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混菌固态发酵菜籽粕提高可溶性蛋白的研究

食品与发酵工业 2023年第13期49卷 121-128页

作者：郭珍红管军军杨刚郭琳娜张梦琪刘艳霞冯明星河南工业大学生物工程学院河南郑州450000

为提高菜籽粕中的可溶性蛋白(soluble protein,SP),该试验通过植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)与米曲霉(Aspergillus oryzae)混菌固态发酵的方法对其进行研究。结果表明,通过试验和响应面优化分... 详细信息

为提高菜籽粕中的可溶性蛋白(soluble protein,SP),该试验通过植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)与米曲霉(Aspergillus oryzae)混菌固态发酵的方法对其进行研究。结果表明,通过试验和响应面优化分析得出菜籽粕发酵最优工艺条件为料液比1∶1.01(g∶mL),接种量7.95%(质量分数),L.plantarum、B.subtilis与A.oryzae接种比例2∶2∶1(体积比),发酵温度34.02℃,共发酵93.86 h。发酵的菜籽粕相对于未发酵菜籽粕,多肽含量提高105.65%(P蛋白二级结构中α-螺旋大部分转变为β-折叠、无规则卷曲、β-转角;氯化钯法测硫苷,其降解率达到(85.06±1.63)%(P蛋白结构发生改变。

关键词：混菌固态发酵菜籽粕可溶性蛋白多肽

八种红树植物幼苗的叶片可溶性蛋白和抗氧化酶活性对光强的响应

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广西植物 2023年第4期43卷 606-615页

作者：朱一民李婷景宇杭曹洪麟叶万辉沈浩中国科学院退化生态系统植被恢复与管理重点实验室/广东省应用植物学重点实验室中国科学院华南植物园广州510650 南方海洋科学与工程广东省实验室(广州) 广州511458 中国科学院大学北京100049

红树林湿地生态系统的恢复与重建是我国南方海岸带生态恢复研究的重点领域之一。为明确红树植物光适应的生理生态策略,该文选取无瓣海桑(Sonneratia apetala)、秋茄(Kandelia obovata)、木榄(Bruguiera gymnorhiza)、桐花树(Aegiceras c... 详细信息

红树林湿地生态系统的恢复与重建是我国南方海岸带生态恢复研究的重点领域之一。为明确红树植物光适应的生理生态策略,该文选取无瓣海桑(Sonneratia apetala)、秋茄(Kandelia obovata)、木榄(Bruguiera gymnorhiza)、桐花树(Aegiceras corniculatum)、老鼠簕(Acanthus ilicifolius)、卤蕨(Acrostichum aureum)、银叶树(Heritiera littoralis)和黄槿(Hibiscus tiliaceus)作为研究对象,通过遮荫控制试验,探究这8种红树植物一年生幼苗在不同光照强度(自然光强的100%、45%、30%、10%)处理下的叶片可溶性蛋白含量和抗氧化酶活性的响应特征。结果表明:(1)随光照强度下降,木榄、老鼠簕和卤蕨的叶片可溶性蛋白含量受到的影响较小,而无瓣海桑、秋茄、桐花树、银叶树和黄槿的叶片可溶性蛋白含量则表现出下降趋势。(2)木榄、老鼠簕和卤蕨的超氧化物歧化酶(SOD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)等抗氧化酶活性在10%光照强度处理下的活性与对照无显著差异,而无瓣海桑、秋茄、桐花树、银叶树和黄槿的抗氧化酶活性则总体呈下降趋势。从对光照的生理适应角度来看,木榄、老鼠簕和卤蕨具有一定的耐阴性,适宜种植在郁闭度较高的林下;无瓣海桑、秋茄、桐花树、银叶树和黄槿适宜作为中上层树种或在郁闭度较低的林下种植。该研究结果为人工红树群落的优化配置提供了理论指导。

关键词：红树植物光照强度抗氧化酶可溶性蛋白生理适应

分子伴侣对白喉毒素无毒突变体CRM197重组蛋白在大肠杆菌中可溶性表达的促进作用

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生物工程学报 2021年第4期37卷 1368-1375页

作者：杨梦婷李晓晓林晨刘明靓陈叶梓赵云刘朝奇三峡大学医学院肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室湖北宜昌443002 三峡大学医学院湖北宜昌443002

