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地锦和五叶地锦种间杂交不亲和性初步研究

林业科学研究 2005年第1期18卷 52-56页

作者：付彦荣孙振元赵梁军韩益中国农业大学园林系北京100094 中国林业科学研究院林业研究所北京100091

将地锦和五叶地锦杂交,未能获得杂交种。对人工辅助自交和杂交后,花粉萌发和花粉管生长情况进行了荧光显微观测。观察发现:人工辅助自交后,花粉粒可在各自柱头表面正常萌发,花粉管可伸入花柱内。将地锦和五叶地锦杂交时,多数花粉粒不能... 详细信息

将地锦和五叶地锦杂交,未能获得杂交种。对人工辅助自交和杂交后,花粉萌发和花粉管生长情况进行了荧光显微观测。观察发现:人工辅助自交后,花粉粒可在各自柱头表面正常萌发,花粉管可伸入花柱内。将地锦和五叶地锦杂交时,多数花粉粒不能在柱头表面萌发,或者花粉管呈卷曲、先端膨大、破裂等异常现象。授粉后2～48h的花柱中,未观察到花粉管。由此推断,地锦和五叶地锦之间的不亲和发生在柱头表面。

关键词：地锦五叶地锦种间杂交不亲和性

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地锦与五叶地锦原生质体分离及培养研究

林业科学研究 2005年第3期18卷 241-245页

作者：李正红孙振元刘秀贤彭镇华中国林业科学研究院资源昆虫研究所云南昆明650224 中国林业科学研究院林业研究所北京100091

用纤维素酶、果胶酶、甘露醇的混合酶液提取地锦和五叶地锦无菌苗幼叶、五叶地锦胚乳愈伤组织及地锦幼胚愈伤组织的原生质体,对影响原生质体提取得率及活力因素进行分析,对不同材料原生质体得率进行比较,对提取的原生质体进行液体浅层... 详细信息

用纤维素酶、果胶酶、甘露醇的混合酶液提取地锦和五叶地锦无菌苗幼叶、五叶地锦胚乳愈伤组织及地锦幼胚愈伤组织的原生质体,对影响原生质体提取得率及活力因素进行分析,对不同材料原生质体得率进行比较,对提取的原生质体进行液体浅层、固液结合及固体等方式培养,对原生质体形成的愈伤组织以MS和改良B5培养基附加不同浓度NAA、6 BA、2,4 D、PEG、KT、ZT等进行分化培养。试验结果表明:纤维素酶对原生质体提取得率有极显著影响,适宜地锦幼叶原生质体提取的酶液组合为:纤维素酶0.5%、果胶酶0.3%、甘露醇0.6mol·L-1、酶解8h;不同材料原生质体提取得率有显著差异;仅五叶地锦胚乳愈伤组织来源的原生质体在固体培养基中形成新的愈伤组织,其它方式培养的不同材料原生质体均无分裂或仅形成数十个细胞的细胞团后便解体;用30余组配方进行了五叶地锦胚乳愈伤组织原生质体形成的新愈伤组织的分化培养,继代6～10次后仍无分化迹象。

关键词：地锦五叶地锦原生质体培养

地锦叶斑病菌鉴定及LAMP快速检测体系的建立

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华南农业大学学报 2024年

作者：黄成玉陈健鑫郑星月吴峰婧琳马焕成伍建榕西南林业大学生物多样性保护学院/云南省高校森林灾害预警控制重点实验室西南林业大学林学院/国家林业和草原局西南地区生物多样性保育重点实验室

【目的】明确引起云南玉龙县地锦叶斑病的病原种类，并建立快速检测方法。【方法】采用组织分离法分离并依据科赫氏法则确定地锦叶斑病病原，通过形态学特征及多基因联合构建系统发育树，明确病原菌的分类地位；并以病原菌的Alt a1基因... 详细信息

【目的】明确引起云南玉龙县地锦叶斑病的病原种类，并建立快速检测方法。【方法】采用组织分离法分离并依据科赫氏法则确定地锦叶斑病病原，通过形态学特征及多基因联合构建系统发育树，明确病原菌的分类地位；并以病原菌的Alt a1基因序列为靶标设计特异性引物建立环介导等温扩增（Loop-mediated isothermal amplification，LAMP）检测方法。【结果】地锦叶斑病病原菌鉴定为链格孢菌Alternaria alternata。建立的LAMP反应体系可特异有效地检测出地锦叶斑病菌，体系最佳反应温度为65℃，最佳反应时间为50 min，最低检测灵敏度为1 pg/μL。使用该体系对人工接种病原菌不同时间的地锦叶片进行链格孢LAMP检测，检出时间为接种12 h及以上。【结论】本研究可为地锦叶斑病的早期检测和及时、科学防控提供理论依据。

