑瘤作用和相关的毒副反应。方法给荷瘤小鼠饲服用纯扶正中药"四君子汤"加味方(简称扶正抗癌汤)煎制的汤剂,观察对小鼠移植性肉瘤s180的抑制作用及毒性实验,并设对照组进行比较。结果扶正抗癌汤对昆明种小鼠移植性小... 详细信息

目的观察扶正中药的抑瘤作用和相关的毒副反应。方法给荷瘤小鼠饲服用纯扶正中药"四君子汤"加味方(简称扶正抗癌汤)煎制的汤剂,观察对小鼠移植性肉瘤s180的抑制作用及毒性实验,并设对照组进行比较。结果扶正抗癌汤对昆明种小鼠移植性小鼠肉瘤s180抑瘤率达到40.6%,35%(中、低剂量组)。单纯"四君子汤"抑瘤率也达到35.6%,而由软坚散结中药组方组则无抑瘤作用。毒性实验显示,动物饮食、饮水正常,体重增加,无一动物死亡。结论纯扶正中药有明显的抑瘤效果而且安全无明显的毒副反应,适合临床推广使用。

关键词：扶正中药小鼠肉瘤s180 抑瘤率

软骨多糖作用下s_(180)荷瘤小鼠免疫功能的变化

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现代免疫学 2008年第6期28卷 502-505页

作者：张国蓉车伟刘安军天津科技大学食品工程与生物技术学院天津300457

研究软骨多糖作用下,s180荷瘤小鼠的免疫功能的变化。采用小鼠肉瘤s180细胞建立动物腹水瘤模型,然后随机将小鼠分为空白组、模型组和治疗组,连续腹腔注射生理盐水或软骨多糖,分别测量外周血中性粒细胞、T淋巴细胞亚型的变化,及巨噬细胞... 详细信息

研究软骨多糖作用下,s180荷瘤小鼠的免疫功能的变化。采用小鼠肉瘤s180细胞建立动物腹水瘤模型,然后随机将小鼠分为空白组、模型组和治疗组,连续腹腔注射生理盐水或软骨多糖,分别测量外周血中性粒细胞、T淋巴细胞亚型的变化,及巨噬细胞的活性变化。结果发现软骨多糖能够提高荷瘤小鼠中性粒细胞的数目,提高外周血细胞CD3+、CD4+细胞数,增加CD4+/CD8+细胞比值,显著提高巨噬细胞吞噬中性红和鸡红细胞的能力。软骨多糖能通过增强s180荷瘤小鼠的免疫功能而抑制肿瘤的生长。

关键词：软骨多糖小鼠肉瘤s180 中性粒细胞 T淋巴细胞巨噬细胞

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构建小鼠肉瘤随机表达文库筛选肿瘤新抗原

构建小鼠肉瘤随机表达文库筛选肿瘤新抗原

作者：赵恢准华中农业大学

学位级别：硕士

肿瘤疫苗可激发机体产生针对肿瘤的特异性免疫应答,是常见的免疫疗法,而肿瘤抗原又是研制有效的肿瘤疫苗的基础。因此,创造和发现新的肿瘤抗原,有利于克服免疫耐受和免疫抑制,研制更为有效的新型抗肿瘤疫苗。本研究以小鼠s180肉瘤为例,... 详细信息

