检索结果-南通市图书馆

作者：宋宝财南京理工大学

学位级别：硕士

生物柴油作为可再生的生物质燃料所具有的独特优势,包括燃烧后几乎不会产生有毒污染物等,有助于我国实现“双碳”目标。以传统油料（植物油）为原料生产生物柴油,面临生产成本和“与人争粮,与人争地”的问题,而单细胞油脂作为新型油脂原... 详细信息

生物柴油作为可再生的生物质燃料所具有的独特优势,包括燃烧后几乎不会产生有毒污染物等,有助于我国实现“双碳”目标。以传统油料（植物油）为原料生产生物柴油,面临生产成本和“与人争粮,与人争地”的问题,而单细胞油脂作为新型油脂原料,油脂组成类似于植物油有利于生产生物燃料。因此,近年关于产油微生物的研究受到越来越多研究人员的重视。其中圆红酵母作为产油率较高的物种,而且能够利用廉价碳源粗甘油为底物生产微生物油脂,可以降低生产成本和减少环境污染问题,表现出良好的工业化应用潜力。本研究以一株油脂降解能力弱化的圆红酵母基因工程菌Rhodotorula ***3为出发株。首先通过实验室适应性进化方法驯化筛选出一株耐受较高浓度甲醇的驯化株,并通过发酵实验结合代谢组学方法,分析其在甲醇中的代谢和发酵性能差异。随后对驯化株以粗甘油为碳源进行发酵性能测试以及发酵条件的优化,最后分析了酶解法与超声波破碎两者单独或联合使用对油脂提取率的影响,主要结论如下:（1）以甲醇作为抑制因子通过实验室适应性进化处理出发菌株GX3,筛选出一株能够耐受较高浓度甲醇的驯化株O3A2。利用H NMR代谢组学技术分析驯化株O3A2与出发菌株GX3在菌体生长期和油脂合成期的代谢差异,共鉴定出36种代谢物。在菌体生长期驯化株O3A2的TCA循环加强,显示出更高的细胞生长率,而在油脂合成期,驯化株表现出更高的油脂生产率。在含甲醇的培养基中分批发酵96 h,相比于出发株,O3A2油脂产量提升了31.39%,达到7.06±0.45 g/L,其中十六碳和饱和脂肪酸相对含量分别增加了2.73%和1.51%。（2）驯化株O3A2利用粗甘油作为唯一碳源分批培养,发酵至96 h油脂产量可以达到7.16±0.08 g/L,生产强度为0.075 g/L/h。之后添加1 g/L碳酸钙发酵至120 h后油脂产量比未添加组提升了92.59%,此时的油脂产量和生产强度分别达到14.19±0.34 g/L和0.118 g/L/h。然后利用响应面方法对培养条件进行优化,优化后培养60 h生物量可达到12.37±0.35 g/L。最后建立了红酵母O3A2两阶段转化粗甘油产单细胞油脂工艺,通过二级种子富集的细胞转化粗甘油生产油脂,转化72 h油脂产量和胞内油脂含量分别达到了13.64±0.53 g/L和51.94±1.60%,转化油脂生产强度为0.109 g/L/h。（3）通过单因素实验确定酶解法中β-葡聚糖酶和甘露聚糖酶比例在2:1及酶解时间延长至24 h时,油脂提取率达到酸热法的73.07±2.37%。对于超声波破碎,处理时间越长细胞破碎率越高,符合一级破碎动力学特征,当处理时间40 min时,油脂提取率达到酸热法的57.66±2.70%。随后,通过酶解12 h加超声波破碎20 min,油脂提取率可以达到油脂提取率可以达到95.39±2.07%,其油脂组成中十六碳脂肪酸和饱和脂肪酸的相对含量相比于酸热法分别增加1.09%和1.27%,而且通过流式细胞术和共聚焦显微镜观察酵母细胞能保留较完整的细胞碎片。

关键词：圆红酵母实验室适应性进化代谢组学发酵粗甘油细胞破碎

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

重离子诱变联合实验室自适应进化选育高耐受性的圆红酵母的研究

重离子诱变联合实验室自适应进化选育高耐受性的圆红酵母的研究

引用

作者：张珺璐武汉科技大学

学位级别：硕士

木质纤维素资源是地球上储量最为丰富的可再生资源之一,然而目前利用其进行生物炼制制备微生物油脂面临着诸多挑战。木质纤维素在水解过程中既会产生可发酵性糖,同时也会产生各种类型的副产物,这些副产物对微生物的生长和发酵不利,也影... 详细信息