关键词：地锦叶斑病链格孢病原鉴定 LAMP体系

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秋水仙素诱导地锦多倍体研究

核农学报 2005年第6期19卷 430-435页

作者：李正红孙振元彭镇华中国林业科学研究院林业研究所/国家林业局林木培育重点实验室北京100091

用不同浓度秋水仙素处理不同萌发时期地锦体细胞胚胎及丛生芽苗诱导多倍体,对多倍体植株进行染色体数目及稳定性检测.结果表明:(1)秋水仙素对地锦体胚及丛生芽的生长有不同程度抑制作用,对根系生长的抑制尤为明显.以0.05%秋水仙素处理48... 详细信息

用不同浓度秋水仙素处理不同萌发时期地锦体细胞胚胎及丛生芽苗诱导多倍体,对多倍体植株进行染色体数目及稳定性检测.结果表明:(1)秋水仙素对地锦体胚及丛生芽的生长有不同程度抑制作用,对根系生长的抑制尤为明显.以0.05%秋水仙素处理48h以上对地锦体胚萌发有显著抑制作用,0.1%浓度处理96h产生完全抑制.(2)0.05%秋水仙素处理1cm体胚48h可诱导3.3%地锦体胚产生多倍体嵌合植株,多倍细胞比率40%.以0.1%秋水仙素处理地锦丛生芽24h,多倍体诱导率可达13.3%,多倍细胞比率62.5%～75%.说明秋水仙素处理丛生芽效果要好于处理体胚.(3)本实验诱导的多倍体植株全为混倍体,多倍细胞占40%～75%,但在无性增殖中有逐代下降趋势.(4)多倍体植株中出现4裂和5裂叶片的变异体.

关键词：地锦秋水仙素诱导多倍体

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地锦叶斑病病原菌的鉴定及其生物学特性

东北林业大学学报 2015年第3期43卷 112-116页

作者：高国平邓秋越王红王月谢皖豫马腾飞沈阳农业大学沈阳110161

结合传统形态学和分子生物学方法对地锦（Parthenocissus tricuspidata）叶斑病病原菌进行了鉴定,并在室内纯培养条件下,采用生长速率法研究了病原菌在不同培养基、p H值、温度、光照、碳源和氮源条件下菌丝生长和菌落形态。结果显示：... 详细信息

结合传统形态学和分子生物学方法对地锦（Parthenocissus tricuspidata）叶斑病病原菌进行了鉴定,并在室内纯培养条件下,采用生长速率法研究了病原菌在不同培养基、p H值、温度、光照、碳源和氮源条件下菌丝生长和菌落形态。结果显示：病原菌为马卡假尾孢（Pseudocercospora macadamiae Deighton）;病原菌生长较适培养基为PDA培养基和20%地锦植物煎汁的PDA培养基,适宜p H值为6.0~7.0,菌丝生长适宜温度范围为25~30℃,最适碳源为蔗糖,最适氮源为酵母粉,最佳光照条件为全黑暗。

关键词：地锦叶斑病马卡假尾孢生物学特性

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地锦营养器官及乳汁管的解剖研究

河南农业大学学报 2016年第3期50卷 383-388页

作者：李双江焦铸锦许笑蒙闫光兰阚云超李春奇河南农业大学生命科学学院河南郑州450002 南阳师范学院河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室河南南阳473061

通过组织切片和显微观察法,研究了地锦营养器官的解剖特征及乳汁管的分布和发育过程。结果表明,地锦根的初生木质部为三原型;次生结构由周皮、次生韧皮部、维管形成层和次生木质部构成,维根比约72.4%。茎的初生结构由表皮、皮层、维管... 详细信息

通过组织切片和显微观察法,研究了地锦营养器官的解剖特征及乳汁管的分布和发育过程。结果表明,地锦根的初生木质部为三原型;次生结构由周皮、次生韧皮部、维管形成层和次生木质部构成,维根比约72.4%。茎的初生结构由表皮、皮层、维管束和髓构成,次生结构中无周皮。叶为异面叶,上表皮气孔比下表皮多,叶肉中具有与碳4(C4)植物相同的花环状结构。乳汁管主要分布在主根、侧根和茎的韧皮部外侧以及叶肉内,为无节乳汁管,乳汁管中有较多颗粒状晶体物质。成熟的乳汁管直径差异较大,由大到小依次为茎﹥主根﹥侧根﹥叶。