肿瘤疫苗可激发机体产生针对肿瘤的特异性免疫应答,是常见的免疫疗法,而肿瘤抗原又是研制有效的肿瘤疫苗的基础。因此,创造和发现新的肿瘤抗原,有利于克服免疫耐受和免疫抑制,研制更为有效的新型抗肿瘤疫苗。本研究以小鼠s180肉瘤为例,尝试通过构建肿瘤基因随机表达文库的新方法来创造和筛选新型的肿瘤抗原。(1)小鼠s180肉瘤基因随机表达文库的构建。提取s180肉瘤组织总RNA,反转录成c DNA,用10条随机引物从c DNA中扩增得到大量随机大小的基因片段M,通过双酶切位点Eco R I和Hind III将这些基因片段插入到表达载体p ET-28a-HsP的HsP65的C末端,然后转化大肠杆菌,从而构建小鼠s180肉瘤基因随机表达文库。(2)从s180肉瘤基因随机表达文库中筛选具有抗肿瘤活性的转化子。经过多次转化和抗性筛选,得到537个阳性转化子组成的肿瘤随机表达文库。将库中各转化子培养,IPTG诱导表达后对菌体全蛋白进行sDs-PAGE分析筛选,得到100个表达分子量大于65 k Da融合蛋白的转化子。通过3次菌液免疫抑瘤效果的筛选,获得免疫抗瘤效果最佳的转化子A5菌株,其菌液免疫抑瘤率为79.15±1.74%。(3)重组蛋白免疫抗瘤效果的验证。菌株A5能够表达分子量为81 k Da的融合蛋白HsP-A5,构建的含表达质粒p ET-28a-A5的工程菌株能够表达分子量为16k Da的蛋白A5。纯化得到重组融合蛋白HsP-A5和A5,进行免疫抗瘤效果验证,结果显示蛋白HsP-A5和A5的免疫抑瘤率分别为62.40±1.91%和58.74±0.91%,显著高于PBs对照组(psP65对照组(psP-A5和A5免疫小鼠之后,收集小鼠血清,ELIsA检测小鼠血清中Ig G效价,结果显示HsP-A5免疫小鼠血清中抗HsP-A5的Ig G抗体效价为25,600×,抗A5的Ig G抗体效价为3,200×,而A5免疫小鼠血清中抗A5的Ig G抗体效价为1,600×。蛋白HsP-A5和A5均能激发小鼠机体产生高效价的A5抗体,从而抑制s180肉瘤的生长。进一步以HsP-A5抗血清过继免疫治疗,其对s180的抑瘤率为34.67±1.23%,与阳性对照紫杉醇36.73±1.18%的抑瘤效果相当。这一数据验证了A5特异性抗体在抗s180肉瘤的过程中起了重要的作用。为了验证蛋白HsP-A5和A5能否激发机体产生特异性的细胞免疫反应发挥免疫抗瘤效果,分别检测了T淋巴细胞胞内Th1型细胞因子TNF-α和IFN-γ的表达,同时检测了细胞毒T淋巴细胞杀伤活性和抗原A5特异性淋巴细胞的增殖效应,结果发现蛋白HsP-A5和A5无法有效激发小鼠体内产生针对s180肉瘤的细胞免疫应答。(5)A5诱导抗体的靶标为PCMT1。蛋白A5含有一段与L-异天冬氨酸(D-天冬氨酸)-O-甲基转移酶(PCMT1)相似的氨基酸残基序列。大肠杆菌表达并纯化PCMT1(32 k Da)蛋白,然后进行Western Blotting、ADCC及CDC效应的检测。结果表明,蛋白A5和PCMT1诱导的抗体都能够同时与A5和PCMT1特异性结合,也都能够诱导针对s180细胞的ADCC和CDC作用。进一步通过免疫荧光测定,发现A5和PCMT1诱导产生的抗体,都能特异性结合于s180肉瘤细胞的表面,表明s180肉瘤细胞表面表达有PCMT1蛋白或其提呈的PCMT1表位肽,也解释了这两个抗体诱导产生ADCC效应和CDC效应的机制。以上结果,验证了PCMT1是A5蛋白抗肿瘤疫苗新的靶标与位点。综上所述,通过构建肿瘤基因随机表达文库,可以创造和筛选新的肿瘤抗原,发现新的肿瘤免疫治疗的靶点,为肿瘤疫苗的研发提供一种新的策略与方法。运用该方法,我们成功创造和获得了A5抗原,发现其诱导产生的抗体可以与s180肉瘤细胞表面新的作用靶点PCMT1结合,从而可以通过ADCC和CDC等作用,发挥其免疫抗瘤效果。

关键词：肿瘤基因随机表达文库小鼠肉瘤s180 肿瘤抗原 PCMT1 体液免疫应答