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裸DNA肌肉注射不同注射方法对标记基因转染效率的影响

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中国运动医学杂志 2003年第6期22卷 580-583,602页

作者：文立陈立贺晨霞陆爱云曾凡辉卢大儒薛京伦天津体育学院运动医学研究所天津300381 复旦大学遗传研究所上海体育学院

在肌肉损伤基因治疗应用研究中 ,裸DNA直接注射法具有安全可靠 (不会引起炎症反应和导致插入突变 )、制作工艺简单、操作简便 (与传统的注射方法非常相近 )、可重复注射等优点。以往研究表明 ,肌肉DNA注射基因转移的注射技术是显著影响... 详细信息

在肌肉损伤基因治疗应用研究中 ,裸DNA直接注射法具有安全可靠 (不会引起炎症反应和导致插入突变 )、制作工艺简单、操作简便 (与传统的注射方法非常相近 )、可重复注射等优点。以往研究表明 ,肌肉DNA注射基因转移的注射技术是显著影响表达水平的一个重要参数。因此 ,本研究比较了直接注射、注射后保持和缩进式注射三种不同注射方法对基因转移效率的影响 ,进行了不同注射方法的机理探讨。实验结果显示 ,缩进式注射方法转染效率最高 ,直接注射和注射后保持两种方法间无显著性差异。结果提示 ,质粒不是通过细胞膜的破损进入细胞 ,可能是“受体介导”或“T管和内陷”作用的结果。这一结果支持“T管和细胞内陷说”和“受体介导说”。

关键词：裸DNA肌肉注射注射方法基因转染效率影响骨骼肌 :肌肉创伤

实时PCR定量分析体内基因转染效率的可行性

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中国实验血液学杂志 2003年第2期11卷 132-136页

作者：高春记解放军总医院血液科

为了探索实时PCR技术评价基因转染效率的可行性 ,利用克隆PCR检测逆转录病毒载体介导的neo基因导入原代成肌细胞的转染效率 ,同时行实时PCR检测 ,对二者结果进行对比分析 ;利用线性扩增介导的PCR(LAM PCR)技术和逆转录病毒 5′LTR插入... 详细信息

为了探索实时PCR技术评价基因转染效率的可行性 ,利用克隆PCR检测逆转录病毒载体介导的neo基因导入原代成肌细胞的转染效率 ,同时行实时PCR检测 ,对二者结果进行对比分析 ;利用线性扩增介导的PCR(LAM PCR)技术和逆转录病毒 5′LTR插入细胞基因组位点的分析 ,确定单细胞内基因转染的拷贝数。结果显示 :①在低转染率的情况下 (转染率情况下二者的结果差别明显 ;②逆转录病毒载体介导的转染 ,在原代成肌细胞中为单拷贝基因导入基因组内。结论 :实时PCR可以比较精确地估计体内病毒载体介导的基因转染效率 ;而在体外由于多为高转染率。

关键词：实时PCR定量分析基因转染效率克隆逆转录病毒载体生物医学

聚谷氨酸为骨架的梳状基因载体的合成及生物学性能评价

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高等学校化学学报 2014年第9期35卷 2019-2025页

作者：何宁孙贺春徐欢喜邵张章安徽中医药大学药学院合肥230031

以聚谷氨酸为骨架,用低分子量聚乙烯亚胺胺解聚谷氨酸苄酯,得到聚谷氨酸-g-聚乙烯亚胺,用异佛尔酮二异氰酸酯将聚乙二醇单甲醚偶联到聚谷氨酸-g-聚乙烯亚胺上,合成了梳状聚阳离子基因载体聚谷氨酸-g-(聚乙烯亚胺-b-聚乙二醇).利用核磁... 详细信息

以聚谷氨酸为骨架,用低分子量聚乙烯亚胺胺解聚谷氨酸苄酯,得到聚谷氨酸-g-聚乙烯亚胺,用异佛尔酮二异氰酸酯将聚乙二醇单甲醚偶联到聚谷氨酸-g-聚乙烯亚胺上,合成了梳状聚阳离子基因载体聚谷氨酸-g-(聚乙烯亚胺-b-聚乙二醇).利用核磁共振氢谱、激光粒度分析仪、Zeta电位仪和凝胶电泳对聚阳离子载体及其与质粒脱氧核糖核酸(pDNA)形成的复合物进行了表征.通过噻唑蓝(MTT)细胞毒性测试、绿色荧光蛋白质粒pEGFP-C1及荧光素酶质粒pGL3体外转染实验考察了载体的细胞毒性及基因转染效率.结果表明,当聚乙烯亚胺中N原子和DNA中P原子的摩尔比(N/P)大于5时,载体能很好地包裹DNA,载体与DNA形成的复合物粒径约为130 nm,Zeta电位约为28 mV;通过MTT实验和体外质粒转染实验显示出载体在测量范围内具有极低的细胞毒性和较高的转染效率.