木质纤维素资源是地球上储量最为丰富的可再生资源之一,然而目前利用其进行生物炼制制备微生物油脂面临着诸多挑战。木质纤维素在水解过程中既会产生可发酵性糖,同时也会产生各种类型的副产物,这些副产物对微生物的生长和发酵不利,也影响微生物油脂的产业化进程。因此,提高菌株对水解液环境的耐受能力是提高生物炼制效率的关键问题之一。本文利用C重离子束,对产油酵母Rhodotorula toruloides Y4进行重离子诱变,又对诱变菌株进行实验室自适应进化,选育得到了能够耐受高固载量秸秆水解液的菌株,并将其应用于微生物油脂的生产,取得的研究结果如下:1.利用重离子加速器获得C高能离子束,对*** Y4进行重离子诱变,通过计算菌株存活率、结合数学模型拟合出菌株最大比生长速率及延滞期等生物学参数,比较诱变前后菌株耐受水解液能力的变化,评估了重离子诱变效果及*** Y4耐受水解液固载量极限。菌株在200 Gy辐照强度诱变后,细胞存活率约为50%。*** Y4能够耐受的水解液极限固载量为12%(w/w),诱变后的菌株较对照菌株在水解液中生长的最大比生长速率有明显提升,延滞期有明显缩短,诱变菌株能够耐受的水解液极限固载量也略有增加。2.对重离子诱变得到的菌株进行实验室自适应进化,实验室自适应进化在逐步提高固载量的秸秆水解液中进行,经历9代传代后,菌株能够在固载量为20%的水解液中生长。分离单菌落后,获得两株能够耐受17%固载量水解液的菌株L11和L12,较*** Y4耐受水解液的固载量提高了42%。利用发酵工程手段对L11进行了发酵条件优化,其最终能够耐受20%固载量的水解液生产微生物油脂,油脂量达到6.91 g/L,油脂含量达52.2%,并且发酵延滞期由5天缩短至1天。3.跟踪高固载量秸秆水解液制备过程,利用现代分析仪器测定水解液的组成,研究对比了*** Y4和诱变菌株L11对不同类型木质纤维素水解液副产物耐受情况的差异,影响菌株生长主要的副产物为酚醛类化合物,L11对对羟基苯甲酸、丁香酸、乙酰丙酸的耐受性有所提高。

关键词：重离子诱变实验室自适应进化木质纤维素水解液耐受性圆红酵母

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

球磨与蒸汽联合处理玉米秸秆提高水解效率的研究

引用

湖南师范大学自然科学学报 2024年第1期47卷 10-15页

作者：黄其田 RASOOL Kamal 陆洪斌张珺璐龚志伟赵宗保中国科学院大连化学物理研究所生物技术部中国大连116023 武汉科技大学化学与化工学院中国武汉430080

为了开发绿色且高效的木质纤维素处理新技术,以玉米秸秆为模型原料,将球磨预处理与蒸汽预处理相结合用以提高玉米秸秆水解效率。研究结果表明:球磨预处理可显著提高秸秆水解效率,在10%固载量条件下,4 mm秸秆经过球磨预处理后,水解后葡... 详细信息

为了开发绿色且高效的木质纤维素处理新技术,以玉米秸秆为模型原料,将球磨预处理与蒸汽预处理相结合用以提高玉米秸秆水解效率。研究结果表明:球磨预处理可显著提高秸秆水解效率,在10%固载量条件下,4 mm秸秆经过球磨预处理后,水解后葡萄糖和还原糖的回收率分别由38%和36%提高至65%和58%;在球磨预处理的基础上,将秸秆浸入6 g·L-1NaOH并在121℃条件下蒸汽预处理1 h,水解后葡萄糖和还原糖的回收率均达到100%,且在此预处理条件下,当固载量由10%增加至30%时,葡萄糖和还原糖的回收率仍可达到77.14%和75.82%;另外,TOC和TN分析表明,在预处理条件优化和水解效率显著提高的同时,秸秆中的非糖副产物的水解率也显著提高,圆红酵母最高可在秸秆固载量为20%时获得的水解液中进行生长和油脂发酵,生物量、油脂产量和油脂含量分别为16.00 g·L-1,6.00 g·L-1和35.61%。

关键词：木质纤维素预处理酶法水解圆红酵母油脂

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

产油酵母发酵醪液油脂提取及溶剂筛选

引用

可再生能源 2023年第4期41卷 427-433页

作者：宋竞毅黄其田 Rasool Kamal 赵宗保中国科学院大连化学物理研究所生物技术部辽宁大连116023 中国科学院大学北京100049 中国科学院大连化学物理研究所、大连市能源生物技术重点实验室辽宁大连116023

为建立简易高效的微生物油脂提取方法,文章以圆红酵母发酵醪液为原料,直接用溶剂对其进行处理,评估了24种溶剂的提取性能。研究结果表明:弱极性溶剂,如甲基叔丁基醚、氯仿、二氯乙烷等可直接从圆红酵母细胞中提取油脂,而短链醇类极性溶... 详细信息

