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子宫颈癌细胞中HOXA10、NF-κB对MMP-9基因的调控作用

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中华妇产科杂志 2015年第2期50卷 144-145页

作者：朱丽红高燕朱瑾复旦大学附属华东医院妇科上海200040 复旦大学附属妇产科医院妇科上海200040

基质金属蛋白酶（MMP）9是一种锌依赖性蛋白水解酶，其降解细胞外基质、破坏基底膜的功能是肿瘤侵袭、转移及血管形成的基本条件。有研究显示，MMP-9在多种肿瘤组织中呈过度表达且与肿瘤细胞的侵袭和转移密切相关[1]。也有研究报道，MM... 详细信息

基质金属蛋白酶（MMP）9是一种锌依赖性蛋白水解酶，其降解细胞外基质、破坏基底膜的功能是肿瘤侵袭、转移及血管形成的基本条件。有研究显示，MMP-9在多种肿瘤组织中呈过度表达且与肿瘤细胞的侵袭和转移密切相关[1]。也有研究报道，MMP-9可通过诱导肿瘤细胞上皮间质转化，使细胞获得迁移或侵袭力增强的功能性改变[2]。因而作为肿瘤侵袭和转移的关键因子，MMP-9也就成为肿瘤领域研究的热点，虽然已有部分研究证实了MMP-9与一些细胞因子之间的关系，但以MMP-9为中心的整个调控网络至今尚未明确。研究显示，同源框基因（HOX）A10与核因子κB （NF-κB）是两种与肿瘤发生、发展密切相关的转录因子，影响或参与肿瘤的侵袭与转移[3]，但HOXA10、NF-κB对MMP-9基因是否具有调控作用，尚无详细论述。本研究选择子宫颈癌HeLa细胞，对这一调控作用进行研究。

关键词： MMP-9基因 HOXA10 子宫颈癌细胞 NF-κB 调控作用宫颈癌HeLa细胞侵袭和转移基质金属蛋白酶

子宫颈癌细胞学新型生物标志、诊断标志物的筛选和开发现状

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中华细胞与干细胞杂志（电子版） 2019年第6期9卷 375-384页

作者：李红芳赵小环王丽萍许晓燕孙高高甘肃省兰州市第一人民医院妇产科

子宫颈癌至今仍是全球范围内一个重要的公共卫生问题,是妇女疾病死亡的主要原因之一。因此,子宫颈癌细胞学的筛查、早期诊断和治疗越来越受到重视,虽然新的技术不断推出使子宫颈癌的早期筛查及诊治水平有了很大提高,但仍缺乏新型的特异... 详细信息

子宫颈癌至今仍是全球范围内一个重要的公共卫生问题,是妇女疾病死亡的主要原因之一。因此,子宫颈癌细胞学的筛查、早期诊断和治疗越来越受到重视,虽然新的技术不断推出使子宫颈癌的早期筛查及诊治水平有了很大提高,但仍缺乏新型的特异性生物学标志物。本文从新的子宫颈癌相关蛋白生物标志物和诊断靶标的发现,治疗子宫颈癌的药物作用、治疗靶标和作用机制的评估,子宫颈癌相关微小核糖核酸作为诊断和治疗靶标的筛选等方面对子宫颈脱落细胞筛查方法的开发和研究进展进行综述,为子宫颈癌的早期筛查和诊断寻找新的生物学标志物。

关键词：子宫颈癌细胞生物学标志物筛查诊断

子宫颈癌细胞中Src对ERK信号通路的调节作用

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子宫颈癌细胞中Src对ERK信号通路的调节作用

作者：孙雪松山西医科大学

学位级别：硕士

目的:子宫颈癌的发生发展与信号通路中相关因子的异常表达有关。Src作为重要的信号因子,在多种组织类型的人类实体瘤中被激活和(或)蛋白表达过量。有研究表明,p-Src在子宫颈癌组织及细胞系中过度表达,并影响着疾病的进展和预后。ERK信... 详细信息

