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肿瘤相关成纤维细胞的自噬通量与多发性骨髓瘤血管生成的关系及机制

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淋巴细胞绝对计数与多发性骨髓预后的相关性分析

2024中国肿瘤标志物学术大会暨CACA整合肿瘤学高峰论坛暨第十七届肿瘤标志物青年科学家论坛暨中国肿瘤标志物产业创新大会

作者：洪铱辰杨琛擘孙泽欣舒姣陈奎生孙淼淼郑州大学第一附属医院

目的:多发性骨髓(MM)第二大常见的血液系统恶性肿瘤,其疾病的进展与血管生成密切相关。研究表明肿瘤微环境中的肿瘤相关成纤维细胞(CAF)与肿瘤的增殖、迁移、侵袭以及耐药密切相关。在前期研究的基础上,我们以CAF的自噬为切入点,进一步... 详细信息

目的:多发性骨髓(MM)第二大常见的血液系统恶性肿瘤,其疾病的进展与血管生成密切相关。研究表明肿瘤微环境中的肿瘤相关成纤维细胞(CAF)与肿瘤的增殖、迁移、侵袭以及耐药密切相关。在前期研究的基础上,我们以CAF的自噬为切入点,进一步研究体内外条件下,抑制或激活CAF自噬与MM血管生成的关系及其可能机制,为临床通过阻断血管形成,进而治疗肿瘤提供新的理论依据。材料与方法:1.通过Ficoll密度梯度离心法从MM组织标本中分离、培养并鉴定CAF;从营养不良性贫血患者骨髓活检组织标本中分离、培养并鉴定正常成纤维细胞(NF);通过Western blot、免疫荧光检测CAF标志蛋白α-SMA、FAP、FSP、Vimentin,对分离的CAF进行鉴定。2.通过Western blot、GFP-RFP-LC3斑点化实验以及吖啶橙染色等实验方法,检测NF和CAF的自噬通量差异。3.体外使用骨髓瘤上清诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)为肿瘤相关内皮细胞(MMEC),并对其标志物以及增殖、迁移、侵袭、成管能力进行检测。4.使用3-甲基腺嘌呤或雷帕霉素,抑制或激活CAF的自噬,Western blot检测各组LC3B、Beclin1、BNIP3及CTSB的表达;并收集CAF上清作为条件培养基培养MMEC,鬼比环肽染色观察各组MMEC的细胞骨架以及侵袭性伪足的形态和数量;通过CCK8增殖实验、Transwell侵袭实验、划痕实验、小管形成实验观察CAF上清对各组MMEC的增殖、迁移和成管能力的影响。*** blot检测各组细胞中AMPK、p-AMPK、mTOR、p-mTOR、HIF-1α、VEGF-A的表达。5.分组构建裸鼠MM移植瘤模型,应用免疫组织化学方法检测各组MM移植瘤组织中CD34,标记血管内皮细胞,计算MVD值,观察CAF自噬体内对移植瘤血管形成的影响;通过Western blot检测移植瘤模型中AMPK、p-AMPK、mTOR、p-mTOR、HIF-1α、VEGF-A的表达。结果:1. MM患者样本中的CAF比正常人NF的自噬通量更高,且CAF的高水平自噬可增强MMEC的增殖、迁移、侵袭和成管能力。2.激活CAF自噬可进一步促进MMEC增殖、迁移、侵袭和成管能力;抑制CAFs自噬可降低MMEC增殖、迁移、侵袭和成管能力。3.自噬通路的激活或抑制,会调控HIF-1α、VEGFA的表达。4.体内激活CAF自噬可促进裸鼠MM移植瘤组织中的血管生成加速肿瘤生长,而抑制CAF自噬可减少裸鼠MM移植瘤组织中的血管生成延缓肿瘤生长。结论:1.骨髓瘤相关成纤维细胞有更高的自噬通量,其高通量自噬可促进多发性骨髓瘤的血管生成。2.激活骨髓瘤相关成纤维细胞的自噬可进一步促进骨髓瘤血管生成及肿瘤进展;抑制骨髓瘤相关成纤维细胞的自噬可减少骨髓瘤血管生成,延缓肿瘤进展。

关键词：自噬多发性骨髓肿瘤相关成纤维细胞血管生成肿瘤微环境

来源： cnki会议评论

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中国肿瘤临床 2013年第20期40卷 1224-1226页

