检索结果-南通市图书馆

柯萨奇病毒B组1型感染叙利亚金黄地鼠动物模型建立

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国比较医学杂志 2023年第4期33卷 50-56页

作者：李咏洁张伟杨凤梅李艳艳段素琴唐洁孙文亭靳玮华邓自君李明学张名马绍辉和占龙中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所昆明650118 西安交通大学医学部第一附属医院西安710061

目的建立叙利亚金黄地鼠CVB1(Coxsackievirus B1,CVB1)感染动物模型。方法取叙利亚金黄地鼠经鼻腔滴注方式呼吸道感染CVB1,感染剂量每只为10^(7.25)CCID_(50)。观察14 d体重、体温、精神状态、皮肤黏膜变化、行为、粪便状态、是否有神... 详细信息

目的建立叙利亚金黄地鼠CVB1(Coxsackievirus B1,CVB1)感染动物模型。方法取叙利亚金黄地鼠经鼻腔滴注方式呼吸道感染CVB1,感染剂量每只为10^(7.25)CCID_(50)。观察14 d体重、体温、精神状态、皮肤黏膜变化、行为、粪便状态、是否有神经症状等临床情况;每天采集咽拭子、鼻灌洗液以及粪便进行病毒载量检测,感染第7天取3只实施安乐死,采血进行病毒载量及生化检测;同时采集脑、心脏、肝等多个组织样品进行病毒载量、组织病理学和IHC检测。结果感染CVB1病毒的动物在14 d内均出现不同程度精神萎靡、体温下降,以及口唇部出现典型的红疹及疱疹等类似人类手足口病临床表现。咽拭子、鼻灌洗液、粪便以及血液中能检测到病毒;组织中检测到病毒载量并观察到病毒抗原,同时伴有炎症、增生、出血等病理改变;血清酶中肝功、心肌酶升高。结论CVB1病毒经滴鼻方式感染叙利亚金黄地鼠建立的感染模型,表现出心肌和肝等组织器官的病理损伤特征,可用于人类手足口病的研究。

关键词：柯萨奇病毒B组1型叙利亚金黄地鼠手足口病

叙利亚金黄地鼠血管平滑肌细胞的分离、培养及鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

山东医药 2020年第23期60卷 21-24页

作者：李晓杰覃瑛周谊霞贵州医科大学护理学院贵阳550004 贵州医科大学附属医院

目的分离、培养叙利亚金黄地鼠的血管平滑肌细胞,并对其进行鉴定及生长观察。方法取3~4周龄雄性叙利亚金黄地鼠2只,处死后取主动脉,采用组织块贴壁法对血管平滑肌细胞进行分离、原代和传代培养。采用倒置相差显微镜对原代培养3 d后的细... 详细信息

目的分离、培养叙利亚金黄地鼠的血管平滑肌细胞,并对其进行鉴定及生长观察。方法取3~4周龄雄性叙利亚金黄地鼠2只,处死后取主动脉,采用组织块贴壁法对血管平滑肌细胞进行分离、原代和传代培养。采用倒置相差显微镜对原代培养3 d后的细胞及前3代传代细胞进行形态学观察。取第3代对数生长期的血管平滑肌细胞,采用细胞免疫荧光技术观察平滑肌细胞特异性标志因子平滑肌肌动蛋白α(α-SMA)、平滑肌22α(SM22α)染色情况,采用CCK-8法检测细胞培养1~7 d的增殖能力(OD值)。结果原代培养3~5 d,有少量血管平滑肌细胞从组织中爬出,呈贴壁生长;原代培养7~9 d,细胞呈梭形或三角形,生命力旺盛,折光度好;原代培养9 d后,细胞增殖能力明显增强,细胞数量增多,细胞与细胞间排列紧密,出现"峰-谷"状特征;原代培养15 d左右可以进行传代培养。前3代传代细胞与原代细胞相比,形态无明显变化。细胞免疫荧光结果显示,α-SMA、SM22α将细胞质染成绿色,血管平滑肌细胞纯度>95%。血管平滑肌细胞培养1~7 d的OD值分别为0.4373±0.0215、0.4600±0.0188、0.6143±0.0225、0.8453±0.0274、0.8625±0.0240、0.8280±0.0271、0.8160±0.0202。结论成功采用组织块贴壁法分离培养出叙利亚金黄地鼠原代血管平滑肌细胞,细胞传代后2~4 d处于对数生长期,是进行后续实验的最佳时期。

关键词：血管平滑肌细胞原代培养细胞鉴定叙利亚金黄地鼠

叙利亚金黄地鼠高脂血症和动脉粥样硬化模型快速建立及药效学评价关键技术研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

叙利亚金黄地鼠高脂血症和动脉粥样硬化模型快速建立及药效学评价...

