检索结果-南通市图书馆

去甲肾上腺素水平在胸腔积液鉴别诊断及预后评估中的价值

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国肿瘤临床 2023年第14期50卷 714-719页

作者：杨黎刘孝焱张茹李爱恬王莹范菲菲苗丽君张毅郑州大学第一附属医院生物细胞治疗中心郑州市450052 郑州大学第一附属医院呼吸科郑州市450052

目的:探究胸腔积液中能够提示患者临床诊断与预后的潜在生化指标,为临床诊断与治疗提供帮助。方法:收集郑州大学第一附属医院2020年4月至2021年5月41例患者的胸腔积液样本,采用流式细胞术检测肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macroph... 详细信息

目的:探究胸腔积液中能够提示患者临床诊断与预后的潜在生化指标,为临床诊断与治疗提供帮助。方法:收集郑州大学第一附属医院2020年4月至2021年5月41例患者的胸腔积液样本,采用流式细胞术检测肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)比例,酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测乳酸、去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)水平,同时收集临床检测乳酸代谢相关分子乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)结果,结合患者临床诊断与预后情况,通过独立样本t检验、逻辑回归分析、ROC分析等方法分析其与良恶性胸腔积液鉴别诊断及患者预后之间的关联。结果:恶性胸腔积液(malignant pleural effusion,MPE)中NE的水平明显高于非恶性胸腔积液(non-malignant pleural effusion,NMPE)[(5.24±3.49)ng/mL vs.(2.56±2.25)ng/mL,P素更高,对预后预测的价值进一步提高。结论:胸腔积液中NE水平与恶性病理诊断具有相关性,可作为辅助良恶性鉴别诊断的潜在指标。此外,恶性胸腔积液中NE水平与不良预后联系紧密,也可作为患者预后评估的指标;当其与TAMs、乳酸联合时,对预后预测准确性更高。

关键词：胸腔积液去甲肾上腺素肿瘤相关巨噬细胞乳酸鉴别诊断预后

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

去甲肾上腺素对巨噬细胞极化的调节作用研究

中国免疫学杂志 2023年第3期39卷 543-549页

作者：许伟伟陈梦婷杨正峰杨雯雨李明马新润(指导) 上海交通大学附属第一人民医院临床转化研究中心临床免疫学研究所上海201620

目的:研究去甲肾上腺素(NE)在巨噬细胞极化中的功能。方法:获取并培养小鼠腿骨巨噬细胞(BMMs)。BMMs以1×10^(4)个/孔接种于96孔板,待细胞贴壁后给予0、100 ng/ml LPS或20 ng/ml IL-4,再分别给予浓度梯度的NE处理,药物处理48 h后行SRB... 详细信息

目的:研究去甲肾上腺素(NE)在巨噬细胞极化中的功能。方法:获取并培养小鼠腿骨巨噬细胞(BMMs)。BMMs以1×10^(4)个/孔接种于96孔板,待细胞贴壁后给予0、100 ng/ml LPS或20 ng/ml IL-4,再分别给予浓度梯度的NE处理,药物处理48 h后行SRB分析。BMMs以1×10^(5)个/孔接种于12孔板,待细胞贴壁后给予100μmol/L NE处理24 h,同时按照时间梯度再分别给予100 ng/ml LPS或20 ng/ml IL-4,完成M1、M2培养后进行RNA抽提,并进行qPCR检测。流式细胞术分析巨噬细胞纯度及巨噬细胞表面标志物。结果:实验剂量的NE总体对巨噬细胞的毒性较小。NE促进巨噬细胞向M1极化,NE有助维持M2极化的巨噬细胞功能,且NE可能通过调控巨噬细胞代谢状态调控M1及M2的极化与功能。结论:高浓度NE对M1及M2存活及功能具有调节作用,提示NE在适当剂量与合适时间窗口对脓毒症患者的治疗较为关键。