目的:子宫颈癌的发生发展与信号通路中相关因子的异常表达有关。Src作为重要的信号因子,在多种组织类型的人类实体瘤中被激活和(或)蛋白表达过量。有研究表明,p-Src在子宫颈癌组织及细胞系中过度表达,并影响着疾病的进展和预后。ERK信号通路广泛参与调控肿瘤细胞的多种生物学功能,但在子宫颈癌细胞中Src对ERK信号通路的调节作用尚不清楚。本次研究采用体外细胞实验的方法,以ERK信号通路关键因子Src、ERK 1/2、c-Fos、c-Jun以及核转录调控因子hn RNP E1作为靶点,施加Src抑制剂干预,检测Src对其表达的影响及其与子宫颈癌细胞的关系,以此综合评价Src对子宫颈癌细胞中ERK信号通路的调节作用,为深入了解和认识子宫颈病变过程并寻找可能的干预途径提供理论依据。方法:选取子宫颈癌Hela细胞(HPV+)和C33A细胞(HPV-)进行实验研究。采用PP2对两种细胞的Src激酶施加干预,确定PP2的最佳抑制浓度(IC50)和抑制时点。设立Src抑制前组为对照组,Src抑制后组为实验组。采用活细胞计数法和CCK-8法测定抑制前后两种细胞的生长情况和细胞活性,行流式细胞术检测各组细胞的周期和及凋亡情况,分别采用Real-time PCR和Western-blot法检测Src、ERK 1/2、c-Fos、c-Jun、hn RNP E1的m RNA及蛋白表达水平。数据的录入和分析由SPSS 17.0软件执行。结果:1.PP2抑制效果的评价:(1)最佳抑制条件:传代后24h,20μM的PP2作用于Hela细胞,传代后24h,12μM的PP2作用于C33A细胞。(2)PP2抑制效果的评价:PP2明显下调了两种子宫颈癌细胞的p-Src蛋白水平,说明采用以上抑制条件,很好地达到了抑制效果。其中,Hela细胞的p-Src蛋白较抑制前下降了28.87%(t=4.547,P=0.045),C33A细胞的p-Src蛋白较抑制前下降了33.33%(t=5.354,P=0.033)。同时,Hela细胞的Src蛋白降低了33.56%(t=1.662,P=0.238),C33A细胞的Src蛋白降低了29.47%(t=3.233,P=0.082)。经比较,p-Src蛋白和Src蛋白抑制前后的降低值在C33A和Hela间无统计学差异(t=-0.139,P=0.893;t=-1.869,P=0.099)。(3)Src抑制后,两种子宫颈癌细胞的Src m RNA含量较抑制前升高(t=-1.137,P=0.306;t=-18.403,P=0.003),且Hela细胞的Src m RNA升高值显著大于C33A细胞(t=13.909,P子宫颈癌细胞一般生物学特性的影响:(1)Src影响细胞活性。Src抑制前,C33A细胞和Hela细胞迅速繁殖,C33A的生长速度慢于Hela。Src抑制后,两种细胞生长速度变慢,活细胞数大量减少(P细胞和Hela细胞的抑制程度相似(P>0.05)。(2)Src影响周期的转变。Src抑制后,C33A细胞和Hela细胞G0/G1期的比例分别升高了24.04%(t=6.101,P=0.004)和30.90%(t=-15.155,P细胞的AI的升高值远低于C33A细胞(t=25.834,P子宫颈癌细胞中Src对ERK 1/2、c-Jun、c-Fos、hn RNP E1基因表达的影响:(1)Src抑制后,Hela和C33A的ERK 1、ERK 2、c-Fos、c-Jun的m RNA含量较抑制前显著升高(P<0.05),hn RNP E1 m RNA含量较抑制前显著降低(P<0.05)。经比较,抑制前后ERK 1、c-Fos、c-Jun的m RNA在Hela中的升高值均显著大于C33A(P<0.05

关键词：子宫颈癌细胞 Src ERK信号通路 hnRNPE 1 调节作用

miRNA-101表达对子宫颈癌细胞丝状伪足形成的影响

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中华妇产科杂志 2018年第10期53卷 715-717页

作者：张萍刘玉武哈提拉·吐尔逊林晨新疆医科大学基础医学院病理解剖学教研室乌鲁木齐830011

子宫颈癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤，其发病率高居全球女性恶性肿瘤的第2位，死亡率位于第4位。新疆维吾尔自治区维吾尔族妇女子宫颈癌的发病率高，中晚期患者较多，死亡率也高，在该地区被列为特高发肿瘤之一。

关键词：子宫颈癌细胞女性恶性肿瘤新疆维吾尔自治区伪足丝状女性生殖系统维吾尔族妇女晚期患者

ERK对子宫颈癌细胞中核转录因子表达的调节作用

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ERK对子宫颈癌细胞中核转录因子表达的调节作用

作者：李聪聪山西医科大学

学位级别：硕士

目的:HPV感染是子宫颈癌发生的主要病因但并非唯一因素。近年来研究发现,丝裂原活化蛋白激酶（MAPKs）信号通路在细胞恶性转化和肿瘤浸润转移过程中起着重要作用。细胞外信号调节激酶（ERK）作为MAPK家族的主要成员,可通过一系列级联转... 详细信息