作者：杨康敏北京协和医学院

学位级别：硕士

高脂血症和动脉粥样硬化病理改变是冠心病最重要的诱发因素。制作近人类、质量可控、可重复、规范化、评价指标系统化的高脂血症和动脉粥样硬化动物模型不仅能为心脑血管疾病基础与临床病理生理研究提供合适的病理模型,同时也能为心脑... 详细信息

高脂血症和动脉粥样硬化病理改变是冠心病最重要的诱发因素。制作近人类、质量可控、可重复、规范化、评价指标系统化的高脂血症和动脉粥样硬化动物模型不仅能为心脑血管疾病基础与临床病理生理研究提供合适的病理模型,同时也能为心脑血管创新药物临床前药效学评价提供技术支持。现有研究发现大鼠等啮齿类高脂血症和动脉粥样硬化动物模型在脂质损害易感性及脂代谢特点与人类存在较大差异等缺陷,而金黄地鼠与其他动物相比在脂代谢方面与人类具有更多的相似之处。本研究采用高脂饲料（HFHC）和超高脂饲料（extra-HFHC）两种配方进行造模,快速诱导出高脂血症和动脉粥样硬化模型,同时综合应用血脂测定和脂蛋白分离、超声影像分析、全血细胞分析等技术,分别对短、中、长期（4、21、42周）高脂血症模型组造模前和造模后第1、2、3、6、9、12、15、18、21、23、26、34和42周血脂水平进行动态连续监测;对中、长期（21、42周）动脉粥样硬化模型组造模前和造模后第3、6、9、14、16、20、24和42周血脂水平进行动态连续监测;采用脂蛋白分离、组织病理学和分子生物学等方法对不同时期实验终点动物脂蛋白、脂质损害靶器官形态学和脂代谢相关蛋白群表达进行观察,并与大鼠和人类进行初步种属差异性比较。结果显示：①给予高脂饲料1周后,高脂血症模型动物血清极低密度脂蛋白胆固醇（VLDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）,高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和甘油三酯（TG）水平显著上升,至18周时血脂水平出现下降并进入平稳期;给予高脂饲料3周后,动脉粥样硬化模型组血脂大幅度迅速上升,3周后血脂水平出现下降并进入平稳期。②脂蛋白图谱分析结果表明,高脂血症模型短期组血清中极低密度脂蛋白（VLDL）和低密度脂蛋白（LDL）水平显著增加,高密度脂蛋白（HDL）水平不变;高脂血症模型中期和长期组血清VLDL水平仍保持较高水平,HDL水平显著下降。动脉粥样硬化模型中、长期组血清VLDL和LDL水平显著升高,HDL水平不变;动脉粥样硬化模型中期组高密度脂蛋白胆固醇运载能力显著上升,长期组与正常对照组相比无显著变化,提示动脉粥样硬化模型动物体内血脂紊乱程度呈恶化趋势。③超声影像学和病理学结果显示,高脂血症模型短期组动物肝脏出现脂质堆积,且随造模时间的延长脂肪肝病变加重;高脂血症模型中期组主动脉弓部内模-中膜最大厚度显著增加。动脉粥样硬化模型中期动物主动脉弓部和根部都形成向内腔突起的斑块,长期组斑块数量增多,切面积增大。④高脂血症模型短期组肿瘤坏死因子-α和白介素-10显著高于正常对照组。动脉粥样硬化模型中期组动物白细胞总数、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞数目显著上升,肝脏中肿瘤坏死因子-α显著高于正常对照组,而白介素-1p显著低于正常对照组。长期组肿瘤坏死因子-α、白介素-1β、白介素-6和白介素-10显著低于正常对照组。⑤蛋白表达分析结果表明,高脂血症模型和动脉粥样硬化模型动物肝脏固醇反应元件结合蛋白2（SREBP2）表达始终呈现下调趋势。高脂血症模型短、中、长期组与正常组对比肝脏羟甲戊二酰辅酶A还原酶（HMGCR）表达无显著变化,短期组肝脏B型清道夫受体I（SR-BI）表达上调,中期和长期组肝脏低密度脂蛋白受体（LDL-R）、固醇O-酰基转移酶（SOAT1）和SR-BI表达显著下降,长期组动物肝脏ATP结合盒转运子1（ABCA1）表达显著上升,卵磷脂胆固醇酰基转移酶（LCAT）表达显著下降。动脉粥样硬化模型中期组动物肝脏HMGCR表达无显著变化,IDL-R和胆固醇7α羟化酶（CYP7A1）表达显著下降,ABCA1表达显著上升,长期组动物肝脏中SREBP2、HMGCR、LDL-R, SR-BI、SOAT1、LCAT、CYP7A1的表达显著低于正常对照组,ABCA1表达水平显著高于正常对照组。⑥初步种属差异性比较表明：与大鼠相比,金黄地鼠脂蛋白谱与人类更为相近,对膳食中胆固醇和甘油三酯敏感性更高。采用高脂喂饲法可快速建立金黄地鼠高脂血症和动脉粥样硬化模型,应用各种检测技术方法,对金黄地鼠血脂、脂蛋白、脂毒性靶器官和脂代谢相关蛋白表达变化进行系统的探索性研究,初步阐明了该模型的规律特点,为该模型评价提供系统的技术方法。

