检索结果-南通市图书馆

用反转录-聚合酶链反应检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

四川农业大学学报 2005年第2期23卷 244-246,252页

作者：周婷文心田曹三杰肖驰王新张雪锋四川农业大学动物科技学院四川雅安625014

根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型毒株的基因序列设计了一对特异性引物P1/P2,扩增的片段为550bp,根据欧洲型毒株设计了一对特异性检测引物P3/P4,扩增的片段为433bp,建立PRRSV的RT-PCR的检测与血清型鉴别方法。特异性试验表明,这... 详细信息

根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型毒株的基因序列设计了一对特异性引物P1/P2,扩增的片段为550bp,根据欧洲型毒株设计了一对特异性检测引物P3/P4,扩增的片段为433bp,建立PRRSV的RT-PCR的检测与血清型鉴别方法。特异性试验表明,这2对引物均不能扩增其他常见的繁殖障碍相关病毒的RNA或DNA。敏感性试验表明,这2对引物可以分别到检测10-5TCID50和10-4TCID50的病毒含量。利用该方法对重庆、四川某些猪场中临床上疑似为PRRS的20份送检组织样品进行检测,只有引物P1/P2能扩增出与预期大小相符的RT-PCR产物;其中有15份样品呈PRRSV阳性结果,阳性率为75%,说明送检的样品感染的PRRSV为美洲型。试验结果表明该方法快速检测病料组织中PRRSV是可行的,是临床上对PRRS进行快速诊断和分子流行病学调查的实用方法。

关键词：反转录-聚合酶链反应猪繁殖呼吸综合征病毒 RT-PCR

用反转录-聚合酶链反应检测狐狸感染犬瘟热病毒的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

辽宁畜牧兽医 2001年第2期 1-2页

作者：乔军孟庆玲郭新怀许宗运陈创夫新疆维吾尔自治区塔里木农垦大学动物科技学院阿拉尔843300

应用反转录——聚合酶链反应技术成功地从发病银黑狐的脾脏中扩增出一条特异性的核酸带,为狐狸犬瘟热病的诊断提供了一个特异敏感的方法。

关键词：反转录-聚合酶链反应狐狸犬瘟热病毒 RT-PCR 检测方法

犬瘟热病毒反转录—聚合酶链反应检测方法的建立及初步应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

西北农业学报 2001年第1期10卷 51-54,66页

作者：乔军孟庆龄夏咸柱何宏彬塔里木农垦大学动科院新疆阿拉尔843300 解放军军需大学军事兽医研究所长春130062 东北农业大学生命科学院哈尔滨150030

根据 Gen Bank中 Barrett报道的犬瘟热病毒弱毒株 Onderstepoort的血凝蛋白基因序列 ,设计合成了一对能扩增 76 0 bp基因片段的引物。用异硫氰酸胍 -酚 -仿一步抽提法提取细胞总 RNA进行反转录 ,再以此产物为模板进行 PCR扩增 ,筛选出... 详细信息

根据 Gen Bank中 Barrett报道的犬瘟热病毒弱毒株 Onderstepoort的血凝蛋白基因序列 ,设计合成了一对能扩增 76 0 bp基因片段的引物。用异硫氰酸胍 -酚 -仿一步抽提法提取细胞总 RNA进行反转录 ,再以此产物为模板进行 PCR扩增 ,筛选出最佳扩增条件。结果以此对引物进行 PCR扩增能得到与设计片段大小相同的产物 ,并且不扩增犬细小病毒、犬 I型腺病毒、犬冠状病毒、狂犬病病毒的核酸。敏感性试验证实 ,此法能扩增出稀释 1 0 0 0倍的 CDV强毒细胞培养物 ( 1 0 5 .1 TCID5 0 /0 .1 ml)的反转录产物 ,其敏感性远高于电镜负染和荧光抗体染色法。经初步应用表明 ,此法可用于犬瘟热的临床诊断和实验研究。

关键词：犬瘟热病毒反转录-聚合酶链反应检测方法

反转录聚合酶链反应方法诊断肠道小RNA病毒性脑膜炎

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国实用医药 2006年第6期1卷 38-38,30页

作者：关慧臻杨桂梅薛承岩朱长林来锦白海洋承德医学院附属医院河北承德市067000

目的评估RT-PCR方法诊断肠道小RNA病毒性脑膜炎的应用价值。方法对象包括脑膜炎组104例和对照组39例,检测脑脊液中肠道小RNA病毒应用RT-PCR方法。结果脑膜炎组的肠道小RNA病毒阳性率为41.3%(43/104),对照组未测出肠道小RNA病毒阳性结果... 详细信息

