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固氮施氏假单胞菌电子传递复合体rnf基因簇的功能鉴定

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中国农业科技导报 2018年第4期20卷 44-51页

作者：陆超刘伟黄义杨智敏尚立国张宏扬战嵛华陆伟燕永亮林敏中国农业科学院生物技术研究所北京100081 浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所杭州310021 华中农业大学植物科学技术学院武汉430070

能量供应是限制生物固氮效率的重要因素,电子传递复合体是生物固氮过程中能量产生的重要组成部分。基因组分析表明,在联合固氮菌施氏假单胞菌A1501基因组中存在两套编码电子传递复合体rnf,分别为基因簇rnf1和rnf2,其中rnf1位于固氮基因... 详细信息

能量供应是限制生物固氮效率的重要因素,电子传递复合体是生物固氮过程中能量产生的重要组成部分。基因组分析表明,在联合固氮菌施氏假单胞菌A1501基因组中存在两套编码电子传递复合体rnf,分别为基因簇rnf1和rnf2,其中rnf1位于固氮基因岛上,rnf2基因簇位于核心基因组上。为了明确两套电子传递体在生物固氮过程中的功能,分别构建了rnf1和rnf2基因簇的突变株并测定了相关表型。结果发现,在基本培养基中两个基因簇的突变都不影响菌体生长,可能相互之间存在着功能互补;固氮酶活性测定结果表明,位于固氮基因岛中的rnf1基因簇缺失造成固氮酶活下降80%以上,而rnf2基因簇的缺失对酶活无显著影响。进一步采用启动子-lac Z融合表达策略探究了基因簇rnf1对固氮酶结构基因nif H转录的影响,发现rnf1极性突变株中nif H的启动子转录活性仅为野生型的17.59%,推测rnf1缺失造成了固氮条件下能量产生匮乏,胞内碳氮比失衡,进而造成固氮系统表达受抑制。

关键词：施氏假单胞菌A1501 电子传递链rnf 固氮酶活固氮酶基因nifH

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降香黄檀根际固氮菌分离鉴定及菌群活性研究

土壤通报 2015年第5期46卷 1121-1126页

作者：徐睿刘君昂罗娜邓雷刘慧娟周国英中南林业科技大学经济林培育与保护教育部重点实验室湖南长沙410004

利用Ashby培养基从不同林龄的降香黄檀根际土壤中分离高效固氮菌,为专用生物复合肥的研制提供理论基础。固氮酶活在75.30~432.76 nmol h-1 ml-1之间的菌株有21株,其中菌株JT-N305的固氮酶活最高。其中15株菌株具有分泌IAA的能力,其分泌... 详细信息

利用Ashby培养基从不同林龄的降香黄檀根际土壤中分离高效固氮菌,为专用生物复合肥的研制提供理论基础。固氮酶活在75.30~432.76 nmol h-1 ml-1之间的菌株有21株,其中菌株JT-N305的固氮酶活最高。其中15株菌株具有分泌IAA的能力,其分泌量在9.76~41.21μg ml-1。结合形态学、生理生化特性及16S r DNA序列分析,初步鉴定JT-N301属于Burkholderia anthina、JT-N304属于Enterobacter ludwigii、JT-N305属于Burkholderia seminalis。菌群的研究表明:3株菌株混菌培养,其固氮酶活高达498.66 nmol h-1 ml-1;相对于其它氮源而言,菌群更易于吸收铵盐;而菌群的最佳碳源为葡萄糖。

关键词：降香黄檀根际固氮菌固氮酶活 IAA

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硫化氢对大豆共生根瘤衰老的作用研究

硫化氢对大豆共生根瘤衰老的作用研究

作者：潘晴西北农林科技大学

学位级别：硕士

硫化氢信号分子(Hydrogen sulfide,HS)能够参与植物的生长发育过程,并在植物响应各种生物和非生物胁迫过程中发挥重要作用,因此被认定为继一氧化氮(Nitric oxide,NO)和一氧化碳(Carbon monoxide,CO)后的新的气体信号分子。然而,HS是否... 详细信息