作者：杨瑞芳赵志红张鹏天津医科大学肿瘤医院检验科国家肿瘤临床医学研究中心天津市肿瘤防治重点实验室国家"863"计划临床研究实验室天津市300060

目的:探讨淋巴细胞绝对计数与多发性骨髓瘤患者疾病进展和预后的相关性。方法:收集102例初发多发性骨髓瘤患者的淋巴细胞绝对计数及各项临床指标,分析淋巴细胞绝对计数与多发性骨髓瘤患者疾病进展和预后的相关性。结果:根据中位淋巴细... 详细信息

目的:探讨淋巴细胞绝对计数与多发性骨髓瘤患者疾病进展和预后的相关性。方法:收集102例初发多发性骨髓瘤患者的淋巴细胞绝对计数及各项临床指标,分析淋巴细胞绝对计数与多发性骨髓瘤患者疾病进展和预后的相关性。结果:根据中位淋巴细胞绝对计数分组后得出,组1(淋巴细胞绝对计数>1.51×109/L)发病年龄、血清乳酸脱氢酶和β2-微球蛋白明显低于组2(淋巴细胞绝对计数0.05)。结论:初发时淋巴细胞绝对计数高的患者预后较好,淋巴细胞绝对计数低的患者预后较差。推测淋巴细胞绝对计数可能成为多发性骨髓瘤的独立预后因素之一。

关键词：淋巴细胞绝对计数多发性骨髓瘤预后

MDM2/p53通路对多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞凋亡的调控

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西安交通大学学报（医学版） 2020年第2期41卷 197-200页

作者：梁昊廖灿李红刘文龙湖南中医药大学中医诊断研究所湖南长沙410208 湖南中医药大学中医学院湖南长沙410208 湖南中医药大学科技创新中心湖南长沙410208 湖南中医药大学药学院湖南长沙410208

目的研究MDM2/p53通路对多发性骨髓瘤(MM)细胞凋亡的调控作用及机制。方法体外培养人MM细胞株(RPMI 8226)并分为实验组(Nutlin-3a)和对照组(药物溶剂),采用CCK-8法检测各组细胞的增殖情况和抑制率,Western blot检测凋亡相关蛋白表达,流... 详细信息

目的研究MDM2/p53通路对多发性骨髓瘤(MM)细胞凋亡的调控作用及机制。方法体外培养人MM细胞株(RPMI 8226)并分为实验组(Nutlin-3a)和对照组(药物溶剂),采用CCK-8法检测各组细胞的增殖情况和抑制率,Western blot检测凋亡相关蛋白表达,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果与对照组相比,24、48、72 h时间点实验组细胞增殖明显降低,抑制率明显增高(P<0.05);实验组MDM2和Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.05),而p53的表达水平明显升高(P<0.05)。实验组各时间点凋亡率(38.42%、82.26%、82.74%)均明显高于对照组(4.80%、8.06%、14.69%)。结论MDM2与p53之间构成降解-反式激活循环通路影响下游凋亡相关蛋白Bcl-2的表达,抑制MM细胞的增殖,促进MM细胞凋亡。

关键词： MDM2 p53 多发性骨髓凋亡 Nutlin-3a

卡培他滨对多发性骨髓瘤MPC-11细胞的作用及机制研究

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卡培他滨对多发性骨髓瘤MPC-11细胞的作用及机制研究

作者：杨芬华中科技大学

学位级别：硕士

目的:探讨卡培他滨抑制多发性骨髓瘤MPC-11细胞增殖、促进其凋亡及可能的作用的机制。方法:采用0、80、160、320、640、1280μg/ml浓度的卡培他滨和多发性骨髓瘤MPC-11细胞共培养48h后,用CCK-8法检测MPC-11细胞增殖;Annexin V/PI双染色... 详细信息

