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蒙药宝如剂对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏液层及TLR4/NFκB信号通路的影响

蒙药宝如剂对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏液层及TLR4/NFκB信号通路的...

引用

作者：刘昕昕内蒙古医科大学

学位级别：硕士

目的:探究蒙药宝如剂对2,4,6-三硝基苯磺酸/乙醇诱导的溃疡性结肠炎模型大鼠结肠黏液层及TLR4/NFκB信号通路的影响。方法:将72只雄性SPF级SD大鼠随机分为空白对照组(Z)、宝如剂低剂量组(BD),宝如剂中剂量组(BZ),宝如剂高剂量组(BG)及... 详细信息

目的:探究蒙药宝如剂对2,4,6-三硝基苯磺酸/乙醇诱导的溃疡性结肠炎模型大鼠结肠黏液层及TLR4/NFκB信号通路的影响。方法:将72只雄性SPF级SD大鼠随机分为空白对照组(Z)、宝如剂低剂量组(BD),宝如剂中剂量组(BZ),宝如剂高剂量组(BG)及美沙拉秦组(MS)等6组,每组12只。适应性饲养1周后各组大鼠禁食不禁水24h,除空白对照组剩余组大鼠根据资料用TNBS/乙醇溶液造模,空白对照组按体重给予蒸馏水。造模后第4天起,各治疗组大鼠按相应药物灌肠给药,模型组与空白对照组给予蒸馏水灌肠。每天1次,连续14天。观察治疗过程中观察大鼠饮食饮水量、毛发、精神状态,体重变化,粪便性状,便血等情况,并进行DAI评分。治疗结束后截取大鼠结肠,采用HE染色法观察大鼠结肠病理改变。采用IHC法、RT-q PCR法观察大鼠结肠黏液层MUC2、TFF3的蛋白与m RNA表达量。采用Western blot法、RT-q PCR法观察炎症信号通路TLR4、NFκB的蛋白与m RNA表达量。结果:1.大鼠一般情况适应性饲养一周后各组大鼠体重平稳上升,饮食饮水无异常,毛发光泽,粪便性状正常,无便血情况。造模后与正常组相比TNBS\乙醇灌肠造模组的大鼠出现体重下降、饮食饮水量减少、毛发灰暗、活动量减少等状态,与造模前比较各造模组DAI评分显著升高,差异有统计学意义(P宝如剂高剂量组与美沙拉秦组之间无显著差异(P>0.05)。2.大鼠结肠病理改变空白对照组大鼠结肠组织结构基本正常,未见明显病理变化;模型组大鼠结肠呈现上皮细胞排列异常、隐窝扩张、黏膜下层水肿、组织间隙增大、局部有炎症细胞浸润等病理改变,损伤严重。宝如剂高剂量组与美沙拉秦组病理损伤较轻,呈轻度异常。3.大鼠结肠黏液层MUC2、TFF3表达水平IHC、RT-q PCR结果显示,与空白对照组比较模型组MUC2、TFF3蛋白及基因表达量显著降低(P宝如剂低、中剂量组MUC2蛋白、基因表达量及TFF3基因表达量无显著差异(P>0.05)。宝如剂高剂量组、美沙拉秦组与模型组比较MUC2、TFF3蛋白及基因表达量显著升高(P宝如剂高剂量组与美沙拉秦组之间无显著差异(P>0.05)。4.大鼠结肠炎症TLR4、NFκB表达水平Western-blot、RT-q PCR检测结果显示与空白对照组比较模型组TLR4、NFκB蛋白及基因表达量显著升高(P宝如剂低、中剂量组NFκB蛋白、基因表达量及TLR4基因表达量无显著差异(P>0.05)。宝如剂高剂量组、美沙拉秦组与模型组比较TLR4、NFκB蛋白及基因表达量显著降低,差异有统计学意义(P宝如剂高剂量组与美沙拉秦组之间无显著差异(P>0.05)。结论:蒙药宝如剂对TNBS/乙醇诱导的溃疡性结肠炎模型大鼠的饮食饮水量、毛发、精神状态等一般情况、DAI评分、组织病理改变等均有明显的改善,其作用机制可能与调节了结肠黏液层MUC2、TFF3等因子,从而维持了黏液层的结构,修复了组织的损伤。另一方面与抑制了炎症信号通路相关TLR4、NFk B等因子的释放从而阻断了炎症信号通路的激活,避免了炎症反应异常有关。

关键词：蒙医药宝如剂蒙医肠疗法结肠黏液层 TLR4/NFκB信号通路

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宝如剂对溃疡性结肠炎相关性结肠癌小鼠的化学预防作用的实验研究