硫化氢信号分子(Hydrogen sulfide,HS)能够参与植物的生长发育过程,并在植物响应各种生物和非生物胁迫过程中发挥重要作用,因此被认定为继一氧化氮(Nitric oxide,NO)和一氧化碳(Carbon monoxide,CO)后的新的气体信号分子。然而,HS是否参与调控大豆-根瘤菌共生固氮体系进而影响根瘤的固氮及衰老过程还不是很清楚。因此,本项目选用大豆中黄13为实验材料,从植株生长表型、氮素含量、根瘤数目及衰老根瘤所占比例、根瘤内固氮酶活性、固氮酶蛋白表达、衰老标记基因及固氮共生基因的表达等方面分析HS在大豆植物根瘤衰老以及固氮过程中的调控机制研究。研究结果如下:1.以人工气候室培养的大豆(中黄13)为实验对象,接种大豆根瘤菌(Sinorhizobium fredii,strain Q8)。在接种根瘤菌后三周,外源添加HS,分6个时期(3周、4周、5周、6周、7周、8周)分别收取样品,并测定大豆地上/地下干重、根瘤总数及衰老根瘤所占比例等生理指标。结果表明,相比对照组,HS处理后大豆植株干重增加、叶绿素含量下降较慢、根瘤数目增多且根瘤衰老比例减小、固氮酶活性增加、氮素营养积累较多且向豆荚转移快,表明HS影响根瘤的固氮酶活性、可延长固氮周期、促进根瘤成熟延缓衰老。2.采用石蜡切片观察6个时期不同处理条件下根瘤内的根瘤菌侵染情况以及共生体的分布。切片显示3-5周施加HS对根瘤内共生体分布与根瘤侵染状态没有明显差异,但从6周开始,未施加HS处理的根瘤共生体内出现空腔且形成一个中央衰老区,而HS处理的根瘤在7周才出现衰老区,此时未经过HS处理的根瘤衰老区已经出现根瘤结构的破坏。透射电子显微镜分析根瘤超微结构显示,在接菌后3周HS处理的根瘤中类菌体内PHB颗粒较多,接菌后5周两个处理无明显差异。但接菌后6周Q8开始出现衰退的类菌体,囊泡中出现类菌体降解后的空隙,而此时Q8+NaHS没有明显的衰老特征。接菌后7周观察到Q8类菌体有皱缩的边缘,衰老导致的杆状类菌体皱缩成圆球状的数量增多,囊泡的空隙变大。同时Q8+NaHS也开始出现衰退的类菌体。表明HS处理延缓了根瘤的衰老、延长了根瘤的活性时期。3.选用固氮酶铁蛋白(Nitrogenase ironprotein,)抗体、谷氨酰胺合成酶类蛋白(glutamate–ammonia ligase-like protein,NodGS)抗体。分别提取6个时期大豆根和根瘤的总蛋白并进行Western-blot。结果表明:HS处理后,根瘤中固氮酶铁蛋白表达量增多。谷氨酰胺合成酶类蛋白,在施加HS处理后表达增多且在接菌后4周和5周Q8、Q8+NaHS的NodGS表达差异最大,前期表达较多,而后逐渐下降。HS处理能够提高结瘤素蛋白在初生根及根瘤的发育和信号转导中的作用,使固氮酶活性保持较长时间,延长了固氮周期。4.提取6个时期的大豆根及根瘤RNA,设计植物衰老(半胱氨酸蛋白酶等)以及与共生固氮相关基因(钙调速依赖性蛋白激酶等)的特异性引物,qRT-PCR分析这些基因的表达情况。实验结果表明,外源施加HS会干扰根瘤菌侵染过程中核孔蛋白及Ca信号传递等共生基因的表达。另外,外源添加HS后,植株根和根瘤内半胱氨酸蛋白酶表达量下降,超氧化物歧化酶、谷氨酰胺合成酶相关基因表达量增高。综上所述,HS信号分子通过影响大豆根瘤菌共生体系建立过程中共生、氮代谢以及根瘤衰老过程相关基因的表达,使大豆氮素积累增多及转移加快、干重增加、根瘤产生增多且衰老比例下降、固氮酶活性升高,进而延缓根瘤的衰老进程。HS信号分子在延缓大豆衰老中具有作用,可以为提高大豆生物固氮作用、扩大固氮周期、提高氮肥利用率提供一定的理论基础和科学依据,为实现大豆高产高效提供新的思路。

