检索结果-南通市图书馆

中国畜牧杂志 2008年第3期44卷 49-51,59页

作者：孟令君高建明刘云海刘烈琴张建芳北京农学院动物科学技术系北京102206

研究并建立适合小鼠囊胚的双重荧光染色方法。用建立的双重荧光染色法对小鼠体内外囊胚细胞计数,分别计数囊胚不同时期的内细胞团和滋养层的细胞数,比较不同发育时期囊胚的内细胞团和滋养层细胞的比例,评定体内外囊胚质量。

关键词：双重荧光染色内细胞团滋养层细胞计数小鼠囊胚

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

一种鉴定小鼠胚胎质量的双重荧光染色方法

动物学报 2008年第5期54卷 928-932页

作者：芦天罡郭勇倪和民刘云海北京农学院动物科学技术系北京102206

尝试改进并建立一种较可靠的、适合小鼠胚胎质量参考鉴定的双重荧光染色(细胞计数)方法。与传统方法相比,本实验中抗羊脾细胞抗血清的最佳稀释度为1∶5,作用时间为30min。豚鼠补体最佳稀释度为1∶5,两种分染染料H33342和PI的工作浓度均... 详细信息

尝试改进并建立一种较可靠的、适合小鼠胚胎质量参考鉴定的双重荧光染色(细胞计数)方法。与传统方法相比,本实验中抗羊脾细胞抗血清的最佳稀释度为1∶5,作用时间为30min。豚鼠补体最佳稀释度为1∶5,两种分染染料H33342和PI的工作浓度均降低至5.3μg/ml便可着色,染色时间延长至90min,加大了染料工作液中柠檬酸钠的浓度,并在计数观察前增加压片这一步骤。染色过程中应注意避免血清物质对抗体补体的不良影响以及避光和快速的操作。双重荧光染色后小鼠胚胎内细胞团(ICM)细胞着色为蓝色,滋养层(TE)细胞着色为粉红色,数目清晰可辨。此方法可以作为一种简洁有效的小鼠胚胎质量鉴别参考方法。

关键词：小鼠囊胚双重荧光染色

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

双重荧光染色在妇科阴道炎诊断中的应用价值

中国妇幼保健 2022年第15期37卷 2734-2737页

作者：李翠段忠亮应春妹复旦大学附属妇产科医院上海200011

目的探讨双重荧光染色系统在妇科门诊患者阴道分泌物常规检测中的应用价值。方法收集2020年12月—2021年5月复旦大学附属妇产科医院黄浦分院妇科门诊检查阴道炎的患者标本,同时采用传统的湿片镜检法和双重荧光染色法对患者阴道分泌物... 详细信息

目的探讨双重荧光染色系统在妇科门诊患者阴道分泌物常规检测中的应用价值。方法收集2020年12月—2021年5月复旦大学附属妇产科医院黄浦分院妇科门诊检查阴道炎的患者标本,同时采用传统的湿片镜检法和双重荧光染色法对患者阴道分泌物进行检测分析,比较双重荧光染色法的优势。依据显微镜下形态,报告孢子、假菌丝、线索细胞、滴虫、脓细胞及杂菌等检测项目;并用配对χ^(2)检验分析该染色系统与传统显微镜湿片镜检法的一致性和差异。结果从结果的保存和展示的角度分析,双重荧光染色法可将每位患者的结果分析表现为文字报告的同时,以图片的形式体现在检查报告中,便于直观判断,也便于结果回溯,明显优于传统的湿片镜检法。从结果的阳性率和两种方法的一致性分析,5 625例阴道炎患者中,双重荧光染色法显示菌群失调病例694例,占12.3%,显著高于湿片镜检法的315例,差异有统计学意义(χ^(2)=351.200,P0.05),一致性较好;非特异性阴道炎2 012例,占35.8%,与湿片镜检法的2 004例比较,差异无统计学意义(χ^(2)=8.167,P>0.05),一致性较好。结论双重荧光染色法容易保存结果,且可清晰显示致病菌和患者阴道分泌物菌群分布情况,优于传统湿片镜检法;双重荧光染色系统作为一项新技术,可提高妇科阴道炎患者阴道疾病检出率,值得在妇科门诊中应用推广。

