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多酚氧化酶催化合成茶黄素研究

植物生理学报 2017年第8期53卷 1359-1364页

作者：林彩霞杨静蕊王光瑛倪贺李海航华南师范大学生命科学学院广东省植物发育生物工程重点实验室广州510631

茶黄素是红茶的主要品质成分,并具有广泛的生理药理活性。利用多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)体外酶促转化是生产茶黄素的有效方法。本文从PPO酶源的筛选、反应体系的优化、固定化PPO转化茶黄素及PPO构效关系等方面综述了PPO催化... 详细信息

茶黄素是红茶的主要品质成分,并具有广泛的生理药理活性。利用多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)体外酶促转化是生产茶黄素的有效方法。本文从PPO酶源的筛选、反应体系的优化、固定化PPO转化茶黄素及PPO构效关系等方面综述了PPO催化合成茶黄素的研究进展,为工业化制备茶黄素奠定基础。

关键词：茶黄素多酚氧化酶固定化催化合成

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微波处理对鲜湿面片褐变及其特性的影响

现代食品科技 2023年第9期39卷 187-195页

作者：王瑞林江涛岳清华宋安琪宋喜雅苏东民河南工业大学粮油食品学院河南郑州450000 郑州轻工业大学食品与生物工程学院河南郑州450001

该研究探讨了微波处理小麦粉对鲜湿面片褐变及其特性的影响。利用微波技术处理小麦粉,测定鲜湿面片的色泽、小麦粉多酚氧化酶(Polyphenol Oxidase,PPO)活性,并通过分析面片水分分布、游离多酚含量、流变学特性以及小麦粉中蛋白质二级结... 详细信息

该研究探讨了微波处理小麦粉对鲜湿面片褐变及其特性的影响。利用微波技术处理小麦粉,测定鲜湿面片的色泽、小麦粉多酚氧化酶(Polyphenol Oxidase,PPO)活性,并通过分析面片水分分布、游离多酚含量、流变学特性以及小麦粉中蛋白质二级结构、巯基和二硫键变化,从而研究微波处理对鲜湿面片褐变及其特性的影响。研究结果表明:随着微波时间和功率的增加,鲜湿面片的白度呈现上升的趋势,在低微波功率下色泽无显著性差异,在较高功率700 W,处理时间为100 s时白度会因糊化现象而下降;PPO活性下降了42.78%,游离多酚24 h内变化量与未处理组比较下降了54.78%;面片弛豫时间T22和T23呈现先上升后降低的趋势,在中等强度处理时达到最大值;游离巯基整体呈现下降趋势,二硫键含量增加,在700 W处理100 s时分别为1.29、4.38μmol/g;蛋白质二级结构中α-螺旋含量显著性下降,无规则卷曲含量显著性增加;在鲜湿面片的流变学特性中,G′和G″均呈现先增大后减小的趋势,tanδ呈现先减小后增大的趋势。综上所述,在微波功率为700 W,处理时间为80 s效果最佳,该研究可为面制品行业提供一定理论基础。

关键词：微波处理褐变多酚氧化酶白度游离多酚

越冬滞育前后松阿扁叶蜂幼虫体壁防御体系的变化

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应用昆虫学报 2024年第1期61卷 74-81页

作者：王海香陈凡师振萍薛婉怡孙亚星高瑞贺郭红彦山西农业大学林学院太谷030801

【目的】食叶害虫松阿扁叶蜂Acantholyda posticalis Matsumura以老熟幼虫在地下越冬,越冬期间体壁保护其不受外来物的侵害。研究松阿扁叶蜂幼虫体壁对生态的适应性,对于其管理和防治具有重要意义。【方法】采用石油醚溶解脂肪、饱和KO... 详细信息

