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基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路探讨如金解毒散对巨噬细胞焦亡模型的影响

中国免疫学杂志 2024年

作者：马宇慧李祎楠孟佳磊齐璐瑶雷鸣孙芳园上海中医药大学附属普陀医院全科医学科上海中医药大学附属第七人民医院

目的：观察如金解毒散对RAW264.7细胞焦亡模型的治疗作用，并探讨其抗炎机制。方法：RAW264.7细胞经LPS刺激4 h，ATP刺激30min构建细胞焦亡模型。分组包括对照组（Control）、模型组（LPS+ATP）、如金解毒散低剂量组（RJJDS50μg/ml）... 详细信息

目的：观察如金解毒散对RAW264.7细胞焦亡模型的治疗作用，并探讨其抗炎机制。方法：RAW264.7细胞经LPS刺激4 h，ATP刺激30min构建细胞焦亡模型。分组包括对照组（Control）、模型组（LPS+ATP）、如金解毒散低剂量组（RJJDS50μg/ml）、如金解毒散中剂量组（RJJDS100μg/ml）、如金解毒散高剂量组（RJJDS200μg/ml）、地塞米松组（DEX组）。随后收集各组细胞及上清液，检测上清液中LDH释放量，正倒置荧光显微镜观察细胞ROS水平，ELISA法检测上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）的含量，蛋白免疫印迹法（Westernblotting）检测细胞中NLRP3、Caspase-1p45、Caspase-1p20、GSDMD-FL和GSDMD-N的蛋白水平，正倒置荧光显微镜观察PI阳性细胞数量。结果：与对照组相比，模型组细胞上清液中LDH、TNF-α、和IL-1β的含量显著升高（P 如金解毒散各治疗组和阳性药DEX组显著降低了RAW264.7细胞焦亡模型上清液中LDH、TNF-α和IL-1β的含量（P 如金解毒散抑制巨噬细胞焦亡，发挥抗炎作用涉及NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号。

关键词：如金解毒散急性肺损伤巨噬细胞细胞焦亡炎症小体

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基于中药药性理论探索“性味网络药理学”的合理性与可行性——以如金解毒散干预病毒性肺炎的性味网络药理学研究为例

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上海中医药大学学报 2021年第6期35卷 1-11页

作者：陈健汤琛琛赵堃鹏张彩云卢曼晨徐晨钦曹永兵曹烨民葛广波陈启龙上海中医药大学交叉科学研究院上海201203 上海中医药大学附属上海市中西医结合医院上海200071

目的:基于中药药性理论,首次提出"性味网络药理学"概念,通过构建中药性味网络并结合分子对接技术,探索经典方剂如金解毒散治疗病毒性肺炎的作用机制。方法:从HERB数据库获取如金解毒散主要成分,GeneCards收集病毒性肺炎相关基因,借助Net... 详细信息

目的:基于中药药性理论,首次提出"性味网络药理学"概念,通过构建中药性味网络并结合分子对接技术,探索经典方剂如金解毒散治疗病毒性肺炎的作用机制。方法:从HERB数据库获取如金解毒散主要成分,GeneCards收集病毒性肺炎相关基因,借助NetInfer和BATMAN-TCM数据库构建如金解毒散性味药物模块的成分-靶点-疾病模型相互关系网络。采用Metascape软件对靶点进行蛋白相互作用网络和KEGG分析;采用Vina软件对成分和靶蛋白进行分子对接验证;采用SwissADME软件进行有效成分药物代谢动力学评价。结果:利用中药数据库共筛选出该方有效成分335个,其中桔梗20个,甘草117个,黄连26个,黄芩62个,黄柏75个,山栀35个。按3种性味模块进行靶点预测及网络构建,其中苦辛平模块(桔梗)潜在靶标596个,甘平模块(甘草)潜在靶标819个,苦寒模块(黄连、黄芩、黄柏、山栀)潜在靶标1 097个。网络分析及分子对接结果显示,异甘草黄素、穿贝海绵甾醇、吴茱萸次碱、草香豆酮、黄芩素、槲皮素、木犀草素等是该方治疗病毒性肺炎的重要活性成分;SRC、FYN、LCK、MET、AKT1、ABL1、MAPK8、ITK、CCR5、TP53、PTPN11、EIF2AK2、MAPK1、PIK3CD、MAPK3、BTK、STAT3、PIK3CA、MAPK14等是该方治疗病毒性肺炎的核心靶蛋白;JAK-STAT信号通路、细胞因子-细胞因子受体相互作用等是该方治疗病毒性肺炎的关键信号通路。结论:本研究通过性味网络药理学及分子对接技术揭示了如金解毒散多组分、多靶点、多通路的特点,为进一步探索如金解毒散治疗病毒性肺炎作用机制提供了新的思路与方法。研究也表明,采用性味药物模块成分-靶点-疾病模型探析中药复方物质基础具有一定的合理性与可行性。

关键词：性味网络药理学如金解毒散病毒性肺炎分子对接

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