为了获得有活性的白喉毒素突变体蛋白(Cross-reactingmaterial197,CRM197),本研究利用分子伴侣pG-KJE8与重组质粒pET28a-CRM197在大肠杆菌原核表达系统中进行共表达,来促进目的蛋白的正确折叠,进而提高CRM197蛋白的可溶性表达。将质粒... 详细信息

为了获得有活性的白喉毒素突变体蛋白(Cross-reactingmaterial197,CRM197),本研究利用分子伴侣pG-KJE8与重组质粒pET28a-CRM197在大肠杆菌原核表达系统中进行共表达,来促进目的蛋白的正确折叠,进而提高CRM197蛋白的可溶性表达。将质粒转化至大肠杆菌后并诱导其表达目的蛋白,再通过SDS-PAGE胶染色、Western blotting等技术对所得蛋白进行检测分析。结果发现:利用体外重组技术成功得到了pET28a-CRM197重组蛋白原核表达质粒,且CRM197重组蛋白在原核表达系统中主要以包涵体形式表达;通过探索和优化,确定了诱导蛋白的最佳浓度和温度,当加入终浓度为1.0 mmol/L IPTG、0.5 mg/mL L-阿拉伯糖、5.0 ng/mL四环素,在20℃条件下诱导16h时,目的蛋白的可溶性表达得到显著提高;可溶性表达的CRM197重组蛋白可以与CRM197一抗发生特异性结合,免疫反应性良好。因此,研究发现分子伴侣pG-KJE8可以促进CRM197重组蛋白在大肠杆菌中以可溶性形式表达,且能很好地与CRM197一抗发生特异性结合,证实CRM197重组蛋白具有良好的免疫反应性,为CRM197蛋白的工业化生产及应用奠定了一定的基础。

关键词：白喉毒素突变体蛋白原核表达分子伴侣可溶性蛋白

养分异质条件下结缕草克隆分株生长、碳水化合物及可溶性蛋白的生理整合

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应用生态学报 2018年第11期29卷 3569-3576页

作者：徐苏男刘艳虹李虹仪陈忠林李悦张利红辽宁大学环境学院沈阳110036

通过对连接和断开的结缕草分株进行不同的养分处理,研究了养分异质条件下结缕草克隆分株生长、碳水化合物及可溶性蛋白含量的变化.结果表明:在养分异质条件下,处于中、高养分水平的母株可以显著提高与其相连子株的地上、地下及总生物量... 详细信息

通过对连接和断开的结缕草分株进行不同的养分处理,研究了养分异质条件下结缕草克隆分株生长、碳水化合物及可溶性蛋白含量的变化.结果表明:在养分异质条件下,处于中、高养分水平的母株可以显著提高与其相连子株的地上、地下及总生物量,高养分下分别提高32.5%、22.1%和24.8%,降低根冠比、可溶性糖及非结构性碳水化合物(NSC)含量,高养分下分别降低7.7%、15.2%和13.1%,但是对淀粉、纤维素、可溶性蛋白含量无显著影响.处于中、高养分水平的子株对与其相连的母株生长、碳水化合物及可溶性蛋白含量没有显著影响.养分异质条件下结缕草母株对子株生物量、根冠比、可溶性糖及NSC含量有明显的生理整合,其整合强度与养分梯度呈正比,而对淀粉、纤维素及可溶性蛋白含量没有显现显著的生理整合效应.子株对母株各项指标都没有显著的生理整合,结缕草母株和子株间是一种单向的生理整合.

关键词：生理整合养分异质结缕草碳水化合物可溶性蛋白

菌酶协同发酵玉米蛋白粉制备高可溶性蛋白饲料的研究

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饲料研究 2023年第21期46卷 47-53页

作者：樊磊刘晓兰郑喜群哈尔滨商业大学食品工程学院黑龙江省高校食品科学与工程重点实验室黑龙江哈尔滨150028 齐齐哈尔大学食品与生物工程学院黑龙江省玉米深加工理论与技术重点实验室黑龙江齐齐哈尔161006 黑龙江八一农垦大学食品学院黑龙江大庆163319

为了提高玉米蛋白粉的生物利用率,采用菌酶协同方法发酵玉米蛋白粉。试验筛选最优枯草芽孢杆菌和蛋白酶,通过单因素及响应面试验对发酵条件进行优化。结果确定了1株产蛋白酶较多且可特异性水解玉米蛋白粉的枯草芽孢杆菌A5作为发酵菌株,... 详细信息