关键词：聚阳离子基因载体聚乙烯亚胺绿色荧光蛋白聚乙二醇聚谷氨酸基因转染效率

聚酰胺-胺型树枝状大分子及其衍生物在基因传递中的应用

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化学进展 2012年第12期24卷 2352-2358页

作者：董博闫熙博牛玉洁王欣王连永王燕铭南开大学生命科学院生物活性材料教育部重点实验室天津300071 南开大学药学院天津300071

基因治疗通过基因载体将治病基因导入病患的特异细胞以治疗心血管、神经系统疾病和癌症等。寻找安全高效的非病毒基因载体一直是基因治疗以及生物材料领域中的前沿课题。聚酰胺-胺型(PAMAM)树枝状高分子作为一类三维的、结构高度有序的... 详细信息

基因治疗通过基因载体将治病基因导入病患的特异细胞以治疗心血管、神经系统疾病和癌症等。寻找安全高效的非病毒基因载体一直是基因治疗以及生物材料领域中的前沿课题。聚酰胺-胺型(PAMAM)树枝状高分子作为一类三维的、结构高度有序的新型载体,由于具有安全性好、易于修饰、携带外源基因容量大等特点,已经引起了广泛的关注。但是另一方面,合成步骤相对繁琐、后期产物纯化困难以及转染效率相对较低等问题限制了这类载体的进一步发展。本文结合本课题组的研究情况,针对如何提高PAMAM的转染效率以及增强其基因传递的靶向性等相关问题,对近几年在PAMAM树枝状分子修饰改性方面所做的一些有意义的工作进行了综述,并对前景进行了展望。

关键词：聚酰胺-胺型树枝状分子(PAMAM dendrimer) 非病毒基因载体基因转染效率靶向性

食管癌Eca109细胞的HPV16-E6基因转染条件优化

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山东医药 2016年第47期56卷 13-16页

作者：康馨丹陈卫刚阮开学张宁郑勇石河子大学医学院第一附属医院新疆石河子832000

目的确定HPV16-E6基因转染食管癌Eca109细胞的最佳转染条件。方法取体外培养的食管癌Eca109细胞,用中心复合试验设计分组,转染条件控制因素包括DNA用量、Lip2000/DNA和饥饿时间,DNA用量分0.65、1.00、1.50、2.00、2.35μg共5档,Lip2000/... 详细信息

目的确定HPV16-E6基因转染食管癌Eca109细胞的最佳转染条件。方法取体外培养的食管癌Eca109细胞,用中心复合试验设计分组,转染条件控制因素包括DNA用量、Lip2000/DNA和饥饿时间,DNA用量分0.65、1.00、1.50、2.00、2.35μg共5档,Lip2000/DNA分0.65、1.00、1.50、2.00、2.35μL/μg共5档,饥饿时间分0、3、7.5、12、15 h共5档,共设20个组。转染24 h后,倒置显微镜下观察各组荧光情况并拍照,用图像处理软件计算细胞转染效率;用CCK-8法测算各组细胞相对存活率。用响应曲面法绘制有交互影响的因素对细胞转染效率和相对存活率影响的响应曲面,以目的基因细胞数(转染效率×细胞存活率)最大化为原则,确定最佳转染条件。在最佳转染条件下用HPV16-E6基因转染食管癌Eca109细胞,检测细胞转染效率和相对存活率。结果随着饥饿时间延长,细胞转染效率和细胞相对存活率呈下降趋势。依据饥饿0 h的转染效率、细胞存活率响应曲面图,得出最佳转染条件为(24孔培养板):DNA用量1.35μg、Lip2000/DNA1.12μL/μg(换算成Lip2000用量为1.51μL)、细胞饥饿时间0 h;转染效率预测值可达38.68%,细胞相对存活率预测值为85.09%。在最佳转染条件下用相同方法转染,实际转染效率为39.79%,与预测值的相对误差为2.87%。结论 HPV16-E6基因转染Eca109细胞的最佳转染条件(24孔板)为:每孔DNA用量1.35μg,脂质体Lip2000用量1.51μL,不对细胞进行饥饿处理。

关键词：食管癌人乳头瘤病毒16 基因转染效率细胞相对存活率实验设计

新型阳离子聚合物聚磷酰胺的合成及作为基因/siRNA转运载体的体外实验研究

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新型阳离子聚合物聚磷酰胺的合成及作为基因/siRNA转运载体的体外...