关键词：叙利亚金黄地鼠高脂血症动脉粥样硬化动物模型脂蛋白图谱

果糖联合高脂饮食对叙利亚金黄地鼠糖脂代谢影响的研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

果糖联合高脂饮食对叙利亚金黄地鼠糖脂代谢影响的研究

作者：叶文慧南方医科大学

学位级别：硕士

研究背景近年来,由于物质生活水平的提高、体力劳动的减少和口老龄化进程加快,糖尿病在世界范围内的患病率呈急剧上升趋势,已经成为继心脑血管疾病、恶性肿瘤之后导致人类整体健康水平下降的罪魁祸首之一。目前全球拥有超过2.4亿人... 详细信息

研究背景近年来,由于物质生活水平的提高、体力劳动的减少和口老龄化进程加快,糖尿病在世界范围内的患病率呈急剧上升趋势,已经成为继心脑血管疾病、恶性肿瘤之后导致人类整体健康水平下降的罪魁祸首之一。目前全球拥有超过2.4亿人已经被诊断为糖尿病,专家预测到2025年,全球估计将有3.5亿人以上罹患糖尿病。2009年公布的“中国糖尿病及代谢综合征流行病学调查”的最新数据显示,20岁以上的城市、乡镇和富裕农村人群中,糖尿病患病率已达9.7%,另外还有15%的人处于糖调节异常阶段。如果不采取有效的防治手段,糖尿病可能成为21世纪人类将面临的一场新的灾难。果糖（Fructose, FRU）一般制成晶体或者糖浆作为商业用途。在过去的20年里,果糖作为甜味剂在加工食品及软性饮料中从20%增加至30%,这和同期剧烈上升的肥胖发生率相似。有研究提示,日常高脂饮食、喝大量果糖的软饮料所导致的超重和肥胖,与高果糖高脂导致的高甘油三酯血.症、代谢综合征、糖耐量受损、胰岛素抵抗的发生密切相关,但果糖如何导致甘油三酯增高、非酒精性脂肪肝,如何导致胰岛素抵抗、使机体出现胰岛素敏感性降低,继而出现糖耐量受损,其确切的分子机制尚未完全阐明。所以,对此作进一步的研究,阐明其机制并针对其发生机制采取相应的干预措施,对预防肥胖、糖尿病及代谢综合症的发病意义重大。而对其相关发病机制的进一步研究,就需要建立一种与现代人饮食模式相似、糖脂代谢亦与人类相似的动物模型。既往有文献指出：兔、大鼠或小鼠模型在脂质代谢方面均与人类有较大差别,小鼠血量少,不利于血生化分析及实验设计,用上述动物作为研究现代社会人类高糖高脂饮食的动物模型,具有一定的局限性。另一方面,有研究表明,叙利亚金黄地鼠,特别是雄性金黄地鼠,在糖脂代谢方面与人类最接近,可能是糖脂代谢紊乱建模的新选择。大量证据表明脂肪组织不仅是能量的储存所更是重要的内分泌器官,脂肪组织生成和释放许多生物活性分子,通过局部和全身作用,协调能量代谢、胰岛素敏感性、炎症和血管反应等。脂肪型脂肪酸结合蛋白（Adipocyte fatty acid binding protein, A-FABP）主要表达于脂肪细胞和巨噬细胞,它作为脂肪酸的转运蛋白,影响着脂肪酸的代谢及脂肪酸信号,与糖尿病和动脉粥样硬化密切相关。是成熟脂肪细胞中的量最大的蛋白,属于脂肪酸绑定蛋白家族中的一员,在组织细胞间脂肪酸运输及能量代谢中有重要作用。最近有动物模型研究提不A-FABP可能在糖自动调节机能中有重要作用,且发现糖代谢紊乱与A-FABP水平显著相关。本实验通过检测A-FABP在不同膳食组中的变化,探讨其与血糖升高、胰岛素抵抗、胰岛素敏感性降低之间的相关性。综上所述,本课题选择叙利亚金黄地鼠为研究对象,通过不同高脂膳食成分饲料诱导方式,建立更接近现代人膳食成分糖脂紊乱的动物模型,为目前糖尿病、肥胖、代谢综合征、高甘油三酯血症、非酒精性脂肪肝的发生机制及其早期干预研究提供动物模型。并同时了解在不同膳食喂养条件下A-FABP浓度变化,研究其与胰岛素抵抗的关系。研究目的以不同成分膳食喂养叙利亚金黄地鼠,通过设正常对照组、高脂组、高脂+葡萄糖组、高脂+果糖组,观测叙利亚金黄地鼠体重、血清糖脂水平、胰岛素、A-FABP浓度、肝指数及肝脏和胰腺组织形态变化。对比分析正常与病理状态下叙利亚金黄地鼠糖脂变化可能发生机制。旨在建立更接近现代人饮食习惯的糖脂代谢异常动物模型。研究方法 1.随机选取12周健康雄性叙利亚金黄地鼠,分为四组,每组6只。正常对照组（N组）用普通饲料喂养,单纯高脂组（HF组）用单纯高脂饲料喂养,葡萄糖高脂组（HF+GLU组）用20%葡萄糖糖溶液+高脂饲料喂养,高脂果糖组（HF+FRU）用20%果糖溶液+高脂饲料喂养。共喂养12周,分别在第0、1、2、6、12周测体重、酶法测定金黄地鼠血清甘油三酯、胆固醇、血糖水平。 2.12周末处死金黄地鼠,暴露腹腔,心脏取血3-4mL,室温下静置30min 3000rP离心15min,取血浆10μL分装保存于-80℃冰箱备检。肉眼观察肝及胰腺,肝脏称重,计算肝指数（肝指数=肝脏质量/体质量×100%）。留取肝脏叶、分离胰腺,立即投入10%甲醛溶液固定,逐级乙醇脱水,二甲苯透明,石蜡包埋切片,HE染色,光学显微镜下观察各组金黄地鼠肝组织学变化。 3. ELISA法测定各组金黄地鼠血清胰岛素及A-FABP浓度：采用美国R＆D公司大鼠血清A-FABP试剂盒及血清胰岛素试剂盒,即酶联免疫吸附法测定血清A-FABP及胰岛素浓度。严格按说明书操作,批内差异11%,批间差异10%。计算胰岛素敏感指数：胰岛素敏感指数ISI=LIN 1/（空腹血糖值FBG×空腹血清胰岛素值FIN）。 4.统计学分析：采用SPSS 13.0统计软件进行分析,数据以X±s表示,多组比

