检索结果-南通市图书馆

中华流行病学杂志 2022年第1期43卷 92-97页

作者：严寒秋王永全崔海洋靳博高志勇王全意北京市疾病预防控制中心/北京市预防医学研究中心食物中毒诊断溯源技术北京市重点实验室北京100013 北京市西城区疾病预防控制中心北京100120

目的应用实时荧光RT-PCR和半巢式RT-PCR方法检测和分析牡蛎中诺如病毒的基因特征。方法应用实时荧光RT-PCR和半巢式RT-PCR方法,对2014年11月至2015年10月北京市采集的新鲜市售牡蛎进行诺如病毒GⅠ/GⅡ组并联试验检测,分析检出率,应用符... 详细信息

目的应用实时荧光RT-PCR和半巢式RT-PCR方法检测和分析牡蛎中诺如病毒的基因特征。方法应用实时荧光RT-PCR和半巢式RT-PCR方法,对2014年11月至2015年10月北京市采集的新鲜市售牡蛎进行诺如病毒GⅠ/GⅡ组并联试验检测,分析检出率,应用符合率和一致性检验(Kappa值)对半巢式RT-PCR方法进行可靠性评价,应用半巢式RT-PCR方法扩增诺如病毒GⅠ/GⅡ衣壳蛋白区基因,对阳性产物进行测序。采用BioEdit 7.***.9.0软件进行序列比对、Mega 6.0软件构建进化树。结果72份样品中,实时荧光RT-PCR、半巢式RT-PCR和并联试验的诺如病毒检出率分别为31.94%(23/72)、38.89%(28/72)和48.61%(35/72)。2种方法符合率为73.61%,中度一致(Kappa值=0.43)。测序成功13株诺如病毒,11株(7株GⅡ.17、2株GⅡ.4 Sydney_2012、1株GⅡ.1和1株GⅡ.21基因型)为2种RT-PCR方法检测诺如病毒阳性样本所得;2株(GⅡ.17和GⅡ.3基因型各1株)为半巢式RT-PCR方法检测诺如病毒阳性样本、实时荧光RT-PCR方法检测诺如病毒阴性样本所得。这些毒株与腹泻患者、环境污水和贝类水产品参考株的相似性为84.4%~100.0%。结论用2种RT-PCR并联法检测牡蛎中诺如病毒,不仅能提高检出率还能获得更多基因型;牡蛎中诺如病毒毒株与人源、环境污水及贝类水产品参考毒株高度同源,应对经常接触牡蛎的人群及相关环境进行诺如病毒监测和防控。

关键词：诺如病毒实时荧光反转录聚合酶链式反应半巢式反转录聚合酶链式反应基因特征牡蛎

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多种比例混合样本对新型冠状病毒核酸检测结果的影响

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中华医院感染学杂志 2021年第19期31卷 2886-2890页

作者：张自豪程菲刘双谢江刘兆宇于梅于帅解放军总医院海南医院检验科海南三亚572013 解放军总医院海南医院热带医学科海南三亚572013

目的利用真实的新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸检测阳性咽拭子样本与不同比例SARS-CoV-2核酸检测阴性样本混合稀释,分析SARS-CoV-2核酸检测结果Ct值的变化,评估多种比例混合样本对新型冠状病毒核酸检测的影响。方法选择解放军总医院海南... 详细信息

目的利用真实的新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸检测阳性咽拭子样本与不同比例SARS-CoV-2核酸检测阴性样本混合稀释,分析SARS-CoV-2核酸检测结果Ct值的变化,评估多种比例混合样本对新型冠状病毒核酸检测的影响。方法选择解放军总医院海南医院已检测的不同SARS-CoV-2病毒载量的8个咽拭子标本,分别与随机4份等体积阴性咽拭子标本、9份等体积阴性咽拭子样本混合、19份等体积阴性咽拭子样本混合,各取200μl进行实时荧光反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测。另将8个阳性咽拭子样本分别与1份等量咽拭子阴性标本混合,分别进行RT-PCR。结果总体积200μl的多混样本加样,ORF1ab基因Ct值从22.67~39.54,N基因Ct值从24.21~42.37,其中1例单ORF1ab基因阳性,1例单N基因再阳性。随着混合样本数量的增多,Ct值逐渐增大,高Ct值样本,随着混合样本数量的增多,开始出现阴性值。全部样本在5混下全部检出,10混及20混均漏检3例低Ct值样本。比较不同稀释混合比例同原倍样本检出结果的差异,发现2混、5混对Ct值无显著影响,10混、20混对Ct值影响显著(P<0.05)。8个原始样本O基因Ct值从23.54~38.96,N基因Ct值从24.87~35.26,其中1例单O基因阳性,2例阴性。ORF1ab基因与N基因Ct值无明显差异,且2混合样本阳性比例7/8,高于原倍标本6/8。结论随着各地疫情的逐步解除,国外输入及无症状感染者的跨地区输入,仍然给防控带来巨大压力,有限的检测能力是新型冠状病毒肺炎(COVID-19)大流行的主要瓶颈,需持续较长时间进行大规模筛查,占用大量人力资源、社会资源和经济资源,多样本混合尤其是10人份以下样本混合检测将有效提升检测效率、降低检测成本,提高防控能力。