为建立简易高效的微生物油脂提取方法,文章以圆红酵母发酵醪液为原料,直接用溶剂对其进行处理,评估了24种溶剂的提取性能。研究结果表明:弱极性溶剂,如甲基叔丁基醚、氯仿、二氯乙烷等可直接从圆红酵母细胞中提取油脂,而短链醇类极性溶剂及烃类非极性溶剂均不能提取油脂;使用尼罗红和碘化丙啶对细胞进行染色后发现,极性和弱极性溶剂破坏了细胞膜和脂滴膜,有利于提取胞内油脂;利用低毒性的甲基叔丁基醚和乙酸乙酯处理发酵醪液,油脂提取率分别达到了85%和59%,且所得脂质的组成与酸热法提取的油脂相似。

关键词：微生物油脂溶剂法提油圆红酵母提取机制分析

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

红酵母Rhodotorula sp.U13N3产不饱和脂肪酸的发酵调控

红酵母Rhodotorula sp.U13N3产不饱和脂肪酸的发酵调控

引用

作者：赵钰南京理工大学

学位级别：硕士

不饱和脂肪酸是生命中非常重要的一类物质,具有多种重要的生理活性。由于不饱和脂肪酸的主要来源是植物和水产品,其生产一直受到气候条件等不可控因素的影响。利用产油微生物生产富含不饱和脂肪酸的油脂具有一系列优点,如:生长周期短、... 详细信息

不饱和脂肪酸是生命中非常重要的一类物质,具有多种重要的生理活性。由于不饱和脂肪酸的主要来源是植物和水产品,其生产一直受到气候条件等不可控因素的影响。利用产油微生物生产富含不饱和脂肪酸的油脂具有一系列优点,如:生长周期短、生产强度高、不易受外界环境因素影响等,故而是一种较为可行的替代方法。本研究以一株非传统产油酵母红酵母Rhodotorula sp.U13N3为出发菌株,首先利用CRISPR/Cas9基因编辑系统对影响油脂积累的三酰甘油脂肪酶ATG15基因与过氧化物酶AOX2基因进行敲除,然后筛选高产油脂突变株并进行发酵条件的优化,在此基础上分别分析Δ9去饱和酶基因诱导剂(Fe)、渗透压与超长链脂肪酸合成相关的酰基辅酶A延长酶底物(硬脂酸和油酸)对突变株油脂组成和产量的影响,最终得到了生产不饱和脂肪酸较优的条件。主要结论如下:1.利用CRISPR/Cas9系统对红酵母Rhodotorula sp.U13N3进行基因编辑,通过ATMT技术转化含有ATG15与AOX2双基因g RNA的质粒,对得到的双基因缺陷阳性克隆共27株并进行筛选,最终成功得到一株高产油脂的突变株ΔATGΔAOX3。突变株所产油脂中不饱和脂肪酸相对含量略有降低,但油脂产量比出发菌株U13N3提高了52.89%。进一步分析发现,将发酵液p H值维持在较高水平(p H 5～6)有助于提高油脂产量,通过添加Ca CO进行p H控制发酵,使突变株ΔATGΔAOX3油脂产量比调控前进一步提升了59.82%,达到了13.84 g/L,其中不饱和脂肪酸相对含量为70.82%。2.外源添加Fe能够对Δ9去饱和酶基因ole1转录水平产生影响。添加50～200μM Fe后,发酵中期ole1转录水平显著上调,随着浓度增加,Fe对ole1转录诱导作用逐渐减弱。发酵结束时,外源添加50μM Fe使单不饱和脂肪酸相对含量增加了1.01%。另外,Fe能够诱导酰基辅酶A延长酶基因elo1与elo2转录水平上调。添加50～200μM Fe后,发酵中期elo2的转录水平上调均超过对照组的2倍,但最终油脂中链长C20与C22的脂肪酸相对含量变化并不显著。发酵前期,增强发酵液中渗透压对ole1、elo1、elo2基因转录有促进作用,且能够提高不饱和脂肪酸与C18的含量,但发酵结束时,不饱和脂肪酸与超长链脂肪酸含量不会发生明显变化。3.外源添加硬脂酸钠能够在发酵中期和前期诱导ole1、elo1与elo2转录水平显著上调并促进油脂产量提高。其中,1 g/L更有利于ΔATGΔAOX3发酵产油脂,发酵结束时,油脂产量可达到16.74 g/L,其中不饱和脂肪酸含量为10.79 g/L,C20脂肪酸含量为102.11 mg/L,相比对照组分别提高了15.13%、18.02%和23.20%。另外,外源添加油酸同样有助于ole1、elo1与elo2转录水平显著上调。最终,外源添加5 g/L油酸发酵120 h后,突变株ΔATGΔAOX3胞内不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸和超长链脂肪酸含量分别达到12.41 g/L、5.42 g/L和277.35 mg/L,比出发菌株U13N3分别提高了2.74倍、1.96倍和6.50倍。

关键词：圆红酵母不饱和脂肪酸基因编辑发酵脂肪酸去饱合酶脂肪酸延长酶

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：