目的:探讨卡培他滨抑制多发性骨髓瘤MPC-11细胞增殖、促进其凋亡及可能的作用的机制。方法:采用0、80、160、320、640、1280μg/ml浓度的卡培他滨和多发性骨髓瘤MPC-11细胞共培养48h后,用CCK-8法检测MPC-11细胞增殖;Annexin V/PI双染色后流式细胞仪检测细胞凋亡;选择IC50浓度卡培他滨作用组的MPC-11细胞,在共培养48h时,用基因芯片筛选出与对照组有表达差异的miRNAs;RT-PCR进一步验证相关miRNAs的表达;采用灌胃法观察卡培他滨对小鼠MPC-11瘤组织的抑制作用。结果:1卡培他滨对MPC-11细胞形态的影响不同浓度卡培他滨对MPC-11细胞作用48h后,与正常对照组相比,各组细胞形态均有明显的变化。随着卡培他滨浓度的增加,细胞数量逐渐减少、且碎片逐渐增多。可见细胞皱缩、边缘不清或不规则,细胞间隔明显增大,形态细胞各异。而正常对照组细胞透亮、形态规则、边界清楚、细胞成团分布。2卡培他滨对MPC-11细胞增殖的影响CCK-8实验表明,卡培他滨能有效抑制MPC-11细胞的增殖,其抑制增殖的作用随着药物浓度的增加而增加,呈剂量依赖关系。3卡培他滨对MPC-11细胞凋亡的影响流式细胞仪检测结果表明,卡培他滨可促进MPC-11细胞凋亡,且凋亡的时间主要发生在细胞中晚期。经过不同浓度梯度的卡培他滨处理MPC-11细胞48h后,各剂量组(0、80、160、320、640、1280μg/ml)均出现不同程度的凋亡,其总凋亡率分别为4.10±1.43%、20.16±1.86%、21.71±2.49%、28.37±3.74%、43.03±2.67%及95.45±1.45%,且细胞的凋亡比例在早、中、晚各个时期均出现随卡培他滨浓度增加而有增高的趋势,尤以中晚期(各剂量组中晚期凋亡率依次为:1.18±0.60%、13.57±1.12%、14.67±0.67%、20.73±2.90%、34.47±1.16%及92.67±1.17%)为甚。4卡培他滨对MPC-11细胞miRNAs的影响基因芯片检测发现,卡培他滨可显著地上调或下调MPC-11细胞的多个miRNAs,其中表达上调的miRNAs84个,表达下调的miRNAs24个。表达上调的基因有:let-7i、let-7b、let-7c、mir-29b、mir-15a、mir-148a、mir-574、mir-22等;表达下调的基因有:mir-21、mir-207、mir-3969、mir-669a、mir-669c、mir-467e、mir-712、mir-714等。5 RT-PCR检测miRNAs的表达量采用RT-PCR法检测miRNAs的表达,对照组mir-15a、mir-29b及mir-21相对表达量分别为0.394±0.069、0.572±0.026及1.002±0.077,而卡培他滨IC50组分别为1.003±0.095、1.002±0.080及0.328±0.047,差异具有统计学意义。与对照组相比,IC50组mir-15a、mir-29b相对表达量增高1.5倍以上,而mir-21相对表达量降低60%以上。6卡培他滨对多发性骨髓瘤组织的抑制作用对照组瘤重为4.14±0.65g,而卡培他滨组(375mg/kg)瘤重为1.36±0.78g,与对照组相比较,卡培他滨抑制瘤组织生长率达67.5%。结论:无论是在体外细胞层面、还是整体动物层面,卡培他滨均显示出良好的抗多发性骨髓瘤的作用,且在一定浓度范围内存在量效依赖关系。其作用机制是通过抑制细胞增殖、增加细胞凋亡、影响癌/抑癌基因miRNAs的表达实现的。

关键词：卡培他滨多发性骨髓 MPC-11细胞增殖凋亡 miRNAs 小鼠

磁共振扩散加权成像（DWI）在脊柱转移瘤和多发性骨髓瘤诊断和鉴别诊断中的价值

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磁共振扩散加权成像（DWI）在脊柱转移瘤和多发性骨髓瘤诊断和鉴...

作者：王鹏宁夏医科大学

学位级别：硕士

目的研究正常人群腰椎不同部位(椎体、椎弓根)表观弥散系数(ADC值)与年龄的关系。探讨磁共振扩散加权成像(DWI)在脊柱转移瘤和多发性骨髓瘤诊断和鉴别诊断价值。方法选取89例不同年龄组健康体检者,采用GE 1.5T超导型MR仪行腰椎常规MR扫... 详细信息