作者：汪尧东南方医科大学

学位级别：硕士

一、研究背景基因治疗是随着DNA重组技术而发展起来的新型治疗手段和策略,通常是将正常基因或有治疗作用的DNA/RNA导入靶细胞以纠正或替代个体自身结构和功能缺陷的基因,抑制异常活性/表达的基因,从而达到干预疾病的发生、发展及进程的... 详细信息

一、研究背景基因治疗是随着DNA重组技术而发展起来的新型治疗手段和策略,通常是将正常基因或有治疗作用的DNA/RNA导入靶细胞以纠正或替代个体自身结构和功能缺陷的基因,抑制异常活性/表达的基因,从而达到干预疾病的发生、发展及进程的目的[1,2]。基因治疗的巨大挑战之一是设计合适的基因转移载体,它是基因治疗获得较好疗效的关键要素。基因治疗的载体系统通常可分为病毒相关的载体系统和非病毒相关的载体系统两种,这两种基因转移系统已广泛地应用于基因治疗及基因转染等体内外研究[3-5]。病毒相关的载体系统尽管较非病毒相关的载体系统具有较高的转导效率和基因表达效率,但是病毒载体较非病毒载体存在着潜在的安全风险,而且病毒载体的制备方法比较复杂,它也不能直接转移治疗药物,此外,其制备的费用也较为昂贵。而非病毒转移载体除了可转移治疗基因外,还可转移治疗用的药物、抗体、寡聚核苷酸、siRNA等,因此,它因具有低毒、低免疫原性、结构灵活可控、合成简便且费用低廉等特点,正成为基因治疗备受瞩目的新的发展领域[6]。非病毒载体中利用生化的方法进行的基因治疗的转染如初期的磷酸钙转染法,其转染效率很低,并且对很多的细胞株完全没有效果,因此在科研和基因治疗的研究中不能很好地发挥作用。80年代中期建立的阳离子脂质体介导的转染法,在克服细胞屏蔽方面跟病毒有很相像的特征,容易透过细胞膜,在体外基因转染中有很高的效率,且操作简便,成为备受关注的新型基因转移载体[7,8]。然而,在基因治疗的时候,使用阳离子脂质体作为基因转移载体时,它在体内会很快的被血清清除,并在肺组织内积累,从而诱发强烈的抗炎反应,继而这种载体可以产生极高的细胞毒性。因此,阳离子脂质体载体的应用一直没有获得很大的推广。新一代转染试剂阳离子聚合物,有一系列基因治疗载体所需要的必备条件,它能浓缩和包裹DNA并将其转运到目标细胞内,使其在细胞内产生作用,而且对细胞毒性很低,较为稳定,不易被血清清除等特点,因此得到越来越广泛的应用。近年来,各种各样的阳离子聚合物,如聚乙烯亚胺(PEI)[9,10],多聚赖氨酸[PLL poly(L-lysine)][11],和聚酰胺-胺树枝状大分子[12]等作为新型的非病毒载体受到关注[13]。