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双益方改善2型糖尿病模型大鼠胰岛素抵抗的药效及作用机制

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中国实验方剂学杂志 2017年第22期23卷 137-142页

作者：田春雨薄海美林飞武喇孝瑾曹慧娟朱亮杨雨旸李继安华北理工大学中医学院河北唐山063210 华北理工大学临床医学院河北唐山063210 河北林益堂药业有限公司河北邯郸056004

目的:进行双益方对2型糖尿病模型大鼠的药效作用实验,分析其作用机制。方法:采用高脂饲养加25 mg·kg^(-1)剂量链脲佐菌素腹腔注射的方法建立2型糖尿病大鼠模型,将成模动物随机分为模型组,二甲双胍组[灌胃(ig),85 mg·kg^(-1)],双益方... 详细信息

目的:进行双益方对2型糖尿病模型大鼠的药效作用实验,分析其作用机制。方法:采用高脂饲养加25 mg·kg^(-1)剂量链脲佐菌素腹腔注射的方法建立2型糖尿病大鼠模型,将成模动物随机分为模型组,二甲双胍组[灌胃(ig),85 mg·kg^(-1)],双益方高、中、低(ig,2 000,1 000,500 mg·kg^(-1))剂量组。进行双益方对2型糖尿病模型大鼠的体重,饮食量,饮水量,二便情况,血糖,糖耐量测定(oral glucose tolerance test,OGTT),糖化血红蛋白(hemoglobin A1c,Hb A1c),糖化血清蛋白(glycosylated serum protein,GSP),胰岛素等指标的检测,蛋白免疫印迹法(Western blot)测定肝组织蛋白酪氨酸磷酸酶1B(protein tyrosine phosphatase 1B,PTP1B),蛋白激酶(Akt),磷酸化的蛋白激酶(p-Akt),糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β),磷酸化的糖原合成酶激酶-3β(p-GSK-3β)的表达,Western blot测定骨骼肌组织胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1),磷酸化的胰岛素受体底物-1(p-IRS-1),葡萄糖转运蛋白4(glucose transporter 4,Glut4)表达的影响。结果:与模型组比较,双益方可降低2型糖尿病模型大鼠的空腹血糖(fasting blood glucose,FBG),Hb Alc水平及胰岛素抵抗指数(Homa-IR),缓解2型糖尿病模型大鼠饮食量多、饮水量多、二便量大及体重减轻的状况(P双益方高剂量组药效较好;双益方可显著升高2型糖尿病模型大鼠骨骼肌p-IRS-1,Glut4的表达(P双益方可显著升高2型糖尿病模型大鼠肝脏p-Akt的表达,显著降低PTP1B,p-GSK-3β的表达(P双益方可有效调节2型糖尿病模型大鼠糖代谢紊乱,促进胰岛素分泌,改善胰岛素抵抗;调节骨骼肌PI3K/Akt,肝脏Akt/GSK-3β信号转导通路可能是该复方治疗2型糖尿病的作用机制。

关键词：双益方 2型糖尿病胰岛素抵抗糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β) 磷酸化的糖原合成酶激酶-3β(p-GSK-3β)

双益方对2型糖尿病大鼠SOD、MDA、FFA影响的实验研究

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时珍国医国药 2013年第8期24卷 1840-1842页

作者：崔鹏田春雨张艳萍王亚喇孝谨董玉山高秀娟李继安河北联合大学附属医院河北唐山063000 河北联合大学中医学院河北唐山063000

目的研究双益方对2型糖尿病(T2DM)大鼠血糖、血脂及SOD、MDA、FFA的影响,初步探讨其作用机制。方法60只雄性SD大鼠随机抽取10只大鼠为正常对照组(N组),其余大鼠采用高脂饲料喂养联合小剂量链脲佐菌素(STZ)尾静脉注射的方法造2型糖尿病模... 详细信息