关键词：叙利亚金黄地鼠高脂果糖血清A-FABP

新型冠状病毒不同毒株初次或再次感染金黄地鼠后诱导的免疫反应

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国病毒病杂志 2023年第6期13卷 413-418页

作者：徐秀丽孙凯丽王如玉范慧芬夏云翔张秋卢佳李新国武汉生物制品研究所有限责任公司新发传染病研究室、武汉生物制品研究所有限责任公司生物安全三级实验室湖北武汉430207

目的分析新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)原型(Prototype)株、德尔塔(Delta)株及奥密克戎BA.1(Omicron BA.1)株在叙利亚金黄地鼠中初次感染和再感染的免疫反应和交叉保护效果。方法30只5~6周龄金黄地鼠随机分为初次感染组和再次感染组。初次感染组为腹腔感染SARS-CoV-2 Prototype、Delta或Omicron BA.1株,每种毒株感染5只地鼠。感染后第2、4、7、9、14天收集地鼠眼眶静脉丛血清样本,检测中和抗体水平;感染后第14天安乐死地鼠并收集动物肺、鼻甲组织检测病毒拷贝数。再次感染组在感染后第14天再次腹腔感染同类型毒株,并在再次感染后第14天安乐死地鼠并收集动物肺、鼻甲组织和血清样本。在整个实验过程中监测动物体质量。结果初次感染组中,所有感染组动物的体质量都增加,Omicron BA.1、Delta、Prototype感染组动物体质量分别由感染前的(101.29±9.13)、(109.04±2.08)、(113.51±3.19)g增加至感染后第14天的(142.67±7.34)、(150.48±9.36)、(144.96±7.34)g,分别增加了41.55%、38.04%和27.68%;初次感染组从第7天开始所有感染组均可检测到相应的中和抗体。除Omicron BA.1感染组在第14天中和抗体水平下降外,Prototype和Delta感染组抗体水平逐渐增加。在第14天时,Prototype、Delta和Omicron BA.1感染后诱导的动物体内中和抗体几何平均滴度(geometric mean titer,GMT)分别为499、844和48。Prototype、Delta和Omicron BA.1毒株再次感染组动物体质量增加(分别增加12.65%、12.60%和14.12%)都小于初次感染组,Prototype、Delta再次感染组地鼠的肺和鼻甲组织中的病毒拷贝数[M(Q_(25),Q_(75))]分别为3.17(2.77,3.83),3.03(2.58,3.51),0(0,3.68)和4.40(3.50,4.91);Omicron BA.1感染组病毒载量为阴性且显著降低(P<0.01)。Prototype和Delta之间有较强的交叉免疫原性,Prototype和Delta对Omicron BA.1变异株的交叉反应性较弱。结论Omicron新变异株具有较弱的复制能力和致病性,与其他毒株的中和抗体交叉反应性较弱,迫切需要研究针对新变异株的疫苗或具有更广泛保护作用的疫苗。