关键词：双重荧光染色传统湿片镜检法阴道炎

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

AO/EB双重荧光染色检测细胞凋亡的研究

郧阳医学院学报 1997年第2期16卷 68-69页

作者：熊琛陈绪云郭怀兰杨靖郧阳医学院微生物学教研室

目的：检测细胞培养中凋亡细胞的形态及数量。方法：取４℃环境下不同时间培养的小鼠胸腺细胞，用ＡＯ／ＥＢ染色后荧光镜观察。结果：荧光镜下早期凋亡细胞发绿色或暗绿色荧光，伴有核结构的变化，晚期凋亡细胞发橙红色荧光并伴有凋亡... 详细信息

目的：检测细胞培养中凋亡细胞的形态及数量。方法：取４℃环境下不同时间培养的小鼠胸腺细胞，用ＡＯ／ＥＢ染色后荧光镜观察。结果：荧光镜下早期凋亡细胞发绿色或暗绿色荧光，伴有核结构的变化，晚期凋亡细胞发橙红色荧光并伴有凋亡小体的形成。结论：ＡＯ和ＥＢ双重荧光染色后，荧光镜检在细胞凋亡检测中既可定性，又可定量。

关键词：荧光染色细胞凋亡双重荧光染色

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

植物和真菌双重荧光染色方法研究

周口师范学院学报 2017年第2期34卷 114-116页

作者：张杰刘军周口师范学院生命科学与农学学院河南周口466001 邓州市成人教育教学研究室河南邓州474100

双重荧光染色便于观察细胞的显微结构,它具有精确、稳定、可靠的优势.通过改进透化细胞壁和增加抗荧光淬灭剂的方法研究了植物细胞和真菌孢子的双重荧光染色的方法.实验结果表明:改进双重荧光染色步骤后能够使植物细胞和真菌孢子在荧光... 详细信息

双重荧光染色便于观察细胞的显微结构,它具有精确、稳定、可靠的优势.通过改进透化细胞壁和增加抗荧光淬灭剂的方法研究了植物细胞和真菌孢子的双重荧光染色的方法.实验结果表明:改进双重荧光染色步骤后能够使植物细胞和真菌孢子在荧光显微镜下显示出清晰的双重荧光.

关键词：双重荧光染色植物真菌

干化学酶法与荧光染色镜检法在阴道分泌物检测中的应用价值探讨

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国科技期刊数据库医药 2024年第10期 0091-0095页

作者：刘志伟周志红武汉市蔡甸区妇幼保健院湖北武汉430100

探讨干化学酶法与双重荧光染色镜检法在妇科门诊阴道分泌物检测中的应用价值。方法收集2023年4月至2023年5月武汉市蔡甸区妇幼保健院门诊检查阴道炎的119例女性患者标本,同时采用常规湿片镜检法、双重荧光染色镜检法和干化学酶法对阴... 详细信息

探讨干化学酶法与双重荧光染色镜检法在妇科门诊阴道分泌物检测中的应用价值。方法收集2023年4月至2023年5月武汉市蔡甸区妇幼保健院门诊检查阴道炎的119例女性患者标本,同时采用常规湿片镜检法、双重荧光染色镜检法和干化学酶法对阴道分泌物进行检测,结果进行比较分析。结果三种检测方法的阳性率以及两两检测方法的结果一致性分析显示,双重荧光染色镜检法检测出霉菌性阴道炎35例,占29.4%,高于湿片镜检法的26.9%和干化学酶法的21.8%,差异具有统计学意义(Cochrant-Q为7.00,P双重荧光染色镜检法和湿片镜检法对霉菌的检测结果的一致性较好;干化学酶法显示细菌性阴道炎51例,占42.9%,高于湿片镜检法的32.8%和双重荧光染色镜检法的34.5%,差异具有统计学意义(Cochrant-Q为7.75,P荧光染色镜检法在检测阴道分泌物辨别真菌和滴虫方面具有更高的准确性和特异性,而干化学酶法对于细菌性阴道炎有较高的检出率,可以结合这2种方法,以提高临床门诊对阴道炎的检测水平和诊断效率。

关键词：阴道分泌物免疫荧光染色干化学酶法双重荧光染色细菌性阴道炎霉菌性阴道炎滴虫性阴道炎

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

荧光染色在真菌感染诊断中的研究价值

荧光染色在真菌感染诊断中的研究价值

作者：苏潇雨广西医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨荧光染色在甲真菌病及深部真菌病中不同样本中应用价值方法:对58例疑似甲真菌病的指(趾)甲标本和73例疑似深部真菌病(肺泡灌洗液、痰、分泌物、尿液、胸水)标本,分别采用KOH镜检法、真菌培养、双重荧光染色法、荧光染色法四种... 详细信息