目的:HPV感染是子宫颈癌发生的主要病因但并非唯一因素。近年来研究发现,丝裂原活化蛋白激酶（MAPKs）信号通路在细胞恶性转化和肿瘤浸润转移过程中起着重要作用。细胞外信号调节激酶（ERK）作为MAPK家族的主要成员,可通过一系列级联转导系统将信号由细胞外传导进入细胞核并且磷酸化多种核转录因子,促进相关癌基因的表达。研究显示,在子宫颈癌中,ERK的表达率随着宫颈病变的加重呈增高趋势,但其机制不明。本研究通过细胞实验研究方法,旨在探讨ERK在子宫颈癌细胞中对核转录因子的调控作用以及对子宫颈癌细胞生物学功能的影响,进而解释ERK在子宫颈癌发生中的可能机制。方法:选取HPV16阳性的Siha和HPV阴性的C33A子宫颈癌细胞进行传代培养,向两种细胞施加抑制剂U0126,建立ERK抑制体系,形成对照组和干预组。采用活细胞计数法检测细胞生长情况;采用CCK-8法检测细胞活性;采用流式细胞术检测细胞周期及凋亡情况;采用实时荧光定量PCR（Real-time PCR）法和Western-blot法检测相关核转录因子的m RNA及蛋白的表达情况表达水平;数据采用SPSS17.0软件进行统计学分析。结果:1、Siha和C33A子宫颈癌细胞一般生物学特征的比较:除24小时外,两种细胞数在其他时间点的差异均有统计学意义（P＜0.05）;Siha细胞增殖指数（PI）高于C33A细胞（t=5.342,P＜0.001）;C33A细胞凋亡率高于Siha细胞（t=-2.986,P=0.024）。2、Siha和C33A子宫颈癌细胞ERK1/2、hn RNP E1、c-Fos、c-Jun的表达:（1）Siha细胞ERK1 m RNA相对表达量明显低于C33A细胞（t=-17.489,P＜0.001）,Siha细胞ERK1/2和p-ERK1/2的蛋白表达水平均高于C33A细胞（ERK1/2:t=16.309,P＜0.001;p-ERK1/2:t=4.776,P=0.028）。（2）Siha细胞hn RNP E1 m RNA相对表达量高于C33A细胞（t=3.376,P＜0.001）;Siha细胞hn RNP E1蛋白相对表达量高于C33A细胞（t=4.821,P＜0.001）。（3）Siha细胞c-Fos m RNA相对表达量高于C33A细胞（t=3.590,P=0.013）,Siha细胞c-Fos蛋白表达水平低于C33A细胞（t=-1.337,P=0.184）;Siha细胞p-c-Fos蛋白表达水平高于C33A细胞（t=3.029,P=0.004）。（4）c-Jun基因m RNA及蛋白表达比较:Siha细胞的c-Jun m RNA相对表达量高于C33A细胞（t=4.713,P＜0.001）;Siha细胞p-c-Jun蛋白表达水平高于C33A细胞（t=10.209,P＜0.001）。3、ERK对Siha和C33A子宫颈癌细胞一般生物学特征的影响:（1）ERK抑制效果评价:C33A细胞ERK2 m RNA的抑制率为56.89±3.08%,高于Siha细胞的54.08±4.05%,但差异无统计学意义（t=1.004,P=0.107）,C33A细胞ERK1/2蛋白的抑制率为63.16±7.24%,高于Siha细胞的51.32±6.51%,差异有统计学意义（t=-4.281,P=0.007）,两种细胞均达到了较好的抑制效果。（2）与对照组相比,两种细胞干预组的增殖指数均降低（Siha:t=6.863,P＜0.001;C33A:t=7.092,P＜0.001）,Siha细胞干预组增殖指数高于C33A细胞干预组（t=7.066,P＜0.001）。（3）与对照组相比,两种细胞干预组的凋亡率均增加,（Siha:t=-5.201,P=0.006;C33A:t=-4.335,P=0.005）;C33A细胞干预组凋亡率高于Siha细胞干预组,但差异无统计学意义（t=-2.431,P=0.057）。4、ERK对Siha和C33A子宫颈癌细胞hn RNP E1、c-Fos、c-Jun表达的影响:（1）与对照组相比,Siha细胞干预组hn RNP E1 m RNA相对表达量降低（t=2.407,P＜0.001）,Siha细胞hn RNP E1 m RNA的抑制率高于C33A细胞（t=-12.073,P＜0.001）;Siha细胞干预组hn RNP E1蛋白表达水平低于对照组（t=2.539,P=0.004）,Siha细胞干预组与C33A细胞干预组hn RNP E1蛋白表达水平的差异有统计学意义（t=2.132,P=0.017）,Siha细胞hn RNP E1蛋白的抑制率高于C33A细胞（t=2.967,P=0.039）。（2）与对照组相比,Siha细胞干预组c-Fos m RNA相对表达量降低（t=4.129,P＜0.001）,Siha细胞c-Fos m RNA的抑制率高于C33A细胞（

