蒙药宝如剂对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏液层及TLR4/NFκB信号通路的影响

作     者：刘昕昕 

作者单位：内蒙古医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：布图雅

授予年度：2023年

学科分类：1005[医学-中医学] 100513[医学-民族医学(含：藏医学、蒙医学等)] 10[医学] 

主      题：蒙医药 宝如剂 蒙医肠疗法 结肠黏液层 TLR4/NFκB信号通路 

摘      要：目的:探究蒙药宝如剂对2,4,6-三硝基苯磺酸/乙醇诱导的溃疡性结肠炎模型大鼠结肠黏液层及TLR4/NFκB信号通路的影响。方法:将72只雄性SPF级SD大鼠随机分为空白对照组(Z)、宝如剂低剂量组(BD),宝如剂中剂量组(BZ),宝如剂高剂量组(BG)及美沙拉秦组(MS)等6组,每组12只。适应性饲养1周后各组大鼠禁食不禁水24h,除空白对照组剩余组大鼠根据资料用TNBS/乙醇溶液造模,空白对照组按体重给予蒸馏水。造模后第4天起,各治疗组大鼠按相应药物灌肠给药,模型组与空白对照组给予蒸馏水灌肠。每天1次,连续14天。观察治疗过程中观察大鼠饮食饮水量、毛发、精神状态,体重变化,粪便性状,便血等情况,并进行DAI评分。治疗结束后截取大鼠结肠,采用HE染色法观察大鼠结肠病理改变。采用IHC法、RT-q PCR法观察大鼠结肠黏液层MUC2、TFF3的蛋白与m RNA表达量。采用Western blot法、RT-q PCR法观察炎症信号通路TLR4、NFκB的蛋白与m RNA表达量。结果:1.大鼠一般情况适应性饲养一周后各组大鼠体重平稳上升,饮食饮水无异常,毛发光泽,粪便性状正常,无便血情况。造模后与正常组相比TNBS\乙醇灌肠造模组的大鼠出现体重下降、饮食饮水量减少、毛发灰暗、活动量减少等状态,与造模前比较各造模组DAI评分显著升高,差异有统计学意义(P0.05)。2.大鼠结肠病理改变空白对照组大鼠结肠组织结构基本正常,未见明显病理变化;模型组大鼠结肠呈现上皮细胞排列异常、隐窝扩张、黏膜下层水肿、组织间隙增大、局部有炎症细胞浸润等病理改变,损伤严重。宝如剂高剂量组与美沙拉秦组病理损伤较轻,呈轻度异常。3.大鼠结肠黏液层MUC2、TFF3表达水平IHC、RT-q PCR结果显示,与空白对照组比较模型组MUC2、TFF3蛋白及基因表达量显著降低(P0.05)。宝如剂高剂量组、美沙拉秦组与模型组比较MUC2、TFF3蛋白及基因表达量显著升高(P0.05)。4.大鼠结肠炎症TLR4、NFκB表达水平Western-blot、RT-q PCR检测结果显示与空白对照组比较模型组TLR4、NFκB蛋白及基因表达量显著升高(P0.05)。宝如剂高剂量组、美沙拉秦组与模型组比较TLR4、NFκB蛋白及基因表达量显著降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:蒙药宝如剂对TNBS/乙醇诱导的溃疡性结肠炎模型大鼠的饮食饮水量、毛发、精神状态等一般情况、DAI评分、组织病理改变等均有明显的改善,其作用机制可能与调节了结肠黏液层MUC2、TFF3等因子,从而维持了黏液层的结构,修复了组织的损伤。另一方面与抑制了炎症信号通路相关TLR4、NFk B等因子的释放从而阻断了炎症信号通路的激活,避免了炎症反应异常有关。