目的:探讨荧光染色在甲真菌病及深部真菌病中不同样本中应用价值方法:对58例疑似甲真菌病的指(趾)甲标本和73例疑似深部真菌病(肺泡灌洗液、痰、分泌物、尿液、胸水)标本,分别采用KOH镜检法、真菌培养、双重荧光染色法、荧光染色法四种方法进行检测及比较。同时对50例经真菌培养或组织病理检查诊断为真菌感染的组织病理切片分别采用荧光染色、PAS染色和HE染色方法进行检测和比较。结果:1.在对58例疑似甲真菌病的指(趾)甲标本检测中,双重荧光染色法及荧光染色法真菌阳性检出率明显高于KOH镜检法及真菌培养法,有统计学差异(P双重荧光染色和荧光染色真菌阳性检出率比较,差别尚无统计学差异(P>0.05)。临床诊断为甲真菌病共34例,以此为金标准计算双重荧光染色试验的诊断灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为91.2%、91.7%、93.9%、88.0%。荧光染色的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值为85.3%、95.8%、96.6%、82.1%,KOH镜检的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值为55.9%、83.3%、82.6%、57.1%,真菌培养的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值为50%、91.7%、89.4%、56.4%。2.在对73例深部真菌病(肺泡灌洗液、痰、分泌物、尿液、胸水)样本检测中。双重荧光、荧光染色法真菌阳性检出率均高于KOH镜检法及真菌培养法且存在统计学差异(P双重荧光染色阳性检出率高于荧光染色,且存在统计学差异(P双重荧光染色试验的诊断灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为88.0%、68.8%、59.4%、91.7%。荧光染色的灵敏度、特异度阳性预测值和阴性预测值为68.0%、81.2%、65.3%、83.9%。KOH镜检的诊断灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值48.0%、85.4%、63.1%、75.9%。真菌培养的诊断灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值52.0%、89.5%,72.2%,78.1%。3.在对50例真菌感染组织病理切片检测中,PAS染色、荧光染色阳性率大于HE染色,统计学上存在差异(P染色与荧光染色之间尚无统计学差异(P>0.05)。结论:荧光染色在甲真菌病样本、深部真菌感染样本及真菌感染组织病理切片中均具有良好的应用,是一种具有快速且准确的诊断方法。

关键词：荧光染色双重荧光染色深部真菌病甲真菌病组织病理

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

黑木耳种质杂交创新的流程与关键技术

吉林农业大学学报 2019年第5期41卷 510-513页

作者：姚方杰孙鹏张友民吉林农业大学园艺学院长春130118 吉林农业大学食药用菌教育部工程研究中心长春130118

杂交(单-单杂交)是食用菌种质创新行之有效的方法,而单核菌株与双核菌株的真实性鉴定为其中最重要的环节。黑木耳为我国第二大食用菌,不但与其他常见食用菌亲缘关系较远,而且菌丝细弱、半透明、锁状联合数量少,无法凭借锁状联合的有无... 详细信息

杂交(单-单杂交)是食用菌种质创新行之有效的方法,而单核菌株与双核菌株的真实性鉴定为其中最重要的环节。黑木耳为我国第二大食用菌,不但与其他常见食用菌亲缘关系较远,而且菌丝细弱、半透明、锁状联合数量少,无法凭借锁状联合的有无来准确鉴定单核菌丝和双核菌丝的真实性。根据多年对黑木耳遗传育种研究实践,集成创新出黑木耳种质杂交创新的流程与关键技术:确定种质创新目标一►选择目标性状互补亲本一►子实体培养一►单抱分离一►双重荧光染色鉴定“单核菌株”真实性一►选择生长势强的单核菌株进行单-单杂交制备“杂交菌株”一►“杂交菌株”真实性鉴定一►选择与双亲生理特性差异大的杂交菌株-选择与双亲生化特性差异大的杂交菌株一►出耳培养一►初筛、复筛出农艺性状表现超亲的特异种质。旨在为同行开展相关研究提供参考。

关键词：黑木耳种质创新单-单杂交双重荧光染色

蜜蜂病毒与东方蜜蜂微孢子虫对熊蜂的跨种侵染

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

蜜蜂病毒与东方蜜蜂微孢子虫对熊蜂的跨种侵染

作者：秦浩然云南农业大学

学位级别：硕士

熊蜂作为一种重要的授粉昆虫在维持农业可持续发展、农作物的多样性和提高农产品质量与产量方面起着重要作用。但近年来由于病毒、寄生虫等病原物引发的疾病可能会影响熊蜂的生态、分布及其商业授粉应用，对农业生态系统已造成显著的负... 详细信息