关键词：叙利亚金黄地鼠 SARS-CoV-2 再次感染交叉免疫原性

白菜营养及其生物活性物质对金黄地鼠脂类代谢生理的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

白菜营养及其生物活性物质对金黄地鼠脂类代谢生理的影响

作者： Emal Naseri 南京农业大学

学位级别：硕士

不结球白菜(Brassica rapa ssp.chinensis)是一种重要的一二年生叶类蔬菜,对人体健康非常有益。它富含多种营养成分和生物活性物质。营养类化合物如维生素、矿物质和膳食纤维,非营养类生物活性化合物如黄酮、花青素、山奈酚和槲皮素等... 详细信息

不结球白菜(Brassica rapa ssp.chinensis)是一种重要的一二年生叶类蔬菜,对人体健康非常有益。它富含多种营养成分和生物活性物质。营养类化合物如维生素、矿物质和膳食纤维,非营养类生物活性化合物如黄酮、花青素、山奈酚和槲皮素等这些生物活性成分。这些化合物对癌症和炎症,老年痴呆症,心血管疾病等多种慢性疾病具有较好的治疗效果。虽然不结球白菜是人们日常饮食中的大宗蔬菜,受广大消费者欢迎,但是,其对健康的影响相关研究不足。本研究以‘苏州青’、‘紫罗兰’为试验材料,将其添加到高脂肪的饲料中,研究这两个品种的不结球白菜对金黄地鼠生长,脂质代谢和相关基因表达的影响,观察其在地鼠血液,肝脏中的积累情况。将56只雄性叙利亚金黄地鼠(6月龄)随机分为6组:普通饲料(A),高脂饲料(B),高脂饲料+5%“苏州青’’(C),高脂饲料+7%“苏州青”(D),高脂饲料+5%“紫罗兰’’(E),高脂饲料+7%的“紫罗兰”(F),连续喂养56天,在第0、28和56天,收集血液和肝样品以检查脂质分布,肝脏功能相关酶类活性,组织形态学和相关基因表达。结果表明,与A组相比,B组的总胆固醇,甘油三酸酯,低密度脂蛋白胆固醇,丙氨酸氨基转移酶,天冬氨酸氨基转移酶和碱性磷酸酶水平显着增加,而高密度脂蛋白胆固醇水平受损(P叙利亚金黄地鼠抗肥胖和抗高血脂的作用。结果表明,与普通饲料相比,高脂饲料使金黄地鼠的体重增加了 24.50%,但是分别添加7%苏州青和紫罗兰与高脂组相比,可使金黄地鼠体重分别减少了 11.01%和17.20%。更重要的是高脂饲料+7%“苏州青”和高脂饲料+7%的“紫罗兰”组中的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)的抗氧化活性显着更高(P金黄地鼠具有抗肥胖和抗高血脂症的保护作用。7%的紫罗兰补品对预防肥胖和高血脂症具有显著作用。总之,在饮食中添加不同量的白菜可极大地改善血脂水平,增强肝酶活性,抗氧化活性和相关基因的表达。此外,添加了 7%‘紫罗兰’叶片饲喂的金黄地鼠比其它组效果更好,这表明富含花青素的品种‘紫罗兰’是减少脂肪和保持健康的绝佳选择。