目的研究双益方对2型糖尿病(T2DM)大鼠血糖、血脂及SOD、MDA、FFA的影响,初步探讨其作用机制。方法60只雄性SD大鼠随机抽取10只大鼠为正常对照组(N组),其余大鼠采用高脂饲料喂养联合小剂量链脲佐菌素(STZ)尾静脉注射的方法造2型糖尿病模型,成模40只,分为模型组(M)、二甲双胍组(Met)、双益方高剂量组(SH)和双益方低剂量组(SL),每组10只。检测药物干预2周和4周后各组大鼠空腹血糖(FBG)以及4周后各组大鼠血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和游离脂肪酸(FFA)的水平。结果药物干预后,SH、SL组可显著降低大鼠血清FBG、TG、TC、FFA、和LDL-C的水平(P双益方对2型糖尿病大鼠有降糖、降脂的作用,抑制氧化应激反应、降低游离脂肪酸(FFA)为其作用机制之一。

关键词： 2型糖尿病双益方血糖血脂中医药

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双益方对2型糖尿病患者疗效临床观察

辽宁中医药大学学报 2018年第2期20卷 156-158页

作者：田春雨喇孝瑾朱亮周雪梅华北理工大学

目的：进行双益方的临床观察,为其临床应用提供依据。方法：随机选取2015年5月—2016年5月在华北理工大学中医学院门诊部就诊的2型糖尿病患者,共63例,在常规治疗的基础上,将63例2型糖尿病患者随机分为二甲双胍治疗组（31例）及双益方治... 详细信息

目的：进行双益方的临床观察,为其临床应用提供依据。方法：随机选取2015年5月—2016年5月在华北理工大学中医学院门诊部就诊的2型糖尿病患者,共63例,在常规治疗的基础上,将63例2型糖尿病患者随机分为二甲双胍治疗组（31例）及双益方治疗组（32例）,观察双益方对2型糖尿病患者空腹血糖（FBG）、餐后血糖（PBG）、糖耐量（OGTT）、糖化血红蛋白（HbAlc）及胰岛素抵抗指数的影响。结果：双益方可显著降低2型糖尿病患者FBG、HbAlc、OGTT 2h AUC、Homa-IR。结论：双益方具有较好的调节糖代谢作用。

关键词：双益方临床观察 2型糖尿病

双益方、组方单味中药及其有效成分对α-葡萄糖苷酶、二肽基肽酶-4抑制作用实验研究

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辽宁中医药大学学报 2018年第4期20卷 36-39页

作者：田春雨马雷雷喇孝瑾华北理工大学

目的：研究双益方、组方单味中药及其有效成分对α-葡萄糖苷酶、二肽基肽酶-4的抑制作用。方法：建立体外α-葡萄糖苷酶活性筛选模型,测定、计算各实验组对α-葡萄糖苷酶（α-glucosidase）抑制率和IC50值,检测各成分对α-glucosidase... 详细信息

目的：研究双益方、组方单味中药及其有效成分对α-葡萄糖苷酶、二肽基肽酶-4的抑制作用。方法：建立体外α-葡萄糖苷酶活性筛选模型,测定、计算各实验组对α-葡萄糖苷酶（α-glucosidase）抑制率和IC50值,检测各成分对α-glucosidase的抑制作用;建立二肽基肽酶4（DPP-4）抑制作用的体外筛选模型,研究双益方及其有效成分对DPP-4的抑制作用。结果：当双益方提取物浓度达到250μg·L-1时,对α-葡萄糖苷酶的抑制率为91.52%,其IC50值为（17.25±1.06）μg·L-1;双益方组方中药中,以黄芪对α-葡萄糖苷酶的抑制作用较好,其IC50值为（7.68±0.32）μg·L-1;双益方有效成分中,以1-脱氧野尻霉素对α-葡萄糖苷酶的抑制作用较好,其IC50值为（0.85±0.04）μg·L-1,与阿卡波糖（0.39±0.02）μg·L-1较为接近;黄芪、山茱萸、黄连、葛根、桑白皮、佩兰、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、熊果酸、马钱苷、小檗碱对DPP-4抑制作用〈10%;1-脱氧野尻霉素、双益方提取物、黄芪甲苷、葛根素对DPP-4抑制作用〉10%。选择对DPP-4抑制率〉10%的双益方提取物、单味药及有效成分进行DPP-4抑制率复筛,对DPP-4抑制作用顺序为磷酸西格列汀〉1-脱氧野尻霉素〉双益方提取物〉黄芪甲苷〉葛根素。对DPP-4的IC50分别为：1-脱氧野尻霉素（18.78±1.08）μg·L-1,双益方提取物（74.52±3.24）μg·L-1,黄芪甲苷（50.24±2.22）μg·L-1,葛根素（100.24±4.25）μg·L-1。结论：抑制α-葡萄糖苷酶及DPP-4活性可能是该复方治疗2型糖尿病的作用机制。