关键词： ERK 子宫颈癌细胞转录因子调节作用

稳定转染短发夹状RNA后子宫颈癌细胞中人乳头状瘤病毒18型E6基因表达的变化

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中华妇产科杂志 2005年第10期40卷 693-696页

作者：陶光实张克强陈勇聂妹芳刘风英吴宜林刘毅智吴秀山中南大学湘雅二医院妇科长沙410011 湖南省计划生育研究所湖南师范大学生命科学院

目的探讨宫颈癌细胞株HeLa细胞稳定转染表达短发夹状RNA(shRNA)的质粒后,HeLa细胞中人乳头状瘤病毒18型E6基因(HPV18E6)表达的变化。方法实验组将本实验室前期构建的可遗传性表达HPV18E6shRNA的pE6-1shRNA质粒和含E6基因突变点的pE6-2sh... 详细信息

目的探讨宫颈癌细胞株HeLa细胞稳定转染表达短发夹状RNA(shRNA)的质粒后,HeLa细胞中人乳头状瘤病毒18型E6基因(HPV18E6)表达的变化。方法实验组将本实验室前期构建的可遗传性表达HPV18E6shRNA的pE6-1shRNA质粒和含E6基因突变点的pE6-2shRNA质粒分别转染HeLa细胞,对照组以空质粒pSUPER和不加质粒的脂质体分别转染HeLa细胞。稳定转染后,氨基糖苷抗生素(G418)筛选阳性细胞克隆,RT-PCR技术和免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接(SP)法分别检测HeLa细胞中HPV18E6mRNA和蛋白表达的变化。结果稳定转染后,G418筛选,实验组HeLa细胞有新的阳性细胞克隆形成,而对照组HeLa细胞最终全部死亡。实验组转染pE6-1shRNA质粒的HeLa细胞中HPV18E6mRNA表达水平为0·76±0·28,明显低于对照组转染脂质体者(1·14±0·45)和转染pSUPER质粒者(1·12±0·23,P细胞中HPV18E6蛋白阳性表达强度较对照组转染脂质体者弱。实验组转染pE6-2shRNA质粒的HeLa细胞中HPV18E6mRNA和蛋白表达水平分别与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0·05)。结论稳定转染表达HPV18E6shRNA的质粒后,宫颈癌细胞中HPV18E6mRNA和蛋白表达明显受到抑制。

关键词： RNA干扰宫颈肿瘤转染癌基因蛋白质类,病毒性乳头状瘤病毒18型短发夹状RNA 子宫颈癌细胞稳定转染 E6基因基因表达

吡咯烷二硫代氨基甲酸盐对子宫颈癌细胞顺铂敏感性的影响

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中华妇产科杂志 2010年第3期45卷 229-231页

作者：郑小冬吕杰强朱雪琼黄秋穗段萍陈文兵温州医学院附属第二医院妇产科 325027

多个随机临床试验的结果肯定了化疗对控制局部晚期宫颈癌的作用，以顺铂为基础的同步放化疗可提高宫颈癌的生存率，可使宫颈癌死亡危险下降50％。但化疗中耐药的出现是最棘手的问题，寻求增加化疗药物敏感性的研究对提高宫颈癌化疗的疗... 详细信息

多个随机临床试验的结果肯定了化疗对控制局部晚期宫颈癌的作用，以顺铂为基础的同步放化疗可提高宫颈癌的生存率，可使宫颈癌死亡危险下降50％。但化疗中耐药的出现是最棘手的问题，寻求增加化疗药物敏感性的研究对提高宫颈癌化疗的疗效有重大意义。近年来国外研究表明，