目的评估RT-PCR方法诊断肠道小RNA病毒性脑膜炎的应用价值。方法对象包括脑膜炎组104例和对照组39例,检测脑脊液中肠道小RNA病毒应用RT-PCR方法。结果脑膜炎组的肠道小RNA病毒阳性率为41.3%(43/104),对照组未测出肠道小RNA病毒阳性结果。结论肠道小RNA病毒是导致脑膜炎的重要病原体,RT-PCR方法诊断肠道小RNA病毒性脑膜炎具有较高的应用价值。

关键词：脑膜炎肠道小RNA病毒反转录-聚合酶链反应

RT-PCR法在沙门菌检测及血清分型鉴定中的应用价值研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

黑龙江医药 2024年第3期37卷 692-696页

作者：肖芳周志强刘冬梅永新县疾病预防控制中心检验科江西永新343400

目的:探讨反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法在沙门菌检测及血清分型鉴定中的应用价值。方法:选择2022年8月至2024年1月本疾控中心收治的456例腹泻患者的粪便标本,均行细菌培养和RT-PCR检测,记录RT-PCR鉴定沙门菌血清分型结果,以细菌培养... 详细信息

目的:探讨反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法在沙门菌检测及血清分型鉴定中的应用价值。方法:选择2022年8月至2024年1月本疾控中心收治的456例腹泻患者的粪便标本,均行细菌培养和RT-PCR检测,记录RT-PCR鉴定沙门菌血清分型结果,以细菌培养结果作为金标准,分析RT-PCR鉴定沙门菌的价值及其与细菌培养的一致性,对比细菌培养、RT-PCR鉴定沙门菌的费用及操作时间。结果:456例腹泻中经细菌培养共检出沙门菌78株,RT-PCR检出85株,RT-PCR检测敏感度为97.44%(76/78),特异度为96.83%(366/378),准确度为96.93%(442/456),阳性预测值为89.41%(76/85),阴性预测值为99.46%(366/368);RT-PCR鉴定沙门菌结果与细菌培养一致性较高(kappa值=0.897,P<0.001);RT-PCR鉴定结果与细菌培养完全一致有73株,符合率为93.59%,其中里森沙门菌、鼠伤寒沙门菌、德尔卑沙门菌、姆班达卡沙门菌4种优势血清型结果完全一致,而与细菌培养鉴定不一致菌株5株;RT-PCR鉴定沙门菌操作时间为(0.30±0.07)天,费用(100.22±6.52)元,细菌培养鉴定沙门菌的操作时间为(2.82±0.25)天,费用为(300.52±12.16)元,RT-PCR鉴定沙门菌的费用及操作时间均低于细菌培养,差异有统计学意义(P<0.001)。结论:RT-PCR法可准确检出沙门菌,判断沙门菌血清分型,与细菌培养结果具有较高的一致性,且操作用时短、所需费用低,可应用于沙门菌检测。

关键词：沙门菌反转录-聚合酶链反应血清分型细菌培养

酒泉市猪繁殖与呼吸综合征的流行病学监测和分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

畜牧兽医杂志 2024年第2期43卷 121-124页

作者：张翠花张溪赵燕张若玉酒泉市畜牧兽医总站甘肃酒泉735000 肃州区动物疫病防治中心

为掌握酒泉市猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的流行情况,本试验在酒泉市五个农业县市采集638份样品,采用反转录-聚合酶链式反应(荧光RT-PCR)方法进行核酸检测,对不同地域、不同生长期、不同饲养模式的流行情况进行分析。结果显示,638份样品... 详细信息

为掌握酒泉市猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的流行情况,本试验在酒泉市五个农业县市采集638份样品,采用反转录-聚合酶链式反应(荧光RT-PCR)方法进行核酸检测,对不同地域、不同生长期、不同饲养模式的流行情况进行分析。结果显示,638份样品共检测出PRRS核酸阳性样品29份,PRRS阳性感染率为4.55%。不同地域PRRS阳性感染率介于0-7.95%;屠宰场、规模场、散养户PRRS阳性感染率分别为0、2.96、6.82%;种公猪、育肥猪、仔猪、母猪PRRS阳性感染率分别为0、3.1、5.38、6.36%。结果表明,酒泉市PRRS呈散发流行,规模养殖场标准化高,饲养管理模式先进PRRS阳性感染率低,此病仔猪和母猪更容易感染,本试验将对我市PRRS综合防控提供技术支撑。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征酒泉市反转录-聚合酶链反应流行病学监测分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

利用反转录环介导等温扩增技术检测麻疹病毒

中华流行病学杂志 2014年第2期35卷 186-189页

作者：李淑华刘岩曹广文上海市虹口区疾病预防控制中心 200082 第二军医大学基础部流行病教研室

目的建立一种快速检测麻疹病毒的方法。方法以分离到的麻疹病毒RNA为模板，利用环介导等温扩增技术（LAMP）原理，设计合成3套引物，特异型识别病毒基因的8个位点，在反转录酶作用下，63℃扩增60min，80℃2min终止反应，最终产物分别经... 详细信息