关键词：双益方 α-葡萄糖苷酶二肽基肽酶-4

双益方剂及其有效成分对胰岛素抵抗小鼠胰岛β细胞株胰岛素分泌、增殖、凋亡的影响

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山东医药 2017年第39期57卷 23-26页

作者：田春雨马雷雷喇孝瑾华北理工大学河北唐山063210

目的观察双益方及其有效成分对胰岛素抵抗的小鼠胰岛β细胞株Min6胰岛素分泌水平和细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法培养Min6细胞并分为正常组、IR模型组、二甲双胍组、双益方组、双益方组方单味中药组(山茱萸、黄芪、黄连... 详细信息

目的观察双益方及其有效成分对胰岛素抵抗的小鼠胰岛β细胞株Min6胰岛素分泌水平和细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法培养Min6细胞并分为正常组、IR模型组、二甲双胍组、双益方组、双益方组方单味中药组(山茱萸、黄芪、黄连、葛根、桑白皮、佩兰)及双益方有效成分组(1-脱氧野尻霉素、小檗碱、黄芪甲苷、熊果酸、马钱苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、葛根素)。正常组加入无酚红培养液正常培养;其余各组加入葡萄糖和棕榈酸制作胰岛素抵抗的Min6细胞模型。二甲双胍组加入100μg/L的二甲双胍。双益方组、山茱萸组、黄芪组、黄连组、葛根组、桑白皮组、佩兰组、葛根素组、1-脱氧野尻霉素组、小檗碱组、黄芪甲苷组、马钱苷组、熊果酸组、毛蕊异黄酮葡萄糖苷组分别加入50、100、200μg/L的相应药物。各组于给药24 h后进行胰岛素分泌实验,检测胰岛素分泌水平。各组分别于给药24、48 h采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖能力。于给药24 h后采用双染法检测正常组、IR模型组、二甲双胍组、双益方组的凋亡细胞,计算细胞凋亡率;采用Western blotting法检测细胞中的ERK1/2、p-ERK1/2、MEK1/2蛋白。结果 IR模型组细胞高糖、低糖刺激下胰岛素分泌水平均低于正常组(P均双胍组、黄芪组、葛根组、双益方组、黄芪甲苷组、山茱萸组、1-脱氧野尻霉素组、葛根素组、小檗碱组胰岛素分泌水平高于IR模型组(P均双胍组、双益方组、黄芪组、黄芪甲苷组、1-脱氧野尻霉素组、山茱萸组细胞增殖能力高于IR模型组(P均双益方各组细胞凋亡率均低于IR模型组(P均双胍组及双益方组细胞中MEK1/2、ERK1/2、p-ERK1/2蛋白相对表达量高于IR模型组(P均双益方及其黄芪、葛根、黄芪甲苷、山茱萸、1-脱氧野尻霉素、葛根素、小檗碱等成分可有效提高胰岛素抵抗的Min6细胞的胰岛素分泌水平,促进细胞增殖并抑制其凋亡,作用机制可能与ERK1/2、p-ERK1/2、MEK1/2蛋白表达上调有关。

关键词：双益方 2型糖尿病胰岛素抵抗胰岛素分泌实验细胞增殖细胞凋亡小鼠胰岛β细胞株