关键词：去甲肾上腺素脓毒症巨噬细胞极化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

去甲肾上腺素对犬腹主动脉瘤的影响

中国兽医学报 2023年第3期43卷 546-552页

作者：王瑶徐在品孙安强李胤霆明东东李思南洪晗李欣妤贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025 北京航空航天大学生物与医学工程学院北京100083

探讨不同剂量去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)对犬腹主动脉瘤(abdominal aortic aneurysm,AAA)的影响。选取健康成年比格犬12只,雌性,体质量(11±1.5)kg,随机分为4组,每组3只,分别设NE低剂量组(0.2μg·kg^(-1)·min^(-1))、中剂量组(0.4μg·kg^(-1)·min^(-1))和高剂量组(0.8μg·kg^(-1)·min^(-1)),对照组每次只给予5%葡萄糖氯化钠注射液60 mL。手术分离腹主动脉并做血管插管,将弹力蛋白酶注射到腹主动脉插管段中膜,使注射部位形成AAA。在AAA形成后,静脉滴注不同剂量NE和5%葡萄糖氯化钠注射液,速度为60 mL/h,每天1 h,连续用药14 d。BL-420 N生物信号采集器监测AAA内血压变化,B超监测AAA直径及血流速度变化,计算机数值模拟血管壁面剪切应力(wall shear stress,WSS)变化;停药21 d后,牺牲试验犬,做HE和EVG切片染色观察AAA形态结构和细胞组成变化。结果显示,使用NE的各组收缩压、舒张压、平均动脉压与用药前相比极显著升高(P<0.01),血流速度与用药前相比显著或极显著增加(P<0.05或P<0.01);中剂量组和高剂量组AAA处的WSS极显著高于对照组和低剂量组(P<0.01);对照组腔内血栓沉积量、炎性细胞浸润程度、弹性纤维和弹力板层损害程度比使用NE的各组更严重。结果表明,NE可有效增加AAA内血压和血流速度,加大WSS,减少腔内血栓形成,在一定剂量范围内不会导致AAA破裂。

关键词：去甲肾上腺素腹主动脉瘤形态结构犬

去甲肾上腺素对活体肾移植术中肾灌注及术后肾功能的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

临床麻醉学杂志 2024年第4期40卷 341-345页

作者：柳少轩何龙张超凡张禄凤艾艳秋郑州大学第一附属医院麻醉与围术期医学部 450052

目的比较去甲肾上腺素与多巴胺作为活体肾移植术中血管活性药对术中肾灌注及术后7 d内肾功能的影响。方法选择行活体肾移植术的患者94例,男76例,女18例,年龄18~64岁,BMI 18~24 kg/m^(2),ASAⅢ或Ⅳ级。采用随机数法将患者分为两组:去... 详细信息

目的比较去甲肾上腺素与多巴胺作为活体肾移植术中血管活性药对术中肾灌注及术后7 d内肾功能的影响。方法选择行活体肾移植术的患者94例,男76例,女18例,年龄18~64岁,BMI 18~24 kg/m^(2),ASAⅢ或Ⅳ级。采用随机数法将患者分为两组:去甲肾上腺素组(N组)和多巴胺组(D组),每组47例。麻醉诱导后,N组泵注去甲肾上腺素0.03 mg/kg,D组泵注多巴胺3 mg/kg,维持患者MAP波动幅度小于基础值的10%。于关腹前即刻测量肾动脉阻力指数(RI),记录关腹前即刻和术后24 h的MAP、脉压(PP)、CVP等血流动力学参数和pH、血钾(K^(+))、血乳酸(Lac)等动脉血气指标。记录关腹前即刻心输出量(CO)、每搏变异度(SVV)、血管活性药评分(VIS)。术后24 h复测RI,记录术后1、3、5、7 d内血清肌酐(Scr)、肾小球滤过率(GFR)和术后7 d内移植物功能延迟恢复(DGF)例数。结果两组关腹前即刻的MAP、PP、CVP、CO、SVV、VIS,术后24 h MAP、PP、CVP差异均无统计学意义。与关腹前即刻比较,术后24 h两组K^(+)明显降低(P去甲肾上腺素时的肾灌注不劣效于使用多巴胺,且患者术后7 d内肾功能恢复情况与使用多巴胺效果相同。