关键词：硫化氢共生固氮大豆根瘤衰老固氮酶活半胱氨酸蛋白酶

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盐碱化羊草草地固氮微生物的特性研究

盐碱化羊草草地固氮微生物的特性研究

作者：麻爽东北师范大学

学位级别：硕士

盐碱化草地土壤中存在数量较多的能够独立进行固氮作用的自生固氮菌,这些细菌在土壤氮循环中的作用一直受到广泛的关注。本研究利用改良Ashby无氮培养基平板,从松嫩盐碱化草地带有羊草凋落物的表层土壤样品中分离出10株自生固氮菌株,通... 详细信息

盐碱化草地土壤中存在数量较多的能够独立进行固氮作用的自生固氮菌,这些细菌在土壤氮循环中的作用一直受到广泛的关注。本研究利用改良Ashby无氮培养基平板,从松嫩盐碱化草地带有羊草凋落物的表层土壤样品中分离出10株自生固氮菌株,通过形态学分析、生理生化反应及16SrDNA序列分析等试验对菌株进行鉴定,并对菌株固氮酶等酶活、促生特性以及优势菌株对羊草的促生作用进行研究。研究结果如下:1、通过形态学分析、生理生化特征分析及16SrDNA核酸序列分析,对筛选得到的10株自生固氮菌进行鉴定,初步确定为四株链霉菌（Streptomyces）,两株假单胞菌（Pseudomonas）,一株土地戈登氏菌（Gordonia terrae）,一株鲁氏不动杆菌（Acinetobacter lwoffii）,一株新金色分枝杆菌（Mycobacterium neoaurum）,一株根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）。菌株Genbank核酸序列登录号分别为KJ716539、KJ742897-KJ742905。全部菌株具有耐盐碱性,可在Na Cl为4%和pH为10.5的培养基中生长良好;硫化氢试验、接触酶试验阳性;大多数菌株明胶液化试验、淀粉水解试验、糖发酵试验呈阳性,全部菌株均能在以绝大多数糖类为唯一碳源的培养基上生长。2、对分离菌株的固氮酶活性进行研究,利用乙炔还原法进行测定,通过气象色谱仪对乙烯相对生成量的检测证明所有菌株均具有固氮酶活性,酶活区间为2.21-4.44nmol C2H4 h-1m L-1。3、对分离菌株产CMC酶活性研究,以CMC和秸秆分别作为底物,通过二硝基水杨酸法对还原糖生成量进行测定,实验结果表明Sn-15、Sn-21、Sn-22、Sn-23、Sn-26具有纤维素水解酶活性,而且当底物是秸秆时纤维素酶活性明显高于以CMC为底物时的纤维素酶活性。4、对分离菌株产木聚糖酶能力研究,利用DNS显色法进行测定。结果表明,Sn-15、Sn-21、Sn-22、Sn-23、Sn-265株菌产木聚糖酶,其中Sn-23、Sn-26两株链霉菌木聚糖酶活性相对较高。5、对分离菌株促生特性进行研究,实验结果显示,Sn-19、Sn-20、Sn-23具有溶磷能力;所有菌株都能产生IAA,Sn-23产量最高;抑菌活性测定结果显示,Sn-15、Sn-18、Sn-21、Sn-23、Sn-26在金黄色葡萄球菌作为指示菌株时产生抑菌圈,其中Sn-18抑菌效果最好;Sn-15、Sn-22、Sn-23菌株在以大肠杆菌为指示菌株时抑菌效果明显,且Sn-22效果最好。6、对分离菌株的羊草促生特性进行研究,分别以中性山地土和盐碱化草地土进行羊草盆栽实验,采用菌种为Sn-5和外源碱性菌。实验结果表明外源性碱性菌在pH=9,100mmol[Na+]的条件下对羊草生长促生效果最好,山地土盆栽实验中Sn-5没有表现出促生作用;在盐碱化草地土壤盆栽实验中,Sn-5和外源碱性菌均表现出良好的促生作用。

关键词：盐碱化草地自生固氮菌固氮酶活纤维素降解活性促生作用

茎瘤固氮根瘤菌ORS571受体蛋白TLPa1和TLPa2的功能研究

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茎瘤固氮根瘤菌ORS571受体蛋白TLPa1和TLPa2的功能研究

作者：杨金保山西农业大学

学位级别：硕士

茎瘤固氮根瘤菌ORS571能够在共生宿主根际、内生宿主根际及自生状态下生长及固氮,其感受外界信号的受体系统应当更为复杂多样,对其受体系统如何感应外界信号的研究国内外尚无报道,严重限制了根瘤菌与宿主这一独特的共生固氮体系的广泛... 详细信息