然而,这些阳离子聚合物转移载体的转染效率依然相对较低,而且这些阳离子聚合物的功能基团的具体结构与其功能效应之间的关系仍然不甚清楚。因此,近年人们一直对于阳离子聚合物的结构进行不断的改进。其目的通过不同形式的改构和合成,构建和设计新型的聚合物而增加对基因或小分子siRNA的转运效率。最近,一种新的在主链中含有二硫键的生物可降解聚磷酰胺(PPA)被开发出来[14-20]。由于这种新型的聚合物拥有良好的可降解性,因此,它具有极低的细胞毒性[21]。在这些PPA中支链阳离子聚合物与结构呈线性的阳离子聚合物相比,由于支链阳离子聚合物有不同类型的氨基,从而使其拥有不同的碱度和不同程度的质子化作用,这使支链阳离子聚合物能与细胞膜相互作用,从而影响细胞吸收,内逃脱和转染过程[22,23]。本课题组基于聚磷酰胺的树枝化的结构特点,利用点击化学反应将聚磷酰胺结合到含氨基的主链上,拟合成一种安全、高效的树枝状阳离子聚合物作为基因转移载体。二、研究目的本研究的目的是人工化学合成一种低毒、高效的树枝状阳离子聚合物作为基因或siRNA的转移载体,通过体外一系列的化学和细胞学实验检测其作为基因或siRNA的转移载体的特性以及在多种细胞中对质粒及siRNA的转染效率以及在转染过程中所产生的毒性作用。上述研究将为该阳离子聚合物作为基因或siRNA的转移载体用于临床基因治疗相关疾病奠定理论基础。三、研究方法二氯磷酸乙酯和N-(2-氨乙基)-N(1-甲基)-1,2-乙二胺在氮气保护下,聚合48h,得到阳离子聚磷酰胺(PPA)转染试剂。然后通过过表达(质粒)或干扰表达(siRNA)的策略探讨聚磷酰胺(PPA)包裹的PKD2表达质粒在A549细胞(人类肺癌细胞系)和HEK293(人类胚胎肾细胞)中的转染效率;通过CCK8检测细胞在含有这种新型转染试剂的培养基中的增殖情况,确定它的细胞增殖毒性;经免疫荧光染色、流式细胞仪检测、Western blot等方法证实聚磷酰胺(PPA)包裹的PKD2质粒和siRNA进入了细胞中,且能表达相应的靶蛋白,导入的siRNA能靶向性敲低基因的表达,从而证实该新型阳离子聚合物转染试剂有良好的转染效率。四、研究结果1.聚磷酰胺聚合物的化学合成和核磁共振光谱测定PPA是由二氯磷酸乙酯和N-(2-氨乙基)-N(1-甲基)-1,2-乙二胺在氮气保护下聚合得到。PPA的化学结构由核磁共振光谱来(NMR spectra)鉴定。在聚合物1H NMR谱图中,δ=4.512-4.72ppm和1.09-1.31ppm处为