关键词：去甲肾上腺素多巴胺活体肾移植阻力指数移植肾灌注

去甲肾上腺素的急性作用加重糖尿病大鼠心室电重构而易于诱发室性心律失常的作用及其机制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

武汉大学学报（医学版） 2023年第4期44卷 428-434页

作者：余薇刘晋袁慧罗仁峰周博文康爱梅李小红黄雪渊江汉大学医学院医学系湖北武汉430056 武汉设计工程学院亚心护理学院湖北武汉430202 华中科技大学同济医学院病理生理学系湖北武汉430030

目的:探讨去甲肾上腺素(NE)的急性作用对糖尿病大鼠室性心律失常的影响及其机制。方法:将健康雄性大鼠分为对照组(C组,n=10)、糖尿病组(D组,n=10)和NE组(N组,n=10),D组大鼠经腹腔注射链脲佐菌素诱导,成功制备糖尿病模型,N组是在完成D组... 详细信息

目的:探讨去甲肾上腺素(NE)的急性作用对糖尿病大鼠室性心律失常的影响及其机制。方法:将健康雄性大鼠分为对照组(C组,n=10)、糖尿病组(D组,n=10)和NE组(N组,n=10),D组大鼠经腹腔注射链脲佐菌素诱导,成功制备糖尿病模型,N组是在完成D组数据采集后加入NE作用。通过电生理记录技术,观察心电图记录的心率、PR、RR和QT间期以及QT间期离散度变化;在体心室肌单相动作电位的幅度(APA)、最大上升速率(Maxdv/dt)、复极化恢复到10%、50%、90%时间(APD_(10)、APD_(50)、APD_(90)),以及复极化时程三角测量值(Triangulation)变化,基础刺激周长(BCL)为200 ms时心室有效不应期(ERP200),以及短阵快速刺激诱发室性心律失常的BCL和诱发率。酶解法分离单个心室肌细胞,全细胞膜片钳技术观察每组心室肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)及其电流-电压(I-V)曲线改变。结果:与D组比较,N组心率减慢,PR、RR和QT间期延长以及QT离散度增加均非常显著(均P<0.05);且N组APA降低,Maxdv/dt减慢,APD_(10)、APD_(50)、APD_(90)和Triangulation的延长亦非常明显(均P<0.05);另外,N组ERP200和诱发室性心律失常BCL均明显延长,诱发率显著增加(均P<0.05);最后,N组Ito的幅度减小,当钳制电位为+50 m V时,N组大鼠心室肌细胞Ito的电流密度由D组的(12.09±2.29)pA/pF明显减小到(7.94±1.93)pA/pF(P<0.01),其Ito的I-V曲线处于D组的下面。结论:NE的急性作用在糖尿病引起心室电重构和交感神经调节功能损伤的基础上,使得糖尿病心室的电重构加重,易感性加强而更利于诱发室性心律失常,其机制可能与NE急性作用引起糖尿病心室肌细胞Ito减小有关。

关键词：糖尿病室性心律失常去甲肾上腺素重构急性作用交感神经调节

去甲肾上腺素小分子荧光探针的构建及成像研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

去甲肾上腺素小分子荧光探针的构建及成像研究

作者：毛蕾雯华东师范大学

学位级别：硕士

大脑中神经信号传导包括电信号传导和化学信号传导两种方式,其中后者依赖于神经递质在神经突触之间的释放、传递与结合过程,其时间尺度低至毫秒级。因此,在分子尺度上监测神经递质的动态变化,对于理解神经元及脑的结构与功能至关重要。... 详细信息