关键词：混合样本新型冠状病毒实时荧光反转录聚合酶链式反应

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深圳市坪山新区2016年登革热媒介监测结果分析

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中国媒介生物学及控制杂志 2017年第3期28卷 283-285页

作者：刘晓娜吴能简吴崧霖陈景阳谢美莲王德全广东药科大学公共卫生学院广州510310 深圳市坪山新区疾病预防控制中心广东深圳518000

目的了解深圳市坪山新区登革热传播媒介白纹伊蚊密度及二代成蚊携带登革热病毒情况,为登革热的防控提供科学的预警信息。方法 2016年4-8月对坪山新区不同生境的白纹伊蚊密度进行监测,白纹伊蚊专项监测采用诱蚊诱卵器法,蚊幼虫密度监测... 详细信息

目的了解深圳市坪山新区登革热传播媒介白纹伊蚊密度及二代成蚊携带登革热病毒情况,为登革热的防控提供科学的预警信息。方法 2016年4-8月对坪山新区不同生境的白纹伊蚊密度进行监测,白纹伊蚊专项监测采用诱蚊诱卵器法,蚊幼虫密度监测采用布雷图指数(BI)法,将采集的蚊幼虫和蚊卵饲养至成蚊,提取其核酸,利用实时荧光RT-PCR检测登革热病毒。结果 2016年4-8月白纹伊蚊平均诱蚊诱卵指数(MOI)为6.19;公园MOI(7.91)和BI(10.68)最高;8月MOI(10.28)和BI(15.42)最高;共检测白纹伊蚊1 190只,未检出登革热病毒。结论深圳市坪山新区白纹伊蚊未检出登革热病毒,但该蚊广泛分布且密度高,存在因登革热输入性病例引发本地疫情暴发的风险,应加强监测与防控。

关键词：白纹伊蚊监测登革热登革热病毒实时荧光反转录聚合酶链式反应

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Real time RT-PCR与直接免疫荧光法对鼠肺中汉坦病毒检测效果比较

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国际病毒学杂志 2016年第6期23卷 401-404页

作者：南晓伟宋壮志韩松张玉峰郭卫东内蒙古疾病预防控制中心呼和浩特010031 莫力达瓦达斡尔族自治旗疾病预防控制中心

目的比较Real Time RT-PCR与直接免疫荧光法检测鼠肺中汉坦病毒（hantavirus,HV）带毒率的差异,为进一步完善实验室检测方案提供依据.方法 2015年秋季内蒙古自治区呼伦贝尔市莫力达瓦旗肾综合征出血热（hemorrhagic fever with renal s... 详细信息

目的比较Real Time RT-PCR与直接免疫荧光法检测鼠肺中汉坦病毒（hantavirus,HV）带毒率的差异,为进一步完善实验室检测方案提供依据.方法 2015年秋季内蒙古自治区呼伦贝尔市莫力达瓦旗肾综合征出血热（hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS）疫区捕获啮齿类动物,对捕获的啮齿类动物进行分类鉴定.取122只鉴定后的鼠进行无菌解剖取肺组织,提取RNA,用Real Time RT-PCR扩增汉坦病毒目的基因,同时将122份肺组织冷冻切片,进行直接免疫荧光试验（direct immunofluorescenee,DIF）.结果呼伦贝尔市莫力达瓦旗HFRS疫区是以黑线姬鼠为主的混合疫区,捕获鼠类8种共422只,鼠类平均密度为14.81％.在检测的122份鼠肺中,Real Time RT-PCR结果显示：27份鼠肺样品检测到HV核酸阳性,且均为HTNV型,鼠带毒率为22.13％,其中黑线姬鼠16份,占阳性鼠的59.26％.直接免疫荧光法结果为：3份鼠肺样本为阳性,鼠带毒率为2.459％,3份阳性鼠肺均为黑线姬鼠.利用统计软件SPSS 14.0进行统计学分析,两种方法检测结果有统计学差异（x2=21.892,P＜0.01）.结论与DIF法相比,Real Time RT-PCR检测HV阳性率更高,采用DIF方法可能会低估内蒙古自治区肾综合征出血热疫区的疫情情况.

关键词：肾综合征出血热汉坦病毒直接免疫荧光法实时荧光反转录聚合酶链式反应

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