目的研究正常人群腰椎不同部位(椎体、椎弓根)表观弥散系数(ADC值)与年龄的关系。探讨磁共振扩散加权成像(DWI)在脊柱转移瘤和多发性骨髓瘤诊断和鉴别诊断价值。方法选取89例不同年龄组健康体检者,采用GE 1.5T超导型MR仪行腰椎常规MR扫描(T1WI、T2WI)及弥散加权成像(DWI)扫描,常规扫描序列包括:矢状位FSE T2WI、T1WI扫描,横轴位FSE T2WI扫描;DWI扫描采用单次激发自旋回波平面回波成像序列(SS-SE-EPI),扩散敏感系数(b值)选择500 s/mm2。比较腰椎椎体与椎弓根ADC值差异性,并分析不同年龄组间腰椎各部位ADC值的差异,采用相关性研究评估腰椎各部位ADC值与年龄的相关性。选取59例怀疑脊柱恶性肿瘤患者,行脊柱病变部位MRI常规扫描及DWI扫描,将其中经手术或临床穿刺病理确诊的30例脊柱转移瘤患者及16例多发性脊髓瘤患者MRI资料纳入研究,分析两种脊柱恶性肿瘤病变椎体在T1WI、T2WI及DWI信号改变差异有无统计学意义;测量脊柱转移瘤组及多发性骨髓瘤组病变椎体ADC值,分析两种脊柱肿瘤组与正常椎体组、脊柱转移瘤组与多发性骨髓瘤组病变椎体的ADC值之间的差异有无统计学意义。结果1.正常志愿者腰椎椎弓根ADC值显著高于椎体ADC值(P多发性骨髓瘤组病变椎体在T1WI、T2WI及DWI序列信号差异,经χ2检验差异无统计学意义(P>0.05)。4.脊柱转移瘤组、多发性骨髓瘤组及正常人群椎体组平均ADC值分别为:(1.054±0.155)×10-3mm2/s、(0.820±0.171)×10-3mm2/s及(0.316±0.113)×10-3mm2/s;脊柱转移瘤组病变椎体ADC值高于正常人群椎体组,二者之间差异具有统计学意义(t=21.642,P多发性骨髓瘤组ADC值高于正常人群椎体组,二者之间差异具有统计学意义(t=11.862,P多发性骨髓瘤组,二者之间差异具有统计学意义(t=4.933,P多发性骨髓瘤组病变椎体在T1WI、T2WI及DWI图像中信号表现差异无统计学意义,故MRI常规序列及DWI序列信号改变对于二者鉴别诊断价值有限。4.脊柱转移瘤组及多发性骨髓瘤组ADC值均较正常椎体组ADC值高,且脊柱转移瘤组ADC值高于多发性骨髓瘤组,因此,扩散加权成像ADC值定量测定在脊柱转移瘤和多发性骨髓瘤的诊断及鉴别诊断中具有重要价值。

关键词：磁共振成像弥散脊柱转移瘤多发性骨髓

多发性骨髓瘤采用核医学影像诊断的临床效果探究

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中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2021年第8期 99-99,101页

作者：姜果黄娇南充市中心医院核医学科四川南充637000

本次研究对多发性骨髓瘤采取核医学影像诊断,探究其临床诊断效果。方法:本次研究从收治的多发性骨髓瘤患者中选取了80例作为研究对象,均在2019年1月~2021年1月就诊。其中1/2采取X线检查的患者纳入对照组,另外1/2采取核医学影像诊断的患... 详细信息

本次研究对多发性骨髓瘤采取核医学影像诊断,探究其临床诊断效果。方法:本次研究从收治的多发性骨髓瘤患者中选取了80例作为研究对象,均在2019年1月~2021年1月就诊。其中1/2采取X线检查的患者纳入对照组,另外1/2采取核医学影像诊断的患者纳入实验组。分析对比两组患者的诊断效果。结果:经研究结果数据显示,以病理检查为金标准,其中对照组特异度72.50%;准确度70.00%;灵敏度70.00% ;实验组特异度95.00%;准确度92.50%;灵敏度 97.50%。实验组特异度、准确度以及灵敏度数据表明,相比较对照组较高(P多发性骨髓瘤的临床诊断中采取X线检查以及核医学影像诊断,其中核医学影像诊断的效果相比较X线检查较高,其具有较高的灵敏度以及准确度。此种诊断方法可在多发性骨髓瘤的诊断中予以推广。

关键词：多发性骨髓瘤核医学影像诊断 X线检查灵敏度准确度

多发性骨髓瘤患者血清SDF-1、PINP、IL-33水平及意义

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实用癌症杂志 2021年第7期36卷 1091-1094页