大脑中神经信号传导包括电信号传导和化学信号传导两种方式,其中后者依赖于神经递质在神经突触之间的释放、传递与结合过程,其时间尺度低至毫秒级。因此,在分子尺度上监测神经递质的动态变化,对于理解神经元及脑的结构与功能至关重要。其中,去甲肾上腺素(NE)是脊椎动物中枢神经系统的关键神经递质之一,其含量和传递异常与一系列神经系统疾病密切相关,包括帕金森病(PD)、阿尔兹海默病(AD)和抑郁症等。尽管NE在各种生理和病理过程中的重要性已被广泛认知,但对其高特异性、高时空分辨率的动态监测仍然是一项艰巨的挑战。因此,迫切需要开发简单、快速、灵敏的方法来特异性检测NE。本论文主要围绕如何实现高特异性、高灵敏度,特别是高时空分辨动态监测NE这一关键科学问题,开展了以下研究:第一章,介绍了神经递质,尤其是去甲肾上腺素的特点及其在生物体中的重要作用,以及与多种精神疾病和神经退行性疾病之间的联系,强调了对于去甲肾上腺素进行分析检测的重要意义。接着对几种常见的检测方法进行综述,并对各自的优缺点进行了评论。分析了目前去甲肾上腺素检测中存在的一些困难和挑战,最后提出本文的解决方法和策略。第二章,设计并合成了一种新型的小分子荧光探针BPS3,其结构中包含两个由柔性烷基链连接的苯基吡啶单元,保证了分子具有良好的水溶性和可调的分子构象。更重要的是,该探针对NE的识别反应表现出了超快的反应动力学,能够在100 ms内检测NE。通过实验研究和理论分析,我们提出了一种独特的双重加速机制,即分子构象折叠和水桥催化作用。两种机制能够显著降低反应活化能,使反应速率分别提高10倍和10倍以上。在此基础上,该探针被应用于外部高浓度钾离子刺激下神经元中NE释放的实时荧光响应和成像。进一步的,利用该探针,我们对健康和AD疾病模型小鼠的急性脑组织切片进行了双光子荧光成像,揭示了NE水平与AD病理以及抗氧化药物治疗之间的联系与变化规律。第三章,设计并合成了一种新的荧光客体分子SPC,该分子由带有甲硫基的4-(4-甲硫基苯基)吡啶与另一个带有末端S-对甲苯硫代碳酸酯的吡啶环通过柔性烷基链连接形成,可以与NE的伯胺和β-羟基发生连续的亲核取代反应和环化反应,实现特异性响应。在此基础上,引入主体大环分子葫芦[8]脲(CB[8]),与荧光客体分子SPC在水中形成自组装结构SPC?CB[8],并诱导客体分子产生双发射荧光,从而实现对NE分子的比率型响应。该探针对NE的检测线性范围是0-400 nM,检测限为1.2 nM,响应时间短至180 ms。此外,该探针被应用于外源性化学刺激下神经元中NE释放的比率型荧光实时成像,这有助于进一步解析NE的生理和病理功能。

关键词：去甲肾上腺素荧光成像快速检测比率型超分子体系

去甲肾上腺素对小鼠骨髓间充质干细胞迁移的影响及其机制

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

中华烧伤杂志 2020年第12期36卷 1173-1182页

作者：孔亚男金晶程飚安徽医科大学第一附属医院整形外科合肥230022 解放军南部战区总医院烧伤整形科广州510010

目的探讨交感神经递质去甲肾上腺素(NE)对小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)迁移的影响及其机制。方法(1)取20只3周龄雄性C57BL/6小鼠,处死后取出股骨和胫骨,分离培养BMSC并鉴定。取第2代或3代细胞,分为磷酸盐缓冲液(PBS)组、1μmol/L NE组、1... 详细信息