关键词：不结球白菜植物化学物营养物质叙利亚金黄地鼠血脂分析肝酶组织形态学肥胖抗氧化能力基因表达

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

果糖联合高脂饮食对金黄地鼠糖脂代谢的影响

中国糖尿病杂志 2011年第11期19卷 858-861页

作者：叶文慧孙嘉蔡德鸿孙侃张桦陈宏杨力南方医科大学珠江医院内分泌代谢科广州510282

目的通过果糖或葡萄糖联合高脂饮食喂养叙利亚金黄地鼠,比较不同饮食成分喂养对地鼠糖脂代谢的不同影响。方法将金黄地鼠随机分成正常对照组(NC)、高脂组(HF)、果糖高脂组(FRU+HF)、葡萄糖高脂组(Glu+HF),喂养12周,测定体重、血脂、血... 详细信息

目的通过果糖或葡萄糖联合高脂饮食喂养叙利亚金黄地鼠,比较不同饮食成分喂养对地鼠糖脂代谢的不同影响。方法将金黄地鼠随机分成正常对照组(NC)、高脂组(HF)、果糖高脂组(FRU+HF)、葡萄糖高脂组(Glu+HF),喂养12周,测定体重、血脂、血糖、胰岛素、肝指数,观察肝脏及胰腺形态及组织学变化。结果各高脂喂养组地鼠与对照组比较TC、TG、血糖、LDL-C、HDL-C、肝指数升高,胰岛素水平降低,肝脂肪样变,胰岛增生,其中FRU+HF组TG、胰岛素敏感性降低,肝指数升高,肝及胰岛病理变化更明显(P金黄地鼠模型特点为TG显著增高、糖耐量减低、胰岛素抵抗及脂肪肝,更适合作为现代人高果糖高脂饮食导致糖脂代谢紊乱的研究模型。

关键词：血脂异常叙利亚金黄地鼠果糖

诱导型金黄地鼠胰腺癌模型的建立与磁共振成像（MRI）研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

诱导型金黄地鼠胰腺癌模型的建立与磁共振成像（MRI）研究

作者：马青松川北医学院

学位级别：硕士

目的：建立N-亚硝基双（2-氧丙基）胺[N-Nitrosobis（2-oxopropyl）amine, BOP]诱导型金黄地鼠胰腺癌模型,探讨金黄地鼠胰腺及胰腺癌的MR表现。材料与方法：雌性叙利亚金黄地鼠101只,依体质量大小,采取随机排列表法,随... 详细信息