熊蜂作为一种重要的授粉昆虫在维持农业可持续发展、农作物的多样性和提高农产品质量与产量方面起着重要作用。但近年来由于病毒、寄生虫等病原物引发的疾病可能会影响熊蜂的生态、分布及其商业授粉应用，对农业生态系统已造成显著的负面影响。近期国内外学者相继发现黑蜂王病毒（BQCV）与残翅病毒（DWV）等蜜蜂病毒和东方蜜蜂微孢子虫（Nosema ceranae）可跨种侵染熊蜂，而我国关于蜜蜂病原物侵染熊蜂的病理研究报道仍为空白。故本文采用RT-PCR、qRT-PCR技术、荧光显微镜技术、电镜技术等围绕BQCV、DWV对熊蜂的侵染、***的检测鉴定及对小峰熊蜂的侵染开展研究。结果主要为以下三个部分： 1)对熊蜂体内的7种蜜蜂常见病毒（ABPV、BQCV、CBPV、DWV、KBV、IAPV、SBV）进行了检测，其中：小峰熊蜂与红光熊蜂BQCV感染率分别为19.50%和20%，而DWV感染率分别为5.5%和4%。对BQCV与DWV的RNA正负链检测得出BQCV在小峰熊蜂幼虫中的负链阳性率较高（36%），DWV则在小峰熊蜂工蜂中的负链阳性率较高（12%）。qRT-PCR定量分析发现，与小峰熊蜂相比，红光熊蜂幼虫感染BQCV量最高，红光熊蜂工蜂的感染量最低，但红光熊蜂工蜂DWV感染量最高，红光熊蜂雄性蜂DWV感染量最低。 2)在扫描电镜下观察***发现其呈现椭圆形且表面有粗糙褶皱。在透射电镜下观察***的内部结构验证了孢子壁较厚且由内至外有三层结构，极丝管环绕于核周围且具有四层结构。通过荧光染色试剂Calcofluor WhiteM2R与核酸染料Sytox Green双重染法来鉴别***孢子的存活状态，死孢子呈现黄绿色荧光，活的呈现蓝白色荧光，而寄主细胞、细菌、病毒等不被染色。 3)熊蜂感染N. ceranae后，初期工蜂除取食减少和行动迟缓外无明显外观染病特征，后期工蜂萎靡，衰弱，飞翔无力。解剖后镜检发现中肠仅存少量孢子，但充满大量的细菌;熊蜂肠道组织切片发现其侵染中肠上皮细胞后导致核膨大并变形、线粒体体积变小甚至解体，内质网紊乱，但孢子只侵染寄主细胞质而不侵入细胞核，最终导致线粒体解体，细胞破裂;qPCR定量分析得出在接种的3-4d中肠和脂肪体中N. ceranae的感染量达到最高值，其他组织则基本未检测到。结论：首次在国内饲养熊蜂上发现BQCV和DWV两种蜜蜂病毒;通过双重荧光染色鉴别***孢子的活性，并初步确定N. ceranae可跨种侵染熊蜂。

关键词：熊蜂 BQCV DWV N.ceranae RT-PCR qRT-PCR 双重荧光染色电镜技术

不同浓度葡萄糖对铜绿假单胞菌生物膜形成影响的研究

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

不同浓度葡萄糖对铜绿假单胞菌生物膜形成影响的研究

作者：郭阳山西医科大学

学位级别：硕士

铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginoisa, PA)为临床常见菌，在医院内感染中占有相当重要的地位，主要引起通风性呼吸道感染、烧伤性继发性感染和囊性纤维化病人的继发性肺炎。由于PA对多种常用抗生素(如某些β-内酰胺类、喹诺酮类、四... 详细信息

铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginoisa, PA)为临床常见菌，在医院内感染中占有相当重要的地位，主要引起通风性呼吸道感染、烧伤性继发性感染和囊性纤维化病人的继发性肺炎。由于PA对多种常用抗生素(如某些β-内酰胺类、喹诺酮类、四环素类及氯霉素等)耐药，因此给临床治疗造成许多困难。PA耐药的原因是多方面的，其中之一就是细菌生物被膜(bacterialbiofilm，BF)的形成。细菌生物被膜，又称菌膜，是指细菌吸附于固体物质表面后(如医用有机材料或机体豁膜表面)，分泌多糖基质、纤维蛋白、脂蛋白等多糖-蛋白复合物，使细菌相互粘连并将其自身菌体包裹于生物被膜之中，从而形成致密的膜样状态，造成泛耐药。多糖基质是形成生物膜的必要条件，糖尿病患者体内的高糖环境对铜绿假单胞菌形成生物膜是否有影响？本课题通过研究不同浓度葡萄糖对铜绿假单胞菌生物膜形成的影响，为临床糖尿病患者铜绿假单胞菌感染提供治疗思路。本研究收集了42株临床分离的铜绿假单胞菌，对其进行耐药性测定、生物膜形成能力检测、耐药性与生物膜相关性分析、不同浓度葡萄糖对生物膜形成能力和形成过程的影响研究。1、铜绿假单胞菌的耐药率与生物被膜形成能力的相关性分析菌株来源：连续收集山西医科大学附属第二医院2012年3月到2012年6月临床分离的42株铜绿假单胞菌菌株。方法：采用平板结合结晶紫染色法建立铜绿假单胞菌生物被膜模型，定量分析42株临床分离的铜绿假单胞菌生物被膜形成能力;采用琼脂倍比稀释法测定菌株的耐药性;概率法检验生物被膜形成能力与耐药性的相关性。结果：42株临床分离的铜绿假单胞菌对丁胺卡那耐药率为2.4%;对头孢他啶、哌拉西林/舒巴坦均为11.9%;对左氧氟沙星为14.2%，对哌拉西林为19.0%，对美罗培南的耐药率达到28.6%;对头孢哌酮-舒巴坦为35.7%，对氨曲南为40.5%。41株(97.6%)具有生物膜形成能力，其中生物膜形成能力弱的为19株(45.2%)、生物膜形成能力强的22株(52.4%)、1株菌(2.4%)没有形成生物被膜。铜绿假单胞菌对头孢哌酮-舒巴坦的耐药性随着生物被膜的形成能力增强而增强。 2、半定量检测不同浓度葡萄糖对铜绿假单胞菌生物膜形成能力的影响菌株来源：本文第一部分筛选出的22株生物膜强阳性铜绿假单胞菌(A570≥1.0)。方法：采用7组浓度葡萄糖培养液构建铜绿假单胞菌生物膜感染模型，结合结晶紫染色法对生物被膜形成能力进行半定量分析。结果：生物膜结晶紫染色半定量实验显示，随培养液中葡萄糖浓度的升高，22株待测菌的生物膜形成能力均呈上升趋势(拟合直线斜率均>0);其中4株待测菌在葡萄糖浓度≥11.1mmol/L时上升趋势明显，拟合直线斜率为0.025.031;其余18株菌的A570值变化不显著，拟合直线斜率为0.004.019。 3、观察不同浓度葡萄糖对铜绿假单胞菌生物膜形成过程的影响菌株来源：38号铜绿假单胞菌，为本文第二部分中葡萄糖对生物膜形成能力影响最大的菌株，拟合直线斜率为0.031。方法：采用7组浓度葡萄糖培养液构建PA生物膜模型，激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)观察生物膜的形成过程及厚度。结果：CLSM观察葡萄糖对生物膜形成过程影响实验表明：与无糖组及低浓度葡萄糖组相比，当葡萄糖浓度≥11.1mmol/L时，生物膜形成速度加快、成熟时间减少、粘附能力增强、厚度增加(P <0.05)。结论: 1、该院铜绿假单胞菌对丁胺卡那最敏感;对头孢他啶、哌拉西林/舒巴坦、左氧氟沙星、哌拉西林的敏感性次之;对头孢哌酮/舒巴坦和氨曲南的耐药率最高。 2、该院铜绿假单胞菌生物膜形成阳性率高，而且对头孢哌酮/舒巴坦的耐药性与生物被膜的形成能力呈正相关关系(P=0.047)。 3、对于铜绿假单胞菌生物膜阳性株而言，生长环境中葡萄糖的存在对其生物膜的形成有诱导作用。随着葡萄糖浓度的增加，生物膜成熟速度加快、成熟时间减少、粘附能力增强。 4、葡萄糖浓度≥11.1mmol/L时，铜绿假单胞菌的生物膜厚度逐渐增加(P<0.05)，葡萄糖浓度≥20mmol/L时，生物膜厚度显著增加(P<0.01)。

关键词：铜绿假单胞菌耐药性生物膜葡萄糖半定量检测双重荧光染色激光扫描共聚焦显微镜