目的探讨交感神经递质去甲肾上腺素(NE)对小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)迁移的影响及其机制。方法(1)取20只3周龄雄性C57BL/6小鼠,处死后取出股骨和胫骨,分离培养BMSC并鉴定。取第2代或3代细胞,分为磷酸盐缓冲液(PBS)组、1μmol/L NE组、10μmol/L NE组及100μmol/L NE组,每组8孔。1μmol/L NE组、10μmol/L NE组及100μmol/L NE组细胞分别在含体积分数1%胎牛血清的低糖DMEM培养基(以下简称低血清培养基)内分别加入终物质的量浓度为1、10、100μmol/L的NE培养,PBS组细胞在低血清培养基内加入等体积的PBS培养。在刺激前(0 d)及刺激1、3、5 d,采用细胞计数试剂盒8法检测细胞增殖活性(以吸光度值表示)。(2)细胞划痕试验1中,取细胞分为PBS组和单纯NE组,行划痕试验后,单纯NE组细胞采用低血清培养基+终物质的量浓度为10μmol/L的NE培养,PBS组细胞采用低血清培养基+等体积PBS培养。细胞划痕试验2中,取细胞分为PBS组、普萘洛尔+NE组、酚妥拉明+NE组,行划痕试验后,普萘洛尔+NE组细胞每天采用低血清培养基+终物质的量浓度为1μmol/L的普萘洛尔、酚妥拉明+NE组细胞每天采用低血清培养基+终物质的量浓度为10μmol/L的酚妥拉明预处理30 min后,均再采用低血清培养基+终物质的量浓度为10μmol/L的NE培养;PBS组采用低血清培养基+等体积PBS培养。细胞划痕试验3中,取细胞分为单纯NE组、单纯(2E,6E)-2,6-二(4-吡啶基亚甲基)环己酮(SC-66)组、SC-66+NE组,行划痕试验后,单纯NE组采用低血清培养基+终物质的量浓度为10μmol/L的NE培养;单纯SC-66组细胞每天采用终物质的量浓度为30 mmol/L的SC-66预处理30 min后,再采用低血清培养基培养;单纯SC-66+NE组每天采用终物质的量浓度为30 mmol/L的SC-66预处理30 min后,再采用低血清培养基+终物质的量浓度为10μmol/L的NE培养。以上3个细胞划痕试验,每组样本数均为6,均计算划痕后24、48、72 h的划痕愈合率。(3)取细胞分为PBS组、单纯NE组、普萘洛尔+NE组、酚妥拉明+NE组,每组3孔,PBS组、单纯NE组下室处理分别同细胞划痕试验1相同组,普萘洛尔+NE组和酚妥拉明+NE组下室处理分别同细胞划痕试验2相同组,行Transwell实验。常规培养24 h后,计数迁移细胞。(4)取细胞分为PBS组、单纯NE组、普萘洛尔+NE组、酚妥拉明+NE组,每组2皿,PBS组、单纯NE组细胞处理分别同细胞划痕试验1相同组,普萘洛尔+NE组和酚妥拉明+NE组细胞处理分别同细胞划痕试验2相同组。常规培养24 h后,采用蛋白质印迹法检测细胞蛋白激酶B(Akt)磷酸化水平。对数据行重复测量方差分析、单因素方差分析、独立样本t检验、LSD-t检验、Bonferroni校正。结果(1)刺激1 d,100μmol/L NE组细胞吸光度值明显低于PBS组(t=2.986,P<0.05);刺激5 d,10μmol/L NE组细胞吸光度值明显高于PBS组(t=3.547,P<0.01)。(2)细胞划痕试验1中,划痕后24、48、72 h,单纯NE组细胞划痕愈合率分别为(34.4±3.4)%、(52.5±4.7)%、(70.0±3.8)%,明显低于PBS组的(44.1±4.2)%、(80.0±3.6)%、(95.9±2.2)%(t=19.320、128.319、221.575,P<0.01)。细胞划痕试验2中,划痕后24、48、72 h,普萘洛尔+NE组细胞划痕愈合率均明显低于PBS组(t=4.073、9.618、15.272,P<0.01)。细胞划痕试验3中,划痕后72 h,单纯NE组细胞划痕愈合率明显低于单纯SC-66组(t=8.862,P<0.01);划痕后24、48、72 h,SC-66+NE组细胞划痕愈合率均明显低于单纯SC-66组(t=3.862、4.290、10.357,P<0.01)。(3)Transwell实验显示,培养24 h,单纯NE组、普萘洛尔+NE组及酚妥拉明+NE组细胞迁移数量均明显少于PBS组(t=11.895、10.196、3.222,P<0.01)。(4)培养24 h后,与PBS组比较,单纯NE组、普萘洛尔+NE组细胞Akt磷酸化水平明显升高(t=8.186、5.996,P<0.01)。结论NE可抑制小鼠BMSC迁移,Akt信号通路参与了此调控过程。