目的：建立N-亚硝基双（2-氧丙基）胺[N-Nitrosobis（2-oxopropyl）amine, BOP]诱导型金黄地鼠胰腺癌模型,探讨金黄地鼠胰腺及胰腺癌的MR表现。材料与方法：雌性叙利亚金黄地鼠101只,依体质量大小,采取随机排列表法,随机分为3组：健康组（第1组）,5只,用于金黄地鼠正常胰腺解剖及MR成像研究。BOP处理组（第2组）,80只,均分为8.个亚组,按10mg·kg-1·W-1分别皮下注射BOP,持续7周,建立BOP诱导型胰腺癌模型;NACL处理组（第3组）,16只,均分为8个亚组,分别皮下注射等量生理盐水作为造模对照组。所有实验鼠均使用GE 1.5T MR扫描仪,并运用小鼠专用动物实验线圈,行横断面及冠状面MR成像,扫描序列为横断面SE T1W.SPGR T1W.FRFSE T2W、冠状面SPGR T1W、FRFSE T2W。将MR数据传输至GEAW4.1工作站。在第1组中,观察：①胰腺的形态、大小及轮廓;②胰腺的分布;③胰腺信号特点：④胰腺的毗邻关系。扫描后剖腹观察,与MR发现对照;在胰腺周围放置装水的塑料软管,将腹腔器官、组织还原后,进行第2次MR扫描,以明确胰腺MR表现。过度麻醉法处死金黄地鼠,并完整取出胰腺供解剖及组织学研究。首次注射后第11周开始,至第25周,每两周1次,对第2组及第3组进行MR成像。在MRI上观察：①肿瘤位于胰腺的部位;②肿瘤数量;③肿瘤形态、轮廓;④测量肿瘤的大小及体积,⑤肿瘤与周围组织的关系。⑥肿瘤信号特点。每次MR扫描后,立即处死各1个亚组,剖腹肉眼观察,与MR发现对照,记录胰腺及肿瘤的肉眼观察结果,完整取下标本,称取肿瘤质量,测量肿瘤直径与体积;10%福尔马林液固定标本,石蜡包埋,常规切片,HE染色,由病理科医师对所有切片行组织病理学诊断。将BOP诱导发生的胰腺病变按进展过程分为不典型导管增生（atypical ductal hyperplasia, ATH）、原位癌（carcinoma in situ, CIS）、浸润癌（invasive carcinoma, CA）三类。结果：活体金黄地鼠胰腺呈淡粉红色,被覆透明浆膜,分为三叶,即胃叶、脾叶、十二指肠叶,汇合于胰头,呈三叶草样。5只健康金黄地鼠胰腺胃叶、脾叶、十二指肠叶长径分别为19.60±3.21mm,22.40±3.05mm和9.40±2.07mm。十二指肠叶最短,与其它两叶比较,差异均具有统计学意义（p=0.000）;胃叶、脾叶长径差异没有统计学意义（p＞0.05）。胃叶、脾叶、十二指肠叶短径分别为5.26±0.67mm,4.98±0.47mm,5.48+0.63mm,三者差异没有统计学意义（F=0.891,p＞0.05）。在MRI上,脾叶、胃叶、十二指肠叶、胰头分别在5,4,3,4只鼠中显示;其中,胰腺四部均显示的有2只;三部显示的有2只;两部显示的有1只。脾叶显示呈长条形,位于脾、胃、左肾上极之间,胰尾可达脾门;胃叶位于胃壁后缘及右缘;十二指肠叶位于胃窦后,紧贴十二指肠,形态不规则;三叶结构汇合于胰头。显示的胰腺信号均匀,可见清晰的轮廓。在T1W上,金黄地鼠正常胰腺信号强度低于肝脏,T2W信号强度高于肝实质,这与人类正常胰腺MR信号特点有所不同。在所有的扫描序列,胰腺主胰管及侧支胰管均未见显示。肉眼观察,第2组在18只金黄地鼠中发现23个胰腺肿瘤,其中,1只发现3个胰腺肿瘤,3只发现2个,其余均为单发。其中,7个肿瘤直径＜5.0 mm,16个肿瘤直径≥5.0mm,最小肿瘤直径2.0mm,最大肿瘤直径17.0mm。肿瘤直径中位数6.8mm,体积中位数178.7mm3,质量中位数0.32g。最早于第1次注射BOP后15周发现胰腺结节。多数肿瘤呈粉红或肉红色,部分肿瘤为红白相间色。部分肿瘤表面不规整,略呈分叶状。剖开肿瘤,可见出血及坏死灶。肿瘤较大时与周围组织结构分界不清,不易剥离。病理组织学证实,首次注射BOP后第11周,实验组的一个亚组中5只鼠发现不同程度的胰腺ATH;共在65只中发现ATH（81.3%,65/80）。第2组在26只鼠中发现31个胰腺癌,均为胰腺导管腺癌（pancreatic ductal adenocarcinomas, PDAs）,发病率32.5%（26/80）。其中,最早于第1次注射BOP后13周发现CIS,共在9只鼠中发现9个CIS（29.0%,9/31）;最早于第19周发现CA,实验组共在17只鼠中发现22个CA（71.0%,22/31）。所有荷瘤鼠均伴有ATH,所有没有发现ATH的地鼠均未发现PDAs。肉眼发现的23个肿瘤中,20个为CA,3个为CIS;肉眼未能发现的8个PDAs中2个为CA,6个为CIS。在PDAs周围可见不同程度的结缔组织增生及炎细胞反应。第2组共75只金黄地鼠完成1次或多次MR扫描;

关键词：叙利亚金黄地鼠胰腺癌动物模型磁共振成像

超微结构及免疫组化染色下观察藓化饮对金黄地鼠颊黏膜癌前病变的逆转作用

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

超微结构及免疫组化染色下观察藓化饮对金黄地鼠颊黏膜癌前病变的...

作者：仇永乐河北医科大学

学位级别：硕士

目的:口腔黏膜癌前病变与口腔癌的发生密切相关,近些年来,为了降低口腔癌的发病率,人们越来越重视对口腔黏膜癌前病变的预防和治疗。目前,口腔黏膜癌前病变的治疗手段较多,主要分为药物治疗和非药物治疗。非药物治疗如手术治疗、激光治... 详细信息