茎瘤固氮根瘤菌ORS571能够在共生宿主根际、内生宿主根际及自生状态下生长及固氮,其感受外界信号的受体系统应当更为复杂多样,对其受体系统如何感应外界信号的研究国内外尚无报道,严重限制了根瘤菌与宿主这一独特的共生固氮体系的广泛应用。通过生物信息学分析,受体蛋白TLPal和TLPa2分别位于茎瘤固氮根瘤菌趋化基因簇的上游和下游,因此推测这两个蛋白是重要的趋化受体。本实验利用同源重组的原理构建突变株,即先把要敲除目的基因的上下游片段分别插入到PCM351质粒中庆大基因的上下游两个多克隆位点中,然后通过三亲结合的方法把tlpal和tlpa2两个基因与庆大基因交换掉以达到基因敲除的目的。回补菌株的构建采用PBBR1MSC-2质粒,把所敲除目的基因及其启动子区域插入到该质粒中,然后转入突变株达到回补的目的。本实验利用L3半固体平板法检测趋化性,在培养基中加入不同的碳源来观察野生型菌株、突变株和回补菌株的趋化圈大小;刚果红固体培养基用来观察菌株的胞外多糖和次生代谢产物的分泌;通过固氮酶可以与乙炔反应产生乙烯的原理,利用气相色谱来测定菌株的固氮酶活性;将野生型菌株和突变型菌株按不同比例涂抹到宿主田菁的茎上和浸泡种子,通过计算长出的茎瘤和根瘤中两种菌株的比例来检测菌株的竞争性强弱。实验结果表明,与野生型菌株相比,突变株ΔTLPal对柠檬酸、琥珀酸、脯氨酸、酒石酸、苹果酸、甘油等碳源的感应能力均削弱,回补菌株ΔTLPal-com对以上碳源都能部分回补趋化能力;突变株ΔTLPal的胞外多糖分泌与野生型没有区别,但其次生代谢产物黑色素出现的时间比野生型稍早;在固氮酶活性测定中,发现突变株ΔTLPal固氮酶活性明显比野生型降低,回补菌株能够部分回补;竞争性结瘤实验中,突变株ΔTLPal的茎瘤竞争能力明显不如野生型,但根瘤竞争能力与野生型无差别。另一突变株ΔTLPa2在以上实验中与野生型菌株均没有比较大的差异。因此,我们推测趋化受体蛋白TLPal是一个重要的趋化受体,能对多种碳源做出感应,并且影响次生代谢产物、固氮酶活和结瘤过程;趋化受体蛋白TLPa2对趋化等其他方面都没有作用,可能其基因是一段冗余片段。

关键词：茎瘤固氮根瘤菌基因敲除趋化黑色素固氮酶活竞争性结瘤

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甘肃地区道地药材根际固氮微生物分离鉴定

土壤与作物 2017年第1期6卷 67-72页

作者：杜文静刘锦霞李晶李娜丁品武建荣张建军甘肃省科学院生物研究所甘肃兰州730000

为调研甘肃中药材种植区的固氮微生物资源,从党参、黄芪和当归3种药材种植地的根际土壤中分离具有固氮酶活性的微生物,单菌株纯化并进行分子生物学鉴定,最后通过乙炔还原法检测各菌株的固氮酶活性。结果表明:这3种作物的根际土壤中固氮... 详细信息

为调研甘肃中药材种植区的固氮微生物资源,从党参、黄芪和当归3种药材种植地的根际土壤中分离具有固氮酶活性的微生物,单菌株纯化并进行分子生物学鉴定,最后通过乙炔还原法检测各菌株的固氮酶活性。结果表明:这3种作物的根际土壤中固氮微生物资源丰富,共分离得到28株具有固氮酶活性的菌株,经鉴定主要为根瘤菌属、芽孢菌属、单孢菌属、无色杆菌属和粘着箭菌属等,固氮酶活性为53.5 C_2H_2nmol·(h·ml)-1~295.3 C_2H_2nmol·(h·ml)^(-1),无色杆菌属的固氮酶活性较高。此研究为下一步筛选适合中药材生长的微生物固氮菌肥的菌种提供一定的理论依据。

关键词：中药固氮根际微生物固氮酶活乙炔还原法

斯氏假单胞菌A1501固氮岛中NifA依赖的未知功能基因转录特性研究

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斯氏假单胞菌A1501固氮岛中NifA依赖的未知功能基因转录特性研究