作者：曹卫华李超段丽娟河南省南阳市中心医院 473009

目的探讨多发性骨髓患者中血清基质衍生因子1(SDF-1)、Ⅰ型前胶原氨基端延长肽(PINP)、白细胞介素-33(IL-33)水平及意义。方法选取多发性骨髓瘤患者97例(观察组),同时选取健康体检者100例作为对照组,检测血清SDF-1、PINP、IL-33水平。... 详细信息

目的探讨多发性骨髓患者中血清基质衍生因子1(SDF-1)、Ⅰ型前胶原氨基端延长肽(PINP)、白细胞介素-33(IL-33)水平及意义。方法选取多发性骨髓瘤患者97例(观察组),同时选取健康体检者100例作为对照组,检测血清SDF-1、PINP、IL-33水平。结果观察组血清SDF-1为(0.22±0.09)pg/ml,明显高于对照组(P骨髓瘤类型患者血清SDF-1、PINP、IL-33水平差异比较无统计学意义(P>0.05);治疗有效患者治疗后1个月血清SDF-1为(0.12±0.07)pg/ml,明显低于治疗无效患者(P多发性骨髓瘤患者血清SDF-1水平明显升高,而PINP和IL-33水平明显降低,与临床分期和治疗疗效有一定关系。

关键词：多发性骨髓基质衍生因子1 Ⅰ型前胶原氨基端延长肽白细胞介素-33

免疫固定电泳技术在鉴定多发性骨髓瘤M蛋白中的应用

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福建医药杂志 2008年第5期30卷 86-87页

作者：陈慧丹陈发林林凤娇福建省立医院检验科 350001 福建卫生职业技术学院检验影像系

目的探讨免疫固定电泳技术在鉴定多发性骨髓瘤单克隆免疫球蛋白(M蛋白)中的应用。方法采用琼脂糖凝胶免疫固定电泳技术(IFE)检测40份血清,其中19例为多发性骨髓瘤(MM)患者。结果在19例MM患者中,有17例检出M蛋白,M蛋白分型为IgGκ型8例,... 详细信息

目的探讨免疫固定电泳技术在鉴定多发性骨髓瘤单克隆免疫球蛋白(M蛋白)中的应用。方法采用琼脂糖凝胶免疫固定电泳技术(IFE)检测40份血清,其中19例为多发性骨髓瘤(MM)患者。结果在19例MM患者中,有17例检出M蛋白,M蛋白分型为IgGκ型8例,IgGλ型3例,IgAκ型3例,IgAλ型1例,单纯λ型2例;未检出M带2例;21例其他疾病患者,其中有12例检出M蛋白,其分型为IgGκ型2例,IgGλ型3例,IgAκ型1例,IgAλ型1例,Ig Mκ型1例,Ig Mλ型1例,单纯λ型2例,双克隆型1例;未检出M带9例。结论IFE法灵敏度高、干扰少、沉淀带易识别、快速,试验完成后的胶片可扫描定量及长期保存。

关键词：免疫固定电泳多发性骨髓 M蛋白

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29例轻链型多发性骨髓瘤鉴定与结果分析

数理医药学杂志 2002年第3期15卷 251-252页

作者：孙卫红翟玉华宿莉首都医科大学附属北京红十字朝阳医院检验科北京100020

为提高轻链型多发性骨髓瘤的检出率和敏感性 ,从多发性骨髓瘤 ( MM)标本中收集了确诊的 2 9例轻链型多发性骨髓瘤标本 (其中 k型 10例 ,λ型 19例 ) ,通过具体实验做该种病例的血清蛋白电泳、免疫球蛋白定量 ,k、λ定量及尿本周氏蛋白 ... 详细信息

为提高轻链型多发性骨髓瘤的检出率和敏感性 ,从多发性骨髓瘤 ( MM)标本中收集了确诊的 2 9例轻链型多发性骨髓瘤标本 (其中 k型 10例 ,λ型 19例 ) ,通过具体实验做该种病例的血清蛋白电泳、免疫球蛋白定量 ,k、λ定量及尿本周氏蛋白 ( k、λ)定性及定量、k/λ比值 ,蛋白电泳、免疫固定电泳 ,并结合骨髓浆细胞百分比及形态做出实验诊断。结果显示 ,血。

关键词：多发性骨髓轻链(k,λ) 本周氏蛋白电泳