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抗嗜肺军团菌血清8型单克隆抗体的制备及双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测法的建立

生物技术通讯 2009年第4期20卷 488-490,519页

作者：郭景玉朱紫雯王津杨瑞馥宋亚军军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的:制备针对嗜肺军团菌血清8型的单克隆抗体,并建立双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法。方法:用甲醛灭活的嗜肺军团菌血清8型菌免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗嗜肺军团菌血清8型单克隆抗体,建立双抗夹心ELISA检测方法... 详细信息

目的:制备针对嗜肺军团菌血清8型的单克隆抗体,并建立双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法。方法:用甲醛灭活的嗜肺军团菌血清8型菌免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗嗜肺军团菌血清8型单克隆抗体,建立双抗夹心ELISA检测方法。结果:研制出8株能特异性分泌抗嗜肺军团菌血清8型单克隆抗体的杂交瘤细胞株,Ig类型分别为IgM(2株)、IgG3(1株)和IgG1(5株);利用IgG1型单抗6G10与6C7配对,建立了双抗夹心ELISA检测方法,该方法的最低检出浓度为2.6×105cfu/mL,除与金黄色葡萄球菌有微弱的交叉反应外,与14株其他血清型嗜肺军团菌、17株非嗜肺军团菌及11株非军团菌均无交叉反应,具有较高的特异性。结论:制备了具有高特异性和亲和力的抗嗜肺军团菌血清8型单克隆抗体,并建立了双抗夹心ELISA检测方法。

关键词：嗜肺军团菌血清8型单克隆抗体双抗夹心酶联免疫吸附试验

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柯萨奇病毒A6型空心和实心病毒抗原检测系统的建立和应用

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中国疫苗和免疫 2022年第5期28卷 554-558页

作者：戈小琴张克武瑞霞安燕秋李雅静李文麒胡雅灵北京科兴生物制品有限公司北京100085 北京科兴中维生物技术有限公司北京102601 聊城市传染病医院山东聊城252000

目的建立和应用柯萨奇病毒A6型(Coxsackievirus A6,CV-A6)空心和实心病毒抗原检测系统。方法利用蔗糖密度梯度分离CV-A6空心和实心病毒颗粒,采用CV-A6病毒纯化液免疫Balb/c小鼠,筛选出特异性强的CV-A6空心和实心病毒单克隆抗体,进行效... 详细信息

目的建立和应用柯萨奇病毒A6型(Coxsackievirus A6,CV-A6)空心和实心病毒抗原检测系统。方法利用蔗糖密度梯度分离CV-A6空心和实心病毒颗粒,采用CV-A6病毒纯化液免疫Balb/c小鼠,筛选出特异性强的CV-A6空心和实心病毒单克隆抗体,进行效价测定;CV-A6单克隆抗体与多克隆抗体进行酶联免疫吸附试验双抗夹心系统匹配,建立病毒抗原检测系统,验证其线性、灵敏度、结合能力和特异性;应用其检测CV-A6疫苗研发过程中的抗原含量。结果本研究获得了特异性强的CV-A6空心和实心病毒颗粒单克隆抗体,效价分别为10^(7)和10^(6);分别与CV-A6兔多克隆抗体匹配出ELISA双抗夹心病毒抗原检测系统。该系统与其他肠道病毒无交叉反应,与CV-A6空心和实心病毒抗原含量存在明显的剂量效应关系,对CV-A6疫苗研究过程中的各工序段样品含量的检测结果准确。结论本研究建立的CV-A6空心和实心病毒抗原检测系统符合定性和定量检测需求,为CV-A6疫苗研究提供了一种快捷和准确的抗原含量检测方法。

关键词：柯萨奇病毒A6型空心病毒颗粒实心病毒颗粒单克隆抗体双抗夹心酶联免疫吸附试验病毒抗原检测系统

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重组溶葡萄球菌酶在烧伤患者的人体药代动力学

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中国新药杂志 2012年第16期21卷 1864-1866,1877页

作者：杨菲菲熊玉卿夏春华莫云杰张继恩李国栋陆婉英黄青山复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室上海200433 南昌大学医学院临床药理研究所南昌330006 上海高科联合生物技术研发有限公司上海201206

目的:研究重组溶葡萄球菌酶(recombinant lysostaphin,rLysn)在深Ⅱ°烧伤患者创面给药后的药代动力学。方法:23例符合入组标准的深Ⅱ°烧伤患者创面外敷rLysn,单次给药(0.8×104～3.2×104ng.cm-2)和多次给药(2.4×104和3.2×104ng.cm... 详细信息

目的:研究重组溶葡萄球菌酶(recombinant lysostaphin,rLysn)在深Ⅱ°烧伤患者创面给药后的药代动力学。方法:23例符合入组标准的深Ⅱ°烧伤患者创面外敷rLysn,单次给药(0.8×104～3.2×104ng.cm-2)和多次给药(2.4×104和3.2×104ng.cm-2)后,定时采血,以双抗夹心酶联免疫吸附法检测血药浓度。结果:所有受试者创面外敷给予rLysn后血浆中rLysn的浓度均低于本分析方法的定量下限2.8 ng.mL-1。结论:深Ⅱ°烧伤患者创面单次(0.8×104～3.2×104ng.cm-2)和多次(2.4×104和3.2×104ng.cm-2)给予rLysn,药物入血浓度低于检测限。

关键词：重组溶葡萄球菌酶药代动力学双抗夹心酶联免疫吸附试验

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酶联免疫吸附试验定量检测血清肝素酶方法的建立及应用

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生物技术通讯 2009年第4期20卷 545-547页

作者：田曙光虞立霞李素波高红伟王颖丽宫锋军事医学科学院野战输血研究所北京100850

目的:建立一种简便、微创的血清肝素酶酶联免疫吸附(ELISA)定量检测方法,并对肿瘤患者和正常人血清肝素酶进行比较,初步探讨血清肝素酶水平与肿瘤发生、发展的关系。方法:选择鼠抗人肝素酶单克隆抗体和兔抗人肝素酶多克隆抗体,建立双抗... 详细信息

目的:建立一种简便、微创的血清肝素酶酶联免疫吸附(ELISA)定量检测方法,并对肿瘤患者和正常人血清肝素酶进行比较,初步探讨血清肝素酶水平与肿瘤发生、发展的关系。方法:选择鼠抗人肝素酶单克隆抗体和兔抗人肝素酶多克隆抗体,建立双抗夹心ELISA检测方法,并利用此方法检测健康献血者和肿瘤患者血清中的肝素酶水平。结果:组内数据稳定,可重复;肿瘤患者血清中肝素酶D450nm值高于健康献血者。结论:所建立的血清肝素酶ELISA检测方法灵敏、高效,可用于肿瘤的辅助诊断。

关键词：肿瘤肝素酶双抗夹心酶联免疫吸附试验

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