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壮督驱寒合剂对PGIA小鼠miR-29a及Wnt通路相关因子的影响研究

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壮督驱寒合剂对PGIA小鼠miR-29a及Wnt通路相关因子的影响研究

作者：李灿湖南中医药大学

学位级别：硕士

目的:通过研究壮督驱寒合剂对蛋白聚糖诱导的关节炎(proteoglycan-induced arthritis,PGIA)小鼠模型Micro RNA-29a(miR-29a)及Wnt信号通路相关因子的影响,探讨其治疗强直性脊柱炎(Ankylosing spondylitis,AS)的可能机制。方法:50只BALB/c雌性小鼠随机分为空白组、模型组、西药组、中药低剂量组、中药高剂量组,每组10只,除空白组外,其余均采取蛋白聚糖(proteoglycan,PG)+完全弗式佐剂腹腔注射复制PGIA小鼠模型。末次免疫后2周开始予以相应药物处理。观察小鼠关节炎指数(Arthritis Index,AI)变化,采用实时荧光定量PCR法(Quantitative Real-time PCR,qPCR)测定miR-29a、Dickkopf-1(DKK1)及β-catenin的mRNA表达,采用蛋白质印迹法(Western Blot,WB)检测DKK1及β-catenin的蛋白含量。结果:1.壮督驱寒合剂对PGIA小鼠关节炎症状的影响:壮督驱寒合剂能有效减轻PGIA小鼠模型的关节炎症状,与模型组相比,各用药组小鼠的AI评分下降(P0.05)。2.各组miR-29a的比较:与模型组相比,各用药组miR-29a表达水平显著下降(P0.05),β-catenin mRNA及蛋白表达下降(P壮督驱寒合剂能减轻PGIA小鼠关节炎的症状,降低AI评分。2.壮督驱寒合剂能抑制miR-29a及β-catenin的表达,上调DKK1的表达,提示壮督驱寒合剂可能通过miR-29a调控Wnt/β-catenin信号通路的表达从而起到延缓AS新骨形成的作用。

关键词：强直性脊柱炎壮督驱寒合剂蛋白聚糖诱导的关节炎小鼠关节炎指数 miR-29a Wnt/β-catenin信号通路

壮督驱寒合剂对强直性脊柱炎小鼠Wnt3a、β-catenin表达及炎症因子的影响

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世界中西医结合杂志 2020年第12期15卷 2236-2240页

作者：吴伊莹柳玉佳王炽罗常春李灿刘丹王莘智湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007 湖南中医药大学湖南长沙410007

目的观察壮督驱寒合剂对强直性脊柱炎(AS)小鼠Wnt3a、β-连环蛋白(β-catenin)表达及炎症因子的影响。方法将60只雌性BALB/c小鼠随机分成空白组、模型组、塞来昔布组、中药低剂量组和中药高剂量组。除空白组外,其余各组用蛋白聚糖法诱... 详细信息

目的观察壮督驱寒合剂对强直性脊柱炎(AS)小鼠Wnt3a、β-连环蛋白(β-catenin)表达及炎症因子的影响。方法将60只雌性BALB/c小鼠随机分成空白组、模型组、塞来昔布组、中药低剂量组和中药高剂量组。除空白组外,其余各组用蛋白聚糖法诱导AS小鼠模型。造模成功后,塞来昔布组予塞来昔布灌胃,中药低剂量组和中药高剂量组分别予低剂量和高剂量中药灌胃,其余组灌胃等量生理盐水。每天1次,连续用药8周。比较各组之间滑膜Wnt3a和β-catenin mRNA和蛋白表达、血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和转化生长因子β1(TGF-β1)水平情况。结果与空白组比较,模型组滑膜组织Wnt3a、β-catenin mRNA和蛋白表达显著升高(P壮督驱寒合剂对AS小鼠病理性成骨及炎症皆有一定的改善作用,其机制可能与调节Wnt/β-catenin信号通路Wnt3a、β-catenin蛋白表达,抑制TNF-α、TGF-β1水平有关。

关键词：强直性脊柱炎壮督驱寒合剂 Wnt信号通路炎症因子

壮督驱寒合剂对成骨细胞炎性因子轴miR-29a/TNF-α/β-catenin的影响

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中医药导报 2020年第15期26卷 29-32页

作者：刘丹李灿葛子靖王莘智湖南中医药大学第一附属医院长沙湖南410007 湖南中医药大学长沙湖南410208

目的:探究壮督驱寒合剂对成骨细胞炎性因子轴miR-29a/TNF-α/β-catenin的影响。方法:成骨细胞hFOB1.19分为空白对照组、正常血清组、AS血清组、含药血清组。AS血清组的培养基中加入20%患者血清,含药血清组培养基中加入20%壮督驱寒合剂... 详细信息

目的:探究壮督驱寒合剂对成骨细胞炎性因子轴miR-29a/TNF-α/β-catenin的影响。方法:成骨细胞hFOB1.19分为空白对照组、正常血清组、AS血清组、含药血清组。AS血清组的培养基中加入20%患者血清,含药血清组培养基中加入20%壮督驱寒合剂含药血清,共培养72 h。检测实验末各组细胞miR-29a/TNF-α/β-catenin的表达水平。结果:与空白对照组比较,AS血清组miR-29a/TNF-α/β-catenin的表达明显上调,差异有统计学意义(P壮督驱寒合剂能下调miR-29a/TNF-α/β-catenin的表达从而抑制炎性因子释放,这可能是其治疗AS的重要机制之一。

关键词：强直性脊柱炎壮督驱寒合剂成骨细胞 miR-29a TNF-α β-catenin

壮督驱寒合剂对强直性脊柱炎模型小鼠miR-29a及Wnt信号通路的影响

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陕西中医 2020年第8期41卷 1038-1041页

作者：李灿刘丹罗常春柳玉佳王莘智湖南中医药大学长沙410208 湖南中医药大学第一附属医院长沙410021

目的:研究壮督驱寒合剂对强直性脊柱炎(AS)模型小鼠miR-29a及Wnt通路的影响,以探讨壮督驱寒合剂防治AS的机制。方法:将50只6~8周Balb/c雌性小鼠随机分为空白组、模型组、西药组、中药低剂量组、中药高剂量组,每组10只。除空白组外,其余... 详细信息

目的:研究壮督驱寒合剂对强直性脊柱炎(AS)模型小鼠miR-29a及Wnt通路的影响,以探讨壮督驱寒合剂防治AS的机制。方法:将50只6~8周Balb/c雌性小鼠随机分为空白组、模型组、西药组、中药低剂量组、中药高剂量组,每组10只。除空白组外,其余各组均采取蛋白聚糖加完全弗式试剂腹腔注射复制AS小鼠模型。造模结束后各组分别进行相应药物灌胃处理,1次/d,连续6周,末次给药后取膝关节滑膜组织。采用实时荧光定量法测定miR-29a、DKK-1及β-catenin的mRNA表达,采用免疫印迹法检测β-catenin、DKK-1蛋白含量。结果:与空白组相比,模型组小鼠滑膜组织中miR-29a表达升高,β-catenin mRNA及蛋白表达升高,DKK-1 mRNA及蛋白表达下降,差异具有统计学意义(P壮督驱寒合剂可能通过调控miR-29a来影响Wnt/β-catenin经典信号通路的表达,从而起到延缓AS新骨形成的作用。

关键词：强直性脊柱炎壮督驱寒合剂 miR-29a Wnt/β-catenin信号通路小鼠