作者：樊慧俐中国农业科学院

学位级别：硕士

斯氏假单胞菌A1501 （Pseudomonas stutzeri A1501）是分离自我国南方水稻根际的联合固氮微生物,该菌在微好氧和低铵的状态下具有明显的固氮活性。目前A1501菌全基因组测序和基因功能注释,不同氨、氧浓度条件下基因表达谱芯片分析工作... 详细信息

斯氏假单胞菌A1501 （Pseudomonas stutzeri A1501）是分离自我国南方水稻根际的联合固氮微生物,该菌在微好氧和低铵的状态下具有明显的固氮活性。目前A1501菌全基因组测序和基因功能注释,不同氨、氧浓度条件下基因表达谱芯片分析工作已经完成。A1501菌基因组全长4567418 bp,编码4146个的开放阅读框（ORF）。基因组测序和基因芯片分析发现A1501的染色体上存在一个长度为49 kb,编码59个基因的固氮岛。在全基因组测序和芯片分析的基础上,为进一步探讨和研究A1501固氮基因的转录调控机制,本研究开展了正调控蛋白NifA一个关键位点的定点突变分析。同时也发现了“固氮岛”内一些NifA依赖的未知功能基因,并对这些基因的功能进行了初步研究。对NifA序列进行Blaster比对分析,发现该蛋白中间结构域C6区的一个酪氨酸残基高度保守（对应于A1501为Y370）。构建斯氏假单胞菌A1501野生型NifA及其Y370C突变体的表达载体,并分别与含PnifH+lacZ的融合表达载体共转化到大肠杆菌,β-半乳糖苷酶活性分析表明Y370C突变体不能激活nifH启动子,而野生型NifA可以激活PnifH+lacZ的表达。此外,NifA-Y370C不能使NifA缺失突变株A1506恢复固氮酶活,而野生型NifA可以恢复A1506的固氮酶活。研究结果表明斯氏假单胞菌A1501 NifA蛋白C6区的Tyr370氨基酸是NifA蛋白激活nif基因转录的关键位点,其具体作用机制值得进一步深入研究。已有的芯片数据表明:斯氏假单胞菌A1501“固氮岛”中几乎所有的基因在固氮条件下表达量比非固氮条件明显上调,其中包括16个未知功能基因。本工作着重研究了PST1305、PST1312、PST1325三个基因,选择这三个基因不仅因为它们在固氮条件下高表达,还在于PST1305与固氮基因nifBQ位于同一个转录单元,PST1312基因位于正负调控蛋白nifLA下游100bp处,PST1325位于固氮酶结构基因nifHDK的上游,以相反方向转录,而且该基因与其他固氮菌中nifHDK上游未知功能的基因相似性也很高。通过Real-Time PCR对这三个基因的转录表达进行分析,其验证结果与芯片分析结果一致。利用自杀性载体pK18mob,通过三亲结合和重组单交换,获得这三个基因的突变株。生长曲线测定显示这些基因的突变并不影响细胞的生长,但对固氮酶活的影响不尽相同。PST1305、PST1325突变株的固氮酶活分别为野生型的51.96%和24.27%,尽管这两个基因的确切功能还不清楚,但它们与A1501菌固氮酶活性的保持有着较大的相关性。而PST1312突变对固氮酶活影响不大。此外,我们确定了PST1305、PST1325基因的转录表达是受固氮正调控蛋白NifA调控的。

关键词：斯氏假单胞菌A1501 NifA 定点突变基因表达固氮酶活

镉和乙草胺复合污染对旱地土壤自生固氮菌种群和生物活性的影响

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镉和乙草胺复合污染对旱地土壤自生固氮菌种群和生物活性的影响

作者：宣瑛浙江大学

学位级别：硕士

本文以华家池菜园土为研究材料,采用室内培养、纯培养与数理统计分析相结合的方法,探讨了重金属镉和除草剂乙草胺对旱地土壤中自生固氮菌数量及酶活变化的影响,并筛选、分离和鉴定了一株高效自生固氮菌,对污染物胁迫下纯菌的生长和固氮... 详细信息