关键词：地锦营养器官解剖结构乳汁管

地锦（Parthenocissus tricuspidata）的遗传转化及抑菌活性研究

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地锦（Parthenocissus tricuspidata）的遗传转化及抑菌活性研究

作者：刘华玲中国科学院研究生院（成都生物研究所）

学位级别：硕士

地锦(Parthenocissus tricuspidata)为葡萄科(Vitaceae)地锦属(Parthenocissus)多年生大型落叶木质藤本植物，集绿化、环境保护、药用价值为一体，开发利用前景非常广阔。为了进一步有效地利用及增加它的适应性，本论文对地锦的遗传转... 详细信息

地锦(Parthenocissus tricuspidata)为葡萄科(Vitaceae)地锦属(Parthenocissus)多年生大型落叶木质藤本植物，集绿化、环境保护、药用价值为一体，开发利用前景非常广阔。为了进一步有效地利用及增加它的适应性，本论文对地锦的遗传转化及其抑菌活性进行了初步研究。利用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导对地锦进行遗传转化。所转外源目的基因为干旱应答因子结合蛋白DREB基因，克隆自拟南芥，受干旱应答基因启动子rd29Bp驱动。将此基因与pCAMBIA2301重组构建得到植物表达载体p2326。p2326携报告基因β-葡萄糖苷酸酶基因(gus)和选择基因新霉素磷酸转移酶基因(nptⅡ)。然后将p2326导入根癌农杆菌EHA105，对地锦愈伤组织及外植体茎段进行转化。经3-4轮卡那霉素选择培养后，PCR及GUS组织染色验证，表明成功获得了转基因愈伤组织。对地锦愈伤组织进行耐盐及脯氨酸含量测定。结果表明，转基因愈伤组织与非转基因愈伤组织相比，对高盐的耐受力有较大提高。在250 mMNaCl的继代培养基中，携DREB基因的愈伤组织能够存活20 d以上，而对照在10 d后大多数褐化死亡。高盐胁迫时转基因材料脯氨酸含量高于对照，并能够维持较长时间。研究还发现，来自室外自然生长的地锦茎、叶，对根癌农杆菌有极强的抑制作用。因此，对地锦的抑菌作用进行初步研究。对一年中不同时期(分别采于4月、8月、12月)的地锦茎、叶进行抑菌活性初步研究。结果表明，12月份地锦叶片对所选细菌抑制作用最强。然后对其进行分溶剂萃取。分别用极性递增的有机溶剂依次提取地锦中的有效成分、逐级分离、浓缩干燥，得到石油醚部、乙酸乙酯部、正丁醇部和水部等不同极性溶剂萃取物。选择革兰氏阳性菌和阴性菌共5种对得到的各部分粗提物分别做抑菌实验，表明正丁醇部的抑菌活性最强，水部提取物有一定抑制作用，而石油醚部、乙酸乙酯部没有表现出明显抑菌作用。地锦正丁醇提取物对大肠杆菌、枯草杆菌、短小芽孢杆菌、农杆菌及酵母菌的最低抑制浓度(MIC)分别为0.25，0.3，0.25，0.3，1g／mL。其抑菌活性随着浓度增加而增强，而且抑菌活性具有较好的热稳定性。研究发现地锦所产生的抑菌物质不仅对无耐药性的细菌具有抑制作用，而且还对某些耐药性细菌具有抑制作用。目前，细菌对抗生素的耐药性已成为全球关注的问题，寻找新型抗生素已迫在眉捷，地锦抑菌物质的研究为新抗菌药物的研制开发提供了新思路。上述研究结果，为地锦的遗传改良及开发利用打下基础。

关键词：地锦根癌农杆菌遗传转化转录因子DREB 高盐耐受力脯氨酸抑菌作用正丁醇提取物最低抑菌浓度(MIC)

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京密引水渠坡面植被地锦的促生长试验研究

水土保持研究 2006年第2期13卷 47-48页

作者：邵妍李亚光孟学琴北京林业大学水土保持学院北京100083 北京京密引水管理处北京101400

京密引水渠担负着输送北京城市饮用水的重任,是连接北京市地表水源-密云、怀柔水库与市区的一条城市生命线。为了保证京密引水渠正常运行,防护林的更新改造是关键问题。本次试验重点放在坡面地锦的促生长研究。通过试验找到引水渠坡面... 详细信息