目的:口腔黏膜癌前病变与口腔癌的发生密切相关,近些年来,为了降低口腔癌的发病率,人们越来越重视对口腔黏膜癌前病变的预防和治疗。目前,口腔黏膜癌前病变的治疗手段较多,主要分为药物治疗和非药物治疗。非药物治疗如手术治疗、激光治疗、冷冻治疗等等,有着适应证的局限性。而西药治疗如:增生平、维甲酸等等,长期服用可能会出现一些毒副作用。近年来研究表明,中医中药治疗口腔黏膜癌前病变显示出明显的临床效果,也成为目前口腔黏膜癌前病变研究的热点。本课题通过建立口腔黏膜癌前病变动物模型,应用电镜和免疫组化的方法观察中药藓化饮对口腔黏膜癌前病变的逆转作用。方法:选取SPF级LVG叙利亚金黄地鼠55只,鼠龄六周,体质量80g。按完全随机设计方法将动物分为:空白对照组5只和实验组50只。实验组用于建立口腔黏膜癌前病变动物模型,其中又分为癌前病变对照组10只、藓化饮治疗组30只、生理盐水治疗对照组10只。将实验组50只动物,颊囊黏膜涂以0.5%DMBA丙酮溶液,每周3次,连续涂药6周后,藓化饮治疗组、生理盐水治疗对照组分别灌胃治疗。治疗8周时,各组同步取材。采用电镜及免疫组化方法,观察中药藓化饮对金黄地鼠颊黏膜癌前病变的逆转作用。结果: 1癌前病变动物模型的建立实验组50只动物颊黏膜致癌六周后,双侧颊黏膜肉眼观全部为充血、糜烂、条索状皱折等表现。随机切取10例不同肉眼表现的部分病变部位,HE染色后观察,上皮黏膜表现为不同程度的异常增生。由此说明,经DMBA丙酮溶液致癌六周后,已成功建立金黄地鼠颊黏膜癌前病变的动物模型。 2藓化饮对叙利亚金黄地鼠口腔黏膜癌前病变的逆转作用 2.1肉眼观察空白对照组金黄地鼠颊黏膜表面光滑,呈淡粉色,透亮具有弹性,血管清晰。实验组50只动物涂DMBA丙酮溶液六周后,颊黏膜变得粘连、粗糙、无弹性、充血糜烂,甚至可见条索状皱折。中药藓化饮灌胃八周后,可见颊黏膜皱折减轻,黏膜表面逐渐光滑,充血糜烂面基本消失,但弹性较正常稍差。生理盐水灌胃治疗八周后与治疗前无明显改变。 2.2光镜观察空白对照组金黄地鼠颊黏膜为角化的复层鳞状上皮,上皮和肌层之间为薄层结缔组织及少量散在的纤维细胞和血管。停涂DMBA丙酮溶液八周后,镜下观察金黄地鼠颊黏膜可见不同程度的异常增生。中药藓化饮灌胃治疗八周后,黏膜上皮层次逐渐清晰,上皮层数逐渐恢复正常,基底层细胞排列比较有规则,异型性的细胞减少。生理盐水灌胃治疗八周后与治疗前无明显改变。 2.3扫描电镜观察空白对照组金黄地鼠颊黏膜上皮表现为多边形细胞,细胞间桥很明显,个体细胞表面显示很多网状排列的微嵴,微嵴围成均匀一致的小窝,整个细胞表面呈现一种蜂窝状外观。停涂DMBA丙酮溶液八周,细胞外形更不规则,细胞重叠,松解现象更为突出,微嵴肿胀变宽,不规则排列,呈卵石状外观,蜂窝状结构完全消失。中药藓化饮灌胃治疗八周后,细胞外形逐渐清晰,呈现出多边形。细胞表面大部分区域呈现蜂窝状结构,可见连续的细胞界限。生理盐水灌胃治疗八周与治疗前无明显改变。 2.4透射电镜观察空白对照组金黄地鼠颊黏膜上皮细胞外形规则,细胞紧密相邻,桥粒丰富,张力纤维发育正常,基底膜完整。停涂DMBA丙酮溶液八周后,可见细胞间隙增宽,桥粒大量减少,张力纤维减少,细胞外形不规则,核仁边集,核外形不规则,核膜内陷,可见基底膜断裂。中药藓化饮灌胃治疗八周后,增宽的细胞间隙逐渐减小,桥粒和张力纤维逐渐丰富,细胞外形逐渐规则。生理盐水灌胃治疗八周与治疗前无明显改变。 3藓化饮治疗后EZH2、PCNA在各组免疫组化染色结果 EZH2、PCNA在空白对照组和藓化饮治疗组低表达,而在癌前病变对照组和生理盐水治疗对照组高表达。癌前病变对照组EZH2、PCNA高表达率与空白对照组相比,有显著性差异(P0.05);生理盐水治疗对照组EZH2、PCNA高表达率与藓化饮治疗组相比,有显著性差异(P叙利亚金黄地鼠颊黏膜六周后,能成功建立金黄地鼠颊黏膜癌前病变动物模型。 2藓化饮治疗八周后,叙利亚金黄地鼠颊黏膜充血糜烂面基本消失,细胞外形逐渐清晰,上皮层异型性的细胞减少,EZH2、PCNA高表达率明显下降。说明藓化饮对金黄地鼠颊黏膜癌前病变有明显逆转作用。

关键词：口腔癌前病变叙利亚金黄地鼠藓化饮扫描电镜透射电镜 EZH2 PCNA