目的建立一种快速检测麻疹病毒的方法。方法以分离到的麻疹病毒RNA为模板，利用环介导等温扩增技术（LAMP）原理，设计合成3套引物，特异型识别病毒基因的8个位点，在反转录酶作用下，63℃扩增60min，80℃2min终止反应，最终产物分别经凝胶电泳和荧光目视观察。通过real—time仪实时监测反应过程，同时将该方法的灵敏度、特异度与常规RT-PCR、real-timeRT-PCR进行比较。结果RT-LAMP反应约1h即可完成，最终产物经电泳观察可见大小片段不等的呈梯度的扩增条带，目视显示反应液颜色由黄色变为绿色。灵敏性是常规RT-PCR和real—timeRT-PCR的100倍。结论RT-LAMP方法具有灵敏、特异、快速、简便、成本低等特点，适用于基层和现场使用。

关键词：麻疹病毒反转录环介导等温扩增反转录-聚合酶链反应

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

淡色库蚊细胞色素P450基因研究

生物化学与生物物理进展 2001年第1期28卷 61-66页

作者：朱昌亮李建民高晓红田海生李秀兰沈波吴观陵南京医科大学寄生虫学教研室南京210029

采用一对昆虫细胞色素P45 0简并引物 ,以反转录聚合酶链反应从淡色库蚊对溴氰菊酯敏感品系和抗性品系成虫RNA扩增到约 485bp和 5 10bp两个片段 ,将这两个片段与PinPointTMXa 1T质粒重组 ,然后克隆至大肠杆菌JM 10 9菌株 ,筛选获得 6 ... 详细信息

采用一对昆虫细胞色素P45 0简并引物 ,以反转录聚合酶链反应从淡色库蚊对溴氰菊酯敏感品系和抗性品系成虫RNA扩增到约 485bp和 5 10bp两个片段 ,将这两个片段与PinPointTMXa 1T质粒重组 ,然后克隆至大肠杆菌JM 10 9菌株 ,筛选获得 6 8个阳性克隆 ;其中 2 4个阳性克隆测序后与GenBank资料对照 ,显示为细胞色素P45 0新序列 ;分子系统学研究显示 ,2 4个新基因 (等位基因 )分别属CYP4家族CYP4C、CYP4D、CYP4H和CYP4J等 4个亚家族 ,其已由细胞色素P45 0命名委员会命名和GenBank登录上网 ;其中CYP4C2 3可能是一个假基因 ,CYP4H13具有一段 5 8个碱基长度的内含子 ,CYP4J4V1在近 3′端具有一个终止密码子TAG .

关键词：淡色库蚊库药性细胞色素P450 反转录-聚合酶链反应基因克隆

大鼠睡眠剥夺后下丘脑一氧化氮合酶mRNA表达的变化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

航天医学与医学工程 2003年第3期16卷 175-178页

作者：刘长云季红光周建光钱平平沈慧阮芳铭解放军海军411医院上海200081 第二军医大学军队卫生学教研室上海200433

目的观察快动眼睡眠剥夺大鼠下丘脑神经元型一氧化氮合酶 (nNOS )及诱导型一氧化氮合酶(iNOS )mRNA表达的时相变化。方法小站台水环境法剥夺大鼠睡眠 2 4h、48h及 72h后 ,用半定量逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR )检测其下丘脑nNOS及iNOSm... 详细信息

目的观察快动眼睡眠剥夺大鼠下丘脑神经元型一氧化氮合酶 (nNOS )及诱导型一氧化氮合酶(iNOS )mRNA表达的时相变化。方法小站台水环境法剥夺大鼠睡眠 2 4h、48h及 72h后 ,用半定量逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR )检测其下丘脑nNOS及iNOSmRNA的表达。结果睡眠剥夺 2 4h组nNOSmRNA表达量显著增加 (P <0 .0 1 ) ,剥夺 48h组与对照组比较无显著差异 ,剥夺 72h组nNOSmRNA的表达量低于对照组水平 (P <0 .0 5 ) ;睡眠剥夺 2 4h和 48h组iNOSmRNA的表达量无显著变化 ,但剥夺 72h组iNOSmRNA的表达量大幅度增加 (P <0 .0 1 )。结论睡眠剥夺后NOS基因表达增加 ,可能是睡眠“反跳”现象的机理之一 ;

关键词：睡眠剥夺反转录-聚合酶链反应一氧化氮合酶下丘脑基因表达