关键词：聚磷酰胺细胞毒性基因载体基因转染效率小干扰RNA(siRNA)

氨基葡萄糖阳离子脂质体基因载体的合成和性能研究

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氨基葡萄糖阳离子脂质体基因载体的合成和性能研究

作者：彭嘉勋湖南师范大学

学位级别：硕士

基因治疗的核心是设计一类高效、安全的基因载体。作为非病毒载体的一类,阳离子脂质体可与核酸药物静电吸引形成复合物,它与细胞膜的磷脂分子相互作用而附着在其表面,随着细胞膜的内陷,复合物进入细胞并且释放核酸药物至细胞核。糖化学... 详细信息

基因治疗的核心是设计一类高效、安全的基因载体。作为非病毒载体的一类,阳离子脂质体可与核酸药物静电吸引形成复合物,它与细胞膜的磷脂分子相互作用而附着在其表面,随着细胞膜的内陷,复合物进入细胞并且释放核酸药物至细胞核。糖化学是生物化学的一个重要分支。糖类化合物承载了大量生物分子信息,在生命有机体中扮演重要角色,如识别和调控生物分子、确定生物分子的表面形貌和提供能量等。因此,研究具有生物活性的糖类化合物对于生物结构关系的认知显得尤为重要。本论文设计了两个系列氨基葡萄糖阳离子脂质体。一类以氨基葡萄糖盐酸盐为原料,通过全乙酰化、脱1-O-乙酰基、三氯乙酰亚胺酯化、糖苷化、叠氮化、脱全部乙酰基、4,6-O-异丙叉基保护、苄氧基保护、脱异丙叉基、醚化、还原氨化和季铵盐化反应,合成不同疏水链长度的一系列氨基葡萄糖阳离子脂质体:di-C12-GluNAc-TMA、di-C14-GluNAc-TMA、di-C16-GluNAc-TMA和di-C18-GluNAc-TMA;另一类以氨基葡萄糖盐酸盐为原料,通过全乙酰化、脱1-O-乙酰基、三氯乙酰亚胺酯化、糖苷化、叠氮化、脱全部乙酰基、还原氨化、叔胺化和季铵盐化反应,合成不同疏水链长度和不同物理结构的一系列氨基葡萄糖阳离子脂质体:GluNAc-DiC12MA、GluNAc-DiC14MA、GluNAc-DiC16MA和GluNAc-DiC18MA。通过Zetasizer Nano ZS激光粒度仪激光粒度仪测试了阳离子脂质体和脂质体/dna二元复合物的zeta电势、粒径和pdi;凝胶阻滞实验检测了阳离子脂质体缩合质粒dna的能力。原子力显微镜表征了阳离子脂质体及二元复合物的表面形貌。激光粒度仪数据显示di-c18-glunac-tma平均粒径为182.4nm,大于其他阳离子脂质体纳米颗粒尺寸,分散系数(pdi)为0.43,粒径分布不够均一;其他七种阳离子脂质体的粒径范围是80-150nm,脂质体对应复合物的粒径范围在65-140nm;阳离子脂质体的zeta电势在38-60mv之间,复合物的电势在0.5-28mv之间。这些数据表明脂质体及复合物的粒径和zeta电势适宜,符合体外转染实验的要求。凝胶电泳实验证明阳离子脂质体有能力与dna分子结合。当脂质体的量增多时,dna轨道的亮度减弱,当n/p为3时,两类阳离子脂质体与dna分子结合完全。原子力显微镜结果表明单一脂质体及脂质体/dna复合物呈圆球状、尺寸分布均一、表面光滑且直径略大于脂质体。核磁共振仪的图谱结果证明阳离子脂质体的化学结构符合预期的设计。以上述两类所合成的氨基葡萄糖阳离子脂质体作为基因载体,检测它们携带质粒dna进入hek293细胞系的转染性能。经24小时的细胞培养后,通过观察绿色荧光蛋白的表达和细胞计数的方法评价阳离子脂质体的转染效率。体外转染实验结果说明:di-c12-glunac-tma、di-c14-glunac-tma、di-c16-glunac-tma、di-c18-glunac-tma、glunac-dic12ma和glunac-dic18ma的转染效果不理想,glunac-dic14ma和glunac-dic16ma的转染效率可以与商用转染试剂lipo2000媲美。细胞毒性实验结果表明:两类氨基葡萄糖阳离子脂质体的细胞毒性较小,生物兼容性良好。在整个基因传递过程中,GluNAc-Di C14MA和GluNAc-DiC16MA表现出低毒高效的转染效果,具有作为商业基因载体的潜力。将商用脂质体Lipo2000作为阳性对照组实验,考察GluNAc-DiC14MA和GluNAc-DiC16MA在HeLa和HepG2两种细胞系的体外转染情况。结果发现,这两种阳离子脂质体在HepG2细胞系中的转染效果与HEK293细胞系类似,而在HeLa细胞系中几乎没有转染效果。

关键词：基因治疗阳离子脂质体氨基葡萄糖基因转染效率

2-氨基-1,3-丙二醇类基因载体的合成与性能研究及阿比特龙衍生物的合成

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2-氨基-1,3-丙二醇类基因载体的合成与性能研究及阿比特龙衍生物...

作者：张翻湖南师范大学

学位级别：硕士

本论文工作主要包括两个部分:1.2-氨基-1,3-丙二醇类基因载体的合成与性能研究基因治疗作为一种有效治疗遗传疾病的方法引起广大研究者的兴趣,基因治疗的最大障碍就是寻找一种安全高效的载体将外源基因送到靶细胞,其中阳离子脂质体作为... 详细信息