关键词：子宫颈癌细胞吡咯烷二硫代氨基甲酸盐顺铂敏感性同步放化疗局部晚期宫颈癌化疗药物敏感性随机临床试验死亡危险

腹腔镜手术联合护理干预对子宫颈癌细胞凋亡率的影响及相关机制研究

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现代医学 2018年第2期46卷 176-180页

作者：曾祖华陈朝霞潘彧川北医学院附属医院妇产科四川南充637000

目的:分析腹腔镜下广泛子宫全切加盆腔淋巴结清扫术对子宫颈癌细胞凋亡率的影响及其相关机制。方法:选取本院2013年3月~2015年3月收治的80例老年子宫颈癌患者及40例子宫肌瘤患者作为研究对象。80例子宫颈癌患者,40例进行腹腔镜下广泛子... 详细信息

目的:分析腹腔镜下广泛子宫全切加盆腔淋巴结清扫术对子宫颈癌细胞凋亡率的影响及其相关机制。方法:选取本院2013年3月~2015年3月收治的80例老年子宫颈癌患者及40例子宫肌瘤患者作为研究对象。80例子宫颈癌患者,40例进行腹腔镜下广泛子宫全切加盆腔淋巴结清扫术,40例进行开腹广泛子宫全切加盆腔淋巴结清扫术。40例子宫肌瘤患者行腹腔镜全子宫切除术。采用流式细胞分析分别测定40例宫颈癌腹腔镜手术患者,手术前、后子宫颈癌细胞的凋亡率,并观察Trai L、Bcl-2、MTA1和NM23基因的表达水平,将其与腹腔镜下子宫全切术的正常子宫颈细胞和开腹手术的子宫颈癌细胞的手术前、后进行比较。结果:子宫颈癌细胞的术前凋亡率是(4.25±0.17)%,腹腔镜术后的凋亡率是(26.54±0.64)%,明显高于术前,经统计分析,具有显著性差异(P0.05);子宫肌瘤患者术前的子宫颈细胞凋亡率是(18.26±0.46)%,腹腔镜术后的凋亡率是(17.36±0.57)%。行腹腔镜手术后的子宫颈癌细胞的抑制转移基因NM23和诱导凋亡基因Trail的表达水平明显比术前高,而相关转移基因M TA1和抑制凋亡基因Bcl-2的表达水平则明显比术前低;正常的子宫颈细胞其相关基因Bcl-2、MTA1、Trail和NM23的表达水平不受腹腔镜手术对机体的环境造成的变化而发生改变。结论:采用腹腔镜手术治疗子宫颈癌不会增加癌细胞的增殖能力与转移能力,具有较好的临床有效性和安全性。

关键词：腹腔镜广泛子宫全切盆腔淋巴结清扫术子宫颈癌细胞凋亡率

RACK1基因过表达对子宫颈癌细胞增殖的影响

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慢性病学杂志 2019年第9期19卷 1374-1375,1378页

作者：张巍焦作市第二人民医院病理科

目的探讨激活的蛋白激酶C受体1 (RACK1)基因过表达对子宫颈癌细胞增殖的影响,为临床治疗提供参考。方法选取子宫颈癌患者胚肾上皮细胞293T、宫颈癌细胞株HeLa,并购置宫颈癌细胞株SiHa与Caski,分别对其予以细胞培养、包装蛋白激酶C受体1 ... 详细信息

目的探讨激活的蛋白激酶C受体1 (RACK1)基因过表达对子宫颈癌细胞增殖的影响,为临床治疗提供参考。方法选取子宫颈癌患者胚肾上皮细胞293T、宫颈癌细胞株HeLa,并购置宫颈癌细胞株SiHa与Caski,分别对其予以细胞培养、包装蛋白激酶C受体1 (RACK1)慢病毒、转染等处理,运用流式细胞仪细胞周期进行检测,并运用蛋白印迹法对相关蛋白的表达进行测量,分别观察流式细胞仪与蛋白印迹法的检测结果。结果三种细胞株的中S期细胞所占比例明显较高,差异有统计学意义(P0.05)。HeLa、SiHa与Caski的RACK1基因过表达的稳转宫颈癌细胞株中的有关蛋白cyclin D1、β-catenin、AKT、p-AKT表达高于基因未过表达,p21蛋白表达明显低于基因未过表达,但p53蛋白表达与基因未过表达比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 RACK1基因的过表达能够在较大程度上加强子宫颈癌细胞增殖,对于子宫癌的发生与发展具有较大的促进作用。

关键词：激活的蛋白激酶C受体1 子宫颈癌细胞增殖