关键词：去甲肾上腺素间充质干细胞细胞迁移分析

去甲肾上腺素影响tau蛋白聚集物的分子动力学研究——运动干预阿尔茨海默病的机理初探

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

去甲肾上腺素影响tau蛋白聚集物的分子动力学研究——运动干预阿...

作者：万嘉倩上海体育学院

学位级别：硕士

研究目的:阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种神经退行性疾病,其多发于65岁以上的老年人。随着人口老龄化程度的不断加深和人均预期寿命的增加,AD的患病人数逐年递增,现已经成为危害老年人健康的第四大病因。tau蛋白聚集物作... 详细信息

研究目的:阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种神经退行性疾病,其多发于65岁以上的老年人。随着人口老龄化程度的不断加深和人均预期寿命的增加,AD的患病人数逐年递增,现已经成为危害老年人健康的第四大病因。tau蛋白聚集物作为AD的病理特征之一,最早出现在大脑蓝斑核(Locus Coeruleus,LC),这也是目前最早可以检测到的病理特征。而AD的药物研发经过了漫长的时间,仍没有有效的治愈药物,因此寻找有效的非药物疗法得到了广泛的关注。运动作为一种促进身体健康的有效方法,许多研究证明:运动能够缓解AD患者的症状,并且可以延缓AD发生的时间,从而起到预防作用。运动对机体的强烈刺激,引起应急激素去甲肾上腺素(Norepinephrine,NE)水平上升,运动可以刺激LC中去甲肾上腺素能神经元分泌NE,并且LC中NE水平的上升可以改善AD小鼠的症状。本研究通过分子动力学模拟研究NE对tau蛋白核心片段的影响,揭示NE破坏AD的致病蛋白tau蛋白聚集物核心片段的微观机理,从而为运动延缓AD潜在的生物学机制提供了理论依据。研究方法:本研究主要采用了全原子分子动力学模拟来探究NE破坏tau蛋白聚集物核心片段的微观机理。本研究主要使用GROMACS程序搭建了单独的tau蛋白体系作为对照组,并在相同结构的tau蛋白体系中加入NE小分子作为实验组,从而观察NE对tau蛋白的影响。在对照组和实验组中,tau蛋白均是在AMBER99SB-ILDN力场下进行全原子分子动力学模拟。在实验组中,结合在小分子专用力场GAFF力场下的NE进行全原子分子动力学模拟。在两个体系中模拟环境均保持一致,且每个体系均进行了两个时间为550ns的独立的模拟。模拟结束后使用VMD软件查看轨迹,使用GROMACS自带的程序、第三方程序以及Origin和SPSS22.0软件进行数据分析。研究结果:(1)NE可以使tau蛋白聚集物的结构稳定性有所降低,与对照组相比,实验组中tau蛋白N-端β2(p<0.05),C-端β7(p<0.01)和β8(p<0.01)区域结构稳定性的下降存在显著性差异。从而使tau蛋白整体的构型发生了改变,原本的C形结构趋于J形转变。(2)在实验组tau蛋白中起稳定作用的β-sheet结构出现了减少,且存在显著性差异(p<0.05),而其主要下降的区域位于tau蛋白的β4、β6和β8区域。(3)NE通过减弱tau蛋白内部GQV-EVK、KIGSL-LDNI和VQI-LTF三个区域的相互作用,从而对tau蛋白产生了破坏。(4)本研究识别出NE在tau蛋白上的结合位点呈W型的趋势,既两端和中间区域结合为主。并且NE主要与tau蛋白中极性氨基酸Q336、T377,疏水氨基酸G335、V337和芳香族氨基酸F378的主链接触较多,同时会与tau蛋白中极性氨基酸Q336、E338、E342、D348、R349,与带苯环结构的氨基酸Y310、P312、H374、F378的侧链有较多的接触。(5)通过结合模式分析发现,NE与tau蛋白中间区域的E338、E342、D348、D358以及C-端的E372和F378通过氢键结合;与N-端的Y310、P312以及C-端的H374和F378通过芳香相互作用结合,而NE与F378的结合模式尤为特别,既可以通过氢键结合也可以通过芳香相互作用结合。研究结论:(1)tau蛋白的核心结构是双层C型结构,因此其内层与外层也存在较强的相互作用,从而形成了一个较为稳定的结构。NE的加入使tau蛋白的核心结构产生了一定的破坏。(2)NE通过减少tau蛋白中的b-sheet形成的概率,减弱其内部的相互作用,使tau蛋白整体的结构稳定性有所减弱,进而使C形构型趋于J形转变。而其中最显著的变化区域是tau蛋白的N-端和C-端以及中间区域。(3)通过结合位点分析发现,NE与tau蛋白上所有的氨基酸都有不同程度地接触,其主要的结合区域在tau蛋白上呈现W型。NE主要与tau蛋白上极性、疏水和芳香族氨基酸接触较多,该结果表明静电、疏水和芳香相互作用在NE与tau蛋白的结合中起着重要的作用。(4)NE主要通过氢键与tau蛋白中间区域以及C-端的F378结合,并且通过π-π堆积与N-端的和C-端带苯环的氨基酸与tau蛋白结合。而NE与F378之间通过较强的氢键和芳香相互作用共同推动两者之间的结合,在破坏tau蛋白N-端以及N-端和C-端之间的相互作用中起着至关重要的作用。