【目的】食叶害虫松阿扁叶蜂Acantholyda posticalis Matsumura以老熟幼虫在地下越冬,越冬期间体壁保护其不受外来物的侵害。研究松阿扁叶蜂幼虫体壁对生态的适应性,对于其管理和防治具有重要意义。【方法】采用石油醚溶解脂肪、饱和KOH消化几丁质和考马斯亮蓝结合法测定松阿扁叶蜂不同龄期幼虫蛋白质质量和含量;采用FB 28和HE染色法研究幼虫体壁几丁质和脂肪发育的动态变化;采用紫外分光光度计比色法测定体壁多酚氧化酶的蛋白含量和活性变化。【结果】(1)松阿扁叶蜂幼虫体壁几丁质、总蛋白质、总脂肪含量均随着幼虫发育阶段的变化而增加:蛹前滞育>入土滞育>5龄>4龄,且在5龄至入土前迅速增长。(2)松阿扁叶蜂幼虫体壁的几丁质和脂肪厚度随幼虫发育阶段变化趋势为:入土滞育>蛹前滞育>5龄>4龄,且在5龄至入土前迅速增长。(3)随着幼虫发育,松阿扁叶蜂幼虫总脂肪含量变化平缓,几丁质含量呈现下降-升高-下降趋势,总蛋白质含量呈现升高-降低-升高趋势。(4)随着幼虫的发育,松阿扁叶蜂幼虫体壁多酚氧化酶含量呈现先升高后持续降低的趋势,而活力正好相反,变化波形趋势近似互补。【结论】几丁质和蛋白质含量变化曲线相反,波形互补,多酚氧化酶的含量-活性变化互补,这两种互补在松阿扁叶蜂越冬滞育和非滞育期间又构成了互补的体壁防御体系。

关键词：松阿扁叶蜂滞育体壁防御化学成分多酚氧化酶

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多酚氧化酶的提取工艺与活性测定研究

茶叶通讯 2020年第2期47卷 291-296页

作者：袁斌周诗雨刘昌伟张盛严彭刘爱玲湖南农业大学生物科学技术学院湖南长沙410128 湖南农业大学园艺学院湖南长沙410128 湖南艾嘉生物科技有限公司湖南长沙410128

多酚氧化酶活性测定常使用分光光度法。本试验对目前常用的茶叶多酚氧化酶(Polyphenol oxidase,PPO)的提取工艺和活性测定条件进行了改进,考察了4℃浸提时间、离心处理、反应pH值及温度、底物浓度和反应终止剂对茶叶PPO酶活的影响,并对... 详细信息

多酚氧化酶活性测定常使用分光光度法。本试验对目前常用的茶叶多酚氧化酶(Polyphenol oxidase,PPO)的提取工艺和活性测定条件进行了改进,考察了4℃浸提时间、离心处理、反应pH值及温度、底物浓度和反应终止剂对茶叶PPO酶活的影响,并对不同植物来源的PPO酶活进行了比较。结果表明:茶叶多酚氧化酶活性的最佳测定条件为鲜叶匀浆后4℃浸提12 h,8000 r/min离心15 min,取上清酶液于pH值6.0和37℃条件下,添加质量浓度为1.5%的邻苯二酚作为底物,反应10 min后使用3 mL 1 mol/L的偏磷酸终止反应,于460 nm处测定吸光度值,改进后的方法测定标准差和相对标准偏差均小于5%。使用改进方法测定了福鼎大白(春)、福鼎大白(夏)、香蕉、苹果、皇冠梨和葡萄等植物的PPO酶活大小,发现福鼎大白夏季茶叶PPO酶活性高于春季茶叶,而香蕉PPO的酶活高于其他植物,这为使用茶鲜叶以外的材料制备茶黄素提供了一定的科学依据。

关键词：多酚氧化酶活性提取工艺优化茶

多酚氧化酶对蚕丝及丝蛋白生物材料的改性与应用研究进展

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蚕业科学 2019年第1期45卷 134-139页

作者：周倩王平袁久刚王强范雪荣江南大学生态纺织教育部重点实验室江苏无锡214122

多酚氧化酶能催化氧化酚类结构生成醌类活性中间体,引发酚类单体之间聚合。家蚕丝素蛋白和丝胶蛋白大分子肽链上均含一定数量的酪氨酸残基,酪氨酸的酚羟基能被多酚氧化酶催化氧化,生成醌类活性基,不仅可促成丝蛋白大分子交联,而且可与... 详细信息