京密引水渠担负着输送北京城市饮用水的重任,是连接北京市地表水源-密云、怀柔水库与市区的一条城市生命线。为了保证京密引水渠正常运行,防护林的更新改造是关键问题。本次试验重点放在坡面地锦的促生长研究。通过试验找到引水渠坡面上影响地锦生长的制约因素及合理的管护措施。试验结果表明:影响地锦生长的主要因素是土壤水分,其次是土壤肥力。

关键词：京密引水渠地锦饮用水防护林土壤水分土壤肥力

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地锦繁殖生物学与营养器官解剖学研究

地锦繁殖生物学与营养器官解剖学研究

作者：李双江河南农业大学

学位级别：硕士

地锦是全草入药的野生植物,研究其繁殖生物学特性和营养器官的解剖结构将为地锦的栽培种植、药用部位及综合开发提供理论基础。本实验采用观察、比较和统计的方法,对地锦的花部结构、传粉昆虫和繁育系统特性进行了研究;通过植物显微技术... 详细信息

地锦是全草入药的野生植物,研究其繁殖生物学特性和营养器官的解剖结构将为地锦的栽培种植、药用部位及综合开发提供理论基础。本实验采用观察、比较和统计的方法,对地锦的花部结构、传粉昆虫和繁育系统特性进行了研究;通过植物显微技术,对地锦营养器官的解剖特征及乳汁管的分布和发育过程进行了研究。结果表明:1.地锦居群花期为5～11月,群体盛花期具有间歇性,间歇期集中在6～10月的盛花期,间歇期为4～7d,每月间歇2～3次,雌花花期为5.95±0.98 d,雄花花期为4.5±1.39 d;地锦为杯状聚伞花序,雌花花梗较长、发育较早,雄花花梗较短、发育较晚,导致二者空间异位、花期不遇,利于异花传粉。根据杂交指数(OCI)、花粉/胚珠比(P/O)以及人工授粉检测得出,地锦的繁育系统属于兼性自交,需要传粉者。地锦总苞顶端分化出的花蜜腺结构与虫媒传粉相适应,主要的访花昆虫包括黑蚁(Formica sp.)、棉蚜(Aphis gossypii Glover)、食蚜蝇(syrphus sp.)和中华蜜蜂(Apis cerana cerana Fabricius)等促进了花粉的传播。地锦较小的总苞直径、较高的花密度、单花较少的花粉量提高传粉的效率;红色蜜腺的特征体现了地锦有效的虫媒传粉机制和繁育能力;较强的种子弹射能力,增加了种子的传播距离,为扩大其领地奠定了基础。2.地锦根的初生木质部为三原型。初生结构由表皮、皮层和维管柱组成。次生结构由周皮、次生韧皮部、维管形成层和次生木质部构成。次生结构中次生木质部所占比例较大,约占整个横切面的三分之二。茎的初生结构由表皮、皮层、维管束和髓构成,次生结构由表皮、皮层、次生维管组织和髓构成,未见周皮结构。地锦的叶由上、下表皮、叶肉和叶脉构成。上表皮气孔比下表皮多,叶肉分化成具有栅栏组织和海绵组织的异面叶,叶脉周围的维管束鞘呈花环状结构,与碳4(C4)植物相同。3.地锦营养器官中的乳汁管为无节乳汁管,具有颗粒状晶体物质,部分乳汁管具分支,乳汁管直径为茎﹥主根﹥侧根﹥叶。在根中主要分布在次生韧皮部的外侧、次生韧皮部和皮层薄壁组织中,管腔呈多边形或圆形,直径约14～20μm。茎中主要分布在韧皮部的外侧及髓中,管腔呈多边近圆形或椭圆形,直径约28～51μm。叶中主要分布在栅栏组织外侧和海绵组织内部,叶脉韧皮部外侧也有分布,管腔呈多边形,直径约10～12μm。乳汁管的发育分为3个时期:I期细胞皱缩、细胞壁破裂;II期原生质体处于游离状态、乳汁颗粒明显;III期管腔清晰、管壁较厚。总之,地锦单性花、雌雄花空间异位、总苞内雌雄花不同时成熟的特征,证明了其异花传粉的特性;花蜜腺结构的存在显示了其适应虫媒传粉的特征;较强的种子弹射力保证了种子的传播。地锦营养器官的结构和草本双子叶植物的一致,叶脉周围的维管束鞘呈花环状结构是其独特特征,其药用成分可能分布于营养器官的薄壁细胞及乳汁管中。

关键词：地锦营养器官乳汁管解剖结构繁育系统