关键词： tau蛋白去甲肾上腺素运动破坏机理

去甲肾上腺素对鲍曼不动杆菌生长及生物膜的作用研究

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

去甲肾上腺素对鲍曼不动杆菌生长及生物膜的作用研究

作者：方志尧大连医科大学

学位级别：硕士

背景与目的鲍曼不动杆菌是常见的条件致病菌,属非发酵革兰阴性杆菌,广泛分布于自然界。由于对外界环境如湿热、紫外线、化学消毒剂有较强的抵抗力,因此容易引起多种医院感染。近年来由于抗菌药物的滥用,鲍曼不动杆菌的耐药率居高不下,... 详细信息

背景与目的鲍曼不动杆菌是常见的条件致病菌,属非发酵革兰阴性杆菌,广泛分布于自然界。由于对外界环境如湿热、紫外线、化学消毒剂有较强的抵抗力,因此容易引起多种医院感染。近年来由于抗菌药物的滥用,鲍曼不动杆菌的耐药率居高不下,由多重耐药鲍曼不动杆菌(MDR-AB)引发的感染性休克会导致患者极高的病死率。去甲肾上腺素(NE)是一种儿茶酚胺类激素,是临床上用于治疗感染性休克的一线血管活性药物,有助于恢复组织灌注。但有研究发现,儿茶酚胺类激素可以促进细菌的生长及相关毒力,其中NE由于对多数细菌有显著的促生长效果而研究最多。已有研究报道,NE可以显著促进ATCC 17978及临床MDR-AB菌株的生长,在治疗MDR-AB感染引起的感染性休克中可能存在不利作用,但不同浓度NE对鲍曼不动杆菌生长及生物膜形成的具体影响仍有待研究。因此,我们通过体外培养鲍曼不动杆菌,以观察NE对鲍曼不动杆菌生长及生物膜形成的影响。方法1.本实验采用鲍曼不动杆菌标准菌株ATCC 19606以及临床分离MDR-AB菌株,在模拟体内营养贫瘠环境的血清SAPI培养基中进行培养,测定两种菌株在不同浓度(25μM、50μM、100μM、200μM、500μM)NE存在下的24h生长曲线。2.分别测定ATCC 19606和MDR-AB菌株在NE作用前后对肺泡上皮细胞A549的黏附侵入能力。3.用结晶紫染色法、激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)以及扫描电镜(SEM)观察NE对ATCC 19606和MDR-AB菌株生物膜形成的影响。4.通过实时定量PCR(RT-q PCR)法测定ATCC 19606和MDR-AB菌株在NE作用前后黏附和生物膜相关基因aba I、csu A/B、bap、omp A和pga A基因的表达。5.微量肉汤稀释法测定NE作用前后左氧氟沙星(LEVO)、美罗培南(MEM)及多黏菌素B(PB)对ATCC 19606和MDR-AB菌株的最低抑菌浓度(MIC)。6.测定NE作用前后,ATCC 19606和MDR-AB菌株在1/4MIC、1/2MIC及MIC浓度的LEVO和MEM作用下的OD值。