为了提高玉米蛋白粉的生物利用率,采用菌酶协同方法发酵玉米蛋白粉。试验筛选最优枯草芽孢杆菌和蛋白酶,通过单因素及响应面试验对发酵条件进行优化。结果确定了1株产蛋白酶较多且可特异性水解玉米蛋白粉的枯草芽孢杆菌A5作为发酵菌株,选择酸性蛋白酶进行酶解。最佳发酵条件为:酸性蛋白酶添加量100 U/g、含水量45%、接种量5%、发酵温度35℃、发酵时间72 h。在此条件下,发酵饲料中可溶性蛋白含量为140.1 mg/g,多肽含量为92.0 mg/g,总氨基酸含量为27.5%。与发酵前相比,发酵饲料中可溶性蛋白含量提高了94.2%,多肽含量提高了74.3%,总氨基酸含量提高了97.9%,DPPH自由基和ABTS+自由基清除率分别提高了32.8%和58.1%。结果表明,菌酶协同处理玉米蛋白粉可以有效提高玉米蛋白粉生物利用率,提升饲料营养价值。

关键词：玉米蛋白粉可溶性蛋白多肽发酵饲料

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胱天蛋白酶募集域蛋白9的可溶性表达及纯化

中国真菌学杂志 2023年第2期18卷 140-145页

作者：彭敏张晨王珏陈浩孔庆涛桑红南京大学医学院附属金陵医院皮肤科南京210002 南京大学化学化工学院南京210023

目的制备可溶性TrxA-CARD9蛋白及其临床突变型。方法将构建好的原核系统表达质粒转化至大肠杆菌感受态细胞后,通过不同诱导条件筛选合适的表达条件。使用精氨酸辅助目的蛋白进行非变性溶解,并通过聚乙烯亚胺和硫酸铵沉淀法去除核酸和... 详细信息

目的制备可溶性TrxA-CARD9蛋白及其临床突变型。方法将构建好的原核系统表达质粒转化至大肠杆菌感受态细胞后,通过不同诱导条件筛选合适的表达条件。使用精氨酸辅助目的蛋白进行非变性溶解,并通过聚乙烯亚胺和硫酸铵沉淀法去除核酸和杂蛋白,最终利用阴离子交换和肝素亲和色谱柱纯化融合蛋白。结果成功构建表达质粒并纯化融合蛋白,酶切去除TrxA标签后通过质谱鉴定其为可溶性CARD9蛋白。结论成功实现了全长CARD9序列在原核系统中的高可溶性表达,为研究CARD9蛋白生物结构和功能提供了基础,并为寻找治疗真菌感染的潜在靶点和治疗方法提供新思路。

关键词：胱天蛋白酶募集域蛋白精氨酸 Trx-A标签蛋白表达可溶性蛋白

杧果成花过程碳水化合物和可溶性蛋白含量的变化

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中国南方果树 2022年第3期51卷 63-69页

作者：高天瑜郑斌许文天梁清志王松标李蕊曾教科武红霞海南大学园艺学院海口570288 农业部热带果树生物学重点实验室/中国热带农业科学院南亚热带作物研究所广东湛江524091 海南省热带园艺采后处理与保鲜重点实验室广东湛江524091

以“南多美”和“椰香”两个杧果品种为试验材料,调查其物候期、抽梢率和成花率,选取花芽分化前后不同发育时期的顶芽,进行碳水化合物和可溶性蛋白含量的测定比较,探讨不同品种杧果成花过程中碳水化合物和可溶性蛋白的变化,为杧果花芽... 详细信息

以“南多美”和“椰香”两个杧果品种为试验材料,调查其物候期、抽梢率和成花率,选取花芽分化前后不同发育时期的顶芽,进行碳水化合物和可溶性蛋白含量的测定比较,探讨不同品种杧果成花过程中碳水化合物和可溶性蛋白的变化,为杧果花芽分化调控提供依据。结果表明,“南多美”和“椰香”在成花的各个时期,果糖、麦芽糖含量持续积累,其含量均以“南多美”含量高于“椰香”。两个品种的葡萄糖变化趋势不同,“南多美”呈先升后降,而“椰香”呈不断升高的趋势;蔗糖在花芽分化早期消耗,后期大量积累。两个品种的淀粉含量在成花过程中趋于稳定,可溶性蛋白不断积累;碳水化合物与可溶性蛋白含量的比值在成花早期增加,后期降低。“南多美”成花率显著高于“椰香”,且成花率与果糖、麦芽糖和可溶性蛋白含量均显著正相关,相关系数分别为0.816、0.506和0.456。说明杧果成花过程中碳水化合物和可溶性蛋白的积累有利于花芽分化,进入花芽分化期后,两者比值以易成花的“南多美”显著高于难成花的“椰香”。

