抗嗜肺军团菌血清8型单克隆抗体的制备及双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测法的建立

作     者：郭景玉 朱紫雯 王津 杨瑞馥 宋亚军 GUO Jing-Yu;ZHU Zi-Wen;WANG Jin;YANG Rui-Fu;SONG Ya-Jun

作者机构：军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 

出 版 物：《生物技术通讯》 (Letters in Biotechnology)

年 卷 期：2009年第20卷第4期

页      面：488-490,519页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 08[工学] 100102[医学-免疫学] 0836[工学-生物工程] 10[医学] 

基　　金：国家重大传染病专项(重要传染性病原体高通量检测鉴别新技术平台研究)(2009ZX10004-103)的资助 

主　　题：嗜肺军团菌血清8型 单克隆抗体 双抗夹心酶联免疫吸附试验 

摘      要：目的:制备针对嗜肺军团菌血清8型的单克隆抗体,并建立双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法。方法:用甲醛灭活的嗜肺军团菌血清8型菌免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗嗜肺军团菌血清8型单克隆抗体,建立双抗夹心ELISA检测方法。结果:研制出8株能特异性分泌抗嗜肺军团菌血清8型单克隆抗体的杂交瘤细胞株,Ig类型分别为IgM(2株)、IgG3(1株)和IgG1(5株);利用IgG1型单抗6G10与6C7配对,建立了双抗夹心ELISA检测方法,该方法的最低检出浓度为2.6×105cfu/mL,除与金黄色葡萄球菌有微弱的交叉反应外,与14株其他血清型嗜肺军团菌、17株非嗜肺军团菌及11株非军团菌均无交叉反应,具有较高的特异性。结论:制备了具有高特异性和亲和力的抗嗜肺军团菌血清8型单克隆抗体,并建立了双抗夹心ELISA检测方法。