7.对MDR-AB菌株进行基因组重测序,比较ATCC 19606和MDR-AB菌株基因组的差异。结果1.时间生长曲线表明,NE促进了ATCC 19606和MDR-AB菌株的生长,而对两种菌株表现出不同的促生长情况。500μM NE最大程度促进了两种菌株的生长,在接种2h后已产生显著的促生长作用(ATCC 19606,P<0.05;MDR-AB,P<0.01);200μM NE分别从4h和2h开始显著促进ATCC 19606和MDR-AB菌株的生长(P均<0.05);100μM NE从12h开始显著促进ATCC 19606菌株的生长(P<0.01),而从4h开始促进了MDR-AB菌株的生长(P<0.05);25μM和50μM NE基本不影响两种菌株24h内的生长。考虑药物用量、作用程度和作用时间,采用200μM浓度的NE进行后续实验。2.NE作用前后ATCC 19606和MDR-AB菌株对肺泡上皮细胞A549的黏附侵入能力没有变化。3.利用结晶紫染色法、CLSM及SEM均观察到NE促进了MDR-AB菌株生物膜的形成,而对ATCC 19606菌株的生物膜形成没有明显影响。4.ATCC 19606和MDR-AB菌株在NE作用下,csu A/B和bap基因的表达显著上调(P<0.01),aba I基因的表达均显著下调(P<0.01),omp A和pga A基因在ATCC 19606菌株中表达上调(P<0.01),但在MDR-AB菌株中表达下调(P<0.01)。5.NE作用前LEVO、MEM和PB对ATCC 19606菌株的MIC分别为1μg/ml、0.5μg/ml和0.5μg/ml,对MDR-AB菌株的MIC分别为64μg/ml、64μg/ml和0.5μg/ml;NE作用后LEVO、MEM和PB对ATCC 19606菌株的MIC分别为1μg/ml、0.5μg/ml和1μg/ml,对MDR-AB菌株的MIC分别为64μg/ml、64μg/ml和1μg/ml。NE没有改变LEVO和MEM对ATCC 19606和MDR-AB菌株的MIC,但将PB对两种菌株的MIC提高了一倍。6.在NE作用前1/4MIC浓度的MEM作用下MDR-AB菌株的OD值在NE作用24h后没有显著变化,除此之外,在NE作用前MIC、1/2MIC、1/4MIC浓度的LEVO和MIC、1/2MIC浓度的MEM作用下ATCC 19606和MDR-AB菌株的OD值在NE作用24h后均显著提高。7.与ATCC 19606菌株基因组相比,MDR-AB菌株基因序列读长(Reads)的比对率为81.24%,平均覆盖深度为162。单核苷酸多态性(SNP)总数为54780个,其中转换SNP为40388个,颠换SNP为14392个。插入

关键词：去甲肾上腺素鲍曼不动杆菌生物膜细菌生长