宝如剂对溃疡性结肠炎相关性结肠癌小鼠的化学预防作用的实验研究

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作者：陶敖力内蒙古医科大学

学位级别：硕士

目的:通过观察宝如剂对溃疡性结肠炎相关性结肠癌（UCACC）模型小鼠的预防作用,验证蒙药宝如剂对溃疡性结肠炎相关性结肠癌的防治作用,为蒙医药防治UCACC临床提供可参考的实验数据。方法:将144只SPF级BALB/c雄性小鼠随机分为空白对照组... 详细信息

目的:通过观察宝如剂对溃疡性结肠炎相关性结肠癌（UCACC）模型小鼠的预防作用,验证蒙药宝如剂对溃疡性结肠炎相关性结肠癌的防治作用,为蒙医药防治UCACC临床提供可参考的实验数据。方法:将144只SPF级BALB/c雄性小鼠随机分为空白对照组、宝如剂低剂量组、宝如剂中剂量组、宝如剂高剂量组、西药组（美沙拉嗪）、模型组6组。空白对照组除外,其余各组通过联合应用氧化偶氮甲烷（AOM）与三个循环的葡聚糖硫酸钠（DSS）建立小鼠溃疡性结肠炎相关性结肠癌模型。自造模第5天开始各治疗组给予相应剂量的药物灌肠治疗至实验结束,空白组和模型组给予等剂量生理盐水灌肠。AOM造模开始,每天观测并记录小鼠的一般情况和体重。于第28、70天分别观测各组小鼠一般情况、体重、结肠长度、结肠重量、单位肠重、结肠大体情况、结肠病理改变、抑瘤率以及肿瘤转移情况。结果:小鼠体重:肿瘤形成阶段和肿瘤发展阶段,空白对照组小鼠的体重逐渐上升,模型组小鼠体重从造模开始逐渐下降,从第二周开始模型组与空白组小鼠体重具有显著性差异（P＜0.05）。从第3周开始,模型组与各治疗组体重具有显著性差异（P＜0.05）。第6周、第7周西药组与其他治疗组比较具有显著性差异（P＜0.05）。结肠长度和重量:肿瘤形成阶段,与空白对照组比较,模型组小鼠结肠长度明显缩短,重量明显增重,两组间具有显著性差异（P＜0.05）。各治疗组小鼠结肠长度和重量,与模型组比较具有显著性差异（P＜0.05）。宝如剂高剂量组、中剂量组与西药组结肠长度不具有显著性差异（P＞0.05）,与低剂量组比较具有显著性差异（P＜0.05）。单位肠重:肿瘤形成阶段和发展阶段,经造模后,与空白对照组比较,模型组小鼠单位肠重明显增加,两组间具有显著性差异（P＜0.05）。各治疗组小鼠单位肠重,与模型组比较具有显著性差异（P＜0.05）。在肿瘤形成阶段,宝如剂高剂量组、中剂量组与西药组单位肠重不具有显著性差异（P＞0.05）,与低剂量组比较具有显著性差异（P＜0.05）。在肿瘤发展阶段,宝如剂低剂量组与其他治疗组比较具有显著性差异（P＜0.05）。结肠大体情况:肿瘤形成阶段和发展阶段,与空白对照组比较,模型组小鼠结肠大体情况评分高,两组间具有显著性差异（P＜0.05）。在肿瘤形成阶段,宝如剂低剂量组与模型组比较不具有显著性差异（P＞0.05）。其他治疗组与模型组比较具有显著性差异（P＜0.05）。结肠病理改变:肿瘤形成阶段和发展阶段,与空白对照组比较,模型组小鼠结肠病理改变评分高,两组间具有显著性差异（P＜0.05）。各治疗组与模型组比较具有显著性差异（P＜0.05）。在肿瘤形成阶段,西药组、宝如剂高剂量组与宝如剂中剂量组、宝如剂低剂量组比较具有显著性差异（P＜0.05）。在肿瘤发展阶段,西药组、宝如剂高剂量组与宝如剂低剂量组比较具有显著性差异（P＜0.05）。抑瘤率与肿瘤转移情况:肿瘤发展阶段,与空白对照组比较,模型组小鼠结肠成瘤,两组间具有显著性差异（P＜0.05）。西药组、高剂量、中剂量与模型组具有显著性差异（P＜0.05）,低剂量组与模型组不具有显著性差异（P＞0.05）。肿瘤转移情况,各组均无肿瘤转移情况。结论:1.蒙药宝如剂对UCACC模型小鼠的体重减轻、黏液血便等症状具有一定的缓解作用。2.蒙药宝如剂对UCACC模型小鼠的结肠损伤与结肠病理改变具有一定的修复作用。3.蒙药宝如剂可抑制UCACC模型小鼠结肠瘤的形成和发展。4.蒙药宝如剂具有一定的防治UCACC作用。蒙医药防治UCACC具有特色与优势,值得深入研究和推广应用。

关键词：宝如剂尼如哈溃疡性结肠炎相关性结肠癌 AOM/DSS模型

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