多酚氧化酶能催化氧化酚类结构生成醌类活性中间体,引发酚类单体之间聚合。家蚕丝素蛋白和丝胶蛋白大分子肽链上均含一定数量的酪氨酸残基,酪氨酸的酚羟基能被多酚氧化酶催化氧化,生成醌类活性基,不仅可促成丝蛋白大分子交联,而且可与外源氨基功能化合物发生迈克尔加成或席夫碱反应,实现底物分子改造。本文讨论了多酚氧化酶的催化氧化机制,侧重阐述了近年来国内外应用多酚氧化酶(漆酶和酪氨酸酶)进行丝蛋白生物材料加工的研究,包括丝纤维制品酶法抗菌和防皱整理、丝素或丝胶酶促交联与接枝改性、再生丝蛋白膜及功能性生物材料制备等,为蚕丝及丝蛋白基材料的生物改性研究及开发利用提供参考。

关键词：多酚氧化酶丝蛋白酪氨酸残基催化氧化生物改性应用

逐步降温对‘鸭梨’果心褐变及其相关基因表达的影响

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植物生理学报 2022年第8期58卷 1431-1440页

作者：程玉豆何近刚冯云霄刘立芹关军锋河北省农林科学院生物技术与食品科学研究所石家庄050051 河北省植物转基因中心石家庄050051

‘鸭梨’贮藏期果心褐变是困扰当前梨产业发展的主要问题之一,因此,解析其发生机制对于将来开发保鲜新技术具有重要的理论指导意义。本研究以‘鸭梨’为材料,探究了直接冷藏(直冷)和逐步降温(逐降) 2种方式对贮藏期果实品质和果心褐变... 详细信息

‘鸭梨’贮藏期果心褐变是困扰当前梨产业发展的主要问题之一,因此,解析其发生机制对于将来开发保鲜新技术具有重要的理论指导意义。本研究以‘鸭梨’为材料,探究了直接冷藏(直冷)和逐步降温(逐降) 2种方式对贮藏期果实品质和果心褐变相关基因表达模式的影响。结果表明:与直冷相比,逐降处理促使‘鸭梨’果实贮藏期间呼吸高峰提前,提高了乙烯生成速率;逐降处理‘鸭梨’果心在贮藏第60天时发生褐变,而直冷处理则在贮藏第85天时果心褐变。逐降处理‘鸭梨’果心褐变初期,总酚含量显著低于直冷处理,而PPO活性则相反。贮藏第60天时,逐降处理‘鸭梨’果心中Pb PAL1和Pb PAL2表达量显著高于直冷处理‘鸭梨’果心,并且它们的表达模式与果心褐变指数密切相关;与PbPALs相似,逐降处理‘鸭梨’果心PbPPO1、PbPPO4、PbPPO5和PbPPO6表达量在褐变初期均显著高于直冷处理,但只有PbPPO1和PbPPO5表达模式与果心褐变指数和PPO活性显著正相关,表明PbPPO1和PbPPO5是参与‘鸭梨’贮藏期果心褐变的关键基因。综上,逐降处理通过提高PbPAL1、PbPAL2、PbPPO1和PbPPO5等基因表达,促使PPO和酚类物质主导的酶促褐变反应发生,进而加剧果心衰老性褐变。因此,建议生产中在采用逐步降温贮藏‘鸭梨’时,应充分考虑采收期和果实采收品质。

关键词： ‘鸭梨’ 逐步降温果心褐变苯丙氨酸解氨酶多酚氧化酶基因表达

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大黄酶促褐变相关酶学特性研究

中国药学杂志 2023年第22期58卷 2062-2068页

作者：李东辉李国峰吴红伟杨新荣李咸慰宋沁洁司昕蕾边甜甜张育贵孙宇靖李越峰甘肃中医药大学药学院兰州730000

目的研究大黄鲜切晾干过程中指标化学成分变化及大黄多酚氧化酶(polyphenol oxidases,PPO)、过氧化物酶(peroxidases,POD)的相关酶学特性。方法利用高效液相色谱(HPLC)技术对指标成分峰面积进行测定,采用紫外光谱(UV)技术考察底物种类... 详细信息