关键词：杧果 “南多美” “椰香” 顶芽成花碳水化合物可溶性蛋白

基于近红外光谱的大豆叶片可溶性蛋白含量快速检测（英文）

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农业工程学报 2018年第18期34卷 187-193页

作者：张亚坤罗斌宋鹏潘大宇路文超周亚男王成赵春江东北农业大学电气与信息学院哈尔滨150030 北京农业智能装备技术研究中心北京100097 国家农业智能装备工程技术研究中心北京100097

可溶性蛋白是植物生化及抗性生理研究的重要指标之一。快速、准确、无损测定可溶性蛋白含量对作物生长状况的动态监测及抗性作物品种的筛选具有重要意义。近红外光谱具有快速、简单方便、非破坏性的特点,已在农业、食品、化工等领域广... 详细信息

可溶性蛋白是植物生化及抗性生理研究的重要指标之一。快速、准确、无损测定可溶性蛋白含量对作物生长状况的动态监测及抗性作物品种的筛选具有重要意义。近红外光谱具有快速、简单方便、非破坏性的特点,已在农业、食品、化工等领域广泛应用,尤其是近年来基于光谱技术快速无损的获取作物生理生化信息的研究已成为当前农业领域研究的热点。本文采用近红外光谱技术结合化学计量学方法以实现大豆叶片可溶性蛋白含量的快速无损检测。首先,采用Savitzky-Golay平滑(SG)、一阶导数(1-Der)、二阶导数(2-Der)等7种光谱预处理方法分别建立大豆叶片可溶性蛋白含量的偏最小二乘(PLS)预测模型,经对比发现SG预处理方法为大豆叶片可溶性蛋白含量预测的最优光谱预处理方法。其次,分别采用连续投影算法(SPA)、随机蛙跳(RF)和遗传算法(GA)对SG预处理后的光谱数据进行特征波长提取。最后,基于提取的特征波长分别建立了大豆叶片可溶性蛋白含量的SPA-PLS、RF-PLS和GA-PLS预测模型,发现基于SPA提取的11个特征波长建立的大豆叶片可溶性蛋白含量SPA-PLS模型具有最佳的预测效果,其预测集相关系数(R2p)为0.864,预测均方根误差(RMSEP)为1.894 mg/g,预测偏差为2.061(RPD)。上述结果表明,应用近红外光谱技术检测大豆叶片中可溶性蛋白含量是可行的,可为大豆生长状况动态监测及抗性大豆品种的筛选提供新的方法。

关键词：近红外光谱大豆叶片可溶性蛋白连续投影算法偏最小二乘算法

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丹凤牡丹花蕊可溶性蛋白提取及性质研究

中国食品添加剂 2022年第7期33卷 67-74页

作者：夏迎利罗磊杨浩昆河南科技大学食品与生物工程学院洛阳471000

目的:为丹凤牡丹花蕊资源化利用和产品开发提供科学依据。方法:在单因素实验基础上,采用响应面法对丹凤牡丹花蕊可溶性蛋白提取工艺进行优化设计,并对花蕊可溶性蛋白的溶解性、持水及持油性、乳化及乳化稳定性、十二烷基硫酸钠聚丙烯酰... 详细信息

目的:为丹凤牡丹花蕊资源化利用和产品开发提供科学依据。方法:在单因素实验基础上,采用响应面法对丹凤牡丹花蕊可溶性蛋白提取工艺进行优化设计,并对花蕊可溶性蛋白的溶解性、持水及持油性、乳化及乳化稳定性、十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和红外光谱进行分析。结果:牡丹花蕊的最佳提取工艺为pH 9.5、料液比1∶30g/mL、超声功率250W、超声时间40min,此时蛋白质提取率高达69.74%;在温度为60℃时,花蕊蛋白的功能性达到最优,二级结构主要为β-折叠,SDS-PAGE图显示其亚基分子量大部分分布在14~42Kda。结论:超声辅助碱提酸沉法能有效提取丹凤牡丹花蕊中的可溶性蛋白,且保留其优良的功能性质,在食品加工应用中具有巨大的潜力,可为丹凤牡丹花蕊作为食品原料进一步进行深加工提供参考。

关键词：丹凤牡丹花蕊资源化利用工艺优化可溶性蛋白功能性