本文以华家池菜园土为研究材料,采用室内培养、纯培养与数理统计分析相结合的方法,探讨了重金属镉和除草剂乙草胺对旱地土壤中自生固氮菌数量及酶活变化的影响,并筛选、分离和鉴定了一株高效自生固氮菌,对污染物胁迫下纯菌的生长和固氮酶活及氧化应激反应进行了研究,对C4菌株抗污染的机理进行了初步的探讨,为建立有效的镉和乙草胺复合污染预警指标体系、环境质量评价提供了有益的参考。本研究所获得主要结论如下: 1.采用传统方法研究了镉和乙草胺单一及复合污染对旱地土壤自生固氮菌生长及对土壤固氮强度的影响。研究结果表明,土壤中好氧固氮菌对Cd非常敏感。低浓度的Cd可以刺激土壤中好氧固氮菌的数量,但高浓度对其有强烈的抑制作用。而乙草胺对好氧固氮菌数量没有实质上的影响。Cd对前8d土壤中的厌氧固氮菌数量表现为强烈的刺激作用,随后固氮菌数量下降。最终除最高浓度组(5.0mg·kg干土)受明显的抑制作用,其余组与对照相当。从长期来看,施用乙草胺后厌氧固氮菌数量变化不大,但施用高浓度时(2.0mg/kg干土)可显著抑制固氮菌的数量。Cd与乙草胺复合污染对土壤好氧和厌氧固氮菌均表现为协同毒性效应。Cd对培养末期土壤固氮强度的影响表现为负相关作用,呈良好的浓度—剂量效应。而一定浓度范围内的乙草胺可以在短期内刺激固氮酶活性,但最终则表现为抑制作用。两者复合污染下的固氮酶活前期表现为协同刺激作用,而末期则为协同毒性效应。 2.从菜园中分离得到一株高效自生固氮菌株C4。C4菌株16S rDNA与GenBank数据库中拜式固氮菌(Azotobacter beijerinckii)的16S rDNA序列具有99%同源性,结合形态、生理生化特性判断,该菌为拜式固氮菌。对该菌固氮酶活的测定发现,菌株在培养24h时固氮酶活性最高,乙烯生成量达1203.779nmol/h.ml菌液,随后酶活逐步下降,至90h时的酶活仅75.66nmol/h.ml菌液。菌株的抗药性的检测结果表明,菌株C4对庆大霉素、氨苄青霉素、丁胺卡那霉素、红霉素敏感,而对青霉素钠、头孢霉素和氯霉素不敏感。 3.以菜园里分离得到的固氮菌株C4为实验材料,通过对其生长和固氮酶活两方面的影响,研究了Cd、乙草胺两者复合污染对C4菌株的毒害作用,初步获得以下结论:Cd对刚培养或已培养12h后的纯培养物菌株C4的生长和酶活都有较强的抑制作用,其中Cd对已培养12h菌株的危害更大。0.5mg L Cd浓度即可显著地抑制菌株的生长和酶活水平。而C4菌株对乙草胺有较强的耐受能力,特别是对已培养12h的菌株,乙草胺浓度高达1000mg/L时,其酶活仍可与对照水平相近。在Cd和乙草胺复合污染中,也观察到已培养

关键词：镉乙草胺复合污染自生固氮菌固氮酶活 Azotobacter beijerinckii C4 氧化应激

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人工诱导旱稻结瘤固氮的探索研究

中国农学通报 1993年第1期9卷 14-17页

作者：丁武福建省农业科学院土壤肥料研究所福州350013

采用终浓度为1ppm的2,4-D处理旱稻苗,无论是否接种固氮微生物,均能使其根部形成瘤状物。结瘤率、单株瘤数及瘤大小与接种菌无关,但不同旱稻品种的结瘤率有差异。乙炔还原测定表明,接种具离体固氮酶活的固氮微生物的稻苗,在某些情况下,... 详细信息

采用终浓度为1ppm的2,4-D处理旱稻苗,无论是否接种固氮微生物,均能使其根部形成瘤状物。结瘤率、单株瘤数及瘤大小与接种菌无关,但不同旱稻品种的结瘤率有差异。乙炔还原测定表明,接种具离体固氮酶活的固氮微生物的稻苗,在某些情况下,能显示极微弱的固氮酶活,但与该稻苗是否用2,4-D处理尚无必然联系。稻瘤的含菌结瘤率约占总瘤数的33％～40％。初步鉴定稻瘤分离菌系原接种菌。

关键词：旱稻 2,4-D 结瘤固氮酶活