目的研究大黄鲜切晾干过程中指标化学成分变化及大黄多酚氧化酶(polyphenol oxidases,PPO)、过氧化物酶(peroxidases,POD)的相关酶学特性。方法利用高效液相色谱(HPLC)技术对指标成分峰面积进行测定,采用紫外光谱(UV)技术考察底物种类、底物浓度、温度及pH值对大黄中PPO及POD的酶活性影响。结果没食子酸、儿茶素及表儿茶素的峰面积变化率高于蒽醌类成分,PPO最佳底物为没食子酸、最佳底物浓度为0.06 mol·L^(-1),最佳温度为30℃,最佳pH为7.0,POD的最佳底物为愈创木酚,最佳底物浓度为0.06 mol·L^(-1),最佳温度为30℃,最佳pH为8.0。结论大黄在产地加工过程中调节温度和pH值均可抑制PPO及POD的酶活性,从而有效提升大黄药材品质,同时也为其他类药材酶促褐变的控制提供思路。

关键词：大黄鲜切多酚氧化酶过氧化物酶酶学特性

多酚氧化酶对普洱茶渥堆发酵过程中品质变化的影响

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现代食品科技 2015年第3期31卷 197-201页

作者：付赢萱刘通讯华南理工大学轻工与食品学院广东广州510640

本文探讨了添加不同浓度多酚氧化酶对渥堆发酵过程中普洱茶理化指标和感官品质的影响。实验结果表明:经不同浓度多酚氧化酶处理后的普洱茶,其部分品质成分在渥堆发酵过程中的变化差异显著(p<0.01),与对照组相比,实验组的渥堆平均温度相... 详细信息

本文探讨了添加不同浓度多酚氧化酶对渥堆发酵过程中普洱茶理化指标和感官品质的影响。实验结果表明:经不同浓度多酚氧化酶处理后的普洱茶,其部分品质成分在渥堆发酵过程中的变化差异显著(p多酚、儿茶素指标变化速度加快,且与多酚氧化酶的添加量呈负相关;茶黄素发酵前期生成速度加快,后期转化速度提高;茶褐素有较快积累。加入多酚氧化酶的普洱茶发酵18d后,在外形、汤色、滋味、香气、叶底等感官品质上基本具有熟茶的品质,其中1.6U/g、3.2U/g多酚氧化酶组可达到陈年普洱汤色红浓明亮,滋味醇厚回甘,香气浓郁的品质特点。本研究为缩短发酵周期,改善普洱茶品质提供新的思路和方法。

关键词：普洱茶多酚氧化酶渥堆发酵

六堡茶渥堆过程中产多酚氧化酶菌株的筛选及多酚氧化酶的分离纯化

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食品工业科技 2022年第5期43卷 130-137页

作者：王洁何瑜琳滕建文夏宁韦保耀黄丽广西大学轻工与食品工程学院广西南宁530000

本研究采用传统分离法从渥堆六堡茶中共分离出42株菌,然后利用平板初筛和液体发酵进行复筛,从42株微生物中筛选出10株产PPO的微生物并测定其酶活。用盐析及透析法对产酶活性最高的菌株所产的多酚氧化酶进行纯化,纯化后的酶液用SDS-PAGE... 详细信息

本研究采用传统分离法从渥堆六堡茶中共分离出42株菌,然后利用平板初筛和液体发酵进行复筛,从42株微生物中筛选出10株产PPO的微生物并测定其酶活。用盐析及透析法对产酶活性最高的菌株所产的多酚氧化酶进行纯化,纯化后的酶液用SDS-PAGE及Native-PAGE电泳方法确定PPO的分子量范围和PPO种类。结果表明,渥堆六堡茶中发现的10株产多酚氧化酶菌株,其中,细菌的产酶活性普遍要高于霉菌;Pantoea vagans(成团泛菌)菌株产酶活性最高,酶活高达37 U/mL,其所产的多酚氧化酶分子量在16~48 kDa之间,属于漆酶。此研究为微生物对六堡茶茶叶品质作用的后续研究奠定了基础,同时也为功能六堡茶的研发提供资料数据。

关键词：六堡茶微生物多酚氧化酶漆酶