本论文工作主要包括两个部分:1.2-氨基-1,3-丙二醇类基因载体的合成与性能研究基因治疗作为一种有效治疗遗传疾病的方法引起广大研究者的兴趣,基因治疗的最大障碍就是寻找一种安全高效的载体将外源基因送到靶细胞,其中阳离子脂质体作为当前最有效的非病毒基因载体备受关注。本论文以2-氨基-1,3-丙二醇为原料,通过威廉姆逊醚化、氯乙酰化和季铵盐化反应,合成了一系列不同长度烷烃链的2-氨基-1,3-丙二醇类阳离子脂质:di-C8-Ser-TMA、di-C10-Ser-TMA、di-C12-Ser-TMA、di-C14-Ser-TMA和di-C16-Ser-TMA。采用凝胶阻滞实验测定了不同N/P比脂质体与DNA的结合能力,结果表明,随着N/P比的增加,脂质体与DNA逐渐结合完全,当N/P比为2时,所有脂质体与DNA已完全结合。利用动态光散射粒度仪测定阳离子脂质体以及脂质体/DNA复合物的平均粒径、Zeta电位和粒径分散性系数PDI值。结果表明各脂质体的平均粒径在80-120 nm之间,Zeta电位为60 mV左右,脂质体/DNA复合物的平均粒径在150-360 nm之间,Zeta电位为20-50 mV之间,所有体系的PDI值均小于0.4。所有物理参数表明自制的阳离子脂质体适于细胞转染。以商用脂质体Lipo2000作阳性对照,在HEK293、Mat和PC-3细胞中进行体外转染实验和摄取实验,结果发现脂质体di-C12-Ser-TMA在三种细胞系中都有很高的转染效率和细胞摄取率,尤其在PC-3细胞中,转染效率比Lipo2000更优。用MTT法检测各脂质体/DNA复合物的细胞毒性,结果显示自制的脂质体的细胞存活率均大于70%。因此,脂质体di-C12-Ser-TMA有希望发展为一种有用的基因载体。2.阿比特龙衍生物的合成前列腺癌是全球老年男性中最常见的肿瘤疾病。阿比特龙作为一种有效的CYP17酶抑制剂,广泛用于治疗前列腺癌,但由于其水溶性极差,导致用药成本极高,毒副作用加强。本文旨在改善其水溶性,促进其药物吸收。文中设计了三类阿比特龙衍生物,第一类以阿比特龙为原料,通过氯乙酰氯酯化,季铵盐化反应,合成了化合物5;第二类以乙二胺为原料,通过Boc-氨基保护、叔胺化、Boc-氨基脱保护、取代、季铵盐化反应,合成了五种不同烷烃链化合物13a-13e。最后一类同样以乙二胺为原料,Boc-氨基单保护、叔胺化、季铵盐化、Boc-氨基脱保护、缩合反应,合成五种不同烷烃链化合物15a-15e。

关键词：阳离子脂质体 2-氨基-1,3-丙二醇基因转染效率前列腺癌阿比特龙

三种非病毒载体对神经母瘤细胞进行转染的效果比较

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山东医药 2012年第11期52卷 8-11页

作者：高聪李威梁兵袁芳谢富华林哲聪广州医学院第二附属医院广州510260

目的以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因,研究Lipofectamine2000、改良纳米材料CS(N/P=10)和纳米粒子PAMAM(N/P=20)介导的基因导入系统对神经母瘤细胞SH-SY5Y的毒性及基因转染效率,为神经系统疾病的基因治疗奠定基础。方法制备Lipofe... 详细信息

目的以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因,研究Lipofectamine2000、改良纳米材料CS(N/P=10)和纳米粒子PAMAM(N/P=20)介导的基因导入系统对神经母瘤细胞SH-SY5Y的毒性及基因转染效率,为神经系统疾病的基因治疗奠定基础。方法制备Lipofectamine2000、CS和PAMAM与质粒DNA(pDNA)的复合物,分别转染在体外培养的人胚肾细胞Hek293和SH-SY5Y,利用噻唑蓝(MTT)比色实验比较三种载体的细胞毒性作用、用激光共聚焦显微镜观察转染后的细胞形态、倒置荧光显微镜检测转染细胞EGFP表达强度、流式细胞仪检测转染效率。结果①Lipofectamine2000、CS和PAMAM转染细胞存活率在Hek293细胞分别为73.09%、73.69%、69.24%,三者比较无显著差异;在SH-SY5Y细胞分别为67.69%、61.71%、42.92%,前两者均显著高于后者(P均转染后,细胞形态均未发生明显改变,保持梭状生长;而PAMAM/pDNA复合物转染后,细胞发生皱缩,呈圆形分布生长。经三种载体转染后的SH-SY5Y细胞均发生形态改变,其中PAMAM/pDNA复合物转染者形态改变程度相对较大。Hek293细胞和SH-SY5Y细胞中,均以Lipofectamine2000/pDNA复合物转染者EGFP表达强度最大,其次为CS/pDNA复合物、PAMAM/pDNA复合物转染者。④Lipofectamine2000、CS和PAMAM的转染效率在Hek293细胞分别为60.9%、45.2%、42.7%,前者显著高于后两者(P均基因治疗研究的非病毒载体;改良后的新纳米材料CS毒性比PAMAM小、转染效率比PAMAM高,有望在神经系统疾病研究中得到进一步运用。

关键词：阳离子脂质体新型纳米材料 SH-SY5Y细胞基因转染效率